Сравнительный фармакогностический анализ травы чабреца Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

А.Г. Бузук1, Р.А. Юрченко1, В.А. Винарский', Г.Н. Бузук2 СРАВНИТЕЛЬНЫЙ ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ТРАВЫ ЧАБРЕЦА

1Белорусский государственный университет, Минск 2Витебский государственный медицинский университет

В результате фармакогностического и хромато-масс-спектрометрического анализа лекарственного растительного сырья травы чабреца — Serpylli herba, установлено, что основными компонентами эфирного масла чабреца ползучего являются камфен (1,75-12,62%), Р-мирцен — (2,26-14,61%), 1,8-цинеол (0 — 23,12%), камфора (4,24-27,59%), Р-кариофиллен (1,12-22,64%), (-)-борнеол (2,02-33,39%) и кариофиллен оксид (3,79-28,7%). Доля тимола и карвакрола в составе эфирного масла составляет всего 0-3,59% и 0-3,69%, соответственно.

Ключевые слова: виды тимьяна, Thymus serpyllum L., эфирное масло, тимол, карвакрол.

ВВЕДЕНИЕ

К достаточно широко распространенным на территории Республики Беларусь лекарственным растениям относится чабрец или тимьян обыкновенный или ползучий. В Республике Беларусь род тимьян представлен тремя видами [1]:Путт pulegioides L.- Т. блошиный, Т. serpyllum L.- Т. обыкновенный или ползучий и Т. marschallianus - Т. Маршалла.

Наиболее распространенными видами являются тимьян блошиный и тимьян ползучий.

Тимьян блошиный - Т. pulegioides L. (Т. жттст (КЪЬ et Shost.) Шок) кустарничек, высотой 10-20 см. Произрастает на низинных лугах, сухих травяных склонах, железнодорожных насыпях, по обочинам дорог, в зарослях кустарников, по березнякам и разреженным смешанным лесам по всей территории Республики Беларусь, встречается довольно часто.

Тимьян ползучий - Т. serpyllum L. кустарничек, высотой 5-15 см. Произрастает по открытым песчаным склонам, дюнно-бугристым пескам, булавоносцевым и можжевеловым пустошам, лишайниковым и вере-щатниковым борам, на суходольных лугах, вырубках, опушках, железнодорожных насыпях, по обочинам дорог по всей территории Республики Беларусь, встречается часто.

Оба этих вида легко различаются по характеру опушения стебля под соцветием: у чабреца блошиного стебель четырехгранный и опушены только ребра, в то время как у чабреца ползучего стебель в поперечном сечении округлый или округло-четырехгранный и опушен со всех сторон.

При заготовке сырья травы чабреца заготовители, как правило, не различают виды чабреца. В связи с этим сырье может состоять как из одной травы чабреца ползучего

или блошиного, так и их сочетаний в различных соотношениях. Предполагается, что их химический состав сходен.

Вместе с тем, имеющиеся в мировой литературе данные свидетельствуют о высокой гетерогенности состава эфирного масла чабреца ползучего. Выявлено существование нескольких хемотипов в пределах мирового ареала его произрастания. Некоторые данные такого рода представлены в таблице 1.

Качество сырья Serpylli herba определяется содержанием эфирного масла, которого должно быть не менее 0,1% в пересчете на сухое сырье [13].

В качестве дополнительного теста идентификации сырья в Государственной фармакопее Республики Беларусь с целью гармонизации требований к лекарственному сырью травы чабреца с Европейской фармакопеей применяется тонкослойная хроматография, которая сводится к обнаружению в метиленхлоридном экстракте травы чабреца доминирующих компонентов эфирного масла - тимола и карвакрола.При этом отмечается, что интенсивность окраски зон тимола и карвакрола зависит от происхождения испытуемого сырья.

Анализ лекарственного сырья травы чабреца промышленных партий испытательными лабораториями Республики Беларусь выявил в ряде случаев отсутствие в сырье одного из основных компонентов - тимола.

