CC BY
45А.Г. Бузук1, Р.А. Юрченко1,
М.Ф. Заяц1, Г.Н. Бузук2
ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ТРАВЫ ЧАБРЕЦА - SERPYLLI HERBA
1 Белорусский государственный университет, Минск
2 Витебский государственный медицинский университет
В результате фармакогностического и хро-мато-масс-спектрометрического анализа образца лекарственного растительного сырья, позиционируемого как трава чабреца - Serpylli herba, установлено, что исследованный образец травы чабреца является карвакрольным хемотипом тимьяна блошиного - Thymus pulegioides L. Различий в составе эфирного масла листьев и цветков не обнаружено.
Ключевые слова: виды тимьяна, эфирное масло, карвакрол.
ВВЕДЕНИЕ
К лекарственным растениям, достаточно широко распространенным на территории Республики Беларусь (РБ), относится чабрец, или тимьян обыкновенный или ползучий. В Республике Беларусь род тимьян представлен тремя видами: Thymus pulegioides L. (T. ucrainicus (Klok. et Shost.) Klok.) - Т блошиный или украинский, Thymus serpyllum L.- Т. ползучий и Thymus marschallianus Willd, - Т Маршалла [1]. К наиболее распространенным видам относятся тимьян блошиный и тимьян ползучий. Диагностические признаки дикорастущих тимьянов [1] в сравнении с признаками лекарственного сырья Serpylli herba [2] приведены в таблице 1.
Из сравнения фармакопейного описания сырья чабреца трава с диагностическими признаками видов тимьяна, произрастающих на территории Республики Беларусь, следует, что по признаку поперечное сечение стебля, его опушению, а также по форме и размеру листьев соответствует T. pulegioides - Т. блошиный, а не T. serpyllum - Т. ползучий, как следовало бы ожидать из названия сырья - Serpylli herba.
Качество сырья Serpylli herba определяется содержанием эфирного масла, которого должно быть не менее 0,1% в пересчете на сухое сырье [2].
В качестве дополнительного теста идентификации сырья применяется тонкослойная хроматография, которая сводится к обнаружению в метиленхлоридном экстракте травы чабреца доминирующих компонентов эфирного масла - тимола и карвакрола, при этом отмечается, что интенсивность окраски зон тимола и карвакрола зависит от происхождения испытуемого сырья [2].
Имеющиеся литературные данные свидетельствуют о высокой вариабельности состава эфирного масла травы тимьяна блошиного. Выделены многочисленные хемотипы, сведения
о некоторых из них приведены в таблице 2.
В связи с этим представляло значительный интерес изучение диагностических признаков и состава эфирного масла травы чабреца, собранной на территории Республики Беларусь.
Цель настоящей работы - исследование со-
Таблица 1 - Диагностические признаки дикорастущих тимьянов и лекарственного сырья чабреца
Диагностический признак Т. pulegioides -Т. блошиный Т. serpyllum -Т. ползучий Т. marschallianus -Т. Маршалла Serpylli herba (по ГФ РБ)
Поперечное сечение стебля Четырех-гранный Цилиндрический Цилиндрический Четырехгранный
Характер опушения стебля По двум противоположным граням Кругом опушенный Кругом опушенный Опушенный
Форма листьев Яйцевидные или эллиптические Ланцетные или эллиптические Широко-ланцетные Ланцетные или эллиптические
Размер листьев До 15 мм длины и 4-10 мм ширины Около 6 мм длиной, до 2 мм ширины До 20 мм длины, 3-5 мм ширины 3-12 мм длины и до 4 мм ширины
Соцветие Головчатое Головчатое Вытянутое -
става эфирного масла образца лекарственного растительного сырья, позиционируемого как трава чабреца - Serpylli herba.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Образец травы чабреца для исследования был собран в течение лета 2010 г. в окрестностях города Витебска на сухом травянистом склоне в фазу цветения и подвергнут естественной сушке в тени. До анализа образцы хранились в бумажных пакетах. Фармакогностический анализ проводили согласно Государственной Фармакопее Республики Беларусь [14].
Учитывая возможность значительных различий состава эфирного масла листьев и цветков, как это обнаружено у лаванды [15], перед проведением химического анализа образец травы разделяли на две части, одну из которых вручную дополнительно разделяли на листья, цветки и стебли. Затем траву, листья, цветки и стебли измельчали до размера частиц 1-2 мм.
