CC BY
27
"Medical & pharmaceutical journal "Pulse" | "Медико-фармацевтический журнал "Пульс"
УДК 616-002.2; 616.314.18; 616.314/163; 616.314.165 http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2019-21-9-79-82
ХАРАКТЕРИСТИКА CD-МАРКЕРНОЙ РЕАКЦИИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ЭНДОПЕРИОДОНТАЛЬНОМ ВОСПАЛЕНИИ
Гилязева1 В.В., Ханова12И.А., Никитина1 Л.И.
гФГОУ ВПО «Чувашский Государственный Университет имени И.Н. Ульянова» г. Чебоксары, Российская Федерация 2АУ «Республиканская стоматологическая поликлиника», г. Чебоксары, Российская Федерация
CHARACTERISTIC CD-MARKERS OF RESPONSE IN CHRONIC ENDOPERIODONTAL INFLAMMATION
Gilyazeva1 V.V., Khanova121.A., Nikitina1 L.I.
1Chuvash State University named after I.N. Ulyanova, Cheboksary, Russian Federation. 2Republican Dental Clinic, Cheboksary, Russian Federation
Аннотация. Изучено содержание маркера CD-31, используемого для выявления реакции кровеносных сосудов и оценки их плотности в тканях эндопериодон-тального комплекса и CD-138 - высокоспецифичного маркера плазматических клеток, представленного на поверхности эндотелиальных и многих других типов клеток при хроническом воспалительном процессе в пульпе и периодонтальных тканях. Установлено накопление в строме плазматических клеток, позитивных к CD-138, и характерное наличие солитарных CD-31-положительных клеток, диффузно расположенных среди фибробластов стромы. Цель работы - представить иммунологическую маркерную характеристику эндо-периодонтального воспалительного процесса. Данные полученных результатов позволят расширить представление об иммунном ответе тканей эндо-периодонтального комплекса в условиях хронического воспаления и обосновать методы уточненной лечебно-диагностической тактики. Ключевые слова; эндо-периодонтальный, воспалительный, процесс, маркеры, CD-31, CD-138, плазматические клетки, кровеносные сосуды. Annotation. The content of the CD-31 marker used to identify blood vessels and assess the density of these vessels in tissues and CD-138 - a highly specific marker of plasma cells, represented on the surface of endothelial and many other types of cells was studied. The accumulation of plasma cells positive to CD-138 in the stroma and the characteristic presence of solitary CD-31 -positive cells diffusely scattered among the stroma fibroblasts in the inflammatory process in the pulp and destructive changes in periodontal tissues of patients with chronic apical periodontitis burdened by the presence of fistula were found. There is no doubt that the timely detection and correctly interpreted pathology affecting all the affected tissues in layers can be stopped without the development of subsequent complications. Understanding the morphology and substantiation of the pathogenesis of the identified pathological process together makes it possible to improve medical tactics and improve the efficiency of care provided to such patients. The aim of the work is to present the morphological characteristics of inflammatory destruction of endo-periodon-tal tissues. Track the reaction of specific markers at all stages of the inflammatory process. To study the state of pulpo-periodontal complex in patients using immuno-histochemical analysis. Key words; inflammatory-destructive changes of periodontium, markers CD31, CD-138, plasma cells, blood vessels.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК [1] Al-Fouzan K.S. A new classification of endodontic-periodontal lessions // Int J Dent. 2014; Epub 2014. Apr. 2014. [2] Pathogenetic aspects of dental pulp pathology / E. V. Shchetinin, S. V. Sirak, A. B. Khodzhayan [et al.] // Medical News of the North Caucasus. 2015. Vol. 10, № 2. P. 187-191. REFERENCES [1] Al-Fouzan K. S. A new classification of endodontic-periodic reductions / K. S. Al-Fouzan // Int J Dent. 2014; Epub 2014. Apr. 2014. [2] Pathogenic aspects of dental pulp pathology / E. V. Shchetinin, S. V. Sirak, A. B. Khodzhayan [et al.] / / Medical News of the North Caucasus. 2015. Vol. 10, № 2. p. 187-191.
