CC BY
136
теччяяет.!!!* яймзет®явд*1™*?кмя w.т
ПАТОГЕНЕЗ, ПАТОЛОГИЯ И ЭКОНОМИЧЕСКИЙ УЩЕРБ
Поступила в редакцию 03.06.2014 Принята в печать 14.01.2015
УДК 619:616.995:636:612.822.3
DOI: 10.12737/10227
Биохимические изменения в организме крупного рогатого скота при фасциолёзе
И.Д. Шелякин, С.Н. Семёнов, О.М. Мармурова
Воронежский государственный аграрный университет им. императора Петра I 394087, г. Воронеж, ул. Мичурина, д. 1, e-mail: ramon_ss@mail.ru
Изучено функционирование ряда ферментов трансаминирования, щелочной фосфатазы, а также некоторые показатели углеводного и липидного обменов на фоне содержания белка в крови крупного рогатого скота при фасциолезе. В сыворотке крови определяли количество общего белка по Лоури и активность щелочной фосфатазы колориметрическим методом на основе гидролиза n-нитрофенолфосфата. Активность глутаматтранса-миназы определяли по методу Олсона, трансаминаз - по методу Рейтмана и Френкеля, содержание холестерола - по реакции Либермана-Бурхарда, пирувата дифенилгидрази-новым и лактата - по реакции с параоксидифенилом. Функциональное состояние крови при фасциолезе характеризуется понижением уровня общего белка и пирувата с одновременным увеличением активности глутаматтрансами-назы, щелочной фосфатазы, лактата и холестерола.
Ключевые слова: крупный рогатый скот, фасциолез, ферменты, общий белок, углеводный обмен, липидный обмен.
Реакция, катализируемая глутаматтрансаминазой, представляет собой основной путь обратимого включения аммиака в глутаминовую кислоту. В клетках животных глутамат-трансаминаза находится преимущественно в митохондриях. Под действием трансаминаз азот глутаминовой кислоты перераспределяется, включаясь в другие аминокислоты.
Целью данной работы было изучение активности щелочной фосфатазы, глутаматтран-саминазы, трансаминаз, а также показателей углеводного обмена - лактата и пирувата, и липидного обмена - холестерола в крови животных на фоне содержания белка при разных стадиях заражения фасциолами для определения биохимического статуса животных при проведении противотрематодных мероприятий.
Исследование проводили в одном из хозяйств Воронежской области у коров симментальской породы, больных фасциолезом. Животных подбирали с учетом возраста, пола, массы, условий кормления и содержания. Были сформированы 3 группы коров по 10 голов в каждой. Первая группа - клинически здоровые животные; вторая - животные с первой стадией инвазии; третья группа - животные с третьей стадией поражения фасциолезом.
Кровь брали из яремной вены до кормления. Для стабилизации применяли гепарин. В сыворотке крови определяли количество общего белка по Лоури и активность щелочной фосфатазы колориметрическим методом на основе гидролиза n-нитрофенолфосфата [1]. Активность глутаматтрансаминазы определяли по методу Олсона, трансаминаз - по методу Рейтмана и Френкеля [2]. Активность выражали в колориметрических единицах
Реферат
Введение
Материалы и методы
AJI-Ruiswi ScwrtHiC Research Institute of Fultdamwfal Slid Aptted Ptfasitefcoy Of Anlrwtt (ted Plant named аПвг K.l SkryeWl 11721S. 4u«ia, Moaeo*, Bolsh&ya Cherstnu*fiW«l**j* Ifr.. 20 Й Russian Journal erf РаглиЫоду
ЖУИ1ЙЯ 2915/1
BUSS»?* JWSS2X2& ST ЯЙЙйВВГСНЯГГ
и рассчитывали на 1 мг белка. Содержание холестерола определяли по реакции Либер-мана-Бурхарда [2], пирувата дифенилгидразиновым и лактата - по реакции с параокси-дифенилом [2]. Результаты исследований обрабатывали статистически с использованием критерия Стьюдента [3].
Результаты и обсуждение
Установлено, что у животных, зараженных фасциолами, интенсивное образование глутаминовой кислоты происходило при переаминировании аспарагиновой кислоты с а-кетоглутаратом, но глутаминовая кислота подвергалась окислительному дезаминированию до а-кетоглутарата.