Навеску измельченного растительного сырья массой около 4 г помещали в плоскодонную колбу емкостью 100 мл, приливали 80 мл диэ-тилового эфира, закрывали пробкой и помещали в ульразвуковую ванну на 15 минут при температуре 20°С. Полученный экстракт отфильтровали через стеклянный фильтр. Из фильтрата эфир отгоняли на роторном испарителе. Полученную фракцию липофильных веществ, также содержащую и эфирное масло, исследовали методом хромато-масс-спектрометрии на газовом хроматографе Hewlett-Packard 5890/II с квадрупольным масс-спектрометром (НР MSD 5971А) в качестве детектора. Использовалась
30-метровая кварцевая колонка НР-5 (сополимер 5%-дифенил-95%-диметилсилоксана) с внутренним диаметром 0,25 мм и толщиной пленки неподвижной фазы 0,25 мм. Процентный состав эфирных масел вычисляли по площадям газо-хроматографических пиков без использования корректирующих коэффициентов. Качественный анализ основан на сравнении времен удерживания и полных масс-спектров с соответствующими данными компонентов эталонных масел и чистых соединений, если они имелись, и с данными библиотеки масс-спектрометрических данных ^1еу275 (275000 масс-спектров) и каталогов [16-17].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Проведенный фармакогностический анализ исследуемого образца травы чабреца показал, что он состоит практически из травы тимьяна блошиного с очень небольшой примесью травы тимьяна Маршалла и, таким образом, соответствует по внешнему виду и морфологическим диагностическим признакам описанию лекарственного сырья - чабреца травы согласно Государственной Фармакопее Республики Беларусь.
В исследованных эфирных экстрактах обнаруживается до 100 компонентов. Методом хромато-масс-спектрометрии идентифицировано более 20 веществ, относящихся к составным частям эфирного масла. Общий вид хроматограммы показан на рисунке 1. Результаты анализа приведены в таблице 3.
Основными компонентами эфирного масла, как в траве, так и в листьях и цветках, яв-
Таблица 2 - Изменчивость химического состава эфирного масла тимьяна блошиного различного
происхождения
Происхождение Хемотип Лит-ра
Великобритания 1 - тимол (38,3%), у-терпинен (12,2%), р-цимен, 3-октанон, в-бисаболен; 2 - линалоол (68,9%), тимол, гераниол, в-бисаболен, метиловый эфир тимола; 3 - гераниол (36,4%), нераль, в-бисаболен, гермакра-1(10),5-диен-4-ол, нераль D; 4 - карвакрол (28,1%), у-терпинен (21,4%), р-цимен (10,8%), линалоол, гермакра- 1(10),4-диен-6-ол; [3]
Норвегия 1 - карвакрол (35,2%), у-терпинен (24,8%), р-цимен (10,2%), в-кариофиллен, в-бисаболен; 2 - тимол (37,2%), у-терпинен (23,2%), р-цимен, в-кариофиллен, метиловый эфир тимола; [4]
Литва 1 - в-кариофиллен, нераль; 2 - карвакрол (16,0-22,2%), в-кариофиллен (11,4-15,9%), в-бисаболен (11,1-12,2%), у-терпинен (5,9-14,5); 3 - а-терпенил ацетат (49,5-70,4%), в-кариофиллен (6,2-11,5%), гераниол, в-бисаболен, а-терпинеол; [5-7]
Португалия тимол (40,0%), р-цимен (12,5%), у-терпинен (12,2%), октан-3-он, карвакрол [8]
Италия тимол (33,8%), у-терпинен (13,5%), р-цимен, в-кариофиллен, карвакрол [9]
Г ермания линалоол + линалил ацетат (22,3-45%), карвакрол (4,9-32,5%), гераниол, 1,8-цинеол, геранил ацетат [10]
Словакия 1 - тимол (17,9-49,6%), в-кариофиллен (14,8-29,6%), у-терпинен (7,5-19,2%), карвакрол (0,7-12,9%), цитраль (1,3-11,3%); 2 - карвакрол (24,0-58,1%), в-кариофиллен (11,0-34,9%), у-терпинен (1,9-25,6%), р-цимен (0-17,7%), цитраль (0-10,2%); 3 - линалоол (33,4-92,3%), в-кариофиллен (0-32,0%), цитраль (0-23,8%), гераниол (0-15,8%), карвакрол (0-7,9%); 4 - цитраль (24,7-65,5%), гераниол (14,3-57,0%), в-кариофиллен (10,2-30,4%), линалоол (1,1-22,9%), карвакрол; 5 - фенхон 18,5-46,3%, в-кариофиллен 9,7-18,5%, цитраль, у-терпинен, карвакрол; [11]
Румыния карвакрол (33,6%), тимол (31,2%), р-цимен (12,9%), нерил ацетат, нерол; [12]
Югославия 1 - карвакрол (29,8%), р-цимен (15,1%), у-терпинен (11,8%), в-кариофиллен (11,5%), а-пинен; 2 - тимол (21,7%), карвакрол, р-цимен, тимол ацетат, борнеол; 3 - линалоол (49,4%), карвакрол (13,2%), р-цимен, тимол, в-кариофиллен; [13]
ляются карвакрол (17,46-20,59%), р-карио-филлен (2,88-5,24%), р -бисаболен (2,075,70%), р-цимен (1,49-7,05%), X-терпинен (4,61-7,74%).
