CC BY
29
8. Loginov V. K., Vishnevetskiy F. E. Sochetannoe porazhenie pecheni i pochek u bol'nykh lepromatoznym ti-pom lepry [Combined damage of liver and kidney in patients with lepromatous type of leprosy]. Aktual'nye voprosy leprologii [The Urgent Issues of Leprology]. Ed. A. A. Yushchenko. Astrakhan', 1984, pp. 98-101.
9. Luzhnova S. A., Gabitova N. M., Voronkov A. V., Kadonidi I. P., Lovyagina S. A., Sochnev V. S. Otsenka antimikobakterial'noy aktivnosti nekotorykh novykh proizvodnykh diazinona [Evaluation of antimycobacterial activity of some new derivatives of diazinon], Fundamental'nye issledovaniya [Fundamental research], 2015, no. 2 (part 11), pp. 2377-2380.
10. Ob utverzhdenii Pravil laboratornoy praktiki: prikaz Ministerstva zdravookhraneniya i sotsial'nogo razvitiya Rossiyskoy Federatsii ot 23 avgusta 2010 g. №708-n. [About approval of The rules of laboratory practice: order of Ministry of Health and Social Development of the Russian Federation dated 23 August 2010 No. 708-n.]. Available at: https://rg.ru/2010/10/22/laboratornaya-praktika-dok.html (accessed 03 May 2016).
11. Ovsyannikov V. G. Patologicheskaya fiziologiya, tipovye patalogicheskie protsessy [Pathological physiology, typical pathological processes], Rostov-on-Don, Rostov State University, 1987,192 p.
12. Profilaktika neblagopriyatnykh pobochnykh reaktsiy [Prevention of adverse reactions]. Ed. prof. N. V. Yurgel', akad. RAMN V. G. Kukes, Moscow, GEOTAR-Media, 2009,450 p.
13. Rukovodstvo po laboratornym zhivotnym i al'ternativnym modelyam v biomeditsinskikh tekhnologiyakh [Guidance on laboratory animals and alternative models in biomedical technology]. Ed. N. N. Karkishchenko, S. V. Grachev, Moscow, Profil', 2010, 345p.
14. Rukovodstvo po provedeniyu doklinicheskikh issledovaniy lekarstvennykh sredstv. Chast' pervaya [Guidance on preclinical tests of medicines. Part one]. Ed. A. N. Mironov, Moscow, Grifi K, 2012, pp. 13-24.
15. Sochnev V. S., Kodonidi I. P., Oganesyan E. T., Kuleshova S. A., Bandura A. F., Zolotykh V. S., Glushko A. A., Davydov V. S., Ovakimyan A. G. Sintez i protivovospalitel'naya aktivnost' amidov antranilovoy kisloty s fragmentami sul'fanilamidov i dapsona [Synthesis and anti-inflammatory activity of amides of anthranilic acid with fragments of sulfonamides and dapsone]. Razrabotka, issledovanie i marketing novoy farmatsevticheskoy produktsii. Sbornik nauchnykh trudov [Development, research and marketing of new pharmaceutical products. Collection of scientific works]. Pyatigorsk, Pyatigorsk Medical-Pharmaceutical Institute - branch of Volgograd State Medical University, 2013, edit. 68, pp. 339-341.
16. Tsyganenko A. Ya., Zhukov V. I., Myasoedov V. V., Zavgorodniy I. V. Klinicheskaya biokhimiya [Clinical biochemistry], Moscow, Triada-Kh, 2002, 504 p.
17. Coleman M. D. Dapsontocxicity: some current perspectives. Gen. Pharmacol, 1995, vol. 26, pp. 1461-1467.
18. Directive/2004/9/EC of the European parliament and of the council of 11 February 2004 on the inspection and verification of good laboratory practice (GLP). Official Jornal of the European Union 20.02.2004, pp. 29-43.
19. Ghu G. I., Stiller M.G. Dapsone and sulfones in dermatology overview and update. Journal of the American Academy of dermatology, 2001, vol. 45, no. 3, pp. 420-434.
20. Wozel G., Blasum S. Dapsone in dermatology and beyond. Arch. Dermatol. Res, 2014, vol. 306, no. 2, pp. 103-124.
УДК 616.65-002-036.12:616.69-008.8 14.01.00 - Клиническая медицина
О P.A. Садретдинов, Н.Г. Короткий, О.С. Полунина, Л.П. Воронина, 2016
ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА КАЧЕСТВЕННЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ СПЕРМОПЛАЗМЫ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПРОСТАТИТОМ
Садретдинов Ренат Ажимахмудович, кандидат медицинских наук, доцент кафедры дерматовенерологии, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: [email protected].
Короткий Николай Гаврилович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой дерматовенерологии педиатрического факультета, ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Минздрава России; заведующий отделением дерматовенерологии ФГБУ «Российская детская клиническая больница» Минздрава России, Россия, 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1; 119571, г. Москва, Ленинский пр-т, д. 117, тел.: (495) 936-93-88, e-mail: [email protected].
Полунина Ольга Сергеевна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой внутренних болезней педиатрического факультета, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: [email protected].
Воронина Людмила Петровна, доктор медицинских наук, профессор кафедры внутренних болезней педиатрического факультета, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: [email protected].
У бесплодных и фертильных больных хроническим простатитом были изучены показатели спермоплаз-мы и выявлены связи с состоянием микроциркуляции, активностью воспаления, интенсивностью перекисного окисления белков, липидов и активностью антиоксидантной защиты, состоянием гормонального фона, интенсивностью коллагенообразования. Выявлены значимые факторы, влияющие на качественные характеристики спермоплазмы. Основными факторами являются нарушения микроциркуляции, микрососудистой реактивности, а также активность воспаления. На клеточный состав спермоплазмы оказывает влияние комплекс факторов. В результате проведенного корреляционного анализа подтвердилось негативное воздействие нарушений микроциркуляции, микрососудистой реактивности, эндотелиальной дисфункции, оксидативного стресса и изменений гормонального фона (особенно уровней половых гормонов) на клеточный состав спермоплазмы, а также снижение количества активно-подвижных сперматозоидов, скорости сперматозоидов и увеличение неподвижных, мертвых сперматозоидов и их патологических форм.
