CC BY
35
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
УДК 618.11:616.98-092.4 DOI 10.23683/0321-3005-2017-4-2-20-25
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ КАК ДОКАЗАТЕЛЬСТВО НАРУШЕНИЙ ГОРМОНОПРОДУЦИРУЮЩЕЙ ФУНКЦИИ ЯИЧНИКОВ ПРИ ХЛАМИДИОЗЕ
© 2017г Н.К. Гуськова1, Е.М. Франциянц1, Е.А. Гуськова2, М.И. Верескунова1, Ю.С. Шатова1,
Т.И. Моисеенко1
1 Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, Ростов-на-Дону, Россия, 2Клинико-диагностический центр «Здоровье», Ростов-на-Дону, Россия
EXPERIMENTAL MODEL AS EVIDENCE OF IMPAIRED OVARIAN FUNCTION
OF HORMONE FOR CHLAMYDIA
N.K. Guskova1, E.M. Frantsiyants1, E.A. Guskova2, M.I. Vereskunova1, Yu.S. Shatova1, T.I. Moiseenko1
1Rostov Research Institute of Oncology, Rostov-on-Don, Russia, 2Clinical and Diagnostic Center "Zdorovie", Rostov-on-Don, Russia
Гуськова Наиля Катифовна - кандидат биологических наук, заведующая клинико-диагностической лабораторией, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: guskova.nailya@mail. ru
Франциянц Елена Михайловна - доктор биологических наук, профессор, заместитель генерального директора по науке, руководитель лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: super.gormon@ya.ru
Гуськова Екатерина Александровна - кандидат медицинских наук, врач акушер-гинеколог, Клинико-диагностический центр «Здоровье», ул. 21-я линия, 8, г. Ростов-на-Дону, 344019, Россия, e-mail: ket_rin1981@inbox.ru
Верескунова Мария Ильинична - кандидат медицинских наук, врач-онколог, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: Mivereskunova@mail.ru
Шатова Юлиана Сергеевна - доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: guskova.nailya@mail.ru
Моисеенко Татьяна Ивановна - доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: guskova.nailya@mail.ru
Nailya K. Guskova - Candidate of Biological Sciences, Head of Clinical and Diagnostic Laboratory, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: guskova.nailya@mail.ru
Elena M. Frantsiyants - Doctor of Biological Sciences, Professor, Deputy General Director for Science, Head of Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: super.gormon@ya.ru
Ekaterina A. Guskova - Candidate of Medicine, Obstetrician-Gynecologist, Clinical and Diagnostic Center "Zdorovie", 21-ya Liniya St., 8, Rostov-on-Don, 344019, Russia, e-mail: ket_rin1981 @inbox. ru
Maria I. Vereskunova - Candidate of Medicine, Oncologist, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: Mivereskunova@mail. ru
Yuliana S. Shatova - Doctor of Medicine, Leading Researcher, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: gusko-va.nailya@mail. ru
Tatiana I. Moiseenko - Doctor of Medicine, Professor, Main Researcher, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: gusko-va.nailya@mail.ru
Представлены результаты экспериментального исследования по репродукции штамма Е Chlamydia trachomatis (Ch. tr.) в первично культивируемых клетках желтого тела с целью моделирования патологического процесса и изучения механизма влияния Ch. tr. на органы репродуктивной системы. Клеточную культуру вырастили из клеток желтого тела, выделенного из биопсийного материала в пролиферативную фазу менструального цикла в ростовых средах. Формирование монослоя
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION. NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
клеток проводилось в атмосфере 5%-го СО2 при 37 С в СО2-инкубаторе. Полученный монослой клеток желтого тела инфицировали штаммом Е Ch. tr. с титром 106IFU/mn в клеточной линии МсСоу с применением центробежной силы. Результаты оценивали через 48 и 72 ч. Данные свидетельствуют о способности клеток желтого тела к активному росту и размножению в ростовой среде. Показаны способность Ch. tr. инфицировать и продуктивно размножаться в клетках желтого тела и способность клеток желтого тела поддерживать рост хламидий в системе in vitro и in vivo.
