CC BY
113
V.G. Banzaraksheev, T.A. Azhunova, S.M. Gulyaev
EXPERIMENTAL PHYTOCORRECTION OF ENDOTHELIAL DYSFUNCTION AND DYSLIPIDEMIA IN TOXIC INJURIES OF LIVER
The object of study is a complex plant remedy that has been developed on the basis of the Tibetan medicine recipes. The course introduction of phytoremedy prevents the development of cytolysis and cholestasis syndromes, normalizes indices of lipid metabolism and endothelial dysfunction.
Keywords: phytoremedy, liver, dyslipidemia, endothelial dysfunction.
Введение
Атеросклероз (АС) как этиологическая основа большинства сердечно-сосудистых и цереб-роваскулярных заболеваний признан «неинфекционной пандемией XXI века», поскольку прочно занимает первое место в структуре заболеваемости и смертности населения большинства стран мира [13]. Установлено, что независимым фактором развития АС является состояние дисфункции эндотелия (ДЭ), заключающееся в дисбалансе медиаторов, обеспечивающих оптимальное течение всех эндотелийзависимых процессов [8]. Очевидно, что свойства эндотелия изменяются под воздействием ряда факторов риска, одним из которых служит атерогенная дислипидемия (ДЛП).
Как известно, ДЛП сопровождается нарушением функции ключевого органа липидного гомеостаза - печени, причем любые патологические процессы в ней способны как вызвать ДЛП, так и способствовать дальнейшему прогресси-рованию липидного дисметаболизма [1]. В сложившихся условиях ДЛП оказывает локальную проатерогенную стимуляцию на эндотелий [5]. В результате этого кардинально изменяются го-меостатические свойства эндотелия, одним из которых является активация его провоспали-тельного потенциала [10, 17]. Последний в синергизме с другими вазотоксическими компонентами усугубляет деэндотелизацию и вносит дополнительный вклад в процесс повреждения эндотелия и в эволюцию АС [18].
Существующие на сегодняшний день методы лечения ДЭ не имеют под собой этиопатоге-нетической базы и применяются в основном как различные варианты симптоматической терапии [9]. Несомненно, что вышеизложенное требует комплексной и рациональной терапии, включающей в себя гепатопротекторную, антидисли-пидемическую и эндотелиопротективную фар-макокоррекцию.
В этом плане определенный интерес вызывает применение средств растительного происхождения. Имеющиеся сведения об эффективном использовании гепатозащитных, гиполипи-демических и эндотелиопротекторных фитос-
редств и их преимущества в виде малой токсичности и высокой эффективности позволяют предположить, что одним из перспективных направлений в профилактике и лечении данной патологии может послужить комплексная фитотерапия [9].
Цель исследования - экспериментальная оценка влияния комплексного фитосредства на показатели ДЭ и липидного обмена при токсическом повреждении печени.
Материалы и методы
Эксперименты выполнены на крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой 170-190 г. и проводились в соответствии с «Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей» (Страсбург, 1986).
Объектом исследования явилось многокомпонентное фитосредство, полученное по прописям оригинальной рецептуры, описанной в первоисточнике тибетской медицины, трактате «Чжуд-ши» [15]. В состав средства входят плоды Crataegus sanguínea Pall, корни Scutellaria baicalensis Georgi, плоды Malus baccata (L.) Borkh., корневища Glycyrrhiza glabra L., корневища Zingiber officinalis L., корневища Acorus calamus L., кора Cinnamomum cassia Blume и др.
Для изучения фармакотерапевтической эффективности фитосредство применяли профилактическим курсом в форме отвара внутриже-лудочно в объеме 1 мл/100 г 1 раз в сутки на протяжении всего срока эксперимента. Животным контрольной группы вводили эквиобъем-ное количество воды очищенной по аналогичной схеме.
Токсический гепатит вызывали на 8-й день от начала фитотерапии введением животным в желудок 40% этилового спирта по 0,7 мл на 100 г. массы 1 раз в сутки в течение 21 дня [11]. Интервал между введениями этанола и фитосред-ства/воды очищенной составлял 6 ч. Степень токсического повреждения печени оценивалась по лейкоцитарному индексу интоксикации (ЛИИ) и по активности индикаторных ферментов - аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспар-татаминотрансферазы (АСТ), щелочной фосфа-
тазы (ЩФ) и гаммаглутамилтранспептидазы (ГГТП) [4, 6].
