CC BY
16БИОЛОГИЯ
УДК 581.14.148:149 А.Г. Юсуфов, З.М. Алиева
Экспериментальная регуляция целостности изолированных органов растений
(К 110-летию со дня рождения академика М.Х. Чайлахяна)
Дагестанский государственный университет, zalieva@,mail. ru
Экзогенной обработкой гормонами роста и ингибиторами метаболизма достигнуто восстановление целостности у стеблевых и листовых черенков, эксплантов разных структур. Введение указанных веществ в базальные и апикальные концы черенков способствует изменению их физиологических и структурных градиентов, полярности, баланса регуляторов роста и метаболитов в тканях, а также характера старения, выживаемости и реализации процессов регенерации.
Ключевые слова: черенки, экспланты, регуляторы роста, старение, стресс.
The restoration of integrity of stem and leaf cuttings, explants of different structures by exogenous treatment by growth hormones and ingibitors of metabolism reaches is reached. Introduction of the these substances in basal and apical ends of cuttings promotes change of their physiological and structural gradients, polarity, balance of growth and metabolites in tissues, and also character of senescence, survival rate and realisation of processes of regeneration.
Keywords: cuttings, explants, growth regulators, senescence, stress.
Введение
М.Х. Чайлахян (1902-1991) - выдающийся физиолог растений, его научная деятельность многогранна [1, с. 98-106]. Он более известен как автор гормональной теории цветения растений [2, 3, с. 487-509]. Ниже обращено внимание главным образом на значение его исследований по регуляции роста и морфогенеза черенков и других изолированных структур растений, которые остаются в тени при оценке его деятельности. Эти данные способствовали углублению представлений о целостности организма и специфике взаимодействия гормонов в тканях [4-8] при регуляции процессов регенерации изолированных структур [9-11], играющих роль в старении и устойчивости растений к стрессам.
Методика
Объектами исследования служили абутилон (Abutilon hybridum Hort.), альтернантера (Alter-nanthera amoena Vass.), арабидопсис (Arabidopsis thaliana (L.) Heynh), баклажан (Solanum melongena L.), бересклет (Euonymus japonica Thumb.), бирючина (Lugustrum vulgare L.), вероника (Veronica orientalis L.), гледичия (Gleditschia triacanthos L.), ива (Salixalba L.), колеус (Coleus hybrid Hort.), кресс (Lepidium perfoliatum L.), мыльнянка (Saponaria officinalis L.), пеперомия (Peperomia magnolia efolia Diеt), подсолнечник (Helianthus annuus L.), томаты (Lycoprsicon escu-lentum L.), фасоль (Phaseolus vulgaris L.), флокс (Phlox paniculata L.), хризантема (Chrysanthemum indicum L.) и целозия (Celosia cristata L.).
Большинство объектов относятся к формам, отличающимся высокой активностью ризогене-за стеблевых черенков. Они были выбраны специально для быстрой оценки состояния изолированных структур после воздействия соответствующих факторов.
Опыты проводили в водной или песчаной культуре, часть опытов - in vitro по общепринятой методике [1]. Растения и изолированные структуры культивировали при естественном освещении и температуре 24-26 0С. Обработку черенков проводили регуляторами роста (ИУК (100 мг/л), ИМК (50 мг/л), ГК (30 мг/л), БАП (20 мг/л), эпибрассинолидом (ЭБ 0,1-0,001 мкМ) и ингибиторами метаболизма (5-бромурацил, актиномицин Д, хлорамфеникол, 8-азагуанин, гидразид малеиновой кислоты) в разных концентрациях и сочетаниях. Стеблевые черенки культивировали с соблюдением и нарушением полярности [12, 13]. Сравнивали также листья и семядоли разных сроков формирования в интактном и изолированном (после развития корней) состоянии. В условиях in vitro экспланты семядолей размером 10 мм культивировали на среде МС, дополненной ИМК (0,5 мг/л), БАП (2,5 мг/л) и ЭБ (0,1 мкМ).