Ключевые слова: клеточная культура, клетки желтого тела, функция яичников, эстрогения, Chlamydia trachomatis.
The results of an experimental study on the reproduction of strain E Chlamydia trachomatis (Ch. tr.) in primary cultured cells of the yellow body are presented to model the pathological process and to study the mechanism of Ch. tr. on the organs of the reproductive system. The cell culture was grown from the cells of the yellow body extracted from the biopsy material into the proliferative phase of the menstrual cycle, in growth media. The formation of a monolayer of cells was carried out in an atmosphere of 5% CO2 at 37 C in a CO2 incubator. The resulting monolayer of the cells of the yellow body was infected with strain E Ch. Tr. with a titer of 106IFU / ml in a McCoy cell line using centrifugal force. The results were evaluated after 48 and 72 hours. The data indicate the ability of the cells of the yellow body to actively grow and multiply in growth medium. The ability of Ch. tr. is shown infection and productive reproduction in the cells of the yellow body and the ability of the cells of the yellow body to support the growth of chla-mydia in the system in vitro and in vivo.
Keywords: cell culture, yellow body cells, ovarian function, estrogenia, Chlamydia trachomatis.
Вопрос о влиянии хламидийной инфекции на гормональную функцию яичников активно обсуждается в научном мире [1, 2]. Антиген Chlamydia trachomatis (Ch. tr.) идентифицирован в образцах эндометрия и фаллопиевых труб бесплодных женщин [3, 4]. С инфицированием Ch. tr. связывают бесплодие [5], преждевременное угасание функции яичников, развитие вторичной аменореи [6]. Отмечены изменения гормонального статуса интактной ткани яичников и эпителия шейки матки у больных раком шейки матки (РШМ) с сопутствующей HPV/Ch. tr. коинфекцией [7], а также нарушение экспрессии женских половых гормонов у женщин с диспластическими процессами и РШМ, протекающими на фоне урогенитального хламидиоза и коррелирующими с титром сывороточных IgG и IgM антител к Ch. tr. [8].
Тем не менее имеющиеся данные не дают четкого представления о механизме повреждения репродуктивной системы женщин в процессе длительной персистенции в половых путях возбудителя хламидиоза, не установлены причины, приводящие к гормональным нарушениям. Полагаем, что доказательством взаимосвязи между нарушениями деятельности органов репродуктивной системы и инфицированием Ch. tr. могло бы явиться инфицирование культуры клеток желтого тела в эксперименте in vitro. Предположение основано на способности хламидий расти и размножаться в различных клеточных линиях: McCoy, Нер-2, HeLa-229 и других [9, 3], а также на преимущественной локализации возбудителя хламидиоза в верхнем отделе полового аппарата - эндометрии, капсуле яичников, фимбриях маточных труб у 53,6 % женщин, перенесших хламидиоз нижнего отдела полового тракта. Возбудитель впервые выявлен в верхнем отделе полового аппарата и у 34,9 % пациенток,
не имевших в анамнезе урогенитального хламидиоза [10].
Цель исследования - разработка модельной системы, содержащей клетки желтого тела, выделенные из ткани яичников, и культуру Chlamydia trachomatis, для выявления признаков инфицирования и воспаления.
Материалы и методы исследования
Использована ткань желтого тела, выделенного из биопсийного материала в пролиферативную фазу менструального цикла. В качестве агента инфицирования выбран штамм Е Ch. tr. с титром 106 IFU/мл, полученный роллерным культивированием в клеточных линиях McCoy [11, 12]. Ткань желтого тела тщательно гомогенизировали при комнатной температуре в культуральной среде RPMI-1640 (Seromed). Полученную клеточную смесь центрифугировали в течение 10 мин при 1000 об/мин на Т-34. Супернатант удаляли, а осадок клеток отмывали в среде RPMI. После оценки выделенных клеток в инвертированном микроскопе (Micro Star Reichert) клеточную взвесь переносили в ростовую среду, содержащую RPMI-1640 с 15%-й эмбриональной телячьей сывороткой (Seromed), 2 ммоль/л глутамина и 150 у/мл гентамицина. Для выращивания клеток использовали матрацы из нейтрального стекла объемом 100 мл. Ростовую среду вносили в количестве 15 мл. На 3-и сут заменяли 1/3 объема среды культивирования. На 6-й день образовавшийся монослой клеток снимали со стекла 0,02%-м раствором Версена с хемотрипси-ном, центрифугировали в течение 10 мин при 1000 об/мин. После удаления надосадочной жидкости клеточный осадок ресуспендировали в той же среде до дозы 2,0-105 клеток в 1 мл и переносили по 1 мл
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
NATURAL SCIENCE.