ДЛП индуцировали с 14-го дня эксперимента путем ежедневного вскармливания крыс натуральным свиным салом ай ИЫйпш [7]. Ги-полипидемическое действие средства оценивали по содержанию общего холестерина (ОХС), триглицеридов (ТГ), холестерина липопротеи-нов высокой плотности (ХС ЛПВП), холестерин липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП) рассчитывали по общепринятой формуле Фрид-вальда [4].
Содержание цитокинов интерлейкина-1бета (ИЛ-1Р), интерлейкина-6 (ИЛ-6) и фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-а) в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа [14]. Уровень С-реактивного белка (СРБ) определяли методом латекс-агглютинации, концентрацию фибриногена методом Рутберга [4]. Уровень содержания в крови циркулирующих эндотелиальных клеток (ЦЭК) определяли по методу Н1а^уес [16].
Полученные в ходе экспериментов данные статистически обработаны с применением паке-
та прикладных программ «Ехсе1 - 2003». Значимость различий определяли с помощью 1-критерия Стъюдента при вероятности 95% (Р<0,05) [12].
Результаты и их обсуждение
Как известно, длительное поступление в организм различных гепатотоксинов неизбежно ведет к напряженности общих механизмов сано-генеза и локальным процессам дестабилизации клеточных мембран, проявляющейся цитолизом гепатоцитов и синдромом холестаза [1].
Наши исследования показали, что 21-дневное введение животным этанола характеризовалось выраженными лабораторными признаками деструкции и некроза гепатоцитов. Так, в контрольной группе крыс индуцированный гепатит сопровождался статистически значимым повышением активности цитолитических ферментов: уровень АЛТ и АСТ возрастал на 23 и 26% соответственно по сравнению с данными в интактной группе животных. Одновременно с этим в контроле наблюдалось существенное возрастание активности ферментов холестаза, в частности, ЩФ на 27% и ГГТП на 39% (табл. 1).
Таблица 1
Влияние фитосредства на лабораторные показатели крови у крыс при повреждении печени этанолом
Группы животных
Показатели Интактная Контрольная Опытная
(п=8) (п=8) (п=8)
ЛИИ, ед. 0,32±0,08 0,49±0,14 0,36±0,11*
АСТ, ммоль/л 129±7,54 163±9,42 146±5,44
АЛТ, ммоль/л 78,3±1,17 96,5±1,49 75,7±6,52*
ЩФ, Ед. 123±8,51 156±10,75 134±9,17
ГГТП, Ед. 8,6±1,45 12±1,63 9±0,78*
Примечание:* - разность достоверна по сравнению с контролем при р<0,05
Как следует из данных таблицы 1 наряду с указанными изменениями введение этанола приводило к выраженному проявлению его токсического эффекта на организм крыс, о чем свидетельствовало возрастание клеточного компонента эндотоксикоза - ЛИИ в 1,53 раза в контрольной группе лабораторных животных.
Наряду с этим курсовое введение фитосред-ства в экспериментально-терапевтической дозе крысам с алкогольным гепатитом достоверно снижало токсическое действие этанола, что сопровождалось незначительным понижением активности цитолитических ферментов АСТ и АЛТ до 10 и до 21% соответственно. Также средство снижало развитие холестатического синдрома, о чем свидетельствовало уменьшение активности ЩФ на 14% и ГГТП на 25% по срав-
нению с контрольными показателями. Помимо этого, курсовая превентивная фитотерапия способствовала купированию состояния эндотокси-коза, приводя к снижению ЛИИ на 26% по сравнению с показателями у крыс контрольной группы.
Известно, что от функционального состояния печени зависят многие виды метаболизма, а поскольку именно здесь происходят основные процессы регуляции, мобилизации, переработки и биосинтеза липидов, то многие патологические процессы в печени способны вызвать нарушения липидного обмена. Более того, печень как орган-мишень липидного дисбаланса активно участвует в прогрессировании ДЛП с развитием системной патологической реакции всего организма [1].