В ряде опытов при оценке защитного действия ЭБ на процессы регенерации черенков в условиях солевого стресса их культивировали в растворах №С1 после предобработки растворами ЭБ.
Жизнеспособность черенков и эксплантов оценивали по продолжительности жизни (ПЖ), типам морфогенеза, выживаемости, индексу живучести (ПЖ в пересчете на 1 корень), каллусообразованию (по доле эксплантов, образовавших каллус, в % от общего числа эксплантов в варианте), биомассе каллуса.
В таблицах приведены средние данные из 3 -х независимых опытов, каждый из которых проведен в 20-кратной биологической повторности, и их стандартные ошибки.
Результаты
Стеблевые и листовые черенки разных растений, посаженные с соблюдением полярности, в большинстве случаев быстро укоренялись. Листья в случае посадки апикальными концами (путем косого среза верхушки пластинки к центральной жилке) не формировали корни (рис. 1) или формировали только на черешках, обращенных в противоположную сторону. Так, листья мыльнянки при посадке с соблюдением полярности на 7-10 день образовывали корни, что было не характерно для вариантов с посадкой апикальными концами. Стеблевые черенки апикальной посадки отличались низкой активностью к ризогенезу, хотя и формировали побеги. После развития корней у черенков базальной и апикальной ориентации отмечено увеличение размеров проводящих пучков в зоне ризогенеза за счет новообразования ксилемы и флоэмы, особенно у листьев при культивировании базальными концами - черешками [12].
Бересклет Мыльнянка
н
б I а I б II а II б
а б а б а б а б I II III IV
а б а б а б а б I II III IV
Пеперомия Хризантема
а б а б а б а б I II III IV
а б а б а б а б I II III IV
Рис. 1. Влияние предобработки в растворах регуляторов на укореняемость (%) листовых (1) и стеблевых (2) черенков при культивировании их с соблюдением (а) и нарушением (б) полярности (на 60 сутки опыта)
Примечание. Варианты культивирования: I - контроль, II-IV растворы ИУК, БАП и 8-АГ.
00
80
60
40
20
Для познания природы полярности морфогенеза значимы экспериментальные воздействия, способствующие изменению структурно-функциональных градиентов, на разных концах черенков. Для этого у стеблевых черенков ивы, которые обычно легко укореняются, проводили обработку противоположных концов только ИУК (100 мг/л) или 8-азагуанином (50 мг/л) или при разном их сочетании на полярных концах. Каждый вариант обработки в последующем был разделен на две группы - с посадкой базальными и апикальными концами. Для черенков, оба конца которых были обработаны в растворе ИУК, при посадке в любом положении характерно ускорение ризогенеза по сравнению с контролем. В вариантах с обработкой 8-азагуанином при любой ориентации у черенков отмечено ингибирование ризогенеза, особенно резко при апикальной посадке (рис. 2). При посадке базальными концами после обработки 8-азагуанином наблюдалась также задержка ризогенеза. Этот эффект ослаблялся в случае экзогенного введения в апикальный конец черенка ИУК, что связано с базипетальным ее транспортом.
При повторной посадке (после формирования развитой корневой системы) срезом над зоной ризогенеза у стеблевых и листовых черенков наблюдалось ускорение темпов ризогенеза и повышение общей укореняемости (рис. 2). Это характерно и для черенков апикальной ориентации независимо от варианта исходной предобработки, что связано с изменениями в проводящих пучках из-за активности камбия после развития корней [12, 13]. Поэтому у черенков исходно апикальной ориентации с сохранением того же положения наблюдается повышение активности ризогенеза в связи с изменениями проводящих пучков. У черенков же, культивированных прежде базальными концами, в случае апикальной их посадки ризогенез не реализовы-вался или реализовывался лишь в единичных случаях (рис. 2).