[3] Диагностика и планирование лечения эндо-паро-донтальных поражений / А.В. Силин, Н.Е. Абрамова, Е.В. Леонова, С.А. Туманова, А.С. Пастухова // Пародонтология. 2015. Т. 20. № 3(76). С. 74-80.
[4] Дифференциальная диагностика эндо-пародон-тальных поражений, определяющая объем лечебных мероприятий / Е.В. Леонова, С.А. Туманова, И.А. Киброцашвили, А.С. Пастухова // Институт стоматологии. 2015. № 3(68). С. 59-61.
[5] Мороз П.В. Эндо-пародонтальный синдром: анатомические предпосылки развития, этиология, классификация и тактика лечения // Институт стоматологии. 2014. № 2(63). С. 91-94.
[6] Маркеры ангиогенеза при опухолевом росте / Н.А. Федорова, О.А. Харлова, Н.В. Данилова, П.Г. Мальков, Н.М. Гайфуллин // Архив патологии. 2016. №2. С. 55-62.
[7] Зорян А.В., Зорян Е.В., Даурова Ф.Ю. К выбору противовоспалительной терапии в эндодонтии // Эндодонтия Today. 2016. № 1. С. 42-46.
[8] Иммунные нарушения на системном и локальном уровнях при хроническом периодонтите, взаимосвязь с оксидантными изменениями / Д.Д. Голдо-бин, А.Л. Локтионов, Н.А. Быстрова, А.В. Караулов // Иммунология. 2017. №1. Т.38. С. 35 - 39._
[3] Diagnosis and treatment planning of endo-perio-dontal lesions / A.V. Silin, N. E. Abramova, E. V. Leonova, S. A. Tumanova, A. S. Pastukhova // Perio-dontology. 2015. Vol. 20. № 3(76). p. 74-80.
[4] Differential diagnosis of endo-periodontal lesions, determining the volume of therapeutic measures / E. V. Leonova, S. A. Tumanova, I. A. Kibrotsashvili, A. S. Pastukhova // Institute of dentistry. 2015. № 3(68). p. 59-61.
[5] Moroz P. V. Endo-periodontal syndrome: anatomical preconditions of development, etiology, classification and treatment tactics // Institute of dentistry. 2014. № 2(63). p. 91-94.
[6] Markers of angiogenesis in tumor growth / N. A. Fe-dorova, O. A. Kharlova, N. I. Danilov, P. G. Malkov, N. M. Gaifullin // Archive of pathology. 2016. №. 2. p. 55-62.
[7] Zoryan A.V., Zoryan E.V., Daurova F.Yu. To the choice of anti-inflammatory therapy in endodon-tics // Endodontics Today. 2016. № 1. p. 42-46.
[8] 8. Immune disorders at the system and local levels in chronic periodontitis, the relationship with oxi-dant changes / D. D. Goldobin, A. L. Loktionov, N. Ah. Bystrova, A.V. Karaulov // Immunology. 2017. Vol. 38 №1. p. 35 - 39._
Введение. Вопросы патогенеза воспаления пульпо-периодонтальных тканей представляют высокий интерес на современном этапе развития стоматологической науки и практики [1]. Для успешного решения этой проблемы необходим компетентный подход к пониманию и интерпретации клинических проявлений заболевания [2]. Формирование полного представления об этиопатогенезе воспалительного процесса, в том числе, последовательности развития патологических реакций и изменений предоставит возможность для проведения уточненной диагностики и, как следствие, своевременной ликвидации проблем [3]. Важным является, прежде всего, необходимость выявления степени вовлечения в патологический процесс всех структурных элементов пораженных тканей, а также - оценка взаимосвязи очага и общей реакцией организма [4]. Экскурсия известных инфекционных агентов тубуло-васкулярным путём в системе «пародонт - эндодонт» превращает это заболевание в сложный патоморфофункцио-нальный синдромокомплекс [5].