В связи с этим представляло значительный интерес провести оценку химического состава эфирного масла чабреца ползучего, произрастающего на территории Республики Беларусь.

Цель настоящей работы - исследование методом хромато-масс-спектрометрии состава эфирного масла образцов лекарственного растительного сырья травы чабреца - Serpylli herba, источником которого является чабрец обыкновенный или

Таблица 1 - Преобладающие компоненты эфирного масла Thymus serpyllum L. различных

хемотипов

Происхождение Хемотип Лит-ра

Финляндия 1 -монотерпеновые углеводороды (33%), 1,8-цинеол (12,515,0%), гермакра-1(10) ,5-диен-4-ол (3-12%), гермакрен D (10,0-12,0%), гермакра -1(10), 4-диен-6-ол; 2- монотерпеновые углеводороды (30%), 1,8-цинеол (26%), в-кариофиллен, гермакрен D, гедикариол; 3- монотерпеновые углеводороды (27%), 1,8- цинеол (19%), гермакрен D, в- кариофиллен, камфора 2

Финляндия 1- линалоол (21,9-43,8%), линалил ацетат (8,9-17,6%), в-кариофиллен,1,8-цинеол, камфора; 2 - 1,8-цинеол (17,2-27,6%), мирцен (15,4-22,4%), в-карио-филлен (6,8-19,1%), камфора, линалоол 3-4

Литва 1,8-цинеол (16,3-19,0%), в-кариофиллен (9,6-11,3%), мирцен (9,7-10,7%), гермакрен D, камфора 5

Венгрия Карвакрол (39,5-45,9%), тимол, р-цимен, линалоол, нерол 6

Украина 1 - тимол (35,1-50,0%), у-терпинен (12,7-18,0%), р-цимен (8,614,1%); 2 - карвакрол (48,4-55,2%), у-терпинен (10,1-27,1%), р-цимен (7,1-8,0%) 7

Кавказ 1 - тимол (76,1-81,5%), р-цимен, карвакрол, в- кариофиллен, а-терпинеол; 2 - карвакрол (49,0-62,0%), тимол (21,5-29,7%), р-цимен, в-кариофиллен, а-терпинеол 8

Пакистан Тимол (42,6%), р-цимен, карвакрол, борнеол, терпенен-4-ол 9

Индия Карвакрол (49,4%), р-цимен, тимол, зингиберен, евгенол 10

Индия Тимол (57,6%), р-цимол (20,0%), у-терпинен, зингиберен, борнеол 11

Китай Тимол (23,9%), 2,4,5-триметилбензиловый спирт (16,9%), р-цимен (16,3%), карвакрол (10,6%), о-бутилфенол 12

ползучий Т. serpyllum Ь., в сравнении с тимьяном блошиным - Т. pulegioides L.

МА ТЕРИАЛЫ И МЕ ТОДЫ

Образцы травы тимьянов для исследования были собраны в течение лета 2011 г. в местах его естественного произрастания на территории Витебской и Гродненской областей в фазу цветения и подвергнуты естественной сушке в тени. До анализа образцы хранились в бумажных пакетах. Фармаког-ностический анализ (идентификацию) проводили согласно Государственной фармакопее Республики Беларусь [14].

Навеску измельченного растительного сырья массой около 4 г помещали в плоскодонную колбу вместимостью 100 мл и приливали 80 мл диэтилового эфира, закрывали пробкой и помещали в ультразвуковую ванну на 15 минут при температуре 20°С. Полученный экстракт отфильтровали через стеклянный фильтр. Из полученного экстракта эфир отгоняли на роторном испарителе. Полученную фракцию липофильных веществ, содер-

жащую и эфирное масло, исследовали методом хромато-масс-спектрометрии на газовом хроматографе Hewlett-Packard 5890/II с ква-друпольным масс-спектрометром (НР MSD 5971) в качестве детектора. Использовали 30-метровую кварцевую колонку НР-5 (сополимер 5%-дифенил-95%-диметилсилоксана) с внутренним диаметром 0,25 мм и толщиной пленки неподвижной фазы 0,25 цм. Процентный состав эфирных масел вычисляли по площадям хроматографических пиков без использования корректирующих коэффициентов. Качественный анализ основан на сравнении времен удерживания и полных масс-спектров с соответствующими данными компонентов эталонных масел с данными библиотеки масс-спектрометрических данных Wiley275 (275000 масс-спектров) и каталогов [15-16].