120 -| 100 80 60 40 20 0
аб аб аб аб аб аб I II I II I II
Рис. 2. Влияние предобработки стеблевых (а) и листовых (б) альтернантеры, колеуса и хризантемы (А-В), укорененных базальными (I) и апикальными (II) концами на их ризогенез при повторной посадке. Под рисунком цифры (1, 2) первого ряда соответствуют исходной, а второго ряда - повторной посадке
После изоляции до образования корней для тканей черенков характерно постепенное снижение общего содержания крахмала, белка, липидов, хлорофилла, нуклеиновых кислот и повышение мономерных их соединений [12, 14], а с образованием корней распад веществ сменялся синтезом полимерных соединений. Темпы указанных изменений в тканях черенков коррели-рованы с темпами ризогенеза у черенков восстановленной целостности. При апикальной ориентации черенков, сопровождающейся задержкой процессов ризогенеза и образования полимерных соединений, такой процесс носил затяжной характер, особенно после их предобработки ингибиторами метаболизма [13, 14].
Изолированные структуры (листья, семядоли, цветки и лепестки) - удобные модели для изучения старения [15, 16] из-за ограниченности их естественной продолжительностью жизни. У целозии листья разных ярусов у декапитированных растений и после укоренения сохраняли свои различия в ПЖ, проявляя эндогенную регуляцию с преобладанием сроков жизни листьев среднего яруса [12].
Это видно и на примере листьев эфемеров разного срока естественного формирования при культивировании на среде МС in vitro (рис. 3).
llllll
Кресс
Резушка
Верхний ярус
Вероника
Нижний ярус
Рис. 3. Продолжительность жизни (сут.) листьев эфемеров разных сроков формирования в интактном (1, 2) и изолированном (3, 4) состоянии
Примечание. Розеточные листья кресса и арабидопсиса, листья нижних (розеточных) и средних (стеблевых) ярусов вероники, сформированные весной (1, 2) и летом (3, 4) (Интакт-ные: 1 - весна, 2 - осень; изолированные: 3 - весна, 4 - осень).
В изолированной культуре они формировали корни и восстанавливали целостность, что приводило к удлинению их ПЖ независимо от сроков формирования. Целостность характерна и для интактных листьев, однако они уступали в ПЖ укорененным. Число корней не являлось определяющим фактором для ПЖ и целостности листовой пластинки. Так, предобработка листьев разными веществами оказывала различное влияние на число корней у них. Однако их ПЖ не всегда была связана с мощностью корневой системы. Так, в вариантах с более мощной корневой системой (ИУК и контроль) индекс живучести листа в пересчете на 1 хорошо развитый корень оказался ниже из-за интенсификации аттрагирующей функции корневой системы и быстрого пожелтения пластинки (табл. 1). На фоне минерального питания пожелтение пластинки удавалось предотвратить, что приводило к удлинению ПЖ листьев после ризогенеза [12, 13, 17, 18]. При ингибировании ризогенеза и меньшем числе корней величина общей ПЖ снижалась (8-АГ), но индекс живучести листьев возрастал.
Таблица 1. Связь между мощностью развития корневой системы и продолжительностью жизни (ПЖ) листьев по вариантам предобработки (экспозиция 6 ч)
Объекты и Средние показатели 1 листа Средняя ПЖ 1 листа, Индекс
варианты, мг/л Число корешков, шт. Длина корня, мм сут. живучести
Мыльнянка
Контроль ИУК, 100 17,0 + 2,4 19,8 + 4,1 32 + 6 37 + 2 57 + 6 47 + 5 3.3 2.4
ГК, 10 БАП, 10 8-АГ, 50 Флокс 14.7 + 2,0 11.8 + 1,4 11,0 + 1,6 28 + 4 14 + 3 7 + 1 61 + 5 72 + 5 32 + 4 4,6 6,0 3,0
Контроль ИУК, 100 ГК, 10 БАП, 10 8-АГ, 50 4,0 + 1,1 6,6 + 1,4 2,6 + 0,1 3,8 + 0,3 2,0 + 0,1 90 + 8 124 + 7 50 + 7 82 + 6 69 + 4 142 + 10 159 + 13 178 + 15 192 + 13 99 + 7 32,2 24,1 68.4 50.5 49,5
Эффект любого варианта предобработки менялся в положительную сторону при культивировании на фоне минерального питания (раствор Кнопа) и 24-часовом освещении, особенно при сочетании этих условий. Так, в последнем случае у укорененных листьев бирючины, томатов и хризантемы даже при предобработке в растворе 8-азагуанина отмечено заметное удлинение ПЖ, не говоря уже о варианте с предобработкой в растворе БАП [16]. Такое явление характерно и для разновозрастных изолированных и укорененных семядолей ряда тыквенных. При этом сдвиги в ПЖ происходили как проявление нормы реагирования генотипа на воздействия, при сохранении видовых и сортовых различий даже после появления корней. Показатели ПЖ таких семядолей довольно близки к ПЖ интактных семядолей [19]. Это же характерно для изолированных лепестков. У них в случае даже редкого образования корней и в варианте с предобработкой БАП сдвиги в ПЖ оказались менее значимыми и ограничились 3-4 сут. [13, 17, 18]. У изолированных лепестков разных растений отмечены различия в ПЖ, специфические для видов и сортов, которые они теряли в случае предобработки в растворах ингибиторов метаболизма.
