CC BY
32
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЕ
УДК 616.153.915:633.88
В.Г. Банзаракшеев Т.А. Ажунова 2
ВЛИЯНИЕ МНОГОКОМПОНЕНТНОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА НА АГРЕГАЦИЮ ТРОМБОЦИТОВ И ЛИПИДНЫЙ ОБМЕН ПРИ АТЕРОГЕННО-ИНДУЦИРОВАННОЙ ДИСЛИПОПРОТЕИНЕМИИ
1 Бурятский государственный университет (Улан-Удэ) 2 Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
Установлено, что атерогенно-индуцированная дислипопротеинемия у крыс усиливает агрегационные свойства тромбоцитов. Курсовое введение многокомпонентного растительного средства нормализует показатели липидного обмена и. оказывает, выраженное антиагрегантное действие.
Ключевые слова: дислипопротеинемия, агрегация тромбоцитов, гиполипидемическое действие
INFLUENCE OF MULTICOMPONENT HERBAL REMEDY ON THROMBOCYTE AGGREGATION AND LIPID METABOLISM AT THE ATHEROGENIC INDUCED DISLIPOPROTEINEMIA
V.G. Banzaraksheev T.A. Azhunova 2 1 Buryat State University, Ulan-Ude
2 Institute of General and Experimental Biology SB RAS, Ulan-Ude
It was determined, that atherogenic induced, dislipoproteinemia in rats intensifies aggregative properties of thrombocytes. Course introduction of multicomponent herbal remedy normalizes lipid, metabolism, and has strong antiaggregant effect.
Key words: dislipoproteinemia, thrombocyte aggregation, hypolipidemic effect
В структуре общей смертности сердечнососудистые заболевания составляют наибольший удельный вес, опережая показатели смертности от внешних причин и злокачественных новообразований [6]. Как известно, ведущим этиопатогенети-ческим механизмом болезней системы кровообращения является атеросклероз, в происхождении которого наряду с эндогенными нарушениями важную роль играет экзогенно индуцированная алиментарная (постпрандиальная) дислипопротеинемия [14].
Доказано, что алиментарная дислипопротеи-немия приводит к гемостатическим нарушениям, в частности повышая активность системы тромбо-образования посредством усиления агрегационных свойств тромбоцитов [2]. Тромбоциты не взаимодействуют с эндотелием интактных сосудов, но при атеросклеротическом повреждении в просвет сосуда экспонируются компоненты субэндотелия и наблюдается активация агрегационных свойств кровяных пластинок с запуском каскада гемостаза [7].
В настоящее время назначение антитромботи-ческих препаратов сопровождается рядом побочных эффектов и в первую очередь геморрагиями, что диктует их применение только в условиях стационара и снижения терапевтических доз [10]. В
связи с этим поиск лекарственных средств, ингибирующих агрегацию тромбоцитов и не обладающих побочными эффектами, приобретает все большее значение, что очень важно в профилактике атеро-тромботических нарушений у пациентов с высоким риском их возникновения. Особенно опасна постпрандиальная гиперлипидемия при сочетании дислипопротеинемии и повышенной тромбоген-ности крови [13].
В связи с вышеуказанным чрезвычайно актуален вопрос разработки новых лекарственных средств, оказывающих комплексное корригирующее влияние как на липидный обмен, так и на гемостатический потенциал крови.
Объектом изучения послужило комплексное растительное средство из арсенала тибетской медицины [12]. Согласно традиционным медицинским системам Тибета, терапия заболеваний должна быть направлена на регуляцию функционального состояния и структурной организации организма как единого целого. Этому требованию в полной мере отвечают многокомпонентные фитосборы, которые оказывают комплексное воздействие на организм за счет сбалансированного состава и рационального сочетания биологически активных веществ [5].
Цель исследования — оценка влияния многокомпонентного фитосредства на тромбоцитарное звено системы гемостаза и липидный обмен при дислипопротеинемии, индуцированной назначением атерогенной диеты.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Эксперименты выполнены на 80 белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой тела 160—180 г. Животных содержали в стандартных условиях вивария при одинаковом уходе, световом и температурном режиме. Экспериментальные исследования проводились в соответствии с Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемыми для экспериментальных и иных научных целей. Дислипо-протеинемия вызвана назначением атерогенной диеты в течение 12 недель, когда крысы ежедневно внутрижелудочно получали холестерин 0,1 г на 100 г массы тела, 1 мл на 100 г массы тела, 3,5% жирности молоко и 30000 ЕД на 100 г массы тела витамина D2 [11].