Ключевые слова: фертилъностъ, хронический простатит, воспаление, микрососудистая реактивность, оксидативный стресс.
FACTORS THAT INFLUENCE QUALITATIVE CHARACTERISTICS OF SPERMOPLASMA IN PATIENTS WITH CHRONIC PROSTATITIS
Sadretdinov Renat A., Cand. Sci. (Med.), Assistant, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: [email protected].
Korotkiy Nikolay G., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Pirogov Russian National Research Medical University; Head of Department, Russian Children's Clinical Hospital, 1 Ostrovityanova St., Moscow, 117997, Russia; 117 Leninsky Avenue, Moscow, 119571, Russia, tel.: (495) 936-93-88, e-mail: [email protected].
Polunina Olga S., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: [email protected].
Voronina Lyudmila P., Dr. Sci. (Med.), Professor of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: [email protected].
We have studied the indicators of spermoplasma at infertile (140) and fertile (140) patients with chronic prostatitis and identified the relationship with the state of the microcirculation, inflammation activity, the intensity of peroxidation of proteins, lipids and the activity of antioxidant defense, the condition of an endocrine profile, the intensity of collagen formation. The result of this work identified significant factors influencing the qualitative characteristics of spermoplasma. The main factors are disturbances of microcirculation, microvascular reactivity and inflammation. The cellular composition of spermoplasma is influenced by a complex of factors. The result of the correlation analysis confirmed the negative impact of violations of microcirculation, microvascular reactivity, endothelial dysfunction, oxidative stress and changes in an endocrine profile (especially in the levels of sex hormones) on cellular composition of spermoplasma, with the reduced number of active-motile sperm cells, sperm velocity, and the increased number of motionless, dead sperm cells and their pathological forms.
Key words: fertility, chronic prostatitis, inflammation, microvascular reactivity, oxidative stress.
Введение. В последние два-три десятилетия во всем мире наблюдается отчетливая тенденция к снижению активности сперматогенной функции у мужчин, в связи с чем в этиологии бесплодия все большее значение приобретает мужской фактор. Это явление, вероятно, служит отражением возрастающего воздействия на организм человека вредных факторов, встречающихся в окружающей среде, на производстве и в быту. Кроме того, к нарушениям сперматогенеза могут приводить хронический простатит, инфекции, гормональные расстройства и другие патологические процессы в организме, косвенно или напрямую являясь причиной бесплодия [6, 15, 18, 19]. В России хроническим
простатитом (ХП) страдают до 35 % мужчин трудоспособного возраста [2, 6].
В развитии многих заболеваний, в том числе и ХП, основополагающим моментом являются микроциркуляторные нарушения тканей и органов [8, 9, 16]. При ХП уже на ранних стадиях заболевания происходят значительные изменения на уровне микроциркуляторного русла, которые характеризуются замедлением скорости кровотока, агрегацией и стазом форменных элементов крови, повышением проницаемости сосудов [1, 12]. Объективная регистрация состояния микрокровотока с помощью лазерной допплеровской флоуметрии важна не только для констатации микроциркулятор-ных нарушений, но и определения прогноза течения заболевания, для патогенетически обоснованного назначения лекарственных и немедикаментозных методов лечения [10]. На сегодняшний день недостаточно изучены вопросы комбинации факторов, приводящих к хронизации воспалительного процесса в простате и развитию бесплодия.
Цель: изучить показатели спермоплазмы у бесплодных и фертильных больных хроническим простатитом и выявить связи с состоянием микроциркуляции, активностью воспаления, интенсивностью перекисного окисления белков, липидов и активностью антиоксидантной защиты, состоянием гормонального фона, интенсивностью коллагенообразования.
Материалы и методы исследования. Работа выполнена в рамках реализации гранта Президента России по государственной поддержке молодых ученых-кандидатов наук за проект «Хронический простатит в развитии мужского бесплодия» (МК-6729.2015.7). Проведение данного клинического исследования одобрено Региональным независимым этическим комитетом (заседание РНЭК от 03.10.2014, протокол № 9). Поправок к исходному протоколу РНЭК не было.
Всего было обследовано 280 пациентов с диагнозом хронический простатит. Средний возраст обследованных составил 34 [22; 43] года (по классификации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), 1999 г.). Медиана длительности заболевания составила 6 [2; 4] лет.
Все пациенты с ХП были разделены на 2 основные группы: 1 группа - «бесплодные мужчины» (140) и 2 группа - «фертильные мужчины» (140). Группу контроля составили 50 практически здоровых мужчин репродуктивного возраста, проходивших диспансерное поликлиническое обследование. У всех пациентов была одинаковая сексуальная ориентация.
Комплексное обследование больных проводили на клинических базах кафедр дерматовенерологии и урологии ФГБОУ ВО «Астраханский ГМУ» Минздрава России. На каждого пациента заполняли индивидуальную план-карту, в которую вносили клинические параметры, результаты лабораторных и инструментальных методов исследования. Было осуществлено комплексное обследование каждого пациента для выявления инфекций, передающихся половым путем, и сопутствующих осложнений со стороны урогенитальной сферы. Полученные данные сопоставляли с критериями включения/исключения.
