CC BY
12
УДК 616-002.2; 616.314.18; 616.314/163; 616.314.165 http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2020-22-3-29-33
ЭНДОПЕРИОДОНТАЛЬНАЯ КЛЕТОЧНАЯ РЕАКЦИЯ ПРИ ВОСПАЛИТЕЛЬНО-ДЕСТРУКТИВНОМ ПОРАЖЕНИИ
Гилязева1 В.В., Ханова12 И.А.
1 ФГОУ ВО «Чувашский Государственный Университет имени И.Н. Ульянова», г. Чебоксары, Российская
Федерация
2 АУ «Республиканская стоматологическая поликлиника», г. Чебоксары,, Российская Федерация
ENDOPERIODONTAL CELL S REACTION IN INFLAMMATORY
AND DESTRUCTIVE LESIONS
Gilyazeva1 V.V., Khanova12 I.A.
1. Chuvash State University named after I.N. Ulyanova, Cheboksary, Russian Federation 2. Republican Dental Clinic, Cheboksary, Russian Federation
Аннотация. Изучено содержание и влияние маркеров коллагена 4 типа и VEGF при хроническом поражении пульпы и периодонта. Факторы роста эндотелия сосудов (VEGF) - мощные ангиогенные факторы, которые продуцируются макрофагами, фибробластами, гепатоцитами, эндотелиаль-ными и другими клетками [1]. Они участвуют в активации, пролиферации, миграции и дифференци-ровке клеток эндотелия кровеносных и лимфатических сосудов, взаимодействуя с ними через специфические тирозинкиназные рецепторы. VEGFуси-ливает проницаемость кровеносных сосудов и создает условия для проникновения белка плазмы крови в тканевое экстраклеточное пространство, способствуя миграции эндотелиальных клеток, а также участвует в регуляции клеточной адгезии и модуляции иммунных свойств. Коллаген 4 типа - основной компонент базальной мембраны эпителиальных клеток, встречающийся в стенке артериальных сосудов и собственном веществе соединительной ткани [2]. Установлено достоверное повышение экспресии коллагена 4 типа при воспалении пульпы и деструктивных поражениях периодонта у пациентов с хроническим гранулирующим периодонтитом, отягощенным наличием синус-тракта. Выявление и компетентная интерпретация этиопа-тогенетических и морфологических событий способствует совершенствованию диагностики и повышению эффективности лечения. Цель исследования - выявление реакции топических клеточных иммунных факторов у пациентов с поражениями эндопериодонтального комплекса. Изучены клинические и морфологические маркеры коллаген 4 типа и VEGF и представлен характерный клеточный ответ в виде достоверной
Annotation. The content and influence of markers of type 4 collagen and VEGF in chronic lesions of the pulp and periodontium were studied. Vascular endothelial growth factors (VEGF) are powerful angiogenic factors that are produced by macrophages, fibroblasts, hepatocytes, endothelial and other cells [1]. They participate in the activation, proliferation, migration and differentiation of endo-thelial cells of blood and lymph vessels, interacting with them through specific tyrosine kinase receptors. VEGF enhances the permeability of blood vessels and creates the conditions for the penetration of blood plasma protein into the tissue extracellular space, promoting the migration of endothelial cells, and is also involved in the regulation of cell adhesion and modulation of immune properties. Type 4 collagen is the main component of the basement membrane of epithelial cells, which is found in the wall of arterial vessels and its own substance of connective tissue [2].
A significant increase in the expression of type 4 collagen has been established in pulp inflammation and destructive periodontal lesions in patients with chronic granulating periodontitis, aggravated by the presence of the sinus tract. The identification and competent interpretation of etiopathogenetic and morphological events helps to improve diagnosis and increase the effectiveness of treatment.
экспрессии изучаемых маркеров. Результаты исследования позволяют сформировать компетентное представление об иммунологическом статусе эндопериодонтального комплекса и способствуют совершенствованию ранней диагностики и выбору эффективной тактики лечения.
Ключевые слова; хронический апикальный периодонтит, коллаген 4 типа, VEGF, эндопериодон-тальные поражения, иммунные свойства, пульпа, периодонт.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
[1] Самсонова, И.В. Экспрессия коллагенов IV и VI типов при хроническом панкреатите / И.В. Самсонова, В.А. Клопова, И.С. Шевченко / / Общая и частная хирургия. - 2015. - Т. 23. № 5. -С. 500-505.
[2] Маркеры ангиогенеза при опухолевом росте / Н.А. Федорова, О.А. Харлова, Н.В. Данилова, П.Г. Мальков, Н.М. Гайфуллин // Архив патологии. 2016. №2. С. 55-62.
[3] К вопросу о совершенствовании диспансеризации стоматологических больных / Вуса-тая Е. В., Красникова О. П., Алферова Е. А., Олейник О. И. // Прикладные информационные аспекты медицины. 2015. Т. 18 № 2.- С. 57-61.
[4] Дифференциальная диагностика эндо-паро-донтальных поражений, определяющая объем лечебных мероприятий / Е.В. Леонова, С.А. Туманова, И.А. Киброцашвили, А.С. Пастухова // Институт стоматологии. 2015. № 3(68). С. 59-61.
