CC BY
5
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1991 УДК 613.636:613.165.3:876.841 ]-078
В. Л. Васильева, А. Л. Гураль, В. И. Трусов, Т. В. Чигирь
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПДК БАКУЛОВИРУСОВ В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Киевский НИИ эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л. В. Громашевского Минздрава СССР
Среди биологических средств защиты растений большое практическое значение приобретают препараты на основе энтомопатогенных вирусов из семейства Васи1оу1пс1ае — ядерных полиэдрозов (ВЯП) и гранулезов. За последние годы в нашей стране создан ряд высокоактивных и рентабельных бакуловирусных препаратов. В их числе биоинсектициды вирин-ЭНШ и вирин-ЭКС, успешно прошедшие испытания и рекомендованные для применения в сельском и лесном хозяйстве. Указанные препараты в течение ряда лет широко применяли в разных регионах СССР с достаточно высокой технической эффективностью — 66—100 % [10, 15]. По-видимому, крупномасштабное производство вирусных препаратов в нашей стране в ближайшем будущем развернуто не будет. Принята концепция создания региональных заводов (производственных биолабораторий), приближенных к местам применения биопрепаратов.
В результате санитарно-гигиенических исследований нами установлено, что бакуловирусы и отечественные препараты на их основе (вирин-ЭНШ и вирин-ЭКС) нетоксичны для человека и теплокровных животных и не вызывают инфекционных заболеваний. Вместе с тем в эксперименте получены данные об иммуногенных свойствах бакуловирусов, которые могут индуцировать гуморальный и клеточно-опосредованный иммунный ответ организма, оказывать сенсибилизирующее действие [4, 5, 8]. Изучение степени об-семененности вирусными тельцами — включениями (полиэдрами) воздуха производственных помещений на предприятиях типа лабораторного производства с помощью ИФ-метода показало, что на различных участках производственного процесса обнаруживаются полиэдры ВЯП непарного шелкопряда (НШ) до 106 в/м3. Единичные полиэдры можно было обнаружить в носоглоточных смывах у работающих [3, 14]. Показано, что бакуловирусы могут сенсибилизировать организм и приводить при длительном контакте с ними к развитию у работающих аллергических заболеваний, приобретающих характер профессиональной вредности [6]. Полученные данные позволили сделать заключение, что бакуловирусы представляют собой новый специфический фактор производственной среды, подлежащий гигиенической регламентации по лимитирующему иммунологическому критерию, поскольку другие критерии вредности не были выявлены.
Цель настоящей работы — обоснование ПДК бакуловирусов в воздухе рабочей зоны при произ-
водстве энтомопатогенных препаратов вирин-ЭНШ и вирин-ЭКС. Вирин-ЭНШ — энтомопато-генный препарат, действующим началом которого является,ВЯП НШ, предназначен для борьбы с опасным полифитофагом, повреждающим сельскохозяйственные культуры, лесные и парковые насаждения. Вирин-ЭКС изготовлен на основе ВЯП капустной совки (КС) и предназначен для борьбы с гусеницами КС, повреждающей капусту, сахарную свеклу и другие культуры. Конструкция препаратов принципиально сходна. Они представляют собой порошок или суспензию полиэдров, из трупов погибших от соответствующей вирусной болезни гусениц в 50 % глицерине. Наполнителями сухих форм препаратов служат каолин, силикон и др. Титр препаратов — 1-109 полиэдров в 1 мл или 1 г. Жизнеспособных полиэдров выделяли из препаратов при помощи дифференциального центрифугирования с последующей очисткой в градиенте плотности сахарозы [2].
Исследование современных условий производства вирусных инсектицидов и анализ полученного1 нами фактического материала по эксперименталь- > ному изучению воздействия бакуловирусов на организм теплокровных животных показали, что является наиболее адекватным реальным путем поступления бакуловирусов в организм человека при разработке и производстве препаратов на их основе является ингаляционный. В связи с этим исследования по гигиеническому нормированию проводили в условиях ингаляционного воздействия бакуловирусов.
Эксперименты проведены на 209 беспородных морских свинках с массой тела 250—300 г. В опытных и контрольных группах было по 8—10 животных. Материалом для ингаляционного воздействия служила взвесь полиэдров ВЯП НШ и ВЯП КС в 0,85 % растворе хлористого натрия. Затравку животных осуществляли в 100-литро-вой аэрозольной камере КИЭМП-9, построенной по динамическому типу. Содержание бакуловирусов в камере контролировали иммунофлюорес-центным методом [13]. Изучали сенсибилизирующее действие бакуловирусов в условиях однократного и 4-х месячного воздействия. Расчеты, допустимых концентраций бакуловирусов проводили по основному действующему началу и выражали в количестве полиэдров в 1 м3 воздуха.