2017. No. 4-2
во флаконы с размещенными на дне покровными стеклами размером 7x7 мм. Через 36 ч ростовую среду из флаконов удаляли, сформировавшийся монослой клеток еще раз промывали той же средой, после чего во флаконы вносили по 40 мл культуры СЬ. центрифугировали при 2500 об/мин в течение 1 ч с использованием центрифуги с горизонтальным ротором. Применение центробежной силы необходимо для усиления адсорбции инокуля-та (инфицирования СЬ. на полученный монослой клеток желтого тела [13]. Далее образцы инкубировали при температуре 37 °С в течение 72 ч. Результат взаимодействия инфекционного агента с клеточной линией оценивали по истечении 48 и 72 ч. В указанные сроки покровные стекла извлекали из флаконов, подсушивали на воздухе и фиксировали охлажденным ацетоном в течение 10 мин. Одно из стекол окрашивали по Май-Грюнвальду - Гимзе, другое - методом прямой иммунофлюоресценции.
Результаты исследования и их обсуждение
При микроскопии препаратов установлено, что через 48 ч после инфицирования клетки желтого тела располагались разрозненно и небольшими группами. Обращало на себя внимание наличие значительного количества инфекционных частиц СЬ. й". как внутри клеток (ретикулярные тельца), так и во внеклеточном пространстве (элементарные тельца) (рис. 1, 2).
признаками деструкции, нашпигованные ретикулярными тельцами и переходными формами возбудителя, экзоцитоз хламидий, лизис инфицированных клеток (рис. 3, 4) на фоне клеточного детрита и голых ядер. Особо привлекали внимание клетки, весь объем которых заполняли зрелые бочонкооб-разные включения СЬ. й. с заметным уплотнением поверхностных структур, увеличением периплаз-матического пространства (рис. 5).
Рис. 2. 48 ч после инфицирования: микроколонии Ch. tr. в культуре клеток жёлтого тела. Окраска по Май-Грюнвальду -Гимзе (40x7) / Fig. 2. 48 h after infection: Ch. Tr. microcolonies in the culture of the cells of the yellow body. Coloring for May-Grunwald-Giemsa (40x7)
Рис. 1. 48 ч после инфицирования: микроколонии Ch. tr. в культуре клеток жёлтого тела. Окраска по Май-Грюнвальду-Гимзе (40x10) / Fig. 1. 48 hours after infection of the microcol-ony Ch. tr. in the culture of cells of the yellow body. Coloring for May-Grunwald-Giemsa (40 x 10)
Через 72 ч в препаратах, полученных после более длительного контакта клеточной линии желтого тела с культурой Ch. tr., отмечено, что значительная часть монослоя разрушена. Обращали на себя внимание клетки эксплантата с выраженными
Рис. 3. 72 ч после инфицирования: микроколонии Ch. tr. в культуре клеток жёлтого тела. Лизис клеток. Окраска по Май-Грюнвальду - Гимзе (40x7) / Fig. 3. 72 hours after infection: microcolonies Ch. tr. in the culture of cells of the yellow body. Lysis of cells. Coloring for May-Grunwald-Giemsa (40x7)
Итак, уже через 72 ч после инфицирования определялись явные признаки лизиса инфицированных клеток желтого тела. Процесс сопровождался освобождением значительного количества инфекционных частиц хламидий, каждая из которых способна инициировать новый раунд инфек-
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
NATURAL SCIENCE.