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В исследованных эфирных экстрактах обнаруживается до 100 компонентов. Методом хромато-масс-спектрометрии иденти-

фицировано более 20 веществ, относящихся к составным частям эфирного масла (соединения, относящиеся к другим, чем эфирные масла, классам природных соединений, не приводятся). Общий вид хроматограмм показан на рисунках 1-2.

Основными компонентами эфирного масла травы чабреца блошиного, как нами ранее было установлено [17], являются кар-вакрол, тимол, Р-кариофиллен, Р-бисаболен

и р-цимен (таблица 2), при этом среди фенольных соединений терпеноидной природы доминирует карвакрол.

Как видно из данных, представленных в таблицах 3-4, основными компонентами эфирного масла чабреца ползучего являются камфен (1,75-12,62%), Р-мирцен - 2,2614,61%), 1,8-цинеол (0 - 23,12%), камфора (4,24-27,59), Р-кариофиллен (1,12-22,64%), (-)-борнеол (2,02-3 3,39%), кариофиллен оксид

Рисунок 1 - Общий вид хроматограммы эфирной фракции Thymus pulegioides L.

(T. ucrainicus (Klok. et Shost.) Klok

Рисунок 2 - Общий вид хроматограммы эфирной фракции Thymus serpyllum L.

Таблица 2 - Формулы основных компонентов эфирного масла травы Thymus pulegioides L. (T. ucrainicus (Klok. et Shost.)Klok.) по данным хромато-масс-спектрометрии

Thymus pulegioides L.

Терпинен

Цимен

Кариофиллен

Тимол

Карвакрол

Бисаболен

Таблица 3 - Формулы основных компонентов эфирного масла травы Thymus serpyllum L.

по данным хромато-масс-спектрометрии

Thymus serpyllum L.__________________________________

Камфен

Борнеол

Камфора

Борнилацетат

Мирцен

Кариофилленоксид

Таблица 4 - Состав эфирного масла травы Thymus serpyllum L. по данным хромато-масс-спектрометрии

Код образцов травы Thymus serpyllum L.

Соединение 51 52 49 B2 B1 63 64 67 68

Камфен 1,75 11,32 11,88 12,62 5,39 10,72 9,78 3,98 9,73

в-пинен 0,00 0,00 0,40 0,35 1,32 0,54 0,40 0,54 0,54

Сабинен 0,40 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

Р-Мирцен 2,26 6,50 3,44 10,57 3,97 14,61 8,83 5,27 6,49

dl-Лимонен 0,00 0,00 0,00 0,42 0,22 0,51 0,31 0,32 0,00

1,8-Цинеол 1,07 0,00 0,00 0,00 23,12 0,64 0,00 0,00 0,00

в-Оцимен 0,00 0,56 0,00 0,26 2,99 0,41 0,18 0,00 0,00

Д3-Карен 0,73 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2,48 0,00 0,00