Исследователи опирались на общепринятую среди отечественных гигиенистов концепцию порогового действия [11, 12]. Главное внимание было обращено на установление зависимости сенсиби-
Таблица 1
Показатели иммунологической перестройки организма морских свинок после одноразового ингаляционного воздействия различных
доз полиэдров
Доза (пдр/м3) РПГА РСЛЛ
Материал (пдр) число обследованных титр число обследованных лизис лейкоцитов, %
абс. % антител абс. %
ВЯП НШ 10'° 9/3 33,3 1:16 9/3 33,3 18,1±4.11
ВЯП КС 10'° 10/5 50 1:21 10/6 60 26,5±4,52
ВЯП НШ 10® 10/2 20 1:11 10/3 30 17,4 ±3,42
ВЯП КС ю9 10/3 30 1:13 10/4 40 21,7±3,16
ВЯП НШ 10е 8/1 12,5 1:8 8/2 25 16,0±7,50
ВЯП КС 10е 10/2 20 1:8 10/4 40 20,8±2,40
ВЯП НШ 107 8/0 0 0 8/2 25 14,0±3,12
ВЯП КС ю7 10/0 0 0 10/4 40 16,1 + 1,87
ВЯП НШ 106 9/0 0 0 9/2 22,2 11,24-0,37
ВЯП КС 106 9/0 0 0 9/3 33,3 14,3±2,95
ВЯП НШ ю5 9/0 0 0 9/0 0 4,1 ±1,03
ВЯП КС 105 10/0 0 0 10/0 0 4,5±1,10
ВЯП НШ 104 10/0 0 0 10/0 0 2,9±0,79
ВЯП КС ю4 8/0 0 0 8,0 0 3,4± 1,00
Примечание. Здесь и в табл. 2. В числителе — число исследованных животных, в знаменателе — положительно
реагирующих; положительными результатами в РСЛЛ принято считать показатель 10 % лизиса лейкоцитов.
лизирующего эффекта от концентрации, времени воздействия и пути поступления бакуловирусов в организм [11.
На 1-м этапе исследований определяли минимальные (пороговые) концентрации, вызывающие иммунный ответ организма, а также концентрации, не вызывающие этот эффект. С данной целью подопытных животных в течение 4 ч подвергали одноразовому воздействию различных концентраций полиэдров (от 1-10'°до МО4 в 1 м3). Через 7—9 дней после введения полиэдров изучали иммунный ответ организма. В качестве основных методических приемов выявления иммунологических реакций были использованы разработанные и широко апробированные при изучении бакуловирусов методы — РПГА и РСЛЛ [7, 9].
Исследования в РПГА показали, что ингаляционное введение бакуловирусов в концентрации Ы0'° полиэдров в 1 м3 (пдр/м3) приводит к выработке специфических антител у 33,3 — 50 % подопытных животных, в концентрации 1-109 пдр/м3 — у 20—30 %. Титры антител соответственно составляли 1:16—1:21 и 1:11 — 1:13. В единичных случаях антитела выявлены и при введении полиэдров в концентрации МО8 в 1 м3.
При концентрации 1-Ю7 пдр/м3 и ниже специфические антитела в РПГА определить не удалось.
Несколько иная картина наблюдалась при постановке РСЛЛ. При ингаляционной затравке подопытных животных 1-Ю9— Ы0'° пдр/м3 повышенные показатели лизиса лейкоцитов (более 10 %) были выявлены у 30—60 % обследованных животных, в концентрации I • 107 — 1 • 108 — у 25— 40%, в концентрации МО6 — у 22,2—33,3 %. Однократная ингаляционная затравка концентрацией 1-104 — 1 • 105 пдр/м3 не приводила к иммунологическим сдвигам в организме.
Анализ полученных данных свидетельствует о том, что на уровне разрешающей способности примененных методов концентрация полиэдров МО6 в 1 м3 является пороговой, индуцирующей иммунный ответ у подопытных животных, а концентрация 1-Ю5 пдр/м3 — не действующей в условиях однократного введения (табл. 1).
В следующей серии экспериментов в соответствии с поставленными задачами определяли порог сенсибилизирующего действия полиэдров ВЯП НШ и ВЯП КС в условиях 4-месячного
Таблица 2
Иммунологические сдвиги у морских свинок после 4-месячного ингаляционного воздействия полиэдров
Материал («др) Доза (пдр/м3) РПГА РСЛЛ
число обследованных тнтр антител (Хг) число обследованных ЛИЗИС лейкоцитов, %
абс. % абс. %
вяп нш ю5 10/6 60 1:323 10/8 80 20,8±3,22
ВЯП КС 105 10/6 60 1:114 10/7 70 16,8±1,82
ВЯП нш Ю4 10/3 30 1:81 10/5 50 14,0+0,75
ВЯП КС ю4 10/2 20 1:23 10/3 30 12,4±1,4
ВЯП нш 103 9/0 0 0 9/0 0 4,3±1,00
ВЯП КС 103 10/0 0 0 10/0 0 3,9±0,85
ингаляционного воздействия. Изучали действие полиэдров в концентрациях МО5, 1-Ю4, МО3 пдр/м3.