Критерием отбора в 1 основную группу стало отсутствие беременности в браке в течение 1 года у лиц репродуктивного возраста при регулярной половой жизни без применения контрацептивных средств. Для исключения женского бесплодия проводили анализ амбулаторных карт женщин с изучением социального статуса, анамнеза, гинекологической и соматической патологии. Возрастные различия между мужчинами из бесплодных пар и контрольной группы отсутствовали. При оценке соматического статуса мужчин обращали внимание на своевременное конституциональное и половое развитие, определение типа телосложения, массо-ростового коэффициента, вторичные половые признаки и наличие гинекомастии. Пациенты с избыточной массой тела и ожирением исключались. Критериями исключения служили также патологические процессы органов мошонки (варикоцеле, кисты, орхит, эпидимит, двусторонний эпидидимит или эпидидимоорхит, перенесенные травмы яичек, пере-крут яичек), аномалии развития мочеиспускательного канала, неврологические заболевания мочевого пузыря, генетические аномалии, эндокринные нарушения, системные заболевания прямой кишки, повышенный уровень антиспермальных антител в эякуляте, хронические интоксикации (хронический алкоголизм и др.), иммунное бесплодие, оперативные вмешательства в анамнезе по поводу криптор-хизма, варикоцеле, паховой грыжи, гидроцеле; прием препаратов, влияющих на функцию мочеполовой системы.
Исследование функционального состояния кожных микрососудов осуществляли методом лазерной допплеровской флоуметрии с помощью лазерного анализатора тканевого кровотока «ЛАКК-02» в одноканальной модификации (научно-производственное предприятие «Лазма», Россия). В качестве стандартной зоны исследования использовали точку проекции простаты на коже живота над лоном. Для характеристики микрокровотока оценивали средние величины перфузии тканей кровью: показатель микроциркуляции (ПМ), среднеквадратическое отклонение или флакс (СКО) и
коэффициент вариации (KB), индекс эффективности микроциркуляции (ИЭМ). Для оценки сосудо-двигательной функции эндотелия в ходе лазерной допплеровской флоуметрии проводили ионофоре-тическую пробу с 5 % раствором ацетилхолина (АХ). В ходе ионофоретической пробы оценивали следующие показатели: Т2-Т4 - время развития максимальной вазодилатации (время от начала ионо-фореза препарата до развития максимального значения показателя микроциркуляции), Т4-Т6 - время восстановления кровотока (время от максимальной вазодилатации до возвращения показателя микроциркуляции к исходным значениям) и РКК - резерв капиллярного кровотока (степень прироста показателя микроциркуляции в ответ на ионофорез препарата) [5]. Кроме того, был вычислен коэффициент эндотелиальной функции (КЭФ) как отношение степени прироста показателя микроциркуляции при ионофорезе ацетилхолина к степени увеличения показателя микроциркуляции при ионофо-резе нитропруссида натрия (КЭФ = РКК АХ/ PKK НН) [11].
Для количественного определения интерлейкина-8 (ИЛ-8) применяли коммерческие иммуно-ферментные тест-системы «ИФА-БЕСТ» фирмы ООО «Вектор-Бест» (Россия). При определении уровня лактоферрина использовали моноспецифическую антисыворотку против лактоферрина человека, полученную иммунизацией кроликов по методу A.A. Николаева, и препарат лактоферрина человека, применяемый для построения калибровочных кривых [7]. Определение уровня С-реактивного белка (СРБ) производили, применяя диагностические наборы «CRP (HS) Wide Range HTI» фирмы «High Technology Inc.» (США).
Интенсивность перекисного окисления липидов сыворотки крови определяли по содержанию малонового диальдегида в составе продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК). ТБК-активные продукты плазмы крови определяли на основе метода, предложенного К. Jagi в модификации М. Uchiyama и М. Mihara [20]. Для количественного определения содержания ТБК-активных продуктов в сыворотке крови использовали диагностические наборы «ТБК-АГАТ» («Биоконт», Россия). Определение активности супероксиддисмутазы (СОД) в сыворотке крови производили с использованием коммерческих диагностических наборов «SOD kit» («Randox Laboratories LTD», Великобритания). В работе был использован косвенный метод определения активности СОД, позволяющий учитывать концентрацию веществ индикаторов (в данном случае I.N.T. - 2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitro phenyl)-5-phenyl tetrazolium chloride), преобразуемых супероксидом [3].
Исследование металл-катализируемой окислительной модификации белков в сыворотке крови проводили по методу R.L. Levine [17] в модификации Е.Е. Дубининой [4] посредством определения уровня карбонильных производных (КП) в сыворотке крови спектрофотометрическим методом с использованием 2,4-динитрофенилгидразина.
Определение уровней натрийуретического пептида типа С (СНП) в образцах плазмы осуществляли методом иммуноферментного анализа с помощью коммерческой тест-системы «NT-proCNP» (каталожный номер BI-20872, фирма «Biomedica Medizinprodukte GmbH&Co KG», Австрия) [13].
Определение уровня трансформирующего фактора роста ßl (ТФР-ßl) в образцах сыворотки реализовано с помощью «сэндвич»-метода твердофазного иммуноферментного анализа при использовании коммерческой тест-системы «Bender MedSystems» (Австрия).
Для количественного определения человеческого карбокситерминального пропептида прокол-лагена I типа (КПП) в образцах сыворотки методом иммуноферментного анализа использовали коммерческую тест-систему «ВСМ Diagnostics» (каталожный номер SEA570Hu, США).
Статистическую обработку данных проводили при помощи программы Statistica 12.0 («StatSoft, Inc.», США) [14]. Для каждого показателя и групп наблюдений вычисляли медиану, 5 и 95 процентили. Поскольку в большинстве групп признаки имели отличное от нормального распределение, то для проверки статистических гипотез при сравнении числовых данных двух несвязанных групп использовали U-критерий Манна-Уитни. Оценку интенсивности корреляционной связи осуществляли с помощью рангового коэффициента корреляции Спирмена. За критический уровень статистической значимости принимали 5 % (р = 0,05).