Изучаемое фитосредство было составлено на основе рецептурных прописей тибетской медицины «Чжуд-ши» [12]. В состав сбора входят плоды боярышника кроваво-красного, плоды яблони ягодной, плоды шиповника, семена мускатника душистого, цветки скабиозы венечной, камфара (химически чистая), трава донника лекарственного и др. Для изучения активности фитосредство применяли в форме отвара профилактическим курсом в объеме 1 мл на 100 г массы тела 1 раз в сутки на протяжении всего срока эксперимента. Препарат сравнения («Тан», сердечно-сосудистый фитосбор № 5, выпускаемый МНПО «Байкалфарм») вводили в форме отвара по аналогичной схеме в эквиобъемных количествах. Контрольная группа животных получала дистиллированную воду в аналогичных условиях.
Для оценки тромбоцитарного гемостаза в крови определяли количество эритроцитов камерным методом, подсчет тромбоцитов — по Фонио, в богатой плазме крови изучали функциональные свойства тромбоцитов по агрескрин-тесту и АДФ-индуцированной агрегации с использованием наборов «Технология-Стандарт» [1].
Гиполипидемическое действие оценивали по содержанию общего холестерина (ОХС), триа-
цилглицеридов (ТГ), холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП), холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП) с применением диагностических наборов фирмы «Cormay» [3, 8].
Полученные данные статистически обработаны общепринятыми методами для малой выборки с определением средней величины и средней арифметической ошибки. Достоверность результатов оценивали с применением t-критерия Стьюдента [9].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Как следует из таблицы 1, назначение атерогенной диеты крысам сопровождается резким нарушением липидного обмена и спектра липопротеинов крови. Так, у животных контрольной группы содержание общего холестерина повышается на 40 %, триацилглицеридов — в 2,2 раза, холестерин липопротеинов низкой плотности возрастает более чем в 5 раз. Вместе с тем содержание антиатерогенного холестерина липопротеинов высокой плотности снижается на 30 %.
При курсовом назначении испытуемого растительного средства в крови лабораторных животных содержание общего холестерина снижается на 25 %, триацилглицеридов — в 3,5 раза, нормализуется соотношение отдельных липопротеинов: холестерин липопротеинов низкой плотности снижается на 50 %, холестерин липопротеинов высокой плотности повышается на 24 %. Следует отметить, что фитосбор по своему гиполипиде-мическому действию в ряде случаев превосходит аналогичное действие препарата сравнения. В частности, в более выраженной степени гиполипидемическое действие испытуемое средство оказывает в отношении наиболее атерогенного холестерина липопротеинов низкой плотности, тогда как препарат сравнения практически не влияет на его содержание.
Из таблицы 2 следует, что атерогенная дис-липопротеинемия у крыс характеризуется усилением функциональной способности тромбоцитов к агрегации без изменения их количественного состава. Так, по сравнению с интактной группой у контрольных животных ускоряется агрегация кровяных пластинок на 16,2 % в агрескрин-тесте и на 19 % — при АДФ-индуцированной агрегации.
Таблица 1
Влияние многокомпонентного фитосредства на показатели липидного обмена при атерогенной дислипопротеинемии у белых крыс (M ± m)
Показатели Группы животных
Интактная Контрольная (атерогенная дислипопротеинемия) Опытная 1 (многокомпонентное фитосредство) Опытная 2 (препарат сравнения)
ОХС, ммоль/л 2,76 ± 0,40 3,87 ± 0,42 2,91 ± 0,04* 3,19 ± 0,21
ТГ, ммоль/л 3,97 ± 0,35 8,87 ± 1,07 2,50 ± 0,12* 3,61 ± 0,21*
ХС ЛПВП, ммоль/л 1,82 ± 0,05 1,29 ± 0,21 1,60 ± 0,15 1,71 ± 0,07
ХС ЛПНП, ммоль/л 0,15 ± 0,01 0,81 ± 0,02 0,41 ± 0,02 0,96 ± 0,05
Примечание: * - здесь и далее разница достоверна по сравнению с контролем при р < 0,05.
