CC BY
5Список литературы
1. Diffuse large B-cell lymphoma: optimizing outcome in the context of clinical and biologic heterogeneity / L . H . Sehn, D . G . Randy // Blood . 2015 . Vol . 125 . № 1. Р 22-32 .
2 . AKT as a Therapeutic Target for Cancer M . Song, Ann M . Bode, Z . Dong, M . H . Lee // Cancer Receach . 2019 . Р 1019-1031.
DOI: 10 .1158/0008-5472 . CAN-18-2738 .
3 . Pharmacological Inhibition of Oncogenic STAT3 and STAT5 Signaling in Hematopoietic Cancers / M . Brachet-Botineau,
M . Polomski, H . A . Neubauer, L Juen et al . // Cancers . 2020 . Vol . 12 (1) . Р 240; https://doi . org/10 . 3390/cancers12010240 .
4 . Ассоциация экспрессии pSTAT3, рАКТ1 с выживаемостью больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой /
Е . В . Ванеева, В А. Росин, Д . А . Дьяконов, С . В . Самарина // Казанский медицинский журнал . 2020 . Т .101. № 4 . С . 501-506 .
Экспрессия Ю-67 в клеточных культурах рака молочной железы люминального В HER2-позитивного подтипа
Авторы
Могиленских Анна Сергеевна, annasajler@yandex.ru, ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», Екатеринбург
Гребенюк Екатерина Владимировна, id-1111@mail.ru, ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», Екатеринбург
Шамшурина Елена Олеговна, elshamshurina@gmail.com, ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, Екатеринбург
Сазонов Сергей Владимирович, prof-ssazonov@yandex.ru, ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», Екатеринбург
Демидов Сергей Михайлович, demidov@gkb40.ur.ru, ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», Екатеринбург
Ключевые слова:
карцинома молочной железы, белок Кь67, клеточные культуры
Актуальность
Ядерный белок Ki-67 присутствует во всех про-лиферирующих клетках, учет количества клеток, его экспрессирующих, имеет значение при определении некоторых молекулярно-генетических подтипов рака молочной железы (РМЖ). Однако при люминальном В HER2-позитивном подтипе рака молочной железы в соответствии с рекомендациями ASCO/CAP значение уровня Ki-67 на сегодня не учитывается [1, 2], а динамика уровней пролиферации клеточной культуры из опухолей данного подтипа неизвестна.
Цель
Изучение особенностей экспрессии Ki-67 при культивировании опухолевых клеток РМЖ, полученных из опухолей люминального В НЕК2-позитивного подтипа.
Материалы и методы
В исследование включен материал пациенток, относящихся к клинической группе гормон-рецептор-позитивных и НЕК2-позитивных (ER+/HER2+) РМЖ, отбор которых осуществлялся в соответствии с рекомендациями ASCO/CAP [2]. Часть материала, полученного после операции, диссоциировали с помощью ферментов. После раствор центрифугировали, суперна-тант сливали. Полученный осадок дважды ресуспенди-
ровали трипсином и смесью диспазы-ДНКазы, после чего разбавляли HF (раствор Хенкса с 10% FBS) 1:1 и центрифугировали. Супернатант сливали, осадок помещали в питательную среду Mammocult (STEMCELL, Канада) в 5 мл флаконы [3]. На 1-3-м пассаже часть клеток высеивали на предметные стекла для проведения иммуноцитохимического анализа (ИЦХ). Окраски проводили с использованием автостейнера Dako Link (Дания). Использовали антитела Primary Antibody anti-Pan Keratin (клон AE1/AE3/PCK26, Roche Diagnostics, США), Ki-67 (клон MIB-1, Dako, Дания) [4]. Подсчет положительно окрашенных клеток осуществлялся при просчете не менее 600 клеток. В каждой группе исследования определялось среднее арифметическое значение Ki-67, стандартная ошибка среднего арифметического, а также доверительный интервал (ДИ) для среднего с помощью программы MC Excel. Для выявления достоверности различий между двумя выборками применялся критерий Стьюдента.