Так, активность глутаматтрансаминазы у 85 % инвазированных животных была выше нормы (92-96 ед/мг белка). Активность глутамикоаспарагиновой трансаминазы у этих животных была несколько ниже нормы (20-40 ед/мг белка), глутаматаланиновая трансами-наза максимально выражена у больных животных (30-70 ед/мг белка) (табл.).
Важность изучения глутаматтрансаминазы у животных, инвазирован-ных фасциолами, определяется физиологическим значением этого фермента, участвующего в регуляции анаболических и катаболических процессов. Реакции, связанные с обменом глутаминовой кислоты, играют важную роль в клеточном метаболизме. Посредством процессов переа-минирования и окислительного дезаминирования осуществляется взаимосвязь белкового обмена с реакциями цикла трикарбоновых кислот. Образующаяся при дезаминировании а-кетоглутаровая кислота окисляется в цикле трикарбоновых кислот или используется для непрямого синтеза липидов и углеводов.
В результате эксперимента установлено, что содержание общего белка в сыворотке крови у животных контрольной группы составило 75,21±0,7 г/л, у животных с первой стадией инвазии - 65,32±0,64 г/л, что на 13,15 % ниже, чем у контрольных животных. У животных с третьей стадией поражения содержание общего белка составило 67,37±0,5 г/л. Активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови инвазированных животных была выше, чем у здоровых коров и составила соответственно 75,3±0,31 и 43,2±0,28 ед/л. Такое увеличение активности щелочной фосфатазы связано с воспалительным процессом в печени, разрушением гепатоцитов, за утилизацию и гидролиз которых отвечает щелочная фосфатаза. Кроме того, более высокий уровень лактата в крови больных животных (выше, чем у здоровых в 2 раза) и холестерола (выше, чем у здоровых на 50,9 %) свидетельствует об усилении процессов катаболизма в их организме, что непосредственно определяется разрушением гепатоцитов.
Низкое содержание пирувата в данном случае (ниже, чем у здоровых коров на 10,4 %) указывает на угнетение активности аэробных процессов, что аргументирует накопление в крови больных животных глутаматаланиновой трансаминазы.
При трематодной инвазии с разрушением плазматических мембран гепатоцитов ферменты быстро диффундируют в кровь, проявляя каталитическую активность.
Показатель Здоровые животные п= 10 Больные животные и = 20
Щелочная фосфатаза, д/мл 43,2±0,28 75,3±0,31
АЛТ, ед/л 29,4±0,17 35,9±0,22
ACT, ед/л 43,3±0,16 49,3±0,92
ГГТ, ед/л 29,2±0,13 32,9±0,07
Ппруват, ткМ/л 131,40±5,59 117,80±5,18
Лактат, гаМ/л 0,93 ±0,15 1,90±0,38
Холестерол, шМ/л 4,65 ± 0,10 7,02±0,18
Биохимические показатели сыворотки крови коров при фасциолёзе
N______________________________________________________________
ВеярОСсийОшй научче-ИСсйДОвЭТММтй mtinrtyf фунйв*ДО1Лы«й и ПрисладнгёПЧММтапнннтоттоХи раСгрнда имени К И Сшиби «а iiTZie. Рмсир. г *п, б черемудомсдо. Z8.
в «Российский парщпнюяиасша журнал»
54
js'jujki "
теччяйет.ай яймз*т®явд*1™*?кмй жу!
Как показали наши исследования, активность АСТ и АЛТ в крови инвазированных животных была выше, чем в крови здоровых и составила соответственно АСТ 49,3±0,92, АЛТ - 35,9±0,22 ед/л.
Таким образом, уровень активности глутаматтрансаминазы, АСТ, АЛТ и щелочной фосфатазы коррелирует с функциональным состоянием гепатоцитов при фасциолезе, что имеет диагностическое значение для ликвидации патологии.
В системе мероприятий по борьбе с возбудителем фасциолеза определенное место отводится дегельминтизации. Однако, применение антигелъминтных средств в ряде хозяйств ЦЧО ограничено в связи с их недостаточностью. Для дегельминтизации жвачных в ЦЧО используют гексихол, гексихол С, дерил О и Б, фасковерм, альбендазол (вальбазен), празиквантел, ацемидофен, ацетвикол, урсовермит, фазинекс, четыреххлористый углерод и др.