2017. No. 4-2
ции. При отсутствии доказательств о различиях между циклом развития инфекционного процесса in vivo от такового in vitro можно предположить, что при естественном инфицировании развитие хламидий происходит аналогичным образом, с продукцией инфекционного потомства. С целью подтверждения вирулентности культуры клеток желтого тела, инфицированных штаммом Е Ch. tr., было выполнено по описанной выше методике несколько повторных заражений монослоя клеток желтых тел. Получен аналогичный первому эксперименту результат.
Рис. 4. 72 ч после инфицирования: микроколонии Ch. tr. в культуре клеток жёлтого тела через. Экзоцитоз хламидий-ных телец, клеточный детрит. Окраска по Май-Грюнвальду -Гимзе (40x7). / Fig. 4. 72 hours after infection of the microcolonies Ch. tr. in the culture of the cells of the yellow body through. Exocytosis of chlamydial bodies, cellular detritus. Coloring for May-Grunwald-Giemsa (40x7)
Рис. 5. 72 ч после инфицирования: разрушенная клетка жёлтого тела. Тельца включений Ch. tr. бочонкообразной формы. Окраска по Май-Грюнвальду - Гимзе (10x1000) / Fig. 5. 72 hours after infection: the destroyed cell of the yellow body. Taurus inclusions Ch. tr. keg-like shape. Coloring for May-Grunwald-Giemsa
Для изучения патологического воздействия й. на органы репродуктивной системы женщин мы инъецировали суспензию клеток желтого тела, инфицированных й., интравагинально половозрелым самкам белых беспородных крыс в возрасте 67 мес. с исходной массой тела 180-200 г, распределенным на 2 группы. В 1-й - 14 крыс в лютеиновой фазе, во 2-й - 12 беременных крыс. Контролем служила группа из 10 крыс аналогичного возраста без инфекционного компонента. Все исследования проводились в соответствии с требованиями и условиями, изложенными в Международных рекомендациях по проведению биомедицинских исследований с использованием животных, положениями Европейской конвенции о защите позвоночных животных для экспериментальных и других научных целей и приказом Минздрава РФ № 267 от 19.06.2003 «Об утверждении правил лабораторной практики».
Ежедневно анализировались мазки из влагалища животных (влагалищные смывы). Через 6-10 дней в материале из половых путей инфицированных крыс 1 -й группы получены признаки диссеминации хламидий, а также изменение клеточного состава влагалищных мазков, свидетельствующие о нарушении длительности фаз эстрального цикла, в отличие от крыс контрольной группы, характеризующейся в целом последовательностью, ритмичностью всех фаз эстрального цикла и схожей длительностью циклов - в пределах 4-6 дней. Полагаем, что указанные изменения могут быть следствием нарушения ритмичности функционирования яичников. Во 2-й группе в результате экспериментального воздействия у 7 крыс (58,3 %) отмечены выкидыши, у остальных крыс этой группы в дальнейшем получено ослабленное потомство.