При сравнении цветков и листьев последние содержат большие количества р-карио-филлена, X -терпинена, р-бисаболена и р-ци-мена. Однако по содержанию основного компонента - карвакрола они практически не различаются.
Таким образом, исследованный образец
травы чабреца является карвакрольным хемотипом тимьяна блошиного - Thymus pulegioides L. Близкие по составу хемотипы тимьяна блошиного отмечены для Югославии, Словакии, Норвегии и сопредельной Литвы (таблица 2). Дальнейшее исследование химической изменчивости состава эфирного масла тимьяна блошиного является весьма актуальным и может привести к выявлению на территории Республики Беларусь и других хемотипов. Также нуждаются в уточнении производящие растения
Рисунок 1 - Общий вид хроматограммы эфирной фракции Thymus pulegioides L. (T. ucrainicus (Klok. et Shost.) Klok.)
и морфологические признаки лекарственного сырья Serpylli 11егЬа.
ВЫВОДЫ
1. Исследованный образец травы чабреца - Serpylli 11егЬа происходит от тимьяна блоши-
ного - Thymus pulegioides L.
2. Основными компонентами эфирного масла травы, листьев и цветков тимьяна блошиного являются карвакрол (17,46-20,59%), р-кариофиллен (2,88-5,24%), р-бисаболен (2,075,70%), р-цимен (1,49-7,05%), X -терпинен (4,61-7,74%).
Таблица 3 - Состав эфирного масла травы, листьев и цветков Thymus pulegioides L. (T. ucrainicus (Klok. et Shost.) Klok. по данным хромато-масс-спектрометрии
№ Соединение Время удерживания RT, мин Содер эфи жание соединений в рной фракции, в %
Трава Листья Цветки
1 а-фелландрен 10,39 0,72 0,69 0,43
2 а-пинен 10,63 0,60 0,31 0,18
3 камфен 11,19 0,69 0,12
4 Р-мирцен 12,46 1,62 0,56 0,50
5 а-терпинен 13,40 0,50
6 р-цимен 13,71 4,75 7,05 1,49
7 Д-карен 14,40 0,17
8 Х-терпинен 14,88 7,74 6,44 4,61
9 цис-сабинен 15,15 0,50 0,48 0,29
10 линалоол 16,12 0,51 0,22
11 борнеол 18,49 1,44 0,32
12 а-терпинеол 19,22 0,19
13 метиловый эфир тимола 20,50 0,85 0,13
14 метиловый эфир карвакрола 20,81 2,31 1,61
15 тимол 22,13 1,39 1,39 1,67
16 карвакрол 22,64 20,59 17,46 17,71
17 Р-кариофиллен 26,26 5,24 3,64 2,88
18 гермакрен D 26,44 0,37 0,42 0,37
19 а-гумулен 27,15 0,32 0,13
20 Р-бисаболен 28,38 5,70 3,62 2,07
21 Д-кадинен 28,84 0,42 0,19 0,29
SUMMARY A.G. Buzuk1, R.A. Jurchenko1,
M.F. Zayats1, G.N. Buzuk2
THE PHARMACOGNOSTICAL ANALYSIS
OF GRASS THYME - SERPYLLI HERBA
As a result of pharmacognostical and the chromato-mass spectrometrical analysis of the sample of the medicinal vegetative raw materials positioned as a grass thyme - Serpylli herba it is established, that the investigated sample of a grass thyme is carvacrol chemotype of thyme flea - Thymus pulegioides L. Distinctions as a part of essence of leaves and flowers are not revealed.