Полученные результаты эксперимента показали, что на фоне алкогольного поражения печени алиментарная жировая нагрузка у крыс сопровождалась развитием ДЛП, о чем наглядно свидетельствовала липидограмма контрольной группы животных. Так, в крови уровень ОХС
возрастал на 19%, ХС ЛПНП на 39%, содержание ТГ увеличивалось на 24%, в то же время антиатерогенный ХС ЛПВП снижался до 21% по сравнению с показателями в интактной группе (табл. 2).
Таблица 2
Влияние фитосредства на показатели липидного обмена при этаноловом гепатите у крыс
Группы животных
Показатели Интактная Контрольная Опытная
(п=8) (п=8) (п=8)
ОХС, ммоль/л 1,75± 0,14 2,08± 0,10 1,65± 0,11*
ТГ, ммоль/л 0,53± 0,04 0,66± 0,10 0,49± 0,03*
ХС ЛПВП, ммоль/л 0,75± 0,10 0,59± 0,12 0,69± 0,11*
ХС ЛПНП, ммоль/л 0,76± 0,01 1,06± 0,15 0,74± 0,11*
Из данных таблицы 2 следует отметить, что при введении испытуемого фитосредства выраженность ДЛП заметно снижалась. Так, в опытной группе животных уменьшалось содержание ОХС на 21%, атерогенного ХС ЛПНП на 30%, ТГ на 26%. Вместе с тем антиатерогенная фракция ХС ЛПВП возрастала на 17% по сравнению с контролем. Полученные данные позволяют предположить, что профилактическое назначение фитосбора оказывает гепатозащитное действие, обеспечивающее оптимальность функционального состояния печени для предотвращения развития и прогрессирования ДЛП.
Как известно, ДЛП служит повреждающим проатерогенным фактором для эндотелиоцитов, вызывая в них состояние ДЭ и, в частности, ее провоспалительную активацию [9, 18]. Последующий ход экспериментальных исследований
подтвердил эти литературные данные и показал, что в контрольной группе крыс, находившихся на атерогенной диете, развившиеся нарушения липидного обмена достоверно ассоциировались с повышением уровня провоспалительных цито-кинов. Так, концентрация провоспалительных цитокинов ИЛ-1Р, ИЛ-6 и ФНО-а возрастала на 23, 17 и 19% соответственно по сравнению с данными у животных интактной группы. В то же время превентивное введение фитосредства уменьшало выраженность гиперцитокинемии у лабораторных животных опытной группы. В частности, уровень исследуемой фракции цито-кинов ИЛ-1Р и ИЛ-6 уменьшался на 17,8 и 16,1% соответственно, а концентрация провос-палительного цитокина ФНО-а под влиянием фитосредства снижалась на 12% в сравнении с показателями в контроле (табл. 3).
Таблица 3
Влияние фитосредства на уровень провоспалительных цитокинов и острофазовых белков при ДЛП на фоне этанолового гепатита у крыс
Показатели Интактная Контрольная Опытная
(п=8) (п=8) (п=8)
ИЛ-1Р, пг/мл 2,05±0,15 2,52±0,23 2,07±0,11*
ИЛ-6, пг/мл 4,90±0,38 5,76±0,43 4,83±0,25*
ФНО-а, пг/мл 2,00±0,19 2,38±0,17 2,09±0,12*
СРБ, мг/л 6,00±0,32 14,41±0,10 12,32±0,37*
Фибриноген, г/л 0,92±0,07 1,06±0,04 0,94±0,06*
Как следует из литературных данных, экспрессия провоспалительных цитокинов ведет к образованию эндотелиальными клетками молекул адгезии, привлекающих моноциты к эндотелию и облегчающих их проникновение в сосудистую стенку [3, 10]. Можно предполо-
жить, что под влиянием курсового введения фитосбора наблюдаемое снижение уровня провоспалительных цитокинов прерывает инициациальное звено атерогенеза, что обусловливает антиатеросклеротический эффект испытуемого средства.