Брассиностероиды (БР) - наиболее поздно открытая и интенсивно изучаемая группа фито-гормонов, по которым все еще мало данных о действии на процессы регенерации [20, 21]. Так, у черенков роз отмечено увеличение укореняемости на 15-20 % и числа корней в 1,5-2 раза по сравнению с вариантом предобработки ИМК [21]. В наших опытах предобработка в растворах ЭБ (эпина) способствовала ускорению появления корней и массовому укоренению стеблевых черенков колеуса и абутилона (табл. 2), особенно при засолении среды хлоридом натрия. Однако такая предобработка черенков не ослабляла эффект летальных и полулетальных для черенков концентраций соли (50 мМ) (табл. 2).
Таблица 2. Влияние растворов эпибрассинолида на изолированные семядоли (ИС) томата
Ва риант Средняя ПЖ*, сут Каллусообразо-вание, % 15-е сут Укореняемость, % Прирост ИС на 30-е сут., мм
предобработка культивирование
Н2О ЭБ, мкМ Н2О 58 ± 6 70 + 10 100 5 + 1
0,100 0,100
0,010 Н2О 61 ± 3 80 + 9 70 + 10 6 + 2
0,0100,001 NaCl 34 ± 2 80 + 8 20 + 10 6 + 2
0,001 Н2О 67 ± 2 80 + 9 80 + 10 4 + 1
NaCl, 10 мМ NaCl 37 ± 3 80 + 10 20 + 11 4 + 1
Н2О 70 ± 3 100 100 8 + 2
NaCl 34 ± 2 90 + 7 20 + 11 7 + 2
NaCl 28 ± 2 40 + 11 20 + 10 3 + 1
Примечание. *) ПЖ - продолжительность жизни.
Для изолированных структур томатов, отличающихся по темпам и характеру регенерацион-ных процессов при засолении среды, оптимальным для предобработки черенков хлоридом натрия оказался раствор 10-9 М (табл. 3). Подобные результаты были характерны и для семядолей томата в культуре in vitro (табл. 4). ЭБ стимулировал разрастание эксплантов семядолей и гипокотилей. ЭБ влиял положительно на изменение массы каллусной ткани, но не заменял эффект действия ИМК и БАП, хотя усиливал их эффект при совместном введении в среду повышением показателей выживаемости, каллусообразования, прироста эксплантов в ряду вариантов: МС ^ МС + ЭБ ^ МС + ИМК + БАП ^ МС + ЭБ + ИМК + БАП. Таким образом, ЭБ играет протекторную роль при засолении среды NaCl.
Гомологичные и аналогичные структуры заметно отличаются по жизнеспособности в изолированной культуре. При высокой общей укореняемости гипокотильных и стеблевых черенков у части растений отделенные листья обнаруживают заметные различия. Так, укореняемость листьев фасоли достигала 90 %, баклажана - 50 %, подсолнечника - 20 %. У большей части структур фасоли развитие корней наблюдалось на 5-7 сутки после изоляции, тогда как у листьев баклажана - на 11 сутки. Листья уступают гипокотильным черенкам по выживаемости, продолжительности жизни, общей укореняемости и мощности развития корневой системы в изолированной культуре (табл. 5).