CD-31, несмотря на некоторые разногласия среди исследователей, принято использовать для целевого выявления состояния кровеносных сосудов и оценки плотности этих сосудов в ткани. CD-31 экспрессируется в эндотелиальных клетках и кровеносных сосудах и малых лимфатических сосудах, хотя и не считается специфическим маркером лимфатической системы. CD-31 - это молекула адгезии РЕСАМ-1, которая обеспечивает контакты эндотелиальных клеток между собой и лейкоцитов с эндотелием. Моноциты, тромбоциты, гранулоциты, часть Т-лимфо-цитов, клетки эндотелия - именно на этих клетках экспрессирован CD-31. Экспрессия CD-138 является обязательной отличительной чертой плазматических клеток. В связи с этим CD-138 принимается большинством авторов в качестве универсального маркера плазматических клеток и часто используется для идентификации и выделения плазмоцитов. Кроме того, учитывая, что CD-138 обнаруживается лишь на плазматических клетках и предшественниках плазмоцитов, считается также одним из дифференциальных маркеров. CD-138 - маркер В-лимфоцитов, высокоспецифичный маркер плазматических клеток и представлен на поверхности эндотелиальных клеток.
----
~ 80 ~
Токсины корневого канала, вызывающие клинически определяемое воспаление в перио-донте, образуются из инфицированной некробиотической ткани пульпы или ее распада, из не обтурированных пространств при неудачном завершении эндодонтических процедур. Немаловажная роль отводится реакции маркеров CD-31 и CD-138 [6]. Получение расширенных и уточненных данных результатов иммуногистохимических исследований экспрессии маркеров позволят обосновать и повысить эффективность ранней диагностики и лечения [7,8].
Цель исследования: представить иммунологическую маркерную характеристику эндо-пе-риодонтального воспалительного процесса по CD-31 и CD-138.
Материал и методы исследования: обследовано 30 пациентов (12 мужчин и 18 женщин в возрасте 20-47 лет), обратившихся с целью плановой санации, после получения информированного согласия распределенных в 3 группы: 1 - пациенты с депульпированными зубами по про-тетическим показаниям, 2 (контрольная) - пациенты с хроническим пульпитом, К04.0; 3 - пациенты с хроническим апикальным периодонтитом, К04.6, отягощенным наличием синус-тракта. Верификация диагноза проводилась стандартно, с использованием основных и дополнительных методов обследования, оценка состояния тканей пародонта проводилась по индексам Muhlemann-Cowell и PMA.
Материалом для морфологического (иммуногистохимического) исследования служила экстирпированная при плановом эндодонтическом лечении пульпа, в работе применяли стандартную методику с последующей проводкой на тканевом гистопроцессоре Leica ASP 200. Им-муногистохимические исследования выполнялись в соответствии со стандартными протоколами с использованием иммуногистохимических автостейнеров AUTOSTAINER-3 60 (THERMO, Великобритания) и Leica BOND-MAX (Германия), с применением систем визуализации En-vision (DAKO, Дания) и NovoLinkpolymer (NovoCastra, Великобритания), моноклональных антител к коллагену 4 типа и CD-68. Компьютерная морфометрия проводилась на базе микроскопа Leica DM4000B с использованием цветной фотокамеры и лицензионной программы. Микрофотографии для проведения морфометрических измерений получены при увеличениях х200 и х400, линейные и количественные морфометрические измерения выполнены с использованием соответствующих лицензионных программ, визуальный подсчет клеток - в десяти интересующих полях зрения при увеличении х400. Статистическая обработка проводилась на компьютере Intel Core 2 Duo с помощью лицензионного пакета Microsoft Office 2003 (Word и Excel), а также программ G-Stat и «Биостатистика».