цис-сабинен гидрат 0,00 0,00 0,00 0,51 1,26 0,88 0,95 0,81 2,70

Камфора 4,24 16,48 27,59 19,63 16,38 13,87 14,09 15,11 22,14

(-)-Борнил ацетат 0,00 0,00 5,14 8,61 0,00 4,33 2,63 5,97 4,44

Р-Кариофиллен 19,04 22,64 11,61 1,12 12,03 7,34 11,34 9,41 8,45

(-)-Борнеол 33,39 2,02 12,38 24,34 14,65 20,12 26,96 30,81 18,98

ГермакренD 2,20 3,03 3,47 8,20 4,09 0,34 0,18 8,33 3,28

в-Бисаболен 5,14 0,00 0,00 0,00 0,00 0,85 0,15 1,61 0,40

а-Фарнезен 2,54 0,78 0,00 0,32 0,44 2,57 2,35 1,67 1,28

в-сесквифелландрен 1,24 5,04 1,37 0,86 0,00 1,49 0,00 0,00 0,76

Гераниол 0,00 0,67 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

(-)-транс-Пинан 0,34 0,00 0,00 0,00 0,00 0,24 0,00 0,00 0,22

Кариофиллен оксид 10,90 28,70 11,95 10,79 9,80 3,79 15,46 13,55 13,51

Гермакрен D-4-ол 1,81 0,00 7,57 0,00 0,00 6,49 0,00 0,38 3,46

(+) спатуленол 5,08 0,00 2,77 0,90 0,00 0,00 2,51 0,38 3,60

Тимол 0,68 2,25 0,43 0,22 3,59 0,68 0,00 0,27 0,00

Карвакрол 0,51 0,00 0,00 0,29 0,63 3,69 0,00 1,61 0,00

Геранил ацетат 3,22 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

d-Неролидол 1,98 0,00 0,00 0,00 0,00 5,92 1,16 0,00 0,00

(3,79-28,7%). Доля тимола и карвакрола в составе эфирного масла очень низкая и составляет всего 0-3,59% и 0-3,69%, соответственно.

Таким образом, исследованный нами чабрец ползучий, ввиду очень низкого содержания или даже полного отсутствия основных действующих веществ чабреца - тимола и карвакрола, не соответствует требованиям Государственной Фармакопеи Республики Беларусь.

Однако для окончательного решения вопроса о пригодности для заготовки чабреца ползучего в качестве лекарственного сырья необходимы дальнейшие исследования химической изменчивости состава его эфирного масла с охватом отбором образцов всей территории Республики Беларусь.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

1. Исследованные образцы травы тимьяна имеют различный химический состав главных компонентов эфирного масла.

2. Основными компонентами эфирного масла чабреца ползучего являются камфен (1,75-12,62%), Р-мирцен - (2,26-14,61%), 1,8-цинеол (0 - 23,12%), камфора (4,2427,59%), Р-кариофиллен (1,12-22,64%), (-)-борнеол (2,02-33,39%), кариофиллен оксид (3,79-28,7%). Доля тимола и карвакрола в составе эфирного масла составляет всего 0-3,59% и 0-3,69%, соответственно.

3. Дальнейшие исследования химической изменчивости состава эфирного масла тимья-нов являются весьма актуальными и могут привести к выявлению на территории Республики Беларусь их различных хемотипов.

SUMMARY

A.G. Buzuk, R.A. Jurchenko,

V.A. Vinarskiy, G.N. Buzuk COMPARATIVE PHARMACOGNOSTICAL ANALYSIS OF GRASS THYME As a result of pharmacognostical and the chromato-mass spectrometrical analysis of the medicinal vegetative raw materi-

als grass thyme - Serpylli herba it is established, that main components of essential oil of Thymus serpyllum L are camphene (1,7512,62%), P-myrcene-2,26-14,61%), 1,8-cin-

eole (0 - 23,12%), camphor (4,24-27,59%), P-caryophyllene (1,12-22,64%), (-)-borneol (2,02-33,39%)and caryophyllene oxide (3,7928,7%). Proportion of thymol and carvacrol in the essential oil is very low and is only 3,59%, and 0-3,69%, respectively.

Keywords: thyme species, Thymus serpyl-lum L., essential oil, thymol, carvacrol.

ЛИТЕРАТУРА

1. Определитель высших растений Беларуси / Под ред. В.И.Парфенова. - Мн., Дизайн ПРО, 1999. - 472 с.