Результаты исследования и их обсуждение. Медиана объема спермы у фертильных больных ХП составила 3,7 мл. У группы контроля медиана объема спермы и интерпроцентильные (5; 95) разма-хи составили 4,05 [3; 3,5] мл. Различия между двумя основными группами, а также с группой контроля были статистически значимы (р < 0,001). Причем у бесплодных больных ХП объем спермы был статистически значимо меньше, чем в группах сравнения. Согласно рекомендациям ВОЗ, объем эякулята должен составлять не менее 2 мл. Однако в группе бесплодных больных ХП у 6 (8,6 %) пациентов объем эякулята был менее 2 мл, что квалифицируется как микроспермия, которая в большинстве случаев
связана с недостаточной функцией придаточных половых желез. При проведении корреляционного анализа была выявлена зависимость объема эякулята от состояния сосудистой реактивности. Прослеживалась взаимосвязь между объемом эякулята и временем развития вазодилатации при ионофорезе ацетилхолина (Т2-Т4 АХ) (г = -0,42; р < 0,001), указывающая на то, что при более медленном развитии вазодилатации объем эякулята уменьшается, то есть у пациентов с гипореактивными типами реагирования увеличивается риск развития микроспермии. Кроме того, была выявлена взаимосвязь между объемом эякулята и временем восстановления кровотока в пробе с ацетилхолином (Т4-Т6 АХ) (г = 0,32; р < 0,001), отражающая снижение объема эякулята при уменьшении продолжительности вазодилатации, то есть риск развития микроспермии увеличивается у пациентов с декрементными типами реагирования микрососудистого эндотелия, свидетельствующими о наличии эндотелиальной дисфункции. Также была выявлена взаимосвязь между объемом эякулята и уровнем ИЛ-8 (г = 0,33; р < 0,001), отражающая негативное влияние активности воспалительного процесса на объем вырабатываемой и выделяемой спермы. Интерес представляют взаимосвязи между объемом эякулята и маркером фиброобразования, трансформирующим фактором роста (31 (ТФР-(31) - г = -0,34; р < 0,001, а также уровнем карбокситер-минального пропептида проколлагена I типа (КПП) - г= -0,31; р < 0,001, что отражает роль процессов фиброобразования и образование коллагена 1 типа в развитии микроспермии у больных ХП, что может оказывать влияние на развитие бесплодия.
Значение медианы времени разжижения спермы у фертильных больных ХП составило 33,95 мин, интерпроцентильные (5; 95) размахи составили [10,5; 46,7] мин, что было статистически значимо продолжительнее по сравнению с группой контроля (р < 0,001), где значение медианы времени разжижения спермы составило 15,05 мин. Значение медианы времени разжижения спермы у бесплодных больных ХП составило 64,25 мин, что было статистически значимо дольше по сравнению как с группой контроля (р < 0,001), так и с группой фертильных больных ХП (р < 0,001). При корреляционном анализе были выявлены взаимосвязи между временем разжижения и некоторыми показателями кожной микроциркуляции: КВ - г = -0,34 р < 0,001 и ИЭМ - г = -0,29 р = 0,001, отражающие увеличение времени разжижения при снижении активной регуляции микрососудистого тонуса и эффективности микроциркуляции. Вместе с тем были выявлены взаимосвязи между временем разжижения и уровнем лактофер-рина (г = 0,42 р < 0,001), а также уровнем ИЛ-8 (г = 0,66 р < 0,001), отражающие негативное влияние воспалительной активности на темпы разжижения спермы. Время разжижения спермы - один из важных спер миологических показателей. Известно, что при длительном разжижении сперматозоиды, передвигаясь в вязкой среде, быстрее теряют биологически доступную энергию (АТФ), дольше находятся во влагалище, кислая среда которого значительно снижает их подвижность, а, следовательно, и способность к оплодотворению. Таким образом, хроническое воспаление в простате, сопровождающееся ухудшением микроциркуляции является одним из факторов, ухудшающих фертильность.
Медиана вязкости спермы у пациентов группы контроля составила 0,5 см. При этом ее значение у фертильных больных ХП составило 1,9 см. Обращало на себя внимание статистически значимое увеличение вязкости спермы у фертильных (р < 0,001) и бесплодных (р < 0,001) больных с ХП по сравнению с пациентами группы контроля. В то же время у бесплодных больных ХП вязкость спермы была статистически значимо выше, чем у фертильных больных ХП (р < 0,001). На показатель вязкости спермы оказывали влияние и такие факторы, как нарушение микроциркуляции и воспалительная активность. В результате корреляционного анализа были выявлены взаимосвязи между вязкостью спермы и значением СКО - г = -0,28 р = 0,001, значением КВ - г = -0,37; р < 0,001, ИЭМ - г = -0,25; р = 0,019, отражающие увеличение вязкости спермы при снижении эффективности микроциркуляции и уменьшении активной регуляции микрокровотока. Кроме того, были выявлены взаимосвязи между вязкостью спермы и временем развития вазодилатации (Т2-Т4 АХ) - г = 0,25; р = 0,003, временем восстановления кровотока (Т4-Т6 АХ) - г = -0,34; р < 0,001, указывающие на увеличение вязкости спермы, а следовательно, и фертильности пациентов при замедлении вазодилатации и уменьшении ее продолжительности. На зависимость вязкости спермы от активности воспаления указывали взаимосвязи вязкости спермы и уровней лактоферрина (ЛФ) - г = 0,24; р = 0,004 и интерлейкина-8 (ИЛ-8) - г = 0,43; р < 0,001.
Медиана рН спермы у бесплодных больных ХП составила 7,9 [7,3; 8,45], что было статистически значимо выше, чем в группе фертильных больных ХП - 7,6 [7,3; 8,1] (р < 0,001) и в группе контроля (р < 0,001). Различия между группой контроля и группой фертильных больных ХП также были статистически значимы (р = 0,002). При проведении корреляционного анализа были выявлены взаимосвязи рН спермы и ряда показателей микроциркуляции, микрососудистой реактивности, активности воспаления. Выявлены взаимосвязи между рН спермы и КВ - г = -0,23 р = 0,006, ИЭМ- г = -0,23; р = 0,005, временем Т2-Т4 АХ - г = 0,25 р = 0,003, временем Т4-Т6 АХ - г = -0,34; р < 0,001, а также взаимосвязи
между рН спермы и уровнем лактоферрина - г = 0,43; р < 0,001, уровнем ИЛ-8 - г = 0,59; р < 0,001, указывающие на тенденцию к увеличению рН при ухудшении микроциркуляции и ее регуляторных механизмов, нарушении микрососудистой реактивности и увеличении активности воспаления.