Результаты
При ИЦХ исследовании положительная реакция на панцитокератин в культивируемых клетках РМЖ была обнаружена во всех трех пассажах во всех культурах. Индекс клеточной пролиферации Ki-67 в клеточной культуре на первом пассаже оказался
низкий — он составил 6,0±1,9%, среднее значение Кь67 с доверительной вероятностью 95% находится в диапазоне ДИ = 2-9%. На втором пассаже средний уровень Ю-67 — 22,1±5,6% (ДИ = 11-32). На третьем пассаже уровень пролиферации составил 20,1±3,0% (ДИ = 12-25). Различия между данными второго и третьего пассажа статистически незначимы.
Выводы
Проведенное исследование показало, что при пересевах клеточной культуры люминального В HER2-позитивного подтипа РМЖ только на втором и третьем пассаже количество клеток, экспрессирующих Кь67, достигает уровня, характерного для данного молекулярно-биологического подтипа [1].
Список литературы
1. Сазонов С . В . , Бриллиант А . А ., Бриллиант Ю . М . Связь состояния пролиферативных процессов и особенностей ре-цепторного аппарата опухолевых клеток карциномы молочной железы // Гены и Клетки . 2017 . Т 12 . № 4 . С . 76-81.
2 . Семиглазов В . Ф ., Палтуев Р М . , Манихас А. Г и др . Клинические рекомендации РООМ по диагностике и лечению
рака молочной железы . Клинические рекомендации РООМ . СПБ . : Издательский дом «АБВ-пресс» . 2015 . 504 с .
3 . Могиленских А . С . Создание клеточных линий карциномы молочной железы / А . С . Могиленских, С . В . Сазонов // Гены
и Клетки . 2021. Т. 16 . № 1. С . 15-23 . DOI: 10 . 23868/202104002 .
4 . Цитологическая оценка одной культуры клеток карциномы молочной железы Luminal A подтипа / Е . О . Шамшури-
на, А . С . Могиленских, Е . B . Гребенюк и др . // Уральский медицинский журнал . 2021. Т. 20 . № 5 . С . 75-81. DOI: 10 . 52420/2071-5943-2021-20-5-75-81.
Возможности цитологической диагностики подслизистых новообразований желудочно- кишечного тракта по материалу тонкоигольной аспирационной биопсии под контролем эндосонографии с технологией «клеточного блока» и иммуноцитохимическим исследованием
Авторы
Нефедова Алина Викторовна, alina-horikova@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт- Петербург
Михетько Андрей Александрович, amikhetko@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт- Петербург
Якубо Екатерина Леонидовна, yakuboklim@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт- Петербург
Шалина Екатерина Сергеевна, shalinakatay@ya.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт- Петербург
Новик Виктор Иванович, viknov@list.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт- Петербург
Красильникова Лариса Анваровна, krasilnikova.lara@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт- Петербург
Ключевые слова:
клеточный блок, тонкоигольная аспирационная биопсия, иммуноцитохимическое исследование
Актуальность
Подслизистые новообразования желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) — гетерогенная группа заболеваний, которая включает в себя опухоли различного гистологического происхождения и составляет 5% всех образований верхних отделов ЖКТ. Обычно большинство из них имеют морфологию веретено-видных клеток, что создает сложности в проведении дифференциальной диагностики на уровне световой микроскопии.
Цель
Оценка результатов цитологического исследования подслизистых новообразований верхних от-
делов ЖКТ в сочетании с технологией «клеточный блок» (КБ) и иммуноцитохимическим исследованием (ИЦХ).
Материалы и методы
С 2018 по 2021 г. у 22 пациентов была выполнена тонкоигольная аспирационная биопсия (ЭУС-ТАБ) подслизистых новообразований верхних отделов ЖКТ при помощи игл 19G, 22G, 25G со взятием материала для гистологического и цитологического исследования. Полученный материал помещали на стекла и в эппендорф с транспортной средой для последующего изготовления КБ. В каждом случае исследовали традиционные мазки и срезы с КБ, окрашенные по
