Экспрессия раково-тестикулярных генов в клетках перевиваемых линий Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

40

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ XI ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ..

Т.Б. Переверзева, Э.Р. Переверзева, Д.А. Бодягин, С.А. Лакатош, М.Н. Преображенская, И.Д. Трещалин ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ

И ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ НОВОГО ТАРГЕТНОГО ПРЕПАРАТА ПИМИНА

ФГБУ «НИИНА» РАМН, Москва

Задачи исследования. В последние годы проводятся интенсивные исследования серин/треониновой киназы Рт-1, которая является ключевым регулятором ряда сигнальных путей, определяющих развитие опухоли. Гиперэкспрессия Рт-1 была обнаружена при многих онкологических заболеваниях, что позволяет рассматривать ее в качестве новой интересной мишени, имеющей значительный потенциал терапевтического воздействия. Показано, что ингибиторы Рт-1-киназы индуцируют гибель опухолевых клеток, экспресси-рующих Рт-1. В ФГБУ «НИИНА» РАМН было синтезировано оригинальное соединение - ингибитор Рт-1-киназы пимин. Задачей настоящего исследования явилось изучение его острой токсичности и противоопухолевой активности.

Материалы и методы. Исследования были проведены на мышах ВВР1(С57В1 х БВА2) самках, массой 18 - 22 г, полученных из Центрального питомника РАМН «Крюково». При изучении острой токсичности по методу Литчфилда и Уилкоксона 2% раствор пимина в 0,9% №С1 вводили внутривенно в различных дозах. Дозы, характеризующие токсичность, рассчитывали при помощи компьютерной программы «81а1Р1ш 2006». Лимфолейкоз Р388 перевивали внутрибрюшинно, меланому В-16 и аденокарциному мышей АК-755 - под кожу бока по 1 млн клеток на мышь. Препарат вводили однократно в/в или в/бр в дозах 100, 150 и 170 мг/кг, пятикратно в/бр ежедневно в дозах 20; 30 и 40 мг/кг или десятикратно в дозах 10 и 20 мг/кг. Введение начинали через 24 часа после перевивки опухоли. Противоопухолевый эффект оценивали по увеличению продолжительности жизни животных (УПЖ%) или по торможению роста опухоли (ТРО%).

Результаты. Расчётные дозы соединения, характеризующие токсичность пимина, составили: ЛД50 = 263 (217^310) мг/кг; МПД = 179 мг/кг (151^200). Показано, что однократное введение соединения не вызывает увеличения продолжительности жизни животных с лимфолейкозом Р388. При пятикратном применении пимина в разовых дозах 20; 30 и 40 мг/кг УПЖ составило соответственно 25%; 37% и 49%. При введении соединения в дозе 10 мг/кг десятикратно было получено достоверное торможение роста АК 755 на 70%, а меланомы В-16 - на 97%.

Выводы. Полученные токсикологические характеристики пимина и высокая противоопухолевая активность позволяют рассматривать его в качестве перспективного химиотерапевтического агента.

Е.С. Плеханова , Д.В. Новиков , А.В. Калугин , С.В. Шумилова , Н. Гуррам , Е.Н. Филатова , В.В. Новиков , А.Ю. Барышников

ЭКСПРЕССИЯ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫХ ГЕНОВ В КЛЕТКАХ ПЕРЕВИВАЕМЫХ ЛИНИЙ

'НИИ молекулярной биологии и региональной экологии ННГУ им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород 2ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН, Москва

Задачи исследования. Транскрипция раково-тестикулярных (РТ) генов наблюдается в семенниках, клетках зародыша и плаценты, иногда в клетках иммунопривилегированных тканей, а также в неопластических клетках. Ограниченная экспрессия РТ генов позволяет использовать их мРНК в качестве маркеров опухолевых клеток при онкологических заболеваниях. Целью настоящего исследования явилась оценка экспрессии РТ генов в перевиваемых клеточных линиях различного происхождения.

Материалы и методы. В работе использовали перевиваемые клеточные линии Colo205, HCT116, HCT15, SW-60, T84, CaCo2 (колоректальный рак), Hep3B, HepG2 (карцинома печени), PC-3M, Du145, LNBupLN3 (рак простаты), MCF-7, T47d, HS578 (рак молочной железы), A549, NCI-H23 (рак легкого), A498, SN12C, CaKi1, ACHN (рак почки), NCI-H78, H9, (лимфомы), Ramos, Daudi (лимфома Беркитта), Jurkat, J937, HL60, CCRF-CEM, K6-1a (лейкемия) и SK-OV-3 (рак яичников). Методом ОТ-ПЦР выявляли мРНК пяти семейств РТ генов: MAGEA1-6, XAGE1, SSX1, 2 и 4, MAGEC1 и TRAG-3.

Результаты и выводы. В клеточных линиях, полученных из опухолей больных колоректальным раком и раком простаты, были обнаружены мРНК всех пяти семейств генов (MAGEA1-6, XAGE1, SSX1,2 и 4, MAGEC1 и TRAG-3). В линиях, имеющих происхождение от опухолевых клеток больных карциномой печени, раком легкого, молочной железы и почки, обнаруживались мРНК генов MAGEA1-6, SSX1,2 и 4, XAGE1 и TRAG-3. Не обнаруживалась мРНК MAGEC1. В клетках линий NCI-H78, H9 (лимфома) обнаруживалась мРНК генов MAGEA1-6, TRAG-3, SSX1,2 и 4, в клетках линии SK-OV-3 (рак яичников) - мРНК MAGEA1-6 и TRAG-3, в клетках линий Ramos, Daudi (лимфома Беркитта) - мРНК MAGEA1-6. Из пяти исследованных лейкозных клеточных линий мРНК РТ генов была обнаружена в клетках CCRF-CEM (мРНК MAGEA1-6), клетках J937 (мРНК XAGE1), клетках линии K6-1a (мРНК MAGEA1-6 и TRAG-3), но не выявлялась в клетках линий Jurkat и HL60. Таким образом, клеточные линии, имеющие разное происхождение, отличаются по набору активных РТ генов.

Работа выполнена при финансовой поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы и ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России» на 2007-2012 годы.

№ 2/том 11/2012

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