Таким образом, как у бесплодных, так и у фертильных больных ХП наблюдалось изменение качественных характеристик спермы: статистически значимое по сравнению с контролем уменьшение объема при увеличении времени разжижения, вязкости спермы и ее рН. В то же время у бесплодных больных ХП уменьшение объема, вязкости и увеличение рН спермы были выражены статистически значимо больше, чем у фертильных больных ХП. Были выявлены взаимосвязи качественных характеристик спермы и показателей микроциркуляции, микрососудистой реактивности и активности воспаления, а также процессов фиброобразования.
Значение медианы количества клеток сперматогенеза у фертильных больных ХП составило 3 %, а интерпроцентильные (5; 95) размахи [1,9; 3,7] % против 3,1 [2,4; 3,5] % в группе бесплодных больных ХП. При проведении корреляционного анализа были выявлены взаимосвязи между количеством клеток сперматогенеза и показателями микрососудистой реактивности: временем Т2-Т4 АХ - г = 0,33; р < 0,001, временем Т2-Т6 АХ - г = -0,24; р = 0,005, увеличением микроциркуляции в пробе с АХ (РКК АХ) - г = -0,21; р = 0,013.
Медиана количества активно-подвижных сперматозоидов в спермоплазме у пациентов группы контроля составила 69,5 %. При этом значение медианы количества активно-подвижных сперматозоидов в группе фертильных больных ХП составило 65,1 % при интерпроцентильных (5; 95) размахах -[58,25; 78,55] %, а в группе бесплодных больных ХП - 57,1 [34,25; 77] %, что в обеих группах было статистически значимо меньше, чем в группе контроля (р < 0,001). Обращает на себя внимание статистически значимое уменьшение количества активно-подвижных сперматозоидов в группе бесплодных больных ХП по сравнению с группой фертильных пациентов (р < 0,001). Наблюдались положительные корреляции между количеством активно-подвижных сперматозоидов и значением СКО - г = 0,19; р = 0,028, КВ - г = 0,21; р = 0,015, ИЭМ - г = 0,22; р = 0,011 и временем Т2-Т4 АХ - г = 0,23; р = 0,006, отражающие тенденцию к уменьшению активно-подвижных сперматозоидов при ухудшении микроциркуляции и снижении микрососудистой реактивности. Были выявлены взаимосвязи между количеством активно-подвижных сперматозоидов и уровнем ЛФ - г = -0,41; р < 0,001, ИЛ-8 - г = -0,45; р < 0,001, отражающие уменьшение способности сперматозоидов к активному движению при увеличении выраженности воспаления. Интерес представляют слабые, однако статистически значимые взаимосвязи между количеством активно-подвижных сперматозоидов и уровнем тестостерона - г = 0,21; р < 0,022, уровнем эстрадиола - г = -0,19; р < 0,031, а также уровнем лептина - г = 0,18; р < 0,044, отражающие регулирующее действие указанных гормонов на подвижность сперматозоидов.
Количество неподвижных сперматозоидов в спермоплазме в группе контроля составило 20,5 [11; 27,2] %. Количество неподвижных сперматозоидов в спермоплазме фертильных больных ХП составило 23,3 [15,1; 26] %, что было сопоставимо с группой контроля (р = 0,051). В группе бесплодных больных ХП количество неподвижных сперматозоидов в спермоплазме было статистически значимо (р < 0,001) больше по сравнению как с группой контроля, так и с группой фертильных больных ХП и составило 31,2 [20,6; 51,6] %. Были выявлены отрицательные корреляционные взаимосвязи между количеством неподвижных сперматозоидов и значением КВ - г = 0,33 р < 0,001, ИЭМ -г = -0,21 р = 0,021, отражающие увеличение числа неподвижных сперматозоидов при нарушении микроциркуляции. Кроме того, была обнаружена зависимость количества неподвижных сперматозоидов от состояния микрососудистой реактивности и функции сосудистого эндотелия, а именно - от времени Т2-Т4 АХ - г = 0,24; р = 0,004, времени Т4-Т6 АХ - г = -0,31; р < 0,001, коэффициента эндотелиальной функции (КЭФ) - г = -0,21; р = 0,011, а также уровня натрийуретического пептида типа С (СНП) -г = 0,34; р < 0,001, отражающие негативное влияние нарушений микрососудистой реактивности и эндотелиальной дисфункции на подвижность сперматозоидов. Увеличение количества неподвижных сперматозоидов может быть следствием снижения уровня тестостерона, на что указывает корреляция между данными показателями - г = -0,26; р < 0,001.
Скорость сперматозоидов у фертильных больных ХП была сопоставима со скоростью сперматозоидов у пациентов группы контроля (р = 0,091), составляя 2,9 [1,95; 3,6] мм/мин, против 3 [2,3; 5] мм/мин соответственно. В группе бесплодных больных ХП скорость сперматозоидов в спермоплазме составила 2,35 [0,8; 3,3] мм/мин, что было статистически значимо (р < 0,001) меньше как по сравнению с группой контроля, так и по сравнению с группой фертильных больных ХП. Скорость сперматозоидов, как и другие показатели спермограммы, зависела от состояния микроциркуляции, микрососудистой реактивности и функционального состояния эндотелия. Были выявлены взаимосвязи между скоростью
сперматозоидов и ИЭМ - г = 0,22; р = 0,007, временем Т2-Т4 АХ - г = -0,43; р < 0,001, временем Т4-Т6 АХ - г = 0,54; р < 0,001, РКК АХ - г = -0,34; р < 0,001, а также КЭФ - г = 0,28; р < 0,009 и СНП -г = -0,18; р < 0,032. Также была выявлена зависимость скорости сперматозоидов от активности воспаления, что подтверждалось наличием корреляции между скоростью сперматозоидов и уровнем ЛФ -г = -0,44; р < 0,001, ИЛ-8 - г = -0,61; р < 0,001, СРБ - г = -0,2; р = 0,019. Представляет интерес зависимость скорости сперматозоидов от выраженности оксидативного стресса, что подтверждалось наличием взаимосвязей между скоростью сперматозоидов и уровнем ТБК-активных продуктов - г = -0,21; р = 0,015, уровнем карбонильных производных (КП) - г = -0,21 р = 0,011, а также активностью СОД - г = -0,19; р = 0,026. Вместе с тем на скорость сперматозоидов оказывает влияние состояние гормонального фона, а именно - уровни половых гормонов. Так, были выявлены взаимосвязи между скоростью сперматозоидов и уровнем тестостерона - г = 0,28; р < 0,001, уровнем эстрадисша - г = -0,22; р = 0,009.