Таблица 3. Состояние эксплантов семядолей томата с. Новичок in vitro при разных условиях
культивирования
Вариант Выживаемость, % Рост экспланта, % Каллусообразование, % Ризогенез, % Масса каллуса, мг
РР 95 + 5 95 + 5 95 + 5 0 50 + 5
РР + NaCl 64 + 9 64 + 10 42 + 11 0 15 + 1
РР + Э 100 100 100 0 58 + 4
РР + NaCl + Э 100 100 92 + 6 42 + 11 156 + 15
Таблица 4. Влияние предобработки эпином на жизнеспособность стеблевых черенков
Вариант Укореняемость, % Число корней на 1 черенок, шт Длина корня, мм Ризогенно-активная зона, мм
1 2 3 1 2 3
Колеус К 30 60 100 11 12 30 14 + 2 30 + 3
Э 75 100 100 2 6 60 11 + 1 32 + 5
NaCl (а) 20 55 100 6 9 30 11 + 1 30 + 4
Э-NaCl (а) 60 70 100 4 7 40 13 + 1 30 + 5
Абутилон К 30 45 60 1 5 5 14 + 2 62 + 6
Э 30 50 100 1 5 9 10 + 3 30 + 4
NaCl (а) 0 15 25 - 1 1 3 + 1 8 + 2
(б) 0 0 5 - - 1 1 + 0.5 5 + 1
Э-NaCl (а) 0 10 15 - 1 2 1 + 0 10 + 2
(б) 0 0 10 0 - 1 1 + 0 5 + 1
Примечание: а и б - концентрации NaCl 10 и 50 мМ 1, 2, 3 - сроки учета 7, 14 и 21 сут. соответственно
Таблица 5. Выживаемость и регенеративная активность отделенных структур фасоли,
подсолнечника и гледичии
Структуры Выживаемость, % Укореняемость ПЖ,
10 день 25 день дни начала общая, % сутки
Фасоль
1 100 100 6 100 да
2 95 + 5 10 6 - 7 85 + 8 16 + 1
3 100 100 4 - 5 100 да
4 100 60 + 10 3 100 22 + 2
5 100 70 + 10 5 90 + 7 > 60
Подсолнечник
1 100 100 6 100 да
2 5 + 2 0 6 - 7 50 + 11 15 + 2
3 100 100 5 100 да
4 100 10 + 5 5 80 + 9 18 + 2
5 100 40 + 6 10 25 + 5 15 + 3
Примечание. Обозначение структур: 1 - облиственные черенки с апексами, 2 - отрезки эпи-котилей без точек роста и листьев, 3 - отрезки гипокотилей с семядолями и апексом, 4 - отрезки гипокотилей без семядолей и апекса, 5 - отделенные листья, да - продолжительность жизни (ПЖ) составляет несколько месяцев.
Процессы регенерации у изолированных структур меняются с изменением уровня их сложности и целостности, что видно по различиям в укореняемости облиственных черенков с апексами, черенков эпикотилей без точек роста и листьев, гипокотилей с семядолями и апексом и без них. Упрощенные модели (отрезки гипокотилей) хотя и проявляют активность к регенерации, например у фасоли, вигны, бальзамина [23], в целом характеризуются пониженной жизнеспособностью по сравнению с"нормальным" состоянием черенка (табл. 5). При этом различия в регенерации между объектами проявлялись более четко. Эти
различия в регенерации у систем разной степени сложности еще более выражены в условиях солевого стресса. Уточнение пороговой чувствительности разных структур вели в растворах КаС1 диапазона 5-80 мМ. Раствор 80 мМ КаС1 оказался летальным для всех испытанных структур и объектов, а 5 мМ по эффекту не отличался от контроля. Поэтому большинство опытов было проведено в растворах 10-40 мМ №С1. У всех объектов регенерационные процессы были наиболее выражены у гипокотильных и стеблевых черенков, слабее у листьев [24].