По нашему мнению, клетки желтого тела яичника могут служить своеобразной экологической нишей для хламидийной инфекции, являться реальными клетками-хозяевами для них, функционируя в организме как естественный резервуар инфекции. Вместе с тем инфекция может являться независимым фактором риска, ассоциированным с нарушением гормональной функции яичников. Полученная экспериментальная модель культуры клеток желтого тела, которую сокульти-вировали с представляет собой прямое доказательство взаимосвязи урогенитальной хламидий-ной инфекции и нарушений функции репродуктивной системы женщин и позволяет оценить роль й. в развитии гиперэстрогений. Что же касается механизма инфицирования ткани яичника и, в частности, желтого тела, то последний может заключаться в следующем. В момент овуляции маточная труба, воспринимая импульсы фолликула,
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
рефлекторно сокращается, фимбриями охватывая бугорок фолликула. Именно в этот момент труба может забросить свое содержимое в зону овуляции. В это время возможно изолированное поражение яичника инфицированными сперматозоидами в момент разрыва овулировавшей яйцеклетки. Вместе с тем на фоне сальпингита возможно развитие острого и хронического оофорита (вторично). Как правило, этот процесс осложняется формированием одно- или двустороннего тубоовариального образования. Тогда на фоне снижения общего и местного иммунитета в воспалительный процесс могут быть вовлечены фолликулы и желтое тело, несмотря на то что они имеют свои особенности кровоснабжения и обладают значительной анатомо-функциональной автономностью. Как следствие, желтое тело, являясь железистой структурой, в дальнейшем служит средой обитания для хлами-дий. Так может нарушиться продукция прогестерона желтым телом: инфицированное желтое тело не обеспечит полноценного уровня прогестерона. Это повлечет за собой нарушение принципа двойной обратной связи в центральной регуляции функций яичников гипоталамо-гипофизарной областью и нарушит процесс созревания фолликулов в последующих циклах. Наряду с этим факт инфицирования желтого тела объясняет наблюдаемые часто у инфицированных хламидиями женщин кистозные трансформации яичников, кисты желтого тела, нарушения функции яичников по типу недостаточности 2-й фазы вплоть до ановуляции [13]. Организм испытывает дефицит прогестерона. Развивается относительная, а порой и абсолютная гипер-эстрогения. Исходя из вышеизложенного, можно предположить, что инфицирование желтого тела может явиться пусковым механизмом гиперэстро-гений как серьезного осложнения при хламидиозе, поскольку длительно существующая гиперэстроге-ния является источником гиперпластических процессов гормоночувствительных тканей [14, 15].
Заключение
Таким образом, в эксперименте in vitro получены данные, подтверждающие способность клеток желтого тела, выделенного из биопсийного материала в пролиферативную ФМЦ, к активному росту и размножению на поверхности покровных стекол. Показаны способность штамма Е Ch. tr. инфицировать и продуктивно размножаться в первично культивируемых клетках желтого тела, а также чувствительность культуры клеток желтого тела к Ch. tr. Более того, инфицированные штаммом Е Ch. tr. клетки желтого тела способны поддерживать рост хламидий в системе in vitro и in vivo.
NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
Литература
1. Akande V., Turner C., Horner P., Horne A., Pacey A. Impact of Chlamydia trachomatis in the reproductive setting: British fertility society guidelines for practice // Human Fertility.
2010. Vol. 13, № 3. Р. 115-125.
2. Amanda J., Stephens A.J., Aubuchon M., Schust D.J. Antichlamydial Antibodies, Human Fertility, and Pregnan-cyWastage // Infectious Diseases in Obstetrics and Gynecology.
2011. P. 9. DOI 10.1155/2011/525182.
3. Jerchel S., Knebel G., König P., Bohlmann M.K., Rupp J. A human fallopian tube model for investigation of C. trachomatis infections // J. Vis. Exp. 2012. Vol. 11, № 66. Р. e4036. DOI 10.3791/4036.
4. Zardawi I.M. Primary Fallopian Tube Carcinoma Arising in the Setting of Chronic Pelvic Inflammatory Disease // Case Rep. Med. 2014. Vol. 3. P. 7. DOI 10.1155/2014/645045.
5. Price M.J., Ades A.E., Soldan K., Welton N.J., Macleod J., Simms I., DeAngelis D., Turner K.M., Horner P.J. The natural history of Chlamydia trachomatis infection in women: a multiparameter evidence synthesis // Health Technol. Assess. 2016. Vol. 20, № 22. P. 1-250. DOI 10.3310/hta20220.
6. Haggerty C.L., Gottlieb S.L., Taylor B.D., Low N., Xu F., Ness R.B. Risk of sequelae after Chlamydia trachomatis genital infection in women // J. Infect. Dis. 2010. Vol. 201, № 15, suppl. 2. P. 134-155.