Значение медианы и интерпроцентильные (5; 95) размахи количества патологических форм сперматозоидов у пациентов группы контроля составили 20,7 [10,5; 27,5] %. В группе фертильных больных ХП количество патологических форм сперматозоидов было сопоставимо с данными группы контроля (р = 0,495), составляя 20,4 [13,15; 28,45] %. В группе бесплодных больных ХП количество патологических форм сперматозоидов составило 29,8 [13,8; 52,7] %, что было статистически значимо больше (р < 0,001) по как сравнению с контролем, так и с группой фертильных больных ХП. На количество патологических форм сперматозоидов оказывали влияние состояние микрососудистой реактивности (взаимосвязи с временем Т2-Т4 АХ - г = 0,4; р < 0,001, временем Т4-Т6 АХ - г = -0,34 р < 0,001), состояние сосудистого эндотелия (взаимосвязь с КЭФ - г = -0,2; р = 0,026), активность перекисного окисления липидов (взаимосвязь с уровнем ТБК-активных продуктов - г = 0,3; р = 0,001), белков (взаимосвязь с уровнем КП - г = 0,2; р = 0,027), а также состояние гормонального фона (взаимосвязи с уровнем тестостерона - г = -0,34; р = 0,003 и уровнем прсшактина - г = -0,23; р = 0,006). Количество мертвых сперматозоидов как у фертильных, так и у бесплодных больных ХП было статистически значимо больше (р < 0,001), чем в группе контроля, составляя 12 [4; 22,4] % и 14,95 [7,05; 25,2] % против
6.3 [0,7; 13,0] %, соответственно. Однако у бесплодных больных ХП количество мертвых сперматозоидов в спермоплазме было статистически значимо (р < 0,001) больше, чем у фертильных больных ХП. Количество мертвых сперматозоидов также зависело от состояния микрососудистой реактивности (взаимосвязи с временем Т2-Т4 АХ - г = 0,65; р < 0,001, временем Т4-Т6 АХ - г = -0,65; р < 0,001), эндотелиальной функции (взаимосвязи с КЭФ - г = -0,21; р = 0,014), активности воспаления (взаимосвязи с уровнем ЛФ - г = 0,51; р < 0,001, ИЛ-8 - г = 0,67; р < 0,001, СРБ - г = 0,2; р = 0,019), уровня половых гормонов (взаимосвязи с уровнем тестостерона - г = -0,25; р = 0,003, уровнем эстрадиола - г = 0,23; р = 0,006).
Количество лейкоцитов в спермоплазме фертильных пациентов с ХП было статистически значимо больше по сравнению как с группой бесплодных больных ХП, так и с группой контроля, составляя
2.4 [1,2; 3,8] х 10б против 0,9 [0,4; 1,7] х 10б и 0,5 [0,2; 0,9] х 10б, соответственно. Количество лейкоцитов в спермоплазме бесплодных больных с ХП было статистически значимо больше по сравнению с группой контроля. Были выявлены статистически значимые корреляционные взаимосвязи между количеством лейкоцитов в спермоплазме и уровнем ИЛ-8 - г = 0,6; р < 0,001, уровнем лактоферрина -г = 0,39; р< 0,001.
Таким образом, у фертильных больных ХП наблюдалось уменьшение в спермоплазме клеток сперматогенеза, количества активно-подвижных сперматозоидов, мертвых сперматозоидов и лейкоцитов по сравнению с группой контроля. У бесплодных больных ХП изменения клеточного состава спер-моплазмы были более выраженными: уменьшение количества клеток сперматогенеза по сравнению с группой контроля, снижение числа активно-подвижных сперматозоидов, скорости сперматозоидов, увеличение количества неподвижных сперматозоидов, патологических форм сперматозоидов, мертвых сперматозоидов по сравнению как с группой контроля, так и с группой фертильных больных ХП.
Заключение. Значимыми факторами, влияющими на качественные характеристики спермы, являются нарушения микроциркуляции, микрососудистой реактивности и активность воспаления. На клеточный состав спермы оказывает влияние комплекс факторов. Данные корреляционного анализа подтвердили негативное влияние нарушений микроциркуляции, микрососудистой реактивности, эндотелиальной дисфункции, оксидативного стресса и изменений гормонального фона, особенно уровней половых гормонов, на клеточный состав спермы со снижением количества активно-подвижных сперматозоидов, скорости сперматозоидов и с увеличением неподвижных, мертвых сперматозоидов и их патологических форм.
Список литературы
1. Аляев, Ю. Г. Клинико-морфологические аспекты хронического простатита / Ю. Г. Аляев, А. М. Пши-хачев, В. А. Варшавский // Врач. - 2010. - № 6. - С. 17-19.
2. Аполихин, О. И. Анализ уронефрологической заболеваемости в Российской Федерации по данным официальной статистики / О. И. Аполихин, А. В. Сивков, Д. А. Бешлиев, Т. В. Солнцева, В. А. Комарова // Экспериментальная и клиническая урология. — 2010. — № 1. — С. 4—11.
3. Гуревич, В. С. Сравнительный анализ двух методов определения активности супероксиддисмутазы / В. С. Гуревич, К. Н. Конторидинова, С. В. Шапилина // Лабораторное дело. - 1990. - № 4. - С. 44—47.
4. Дубинина, Е. Е. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод ее определения / Е. Е. Дубинина, С. О. Бурмистров, Д. А. Ходов, И. Г. Порогов // Вопросы медицинской химии. - 1995. -Т. 41.-С. 24-26.