Обсуждение
Реализация процессов морфогенеза растений [3, с. 25-27] и черенков [28] определяется сложной природой организации метаболизма. Об этом же свидетельствуют данные по культивированию изолированных структур разной организации (табл. 5), ориентации (табл. 1, рис. 1-3), предобработки регуляторами роста и метаболизма (табл. 3, 4), где процессы регенерации и жизнеспособности зависят от состояния структурных физиологических градиентов.
Эти градиенты регулируются у изолированных структур ростом побега и корней, их конкуренцией за регуляторы роста [10, 11]. В опытах с листьями фасоли показано, что в случае изменения темпов ризогенеза предобработкой регуляторами роста и ингибиторами метаболизма уже на 3-и сутки после посадки меняется уровень активности цитокининов и ИУК, содержание пигментов пластид в тканях черешка и пластинки листа. На примере луковиц тюльпана с готовыми корневыми зачатками в зоне донца при стратификации или обработке ГК показано ускорение развития побега и корней. При этом отмечено не только повышение уровня содержания цитокининов, но изменение состава их спектров [14, 23]. В случае задержки ризогенеза предобработкой листьев 2,4 Д и кумарином они по содержанию ИУК уступали вариантам с предобработкой стимуляторами развития корней [23].
Целостность изолированных структур восстанавливается после дифференциации корней, что можно проследить на примере укорененных листьев, стеблей и цветков [15]. Для восстановления их целостности не столько важна мощность корневой системы, сколько само наличие корней. Поэтому индекс живучести укорененных листьев оказывается выше не в вариантах с большим количеством корней, а в случае пересчета на 1 корень (табл. 2). Так, при наличии большого числа корней общая ПЖ укорененных листьев оказывается ниже, чем в вариантах с меньшим их числом. Из-за повышения аттрагирующей роли корней пластинки укорененных листьев быстро желтеют, падает индекс живучести, что удается предотвратить культивированием укорененных листьев в условиях минерального питания и 24-часового освещения.
В разных условиях культивирования и предобработки у укорененных листьев и семядолей сохраняются ярусные и различия в ПЖ как проявление эндогенной регуляции старения. ПЖ укорененных листьев и семядолей превышает ПЖ интактных из-за старения, как результат ослабления взаимодействия при упрощении системы. Тем не менее, и в этом случае объекты и листья разных ярусов проявляют свои различия в старении и ПЖ. Эти различия менее выражены у лепестков разных растений из-за более жесткого контроля эндогенной регуляции укорененных листьев и семядолей в вариантах а предобработкой ингибиторами метаболизма. При этом эндогенный контроль их старения.
Приведенные данные свидетельствуют о значимости представлений о целостности организма, развиваемых в исследованиях М.Х. Чайлахяна для познания проблем регенерации, старения и устойчивости растений к стрессам в связи с действием регуляторов роста и изменением полярности.
Литература
1. Портрет ученого в интерьере. К 100-летию академика М.Х. Чайлахяна. - М.: Сиприл, 2002.
2. Чайлахян М.Х. Целостность организма в растительном мире. - Ереван: Изд. АН Арм. ССР, 1955. - 59 с.
3. Чайлахян М.Х. Онтогенез и целостность растительного организма // Ботанический журнал. 1956. Т. 41, №4.
4. Чайлахян М.Х., Некрасова Т.В. О преодолении полярности у черенков лимона // Физиология растений. 1954. Т. 1, № 1. - С. 65-72.
5. Чайлахян М.Х. Физиологическое состояние черенков неукореняющихся пород и действие стимуляторов роста // Известия АН Арм. ССР. Биол. и с/х. науки. 1956. Т. 6, № 9. - С. 39-50.
6. Чайлахян М.Х., Саркисова М.М. О содержании эндогенных регуляторов роста в черенках плодовых культур и их изменении под влиянием синтетического ростового препарата // Доклады АН СССР. 1970. Т. 192, № 5. - С. 1174-1177.