7. Франциянц Е.М., Гуськова Н.К., Бандовкина В.А., Моисеенко Т.И., Вовкочина М.А., Черярина Н.Д., Погоре-лова Ю.А. Влияние коинфицирования HPV/Chlamydia trachomatis на локальный гормональный фон при раке шейки матки // Мед. вестн. Сев. Кавказа. 2017. № 1. С. 52-57. DOI 10.14300/mnnc.2017.12014.
8. Франциянц Е.М., Бандовкина В.А., Гуськова Н.К., Комарова Е.Ф. Влияние восходящей хламидийной инфекции на уровень половых гормонов в крови у женщин с воспалительными и пролиферативными процессами гениталий // Фундаментальные исследования. 2013. № 7, ч. 2. С. 419422. URL: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id= 31852 (дата обращения: 17.04.2017).
9. Mei B., Du K., Huo Z., Zou Y., Yu P. Discrepant effects of Chlamydia trachomatis infection on MICA expression of HeLa and U373 cells // Infection, Genetics and Evolution. 2010. Vol. 10, № 6. Р. 740-745.
10. Патент RU № 2136240. Способ лечения хламидиоза у женщин с бесплодием трубно-перитонеального и труб-но-эндокринного генеза / Б.И. Медведев, Т.В. Астахова, Т.В. Узлова, Е.Ю. Канаева. Опубл. 10.09.1999 г.
11. Бартеньева Н.С., Фуэнтос И., Деева Ф.В., Ле-фебр Ж.Ф. [и др.]. Индукция тумор-некротического фактора хламидиями // Актуальные микробиологические и клинические проблемы хламидийных инфекций. М., 1990. С. 30-32.
12. Патент RU № 2509031. Способ моделирования воспалительного процесса в тканях репродуктивных органов женщин / Е.М. Франциянц, Н.К. Гуськова, Е.Ф. Комарова, Е.А. Гуськова. Опубл. 10.01.2015 г. Бюл. № 1.
13. Morin-Papunen L., Rantala A.S., Unkila-Kallio L. [et al.]. Metformin improves pregnancy and live-birth rates in women with polycystic ovary syndrome (PCOS): a multicenter, doubleblind, placebo-controlled randomized trial // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2012. Vol. 97. P. 1492-1500. DOI 10.1210/jc.2011-3061.
14. Rinaldi S., Plummer M., Biessy C., Castellsague X., Overvad K., Kruger K.S. [et al.]. Endogenous sex steroids and
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
NATURAL SCIENCE.
2017. No. 4-2
risk of cervical carcinoma: results from the EPIC study // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2011. Vol. 20. P. 2532-2540. PMID 21994406.
15. Roura E., Travier N., Waterboer T., de Sanjose S., Bosch F.X., Pawlita M. The Influence of Hormonal Factors on the Risk of Developing Cervical Cancer and Pre-Cancer: Results from the EPIC Cohort // PLoS ONE. 2016. Vol. 11, № 1. P. e0147029. DOI 10.1371/journal.pone.0147029.
References
1. Akande V., Turner C., Horner P., Home A., Pacey A. Impact of Chlamydia trachomatis in the reproductive setting: British fertility society guidelines for practice. Human Fertility. 2010, vol. 13, No. 3, pp. 115-125.
2. Amanda J., Stephens A.J., Aubuchon M., Schust D.J. Antichlamydial antibodies, human fertility, and pregnancy wastage. Infectious Diseases in Obstetrics and Gynecology. 2011, p. 9. DOI 10.1155/2011/525182.
3. Jerchel S., Knebel G., König P., Bohlmann M.K., Rupp J. A human fallopian tube model for investigation of C. trachomatis infections. J. Vis. Exp. 2012, vol. 11, No. 66, p. e4036. DOI 10.3791/4036.
4. Zardawi I.M. Primary fallopian tube carcinoma arising in the setting of chronic pelvic inflammatory disease. Case Rep. Med. 2014, vol. 3, p. 7. DOI 10.1155/2014/645045.
5. Price M.J., Ades A.E., Soldan K., Welton N.J., Macleod J., Simms I., DeAngelis D., Turner K.M., Horner P.J. The natural history of Chlamydia trachomatis infection in women: a multiparameter evidence synthesis. Health Technol. Assess. 2016, vol. 20, No. 22, pp. 1-250. DOI 10.3310/hta20220.