[5] Al-Fouzan K.S. A new classification of endodontic-periodontal lessions // Int J Dent 2014; Epub 2014. Apr. 2014.
[6] Иммунные нарушения на системном и локальном уровнях при хроническом периодонтите, взаимосвязь с оксидантными изменениями / Д.Д. Голдобин, А.Л. Локтионов, Н.А. Быстрова, А.В. Караулов // Иммунология. 2017. №1. Т. 38. С. 35 - 39.
[7] Рикуччи Д., Сикейра Ж. Эндодонтология: Клинико-биологические аспекты. Часть 2. М.: Азбука, 2015. 428 с. ISBN: 5914430334.
[8] Pathogenetic aspects of dental pulp pathology / E. V. Shchetinin, S. V. Sirak, A. B. Khodzhayan ^t al.] // Medical News of the North Caucasus. 2015. Vol. 10, № 2. P. 187-191.
Воспаление пульпы зуба с дальнейшим вовлечением тканей связочного аппарата является одной из нерешенных окончательно вопросов в терапевтической
Keywords; chronic apical periodontitis, type 4 collagen, VEGF, endoperiodontal lesions, immune properties, pulp, periodontal.
REFERENCES
[1] Samsonova, I. V. Collagen expression of IV and VI types in chronic pancreatitis / I. V. Samsonova, V. A. Klopova, I. S. Shevchenko / / General and private surgery. - 2015. - Vol. 23. No. 5. - Pp. 500-505.
[2] Markers of angiogenesis in tumor growth / N. A. Fedorova, O. A. Kharlova, N. I. Danilov, P. G. Malkov, N. M. Gaifullin // Archive of pathology. 2016. №. 2. p. 55-62.
[3] On the issue of improving the dispenserization of dental patients / Vusataya E. V., Krasnikova O. P., Alferova E. A., Oleynik O. I. / / Applied information aspects of medicine. 2015. Vol. 18 No. 2. p. 57-61.
[4] Differential diagnosis of endo-periodontal lesions, determining the volume of therapeutic measures / E. V. Leonova, S. A. Tumanova, I. A. Kibrotsash-vili, A. S. Pastukhova / / Institute of dentistry. 2015. No. 3 (68). p. 59-61.
[5] Al-Fouzan K.S. A new classification of endodontic-periodontal lessions // Int J Dent. 2014; Epub 2014. Apr. 2014.
[6] Immune disorders at the systemic and local levels in chronic periodontitis, the relationship with oxi-dant changes / D. D. Goldobin, A. L. Loktionov, N. A. Bystrova, A.V. Karaulov / / Immunology. 2017. No. 1. Vol. 38. p. 35 - 39.
[7] Ricucci D., Siqueira, J. Endodontics: Clinical-biological aspects. Part 2. M.: Alphabet, 2015. 428 p. ISBN: 5914430334.
[8] 8. Pathogenetic aspects of dental pulp pathology / E. V. Shchetinin, S. V. Sirak, A. B. Khodzhayan [et al.] // Medical News of the North Caucasus. 2015. Vol. 10, № 2. P. 187-191.
стоматологии [3]. Ранняя диагностика, основанная на понимании иммунных и морфологических изменений в тканях и их влияние на исход заболевания,
ИгЧ
"Medical & pharmaceutical journal "Pulse" | "Медико-фармацевтический журнал "Пульс"
свидетельствуют о необходимости совершенствования комплекса лечебных и диагностических мероприятий для пациентов, отягощенных эндо-периодонталь-ными поражениями [4,5]. Состояние неспецифической резистентности тканей и развитие воспаления представляют собой взаимосвязанный процесс [6], в значительной мере определяющий распространение патологии и дальнейший прогноз. При снижении уровня системной резистентности, обусловливающего уровень локальной, повышается агрессия микроорганизмов, запускается каскад гуморальных и клеточных реакций, что приводит к локальному иммунологическому конфликту [7].
Воспаление пульпы неизбежно сопровождается локальным отеком, увеличением внутрипульпарного давления и гибелью клеток. В результате развивается коллапс сосудов и продолжающаяся тканевая гипоксия, что предсказуемо приводит к ограниченному некрозу. Высвобождение химических медиаторов, в свою очередь, вызывает увеличение отека, создается порочный круг и прогрессирование процесса [8].
Цель исследования: выявление реакции топических клеточных иммунных факторов у пациентов с поражениями эн-допериодонтального комплекса.
Материал и методы исследования: обследованы 40 пациентов (18 мужчин и 22 женщины в возрасте 18-50 лет), обратившихся в АУ «Республиканская стоматологическая поликлиника» МЗ
Результаты и их обсуждение:
Чувашии с целю планового лечения, после получения информированного согласия, разделенных на 3 группы:
1 группа, интактная - с экстирпацией пульпы зубов по протетическим показаниям;
2 группа, контрольная - с выявленным хроническим пульпитом (К04.0);
3 группа, сравнения - с выявленным хроническим апикальным периодонтитом с наличием синус-тракта (К04.6).