Keywords: thyme species, essence oil, carvacrol.
ЛИТЕРАТУРА
1. Определитель высших растений Беларуси / Под ред. В.И.Парфенова. - Мн., Дизайн ПРО, 1999. - 472 с.
2. Государственная Фармакопея Республики Беларусь. В 3 т. Т. 2. Контроль качества вспомогательных веществ и лекарственного растительного сырья / УП "Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении"; под ред. А.А.Шерякова. -Молодечно: Типография "Победа", 2008. - 472 с.
3. Schmidt, A. Polychemismus bei den atherisches
Ol fuhrenden Arten Thymus pulegioides L. und Thymus praecox Opiz ssp. Arcticus (E. Durand) Jalas (Lamiaceae) im nordatlantischen Europa. Doctoral thesis, University of Hamburg, 1998. - 137 p.
4. Stahl-Biskup, E. Das atherische Ol norwe-gischer Thymianarten II. Thymus pulegioides // Planta Med. - 1986. - Vol. 52. - P. 223-235.
5. Mockute, D. Essential oil of lemon-scented Thymus pulegioides L. grown wild in Vilnius vicinity / D. Mockute, G. Bernotiene // Rast. Res. -1998. -Vol. 34. - P. 131-134.
6. Mockute, D. The main citral-geraniol and carvacrol chemotype of the essential oil of Thymus pulegioides L. growing wild in Vilnius district / D. Mockute, G. Bernotiene // J. Agric. Food Chem. -1999. - Vol. 47. - P. 3787-3790.
7. Mockute, D. The a-terpenyl acetate chemo-type of essential oil of Thymus pulegioides L. / D. Mockute, G. Bernotiene // Biochem. Syst. Ecol. -2001. - Vol. 29. - P. 69-76.
8. Salgueiro, L.R. Chemotaxonomic characterization of a Thymus hybrid from Portugal / L.R. Salgueiro, A. Proenca da Cunha, J. Paiva // Flavour Fragr. J. - 1993. - Vol. 8. - P. 325-330.
9. Senatore, F. Influence of harvesting time on yield and composition of the essential oil of a thyme (Thymus pulegioides L.) growing wild in Campania (Southern Italy) // J. Agric. Food Chem. - 1996. -Vol. 44. - P. 1327-1332.
10. Sievers, E. Beitrage zum Polymorphismus und zur Polytypie verschiedener Populationen von Thymus pulegioides L. / Doctoral thesis, University of Munster, 1971. - 139 p.
11. Martonfi, P. Chemotype pattern differentiation of Thymus pulegioides on different substrates / P. Martonfi, A. Greijtovsky, M. Repcak // Biochem. Syst. Ecol. - 1994. - Vol. 22. - P.819-825.
12. Kisgyorgy, Z. The volatile oil of the more important indigenous Thymus species occurring in the composition of Serpylli herba/ Z. Kisgyorgy, K. Csedo, H. Horster, J. Gergely, G. Racz // Rev. Med. (Tirgu-Mures, Rom.). - 1983. - P.124-130.
13. Kustrak, D. Composition of the essential oils of some Thymus and Thymbra species / D. Kustrak, Z. Martinis, J. Kuftinec, N. Blazevic // Flavour Fragr. J. - 1990. - Vol. 5. - P. 227-231.
14. Государственная Фармакопея Республики Белоруссь. В 3 т. Том 1. Общие методы контроля качества лекарственных средств / УП "Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении"; под ред. Г. В. Годовальникова. -Минск: Гос. ПТК полиграфии, 2006. - 656 с.
15. Lavender The genus Lavandula; edited by Maria Lis-Balchin. - Taylor & Francis: London and New York, 2002. - 268 p.
16. McLafferty, F.W The Wiley/NBS Registry of Mass Spectral Data / F.W. McLafferty, D.B. Stauffer // Wiley-Interscience, 1989. Vol. 1-7.
17. Eight Peak Index of Mass Spectra; Royal Society of Chemistry: University of Nottingham, England, Third Edition, 1983. Vol. 1-2.
Адрес для корреспонденции:
210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27,
Витебский государственный медицинский университет, кафедра фармакогнозии и ботаники с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8 (0212) 37-09-29.
Бузук Г.Н.
Поступила 09.12.2010 г.