Результаты и их обсуждение: У всех пациентов с диагностированным хроническим апикальным периодонтитом в области свищевого хода наблюдался симптом вазопареза, в области синус-тракта определялся локальный отек с кровоточивостью десневого сосочка. Показатели значений индекса Muhlemann-Cowell и PMA в группах наблюдения составили: 1 группа - 0-0,1 и 0-10% соответственно; 2 группа - 0,1-1,0 и 11-20%; группа сравнения - 1,1-1,3 и 25% соответственно.
Данные результатов морфологического исследования свидетельствуют о том, что кровеносные сосуды интактной пульпы представляют равномерную интенсивную реакцию с CD-31. Сосуды имеют линейный ход, строма пульпы без признаков тканевого отека, число сосудов в поле зрения на увеличении Х400 не превышает 4-5 (Рис. 1А).
CD-31 дает позитивную реакцию в эндотелии микрососудов пульпы. Сосуды пульпы при пульпите синусоидного типа, эктазированы, строма отечная. Количество сосудов не превышает 9-10 в поле зрения (Рис. 1Б).
Периодонтит, как и пульпит, характеризуется выраженным полнокровием и эктазией кровеносных сосудов, однако степень выраженности тканевого отека меньше, чем при остром воспалении пульпы. Характерно наличие солитарных CD-31-положительных клеток, диффузно разбросанных среди фибробластов стромы. Число сосудов в поле зрения уменьшается по сравнению с таковым при пульпите до 7-8 при увеличении Х400 (Рис. 1В).
т^шш
-
.тА'
J ч ^ г. fc?
■ Ъ -- ;
вУ -ф '
Ц. 1
f&íV V'
1 vi г ■ .
к»' 1 '.у
А
В
Рис. 1. CD-31 - позитивная реакция кровеносных сосудов. Пульпа зуба. Интактная группа (А), группа с пульпитом (Б), группа с периодонтитом (В). Микроскоп Leica DM4000B. Увеличение х 400.
Интактная пульпа зуба характеризуется отрицательной реакцией с антигеном плазматических клеток CD-138 (Рис. 2А).
Хроническое воспаление пульпы характеризуется незначительной плазмоклеточной реакцией. Плазматические клетки располагаются, преимущественно, периваскулярно, их число не превышает 5-10 в поле зрения при увеличении Х400 (Рис. 2Б).
Хроническое воспаление в тканях периодонта характеризуется накоплением в строме плазматических клеток, позитивных к CD-138. Число этих клеток в поле зрения при увеличении Х400 достигает 40 (Рис. 2В).
; - :,■>• - - ' .-' ^ v,\ "Vi- •:•- • «."
-........... г - . - .• - • >
I '<>.,}
А
В
Рис. 2. Реакция плазматических клеток, позитивных к CD-138. Пульпа зуба. Интактная группа (А), группа с пульпитом (Б), группа с периодонтитом (В). Микроскоп Leica DM4000B. Увеличение х 400.
Заключение. На основании результатов проведенного исследования выявлено:
1. CD-31 дает позитивную реакцию в эндотелии микрососудов пульпы, причем максимальное количество сосудов микроциркуляторного русла наблюдается при хроническом пульпите с выраженным уменьшением при хроническом апикальном периодонтите, что свидетельствует о признаках некроза;
2. Выраженное полнокровие и эктазия кровеносных сосудов выявляется как при пульпите, так и при периодонтите, однако степень выраженности тканевого отека при хроническом воспалении периодонта меньше, чем при аналогичном воспалении пульпы;
3. В интактной пульпе наблюдается отрицательная реакция с антигеном плазматических клеток CD-138;
4. При хроническом апикальном периодонтите происходит явное накопление в строме плазматических клеток, позитивных к CD-138, тогда как при хроническом пульпите выявляется лишь небольшая плазмоклеточная реакция.