6. Haggerty C.L., Gottlieb S.L., Taylor B.D., Low N., Xu F., Ness R.B. Risk of sequelae after Chlamydia trachomatis genital infection in women. J. Infect. Dis. 2010, vol. 201, No. 15, suppl. 2, pp. 134-155.
7. Frantsiyants E.M., Guskova N.K., Bandovkina V.A., Moiseenko T.I., Vovkochina M.A., Cheryarina N.D., Pogorelova Yu.A. Vliyanie koinfitsirovaniya HPV/Chlamydia trachomatis na lokal'nyi gormonal'nyi fon pri rake sheiki matki [Effect of co-infection with HPV/Chlamydia trachomatis on local hormonal profile in cervical cancer]. Med. vestn. Sev. Kavkaza. 2017, No. 1, pp. 52-57. DOI 10.14300/mnnc.2017.12014.
8. Frantsiyants E.M., Bandovkina V.A., Guskova N.K., Komarova E.F. Vliyanie voskhodyashchei khlamidiinoi infektsii na uroven' polovykh gormonov v krovi u zhenshchin s vospalitel'nymi i proliferativnymi protsessami genitalii [Effect of ascending chlamydial infection on level of sex hormones in the blood of women with inflammatory and proliferative processes of genitals]. Fundamental'nye issledovaniya. Meditsinskie nauki. 2013, No. 7, part 2, pp. 419-422. Available at: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=31852 (accessed 17.04.2017).
9. Mei B., Du K., Huo Z., Zou Y., Yu P. Discrepant effects of Chlamydia trachomatis infection on MICA expression of HeLa and U373 cells. Infection, Genetics and Evolution. 2010, vol. 10, No. 6, pp. 740-745.
10. Medvedev B.I., Astakhova T.V., Uzlova T.V., Kanaeva E.Yu. Sposob lecheniya khlamidioza u zhenshchin s besplodiem trubno-peritoneal'nogo i trubno-endokrinnogo geneza [Method of treatment of chlamydia in women with infertility of tubal-peritoneal and tubal-endocrine origin]. Certificate, No. 2136240, 10.09.1999.
11. Barten'eva N.S., Fuentos I., Deeva F.V., Lefebr Zh.F. [et al.]. [Induction of tumor necrotic factor by chlamydia]. Ak-tual'nye mikrobiologicheskie i klinicheskie problemy khlamidi-inykh infektsii [Current microbiological and clinical problems of chlamydia infections]. Moscow, 1990, pp. 30-32.
12. Frantsiyants E.M., Guskova N.K., Komarova E.F., Gus-kova E.A. Sposob modelirovaniya vospalitel'nogo protsessa v tkanyakh reproduktivnykh organov zhenshchin [Method of modelling inflammatory process in tissues of reproductive organs in women]. Certificate, No. 2509031, 10.01.2015.
13. Morin-Papunen L., Rantala A.S., Unkila-Kallio L. [et al.]. Metformin improves pregnancy and live-birth rates in women with polycystic ovary syndrome (PCOS): a multicenter, doubleblind, placebo-controlled randomized trial. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2012, vol. 97, pp. 1492-1500. DOI 10.1210/jc.2011-3061.
14. Rinaldi S., Plummer M., Biessy C., Castellsague X., Overvad K., Kruger K.S. [et al.]. Endogenous sex steroids and risk of cervical carcinoma: results from the EPIC study. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2011, vol. 20, pp. 2532-2540.
15. Roura E., Travier N., Waterboer T., de Sanjose S., Bosch F.X., Pawlita M. The influence of hormonal factors on the risk of developing cervical cancer and pre-cancer: Results from the EPIC Cohort. PLoS ONE. 2016, vol. 11, No. 1, p. e0147029. DOI 10.1371/journal.pone.0147029.
Поступила в редакцию /Received
6 сентября 2017 г. /September 6, 2017