5. Крупаткин А. И. Лазерная допплеровская флоуметрия микроциркуляции крови / А. И. Крупаткин, В. В. Сидоров, Н. К. Черемис, Г. М. Пискунова, В. Г. Голубев, Д. Е. Панов, М. А. Берглезов, В. А. Колосов, В. В. Юлов, В. Н. Карпов, П. Н. Любченко, Р. В. Горенков, Д. А. Рогаткин, М. А. Гинзбург, М. В. Жидков, Н. С. Васильев, Б. С. Брискин, А. В. Пропшн, М. В. Полянский, Т. А. Федорова, П. Н. Масякин, А. В. Мамонов, В. Н. Букатко, С. Н. Ермольев, И. И. Бородулина, А. В. Белоусов; под ред. А. И. Крупаткина, В. В. Сидорова. -М.: Медицина, 2005. - 256 с.
6. Лопаткин, Н. А. Урология : национальное руководство / под ред. акад. РАМН Н. А. Лопаткина. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 1024 с.
7. Луцкий, Д. Л. Определение лактоферрина при уретритах и уретропростатитах / Д. Л. Луцкий, А. А. Николаев, А. И. Полунин, В. М. Миропшиков // Урология. - 2003. - № 4. - С. 33-35.
8. Миропшиков, В. М. Лазерная допплеровская флоуметрия в урологии : монография / В. М. Миропшиков, Ф. Р. Асфандияров, В. А. Круглов, Э. Р. Абдулхакимов, М. В. Бредихин, Д. Г. Шафиева. - Астрахань : Изд-во АГМА, 2009. - 325 с.
9. Неймарк, А. И. Особенности микроциркуляции предстательной железы и гонад у юношей, страдающих изолированным варикоцеле и варикоцеле в сочетании с тазовой конгестией / А. И. Неймарк, И. С. Попов, А. В. Газаматов // Экспериментальная и клиническая урология. - 2013. - № 2. - С. 56-60.
10. Нуржанова, И. В. Анализ функционального состояния сосудистого эндотелия на фоне патогенетической терапии бронхиальной астмы : дис. ... канд. мед. наук / И. В. Нуржанова. — Астрахань, 2009. — 170 с.
11. Нуржанова, И. В. Пат. 2436091 Рос. Федерация, МПК G01N 33/483 Способ оценки функционального состояния микрососудистого эндотелия у больных бронхиальной астмой / И. В. Нуржанова, О. С. Полунина, Л. П. Воронина, Е. А. Полунина; заявитель и патентообладатель ГОУ ВПО АГМА Росздрава. -№ 2010124218/15; заявл. 11.06.2010; опубл. 10.12.2011. Бюл. № 34.
12. Полунин, А. А. Характеристика микрокровотока по результатам дыхательной пробы у больных хроническим простатитом различного генеза / А. А. Полунин, В. М. Миропшиков, А. И. Полунин // Астраханский медицинский журнал. - 2013. - Т. 7, № 2. - С. 77-80.
13. Полунина, Е. А. Клинико-диагностическое значение вазорегулирующей функции сосудистого эндотелия и уровня натрийуретического пептида типа С при бронхиальной астме : дис. ... канд. мед. наук / Е. А. Полунина. - Астрахань, 2011. - 149 с.
14. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О. Ю. Реброва. - М.: Медиа Сфера, 2006. - 305 с.
15. Шангичев, А. В. Диагностика и лечение воспалительной формы хронического абактериального простатита : автореф. дис.... д-ра мед. наук. - СПб., 2011. - 43 с.
16. Kogan, М. «Chronic ishaemic disease» of the prostate based on the results of transrectal biopsy of the prostate in chronic pelvic pain syndrome IIIB / M. Kogan, I. Belousov, A. Matcionis, A. Shangichev // 25 st Annual EUA Congress. - Barcelona, 2010. - Abstract 363. - P. 137.
17. Levine, R. L. Carbonyl assays for determination of oxidatively modified proteins / R. L. Levine, J. A. Williams, E. R. Stadtman, E. Shacter // Methods Enzymol. - 1994. - Vol. 233. - P. 346-357.
18. Nickel, J. C. Clinical evaluation of the patients pressing with prostitutes / J. C. Nickel // Europ. Urol. (Suppl.). - 2003. - № 2. - P. 11-14.
19. Schaeffer, A. J. Summary Consensus Statement : Diagnosis and Management of Chronic Prostatitis : Chronic Pelvic Pain Syndrome / A. J. Schaeffer, W. P. Weidner, G. K. Barbalias // Eur. Urol. - 2003. - № 2. - P. 1-4.
20. Uchiyama, M. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by thiobarbituric acid test / M. Uchiyama, M. Mihara // Analyt. Biochem. - 1978. - Vol. 86. - P. 271-272.
References
1. Alyaev Yu. G., Pshikhachev A. M., Varshavskiy V. A. Kliniko-morfologicheskie aspekty khronicheskogo prostatita [Clinical and morphological aspects of chronic prostatitis]. Vrach [The Doctor], 2010, no. 6, pp. 17-19.
2. Apolikhin O. I., Sivkov A. V., Beshliev D. A., Solntseva T. V., Komarova V. A. Analiz uranefrologicheskoy zabolevaemosti v Rossiyskoy Federatsii po dannym ofitsial'noy statistiki [Analysis of uronephrological incidence in the Russian Federation according to official statistics]. Eksperimental'naya i klinicheskaya urologiya [Experimental and clinical urology], 2010, no. 1, pp. 4—11.
3. Gurevich V. S., Kontoridinova K. N., Shapilina S. V. Sravnitel'nyy analiz dvukh metodov opredeleniya ak-tivnosti superoksiddismutazy [Comparative analysis of two methods of determination of activity of a superoksiddismu-taza]. Laboratornoe delo [Laboratory business], 1990, no. 4, pp. 44—47.