Обследование проведено по стандарту с применением основных и дополнительных методов (лучевые методы диагностики - ра-диовизиография и КЛКТ-исследование). Материалом для иммуногистохимического исследования служил экстирпат пульпы. Для исследования морфологического состава пульпы и проведения морфометрии материал подвергался стандартным процедурам подготовки. Иммуногистохимические исследования выполнялись в соответствии со стандартным протоколом и использованием автостейнеров и систем визуализации En-vision (DAKO, Дания) и NovoLinkpolymer (NovoCastra, Великобритания). В работе использовались монокло-нальные антитела к изучаемым маркерам. Компьютерная морфометрия проведена на базе микроскопа Leica DM4000B и пошаговым использованием соответствующих лицензионных программ. Микрофотографии получены при увеличениях х200 и х400. Статистическая обработка цифровых данных проводилась на компьютере IntelCore 2 Duo с помощью лицензионного пакета MicrosoftOffice 2003 (Word и Excel), а также программ G-Stat и «Биостатистика», достоверность определяли по критерию Стьюдента (t).
А Б В
Рис. 1. ИГХА коллагена 4 типа - микрофотография (увеличение х200). Интактная
группа (А), группа К04.0 (Б), группа К04.6 (В). ----
~ 31 ~
Данные результатов исследования свидетельствуют о том, что распределение коллагена 4 типа в интактной пульпе проявляется его преимущественной локализацией в базальных мембранах кровеносных сосудов (рис.1). Не характерно накопление в клетках стромы либо внеклеточное накопление коллагена 4 типа.
При пульпите реакция с коллагеном 4 типа более интенсивна, чем в интактной пульпе. Преимущественная локализация белка в стенке кровеносных и лимфатических сосудов, однако интенсивность реакции более высокая за счет утолщения стенки сосудов. Обращает на себя внимание реакция в многочисленных микрососудах капиллярного типа, количество которых достоверно выше, чем в интактной пульпе, что свидетельствует о выраженной сосудистой реакции на
у
' . £ • ч ,
j //'/'» f ' .,1' V
% шзшц
j'1 , ■ ' ■»■'< ' V.,7-
X'teAt:'*. >у-. 1% i Л-
. i}
51 ":■->',■ >Х ". Ш Éfí
't'i im
щ jíy ; ж-'&Л i V»
прогрессирующий процесс воспаления. На участках усиленной воспалительной инфильтрации отмечается размытие контура базальной мембраны сосудов и значительной утолщение их стенок, вероятно, за счет отека стромы.
Распределение коллагена при периодонтите характеризуется его накоплением в мембранах свободно лежащих клеток стромы. Эти явления регистрируются на фоне снижения общей клеточного рисунка пульпы и увеличения числа сосудов микроциркуляторного русла. Накопление коллагена в клетках стромы свидетельствует о фиброзировании пульпы. При прогрессировании воспалительного процесса изменение капиллярных стенок сопровождается повышением их проницаемости, следствием чего является выраженный отек и утолщение сосудистой стенки. • - . > у
■ ■ ' • «•' ' . ...• •. / •• •• - -
А Б В
Рис. 2. ИГХА УБОГ - микрофотография (увеличение х400). Интактная группа (А),
группа К04.0 (б), группа К04.6 (В).
Распределение VEGF в интактной
пульпе характеризуется экспрессией в эн-дотелиальных клетках микрососудов, а также в немногочисленных периваскуляр-ных клетках. Воспаление пульпы (К04.0) проявляется яркой позитивной цитоплаз-матической реакцией клеток стромы к VEGF. Клетки располагаются равномерно, местами формируя скопления в количестве 5-10. Число клеток, экспрессирующих VEGF, превышает 100 в поле зрения (х400).
Периодонтит (К04.6) характеризуется выраженной позитивной реакцией с VEGF, причем характерна цитоплазмати-ческая реакция в клетках стромы, в то 3. Морфологическая картина расширения стенок капилляров сопровождается клиническим повышением
время как реакция в клетках эндотелия сосудов снижена. Число клеток пульпы, экспрессирующих VEGF, в отдельных полях достигает 30-40 в поле зрения при увеличении Х400 (рис.2. Выводы:
1. Хроническое воспаление пульпы сопровождается достоверным повышением экспрессии коллагена 4 типа (рИ0,01).
2. Прогрессирование процесса воспаления в пульпе зуба приводит к изменению капиллярных стенок с повышением их проницаемости, с дальнейшим выраженным отеком и утолщением сосудистой стенки.
кровоточивости при вовлечении в воспалительный процесс тканей периодонта.
ИгЧ
"Medical & pharmaceutical journal "Pulse" | "Медико-фармацевтический журнал "Пульс"
4. Воспаление пульпы проявляется выраженной реакцией клеток стромы к VEGF. Выявлен достоверно повышенный объем экспрессирующих к VEGF клеток (более ста в поле зрения) (рИ0,01).
5. При вовлечении в процесс тканей пе-риодонта отмечается достоверное снижение количества VEGF-позитивных клеток наряду с уменьшением реакции клеток эндотелия сосудов (рИ0,01).