7. Чайлахян М.Х., Тукецкая Р.Х., Клюшкина Н.С. Взаимодействие физиологически активных веществ в черенках растений в процессе образования и роста корней и стеблей // Физиология растений. 1961. Т. 8. - С. 601-612.
8. Чайлахян М.Х., Саркисова М.М. Кольцевание и обработка ростовыми препаратами как метод вегетативного размножения плодовых культур // Доклады АН Арм. ССР. 1962. Т. 35, № 5.- С. 227-232.
9. Турецкая Р.Х. Физиология корнеобразования черенков и стимуляторы роста. - М.: Изд. АН СССР, 1961. - 280 с.
10. Кефели В.И. Природные ингибиторы роста и фитогормоны. - М.: Наука, 1973. - 254 с.
11. Бутенко Р.Г. Экспериментальный морфогенез и дифференциация в культуре клеток растений. - М.: Наука, 1975. - 57 с.
12. Ле Тхи Муой, Юсуфова М.А., Кефели В.И., Серова Л.М. Влияние индолилуксусной кислоты на динамику активности цитокининов в листовых черенках фасоли при их укоренении // Физиология растений. 1984. Т. 31, № 5. - С. 909-919.
13. Юсуфова М.А. Особенности регенерации стеблевых // Рост растений и его регулирование. - Кишинев, 1985. - С. 131-1355.
14. Омарова З.А., МагомедоваМ.А. Жизнеспособность интактных и изолированных семядолей Cucurbitaceae // Ботанический журнал. 2002. Т. 87, № 10. - С. 80-85.
15. Thomas Y., Stodart J. Leaf senescence // Ann. Rev. Plant Phys. 1980. V. 31. - P. 81-111.
16. Woolhouse H.W. Leaf senescence // The molecular biology of plant development. - Oxford, London. Blaiwell. Sci. Publ., 1982. - P. 256-284.
17. Юсуфов А.Г. Механизмы регенерации растений. - Ростов н/Д: РГУ, 1982. - 173 с.
18. Юсуфов А.Г. Культура изолированных листьев. - М.: Наука, 1988. - 102 с.
19. Юсуфов А.Г. Биология старения цветковых растений. - Махачкала: Изд. ДГУ, 1992. -203 с.
20. Гамбург К.З. Брассины - стероидные гормоны растений // Успехи современной биологии. 1986. Т. 102. Вып. 2 (5). - С. 314-320.
21. Прусакова Л.Д., Чижова С.И. Применение брассиностероидов в экстремальных для растений условиях // Агрохимия. 2005. № 7. - С. 87-94.
22. Рункова Л.В., Мельникова М.Н., Александрова В.С. Стимулирующее действие химических факторов на размножение растений черенками // Проблемы дендрологии на рубеже XXI века. Тезисы докладов Международной конференции. - М., 1999. - С. 54-55.
23. Kumar K., Kakkar R.K., Kaur R. Influence of auxin synergists in hypocotyl cuttings of Phaseolus vulgaris and Impatients balsamina // Struct. and Funct. Roots; 4th Int. Symp. Book Abstr. and program. - Bratislava, 1993. - P. 62-63.
24. Юсуфов А.Г., Алиева З.М. Жизнеспособность растений и изолированных органов при засолении среды NaCl // Физиология растений. 2002. Т. 49, № 4. - С. 1-5.
25. Dostal R. On integration of plants. - Cambridge: Univ. Press, 1967. - 213 p.
26. Moorby I. Integration and regulation of translocation with the whole plants // Symp. оf the Soc. For. Exp. Biology. - Cambridge, 1977. - P. 725-755.
27. Полевой В.В. Физиология целостности растительного организма // Физиология растений. 2001. Т.48.- С. 631-643.
28. Masikita W., Skrivin R.M. In vitro regeneration from hypocotyl and sceding cotyledon of fronchuda (Brassica oleraceae) // Plant Cell, Tussue and Organ Cult. 1989. V. 19. № 3. - P. 159-165.
Поступила в редакцию 20 сентября 2011 г.