4. Dubinina E. E., Burmistrov S. O., Khodov D. A., Porotov I. G. Okislitel'naya modifikatsiya belkov syvorotki krovi cheloveka, metod ee opredeleniya [Oxidizing modification of proteins of human blood serum, method of its definition]. Voprosy meditsinskoy khimii [Questions of medical chemistry], 1995, vol. 41, pp. 24-26.
5. Krupatkin A. I., Sidorov V. V., Cheremis N. K., Piskunova G. M., Golubev V. G., Panov D. E., Berglezov M. A., Kolosov V. A., Yulov V. V., Karpov V. N., Lyubchenko P. N., Gorenkov R. V., Rogatkin D. A., Ginzburg M. A., Zhidkov M. V., Vasil'ev N. S., Briskin B. S., Proshin A. V., Polyanskiy M. V., Fedorova T. A., Masyakin P. N., Mamonov A. V., Bukatko V. N., Ermol'ev S. N., Borodulina I. I., Belousov A. V. Lazernaya dopplerovskaya fioumetriya mikrotsirkulyatsii krovi [Laser Doppler flowmetry of blood microcirculation], Moscow, Medicine, 2005, 256 p.
6. Lopatkin H. A. Urologiya: natsional'noe rukovodstvo [Urology: national guide]. Ed. by H.A. Lopatkin. Moscow, GEOTAR-Media, 2009,1024 p.
7. Lutskiy D. L., Nikolaev A. A., Polunin A. I., Miroshnikov V. M. Opredelenie laktoferrina pri uretritakh i uretroprostatitakh [Determination of lactoferrin for urethritis and uretroprostatitis]. Urologiya [Urology], 2003, no. 4, pp. 33-35.
8. Miroshnikov V. M., Asfandiyarov F. R., Kruglov V. A., Abdulkhakimov E. R., Bredikhin M. V., Shafieva D. G. Lazernaya dopplerovskaya fioumetriya v urologii (monografiya) [Laser Doppler flowmetry in urology (monograph)]. Astrakhan: publishing house of the Astrakhan State Medical Academy, 2009, 325 p.
9. Neymark A. I., Popov I. S., Gazamatov A. V. Osobennosti mikrotsirkulyatsii predstatel'noy zhelezy i gonad u yunoshey, stradayushchikh izolirovannym varikotsele i varikotsele v sochetanii s tazovoy kongestiey [Features of the microcirculation of the prostate and gonads in boys suffering from isolated varicocele and varicocele in combination with pelvic congestion], Eksperimental'naya i klinicheskaya urologiya [Experimental and clinical urology], 2013, no. 2, p. 56-60.
10. Nurzhanova I. V. Analiz funktsionarnogo sostoyaniya sosudistogo endoteliya na fone patogeneticheskoy terapii bronkhial'noy astmy. Dissertatsiya kandidata meditsinskikh nauk [Analysis of the functional state of vascular endothelium on the background of pathogenetic therapy of bronchial asthma. Thesis of Candidate of Medical Sciences]. Astrakhan, 2009,170 p.
11. Nurzhanova I. V., Polunina O.S., Voronina L. P., Polunina E. A. Sposob otsenki funktsional'nogo sostoyaniya mikrososudistogo endoteliya u bol'nykh bronkhial'noy astmoy [The way to estimate the functional state of microvascular endothelium in patients with bronchial asthma]. Patent RF, no. 2436091,2010.
12. Polunin A. A., Miroshnikov V. M., Polunin A. I. Kharakteristika mikrokrovotoka po rezul'tatam dyk-hatel'noy proby u bol'nykh khronicheskim prostatitom razlichnogo geneza [The characteristic of microblood flow according to the results of respiratory test in patients with chronic prostatitis of various genesis]. Astrakhanskiy meditsin-skiy zhurnal [Astrakhan medical journal], 2013, vol. 7, no. 2, pp. 77-80.
13. Polunina E. A. Kliniko-diagnosticheskoe znachenie vazoreguliruyushchey funktsii sosudistogo endoteliya i urovnya natriyureticheskogo peptida tipa S pri bronkhial'noy astme. Dissertatsiya kandidata meditsinskikh nauk [Clinical-diagnostic value of the vasoregulating function of vascular endothelium and levels of natriuretic peptide type C at bronchial asthma. Thesis of Candidate of Medical Sciences]. Astrakhan, 2011,149 p.
14. Rebrova O. Yu. Statisticheskiy analiz meditsinskikh dannykh. Primenenie paketa prikladnykh programm STATISTICA [Statistical analysis of medical data. The application of a package of applied programs STATISTIC A], Moscow, Media Sphere, 2006, 305 p.
15. Shangichev A. V. Diagnostika i lechenie vospalitel'noy formy khronicheskogo abakterial'nogo prostatita. Avtoreferat dissertatsii doktora meditsinskikh nauk [Diagnosis and treatment of an inflammatory form of chronic abacterial prostatitis. Abstract of thesis of Doctor of Medical Sciences]. St. Petersburg, 2011,43 p.
16. Kogan M., Belousov I., Matcionis A., Shangichev A. «Chronic ishaemic disease» of the prostate based on the results of transrectal biopsy of the prostate in chronic pelvic pain syndrome IIIB. 25 st Annual EUA Congress, Barcelona, 2010, Abstract 363, p. 137.
17. Levine R. L., Williams J. A., Stadtman E. R., Shacter E. Carbonyl assays for determination of oxidatively modified proteins. Methods Enzymol., 1994, vol. 233, pp. 346-357.
18. Nickel J. C. Clinical evaluation of the patients pressing with prostitutes. Europ. Urol. (Suppl.), 2003, no. 2, pp. 11-14.
19. Schaeffer A. J., Weidner W. P., Barbalias G. K. Summary Consensus Statement: Diagnosis and Management of Chronic Prostatitis: Chronic Pelvic Pain Syndrome. Eur. Urol., 2003, no. 2, pp. 1-4.
20. Uchiyama M., Mihara M. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by thiobarbituric acid test. Analyt. Biochem, 1978, vol. 86, pp. 271-272.