2. Stahl-Biskup, E. Essential oil polymorphism in Finnish Thymus species / E.Stahl-Biskup, I.Laakso // Planta Med. - 1990. - Vol. 56. - P.464-468.

3. Ivars, L. Kemotaxonomiska undersokn-ingarav Thymus serpyllum / L.Ivars // Farm. Aikak.-Farmaceutisk Notisblad. - 1964. Vol.73.

- P.324-332.

4. Von Schantz, M. and Ivars, L. Uber die Zusammensetzung des atherischen oles von Thymus serpyllum ssp. tanaensis (Hyl.) / M.Von Schantz, L.Ivars // Jalas. Ann. Univ. Turku. A. II

- 1964 - Vol. 32. - P.301-307.

5. Loziene, K. Chemical composition of the essential oil of creeping thyme (Thymus serpyllum L. s.l.) growing wild in Lithuania / K.Loziene, J.Vaiciuniene, P.R Venskutonis // Planta Med. - 1998. - Vol. 64. - P. 772-773.

6. A comparison between the oil and supercritical carbon dioxide extract of Hungarian Wild Thyme (Thymus serpyllum L.) / M.Oszagyan [et al.] // Essent. Oil Res.-1996. -Vol.8. - P.333-335.

7. Composition of essential oils from the aboveground part of the Thyme / S.V. Sur [et al.] // Khim. Farm. Zh. - 1988. -Vol. 22. -P.1361-1366.

8. Abetisjan, R.G. The essential oils of Mentha longifolia (L.) Huds. and Thymus serpyllum L. (Armenian SSR) / R.G. Abetisjan [et al] // Rast. Res. - 1988. - Vol. 24. - P.605-610.

9. Sattar, A. Essential oils of the species of Labiatae part IV. Composition of the essential

oil of Thymus serpyllum / A.Sattar, M.S. Malik,

S.A.Khan // Pakist. J. Sci. Ind. Res. - 1991. -Vol. 34. - P. 119-120.

10. Razdan, T.K. Zur Zusammensetzung des Quendeloles (Thymian) / T.K. Razdan, G.L.Koul // Riechstoffe, Aromen, Korperp-flegemittel. - 1975. - Vol. 25. - P.166-168.

11. Gulati, B.C. Essential oil from Thymus serpyllum / B.C. Gulati, R. Gupta // Indian Perfumer. - 1977. - Vol.21. - P. 162-163.

12. Zhang, Hongli Study on chemical constituents of essential oil from Thymus mon-golicus Ronn / Hongli Zhang, Youmin Wang, Zhenjie Zhang // Acta Bot. Boreal.-Occident. Sin.-1992. - Vol. 12. - P. 245-248.

13. Государственная фармакопея Республики Беларусь. В 3 т. Т. 2. Контроль качества вспомогательных веществ и лекарственного растительного сырья / УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении»; под ред. А.А. Шерякова. - Молодечно: Типография «Победа», 2008. - 472 с.

14. Государственная фармакопея Республики Белорусь. В 3 т. Том 1. Общие методы контроля качества лекарственных средств / УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении»; под ред. Г. В. Годовальникова. -Минск: Гос. ПТК полиграфии, 2006. - 656 с.

15. McLafferty, F.M. The Wiley / F.M. McLafferty, D.B. Stauffer // NBS Registry of Mass Spectral Data; Wiley-Interscience, 1989. Vol. 1-7.

16. Eight Peak Index of Mass Spectra; Royal Society of Chemistry: University of Notin-ham, England, ThirdEdition, 1983. Vol. 1-2.

17. Фармакогностический анализ травы чабреца - Serpylli herba / А.Г. Бузук [и др.] // Вестник фармации. - 2010. - № 4. - С.33-37.

Адрес для корреспонденции:

210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27,

Витебский государственный Медицинский университет, кафедра фармакогнозии с курсом ФПК и ПК, тел. раб. : 8 (0212) 37-09-29, buzukg@mail. ru Бузук Г.Н.

Поступила 08.09.2011 г.