Показано, что длительное ингаляционное воздействие бакуловирусов в концентрации 1 • 105 пдр/м3 приводит к сенсибилизации организма. Антитела к ВЯП КС (1:114) и НШ (1:323) выявлены у 60 % подопытных животных, а повышенные показатели специфического лизиса лейкоцитов (16,8±1,82 % и 20,8±3,22 %) при их культивировании с соответствующими антигенами — у 70 и 80 % подопытных животных. Введение ВЯП КС и НШ в концентрации 1-104 пдр/м3 также индуцирует иммунный ответ: антитела в титрах 1:25 и 1:81 обнаружены соответственно у 20 и 30 % обследованных животных; положительные результаты РСЛЛ (12,4±1,4 и 14,0± ±0,75 %) — у 30 и 50 %. При 4-месячном воздействии бакуловирусами в концентрации МО3 пдр/м3 специфические иммунологические сдвиги в РПГА и РСЛЛ выявить не удалось (табл. 2).
Следует подчеркнуть, что в указанных выше экспериментах на протяжении всего периода наблюдений не было случаев смертности, не отмечалось признаков заболеваний, заметных отклонений в поведении, внешнем виде, развитии животных. Показатели массы тела достоверно не различались в опытной и контрольной группах.
Анализ полученных данных дает основание считать, что концентрация 1 • 104 пдр/м3 является пороговой по сенсибилизирующему действию, а концентрация 1-103 пдр/м3 — не действующей в условиях хронического ингаляционного поступления.
Таким образом, в результате проведенных исследований впервые разработаны гигиенические регламенты производства вирусных инсектицидов вирин-ЭНШ и вирин-ЭКС по лимитирующему иммунологическому критерию. Полученные данные позволяют рекомендовать ПДК ВЯП НШ и ВЯП КС в воздухе рабочей зоны на уровне
1-103 пдр/м3 с коэффициентом запаса, равным 10.
Литература
1. Алексеева О. Г., Дуева Л. А. Аллергия к промышленным химическим соединениям.— М., 1978.— С. 272.
2. Барановский В. И., Бахвалов С. А. // Вирусы насекомых.— Новосибирск, 1974.— С. 8—11.
3. Васильева В. И., Гураль А. Л.. Трусов В. И. // Вирусные болезни растений и насекомых,— Елгава, 1980,— С. 9—12.
4. Васильева В. Л., Гураль А. Л., Дяченко М. А., Трусов В. И. // Вирусы насекомых и перспективы их практического использования в защите растений от вредителей в странах — членах ВПС/МОББ,— М., 1981,— С. 130— 144.
'5. Васильева Б. Л., Гураль А. Л., Дяченко М. А., Трусов В. И. // Вирусы и вирусные заболевания.— Киев, 1984,— Вып. 12,— С. 91—98.
6. Васильева В. Л., Гураль А. Л., Дяченко М. А. и др. // Врач, чело.— 1984,— № 5.— С. 116—119.
* ¡ ураль А. Л. Васильева В. Л. // Вирусные болезни растений и насекомых.— Елгава, 1980.— С. 22—24.
8. Г ураль А. Л. // Микробиол. журн.— 1983.— Т. 45, № 6.— С. 81—85.
9. Г ураль А. Л., Васильева В. Л. // Микробиол. журн.— 1983.— Т. 45.— С. 77—81.
10. Орловская Е. В. // Микробиологические средства защиты растений и бактериальные препараты.— М., 1980.— С. 27—31.
11. Саноцкий И. В., Фоменко В. И. Отдаленные последствия влияния химических соединений на организм.— М., 1979.— С. 231.
12. Сидоренко Г. И. // Гиг. и сан,— 1984,— № 5.— С. 4—7.
13. Трусов В. И., Васильева В. Л., Г ураль А. Л., Дяченко М. А. II Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде.— М., 1980,— Ч. 10.— С. 161 — 169.
14. Трусов В. И Разработка и применение экспресс-методов выявления бакуловирусов в организме и во внешней среде: Автореф. дне. ... канд. наук.— Киев, 1980.
15. Яценко В. Г. // Итоги и перспективы производства и применения вирусных препаратов в сельском и лесном хозяйстве,— М., 1984,— С. 91—96.
Поступила 03.10.90
Summary. Using guine;i pigs the MACs of entomopathogenic
viral preparations Virin-KNSH and Virin-EKS were substantiated at 1X Ю3 of polynedrons per m3.
Гигиена детей и подростков
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1991 УДК 614.7:616-007-053.2-036.88
В. И. Агарков, Т. М. Доценко, В. Н. Штерляев, Л. В. Бутева, Г. К. Северин, Т. И. Пивнева,
И. В. Коктышев
МЛАДЕНЧЕСКАЯ СМЕРТНОСТЬ ОТ ВРОЖДЕННЫХ АНОМАЛИЙ В УСЛОВИЯХ ГИГИЕНИЧЕСКОГО НЕБЛАГОПОЛУЧИЯ
Донецкий медицинский институт им. М. Горького
В условиях сложившейся экологической обета- вития, частота которых в последние десятилетия новки все более усиливается интерес медицинской существенно увеличилась. Заметно возросла их науки и практики к врожденным порокам раз- роль и в заболеваемости, инвалидизации, а также