Известно, что выработка провоспалитель-ных цитокинов стимулирует синтез и секрецию белков острой фазы - биомаркеров эндогенного воспаления [3, 17]. Из таблицы 3 видно, что в контрольной группе животных гиперцитокине-мия сопровождалась возрастанием в крови СРБ в 2,4 раза и фибриногена на 16%. Одновременно с этим в опытной группе крыс курсовое введение средства приводило к снижению концентрации СРБ и фибриногена на 14 и 11% соответственно. Важно, что под влиянием фитосредства заметное снижение концентрации СРБ достоверно коррелировало с уменьшением содержания ИЛ-6. Вероятно, торможение синтеза СРБ, активным продуцентом которого является ИЛ-6, позволяет предположить, что фитосредство ока-
зывает благоприятное влияние, заключающееся в подавлении активности эндогенного воспаления, которое присуще патогенетическим механизмам АС.
Общеизвестно, что длительная ДЛП приводит к выраженной активности не только воспалительных, но и деструктивных процессов [10]. Из результатов эксперимента видно, что в группе крыс, находившихся на атерогенной диете, индуцированная ДЛП достоверно ассоциировалась с повышением в крови количества ЦЭК -основных маркеров повреждения эндотелия. Результаты исследования показали, что у животных данной группы степень деэндотелизации сосудов возрастала в 2,2 раза по сравнению с данными в интактной группе крыс (табл. 4).
Таблица 4
Влияние фитосредства на уровень ЦЭК при индуцированной ДЛП у крыс
Группы животных Количество ЦЭК Ед/100 мкл
Интактная (n=8) 6,0±1,1
Контрольная (n=8) 13,6±4,2
Опытная (n=8) 7,2±0,3*
Из данных таблицы 4 видно, что профилактическое введение средства уменьшало выраженность повреждения и десквамации эндоте-лиальных клеток у животных. В частности, в опытной группе уровень ЦЭК уменьшался на 47% по сравнению с контролем, что позволяет отметить у изучаемого фитосбора выраженный эндотелиопротективный эффект. Можно предположить, что данное фармакологическое свойство испытуемого фитосредства позволяет на ранних этапах снизить степень ДЭ и ослабить процесс десквамации эндотелиоцитов, тем самым прерывая инициациальное звено АС и обусловливая антиатеросклеротический эффект средства.
Столь многогранная и выраженная фарма-котерапевтическая эффективность фитосбора обусловлена высоким содержанием в его компонентах флавоноидов, органических кислот, полисахаридов и других биологически активных соединений, обеспечивающих поливалентный эффект испытуемого средства [2].
Таким образом, превентивное курсовое введение фитосредства при токсическом повреждении печени сопровождается гепатозащитным действием, что препятствует развитию ДЛП и активации процессов ДЭ. Следует полагать, что успешное сочетание в изучаемом фитосредстве гепатопротекторных, гиполипидемических и эндотелиопротективных свойств может открыть
новые возможности его применения в комплексной профилактике и терапии АС и ассоциированных с ним заболеваний.
Литература
1. Буеверова Е.Л., Драпкина О.М., Ивашкин В.Т. Атерогенная дислипидемия и печень // Российские медицинские вести. - 2008. - №1. - С. 17-23.
2. Головкин Б.Н., Руденская Р.Н., Трофимова И. А. Биологически активные вещества растительного происхождения. - М.: Наука, 2002. - 216 с.
3. Демьянов А.В., Котов А.Ю. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике // Цитокины и воспаление. - 2003. -№2. - С. 20-35.
4. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике. - Минск: Беларусь, 2000. - 463 с.
5. Кухарчук В.В. Дислипидемии и сердечнососудистые заболевания // Consilium Medicum. -2009. - № 5. - С. 61-64.
6. Мустафина Ж.Г., Краморенко Ю.С., Коб-цев В. Ю. Интегральные показатели периферической крови // Клин. лаб. диагн. - 1999. - № 5. - С. 47-49.
7. Патент РФ 2033646. Способ моделирования атеросклероза / В.И. Гарец, Н.П. Федченко, Л.И. Конча // Заявка № 93032126/14. Заявл. 07.07.1993. опубл. 20.04.1995. - Бюл. № 10.
8. Петросов С.Л. Структурно-функциональные изменения артерий у мужчин с артериальной гипертонией и нарушением жирового обмена в возрастном
И.Г. Етобаева, Е.А. Ботоева, Н.А. Тыхеева, О А. Роднаева. Фармакоэкономические аспекты применения адреноблокаторов в терапии гипертонической болезни II-III стадии (по данным кардиологического отделения РКБ им. Н.А. Семашко г. Улан-Удэ)
аспекте // Российский кардиологический журнал. -2012. - № 6. - С. 29-33.