Современные противофасциолезные мероприятия должны строиться на основе сочетания лечебных мер с профилактическими. Как при лечении, так и при профилактике следует учитывать иммунный статус организма. При лечении данного заболевания использовали гексихол С и гексихол С в сочетании с лигфолом - иммуномодулятором природного происхождения.
По окончании опыта содержание гемоглобина составило 108,48±1,88 г/л. После применения препаратов гексихола С и гексихола С в комбинации с лигфолом содержание гемоглобина повысилось до уровня контрольной группы - 109,8±5,64 г/л.
Применение антипаразитарных препаратов в сочетании с иммуномодуляторами снижает активность щелочной фосфатазы и ферментов трансаминирования, что свидетельствует о нормализации регуляторных функций, а в конечном итоге приводит к стабилизации процессов катаболизма и анаболизма.
На основе вышеизложенного считаем перспективным применение антипаразитар-ных препаратов в сочетании с иммуномодуляторами при лечении фасциолеза крупного рогатого скота с целью поддержания гомеостаза и регуляции метаболизма организма.
Применение на практике биологических методов по оздоровлению от фасциолеза животных весьма эффективно, экономически оправдано и не наносит вреда окружающей среде.
1. Землянухин А.А. Малый практикум по биохимии. - Воронеж, 1985.
2. Кондрахин И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии. - М., 1985.
3. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высшая школа, 1980.
References
1. Zemljanuhin A.A. Malyj praktikum po biohimii [Small practicum in biochemistry]. Voronezh, 1985.
2. Kondrahin I.P. Klinicheskaja laboratornaja diagnostika v veterinarii [Clinical diagnostics in veterinary medicine]. Moscow, 1985.
3. Lakin G.F. Biometrija [Biometry]. Moscow: Vysshaja shkola, 1980.
Литература
AJI-Ruiswi ScwrtHiC Research Institute of Fultdamwfal Slid Aptted Ptfasitefcoy Of Anlrwtt (ted Plant named аПвг K.l SkryeWl 11721S. 4u«ia, Moaeo*, Bolsh&ya Cherstnu*fiW«l**j* Ifr.. 20 Й Russian Journal erf РаглиЫоду
55
ЖУИ!ЙЯ
BUSS»?* JWSS2X2& ST ЯЙЙйВВГСНЯГГ
гтъ/г
Russian Journal of Parasitology
DOI: 10.12737/issn.1998-8435
Article history:
Received 03.06.2014
Accepted 14.01.2015
Biochemical changes in cattle body at fasciolosis
I.D. Shelyakin, S.N. Semyonov, O.M. Marmurova
Voronezh State Agricultural University named after Emperor Peter the Great 394087, Voronezh, 1 Michurin st., e-mail: ramon_ss@mail.ru
Abstract
Functioning of a number of transamination enzymes and alkaline phosphatase as well as some values of carbohydrate and lipid metabolism on background of protein in cattle blood at fasciolosis are studied. Total blood protein was determined by Loury method, alkaline phosphatase activity - by colorimetric method based on the hydrolysis of n-nitrophenol phosphate. The glutamate transferase activity was estimated by L.J. Olsen method, transaminase activity - by Reitman-Frankel method. Cholesterol levels were measured according to Liebermann-Burchard reaction, the pyruvate content was determined using the diphenylhydrazine method, and lactate - according to reaction with paraoxydiphenyl. The functional status of blood at fasciolosis is marked by the decrease in total protein and pyruvate with the increase of activity of glutamate transferase, alkaline phosphatase, lactate and cholesterol.
Keywords: cattle, fasciolosis, enzymes, total protein, carbohydrate metabol-ism, lipid metabolism.
© 2015 The Author(s). Published by All-Russian Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K.I. Skryabin. This is an open access article under the Agreement of 02.07.2014 (Russian Science Citation Index (RSCI) http:// elibrary.ru/projects/citation/cit_index.asp) and the Agreement of 12.06.2014 (CABI.org / Human Sciences section: http://www.cabi.org/Uploads/CABI/publishing/fulltext-products/cabi-fulltext-material-from-journals-by-subject-area.pdf
X
ВлрОСсийОшй научче-МсйДОвЭТММтй mtinrtyf фунйв*ДО1Лы«й»1 npHvtivtHtflWMMnNWHHTOftOtwXH paCrtHW имени К И Сшиби «а iiTZie. риснр. г *п, б черемущдмсдо. к.
О «Российский парщпнюяиасша журнал»
56