9. Петухов В.А. Эндотелиальная дисфункция: современное состояние вопроса // Consilium Medicum. - 2008. - №1. - С. 3-11.
10. Уровни воспалительных и деструктивных биомаркеров в крови при коронарном атеросклерозе разной степени выраженности / Ю.И. Рагино и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2010. - № 5. - С. 520-523.
11. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р.У. Хабриева. - М.: Медицина, 2005. - 832 с.
12. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. - М.: Гэотар Медицина, 2001. - 256 с.
13. Сусеков А.В., Зубарев М.Ю., Кухарчук В.В. Heart Protection Study - исследование защиты сердца
// Клиническая фармакология и терапия. - 2002. -№1. - С. 71-74.
14. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Истамов Х.Ч. Экологическая иммунология. - М.: ВНИРО, 1995. -218 с.
15. Чжуд-ши: канон тибетской медицины / пер. с тибетского, пред., прим., указатели Д.Б. Дашиева. -М.: Восточная литература РАН, 2001. - 766 с.
16. Hladovec J. The method of study of endothelial dysfunction // Physiol. Bohemosbv. - 1978. - Vol. 27. -P. 140-144.
17. Packard R.R., Libby Р. Inflammation in atherosclerosis: from vascular biology to biomarker discovery and risk prediction // Clin. Chem. - 2008. -Vol. 54. - P. 24-38.
18. Patti G., Melfi R., Sciascio G.D. The role of endothelial dysfunction in the pathogenesis and in clinical practice of atherosclerosis // Recenti Prog. Med. - 2005. - Vol. 10. - P. 499-507.
Банзаракшеев Виталий Гамбалович - кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры общей патологии человека медицинского института Бурятского государственного университета. E-mail: gambalovi4@mail.ru
Ажунова Татьяна Александровна - доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН. E-mail: t.azhunova@mail.ru
Гуляев Сергей Миронович - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории экспериментальной фармакологии ИОЭБ СО РАН. E-mail: s-gulyaev@inbox.ru
Banzaraksheev Vitaly Gambalovich - candidate of medical sciences, senior lecturer, department of human general pathology, Medical Institute, Buryat State University, 670002, Ulan-Ude. E-mail:gambalovi4@mail.ru
Azhunova Tatyana Alexandrovna - doctor of biological sciences, leading reseasher, laboratory of safety of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. E-mail: t.azhunova@mail.ru
Gulyaev Sergey Mironovich - candidate of medical sciences, senior researche, laboratory of experimental pharmacology, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. E-mail:s-gulyaev@inbox.ru
УДК 616.12
© И.Г. Етобаева, Е.А. Ботоева, Н.А. Тыхеева, О.А. Роднаева
ФАРМАКОЭКОНОМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ АДРЕНОБЛОКАТОРОВ В ТЕРАПИИ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ II-III СТАДИИ (по данным кардиологического отделения РКБ им. Н.А. Семашко г. Улан-Удэ)
Исследовалась комбинированная терапия гипертонической болезни II-III стадии за 2013 г. Было показано, что наиболее часто в качестве гипотензивных средств применяли диуретики, ИАПФ и адреноблокаторы. При этом терапия с использованием бипрола более выгодна по сравнению с применением конкора.
Ключевые слова: фармакоэкономика, гипертоническая болезнь, анализ, терапия.
I.G. Etobaeva, E.A. Botoeva, N.A. Tykheeva, O.A. Rodnaeva
PHARMACOECONOMIC ASPECTS OF BLOCKERS IN THE THERAPY OF HYPERTENSION AT THE II-III STAGES ACCORDING TO THE DATA OF CARDIOLOGY DEPARTMENT RCH NAMED AFTER N.A. SEMASHKO IN ULAN-UDE
The combined therapy of hypertension at the II-III stages was studied in 2013. It was been revealed that diuretics, ACE inhibitors and blockers were mostly used as hypertensives. Thus, the therapy using biprol was more favorable compared with the use of concor.