Таблица 2
Влияние многокомпонентного фитосредства на показатели тромбоцитарного гемостаза при атерогенной дислипопротеинемии у белых крыс
Показатели Группы животных
Интактная Контрольная (атерогенная дислипопротеинемия) Опытная 1 (многокомпонентное фитосредство) Опытная 2 (препарат сравнения)
Эритроциты, X 1012/л 4,36 ± 0,55 5,02 ± 0,23 5,07 ± 0,42 5,11 ± 0,65
Тромбоциты, X 109/л 506 ± 45,5 522,0 ± 33,8 512,0 ± 37,4 511,4 ± 0,21*
Агрескрин-тест, с 18,5 ± 1,1 15,5 ± 0,2 19,8 ± 0,9 15,4 ± 0,7
АДФ-агрегация, с 18,5 ± 1,0 15,0 ± 1,3 20,2 ± 1,5 15,2 ± 1,4
Курсовое превентивное введение изучаемого растительного средства оказывает выраженное антиагрегантное действие, удлиняя время развития агрегации тромбоцитов различными индукторами агрегации (агрескрин-тест и АДФ) на 28 % и 34 % соответственно по сравнению с данными в контроле. Следует отметить, что препарат сравнения не оказывает влияния на агрегационные свойства тромбоцитов. Кроме того, количественный состав форменных элементов крови, в частности, тромбоцитов, не подвергался изменениям ни в одной из опытных групп.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Полученные в ходе экспериментальных исследований результаты показывают, что изучаемое фитосредство в условиях атерогенно-индуцированной дислипопротеинемии снижает уровень триацилглицеридов, атерогенных липопротеинов низкой плотности и повышает антиатерогенную фракцию липопротеинов высокой плотности. По всей видимости, гиполипидемический эффект связан с высоким содержанием в компонентах сбора пектинов, сапонинов, комплексов фенольных соединений, витаминов и др., обладающих антиоксидантной, мембраностабилизирующей, желчесекреторной активностью [4, 5]. Помимо гиполипидемиче-ского действия, испытуемое средство оказывает существенное влияние на тромбоцитарное звено гемостаза, достоверно снижая время образования тромбоцитарных агрегатов. Влияние многокомпонентного фитосредства на первичное звено гемостаза связано, по-видимому, с содержанием в его составе кумаринов, а также с прямым уплотняющим действием фенольных соединений растительных компонентов на двухслойную фос-фолипидную мембрану тромбоцитов, что приводит к нарушению «реакции высвобождения» гранул, содержащих гемостатические вещества и проявлению дезагрегантного эффекта [1, 5].
Можно предположить, что фитосредство, снижая при экспериментальной дислипопротеинемии содержание холестерина липопротеинов низкой плотности в крови, активирует активность липопро-теинлипазы крови, являющейся гуморальным агентом противосвертывающей системы и тем самым, в известной мере, предотвращает тромбиногенез.
Таким образом, изучаемое многокомпонентное растительное средство обладает выраженным комплексным действием, сопровождающимся нормализацией показателей липидного обмена и дезагрегацией кровяных пластинок. Если гипо-липидемическая активность способствует коррекции дислипопротеинемии, то антиагрегантная активность — сохранению жидкого состояния циркулирующей крови и улучшению ее текучести в системе микроциркуляции. Успешное сочетание в изучаемом фитосредстве гиполипидемических и антитромботических свойств позволяет полагать, что его применение может открыть новые возможности эффективной комплексной профилактики и терапии атеросклероза.
ЛИТЕРАТУРА
1. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. — М., 2001. - 325 с.
2. Бубнова М.Г., Оганов Р.Г. Нарушенная толерантность к пищевым жирам и ее значение в атеротромбогенезе // Тер. архив. — 2004. — № 1. — С. 73 — 78.
3. Долгов В.В., Свирин П.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза. — М., 2005. — 227 с.
4. Кондакова Н.В., Сахарова В.В., Рипа Н.В. и др. Протекторные свойства биофлавоноидов в реакциях окисления радикалами ОН биомакро-молекулярных систем in vitro // Биомедицинские технологии и радиоэлектроника. — 2004. — № 1. —
С. 61—67.
5. Намсараева Г.Т., Николаев С.М. Фитотерапия начальных форм хронической недостаточности мозгового кровообращения. — Улан-Удэ, 2003. — 176 с.
6. Оганов Р.Г., Масленникова Г.Я., Шально-ва С.А. и др. Значение сердечно-сосудистых и других неинфекционных заболеваний для здоровья населения России // Профилактика заболеваний и укрепление здоровья. — 2002. — № 2. — С. 3 — 7.
7. Петч Б., Мадленер К., Сушко Е. Гемоста-зиология. Рациональная диагностика и терапия. — Киев, 2009. — 246 с.
8. Пупкова В.И. Гиперлипопротеинемия. — Новосибирск, 2006. — 32 с.
232
niIIIII IIIIIIIII ІПI Ill I I ІІГП □ II II II Ill Г ПІ I I I Il
9. Сергиенко В.И., Бондарев И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. — М., 2001. - 256 с.
10. Федеральное руководство по использованию лекарственных средств (формулярная система). — М., 2009. — Вып. Х. — 896 с.
11. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению фармакологических веществ. — М., 2005. — 832 с.
12. Чжуд-ши: канон тибетской медицины; пер. с тибетского. — М., 2001. — 766 с.
13. Banfi C., Mussoni L., Tremoli E. PAI-1, the primary plasmatic inhibitor of fibrinolysis.Physio-pathologic role and molecular mechanisms // Minerva Endocrinol. - 2007. - Vol. 27. - P. 181-191.
14. Gotto A.M., Patsch J., Yamamoto A. Postprandial hyperlipidemia // Am. J. Cardiol. - 2007. -Vol. 68. - P. 11-12.
Cведения об авторах
Банзаракшеев Виталий Гамбалович - кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры общей патологии человека медицинского факультета Бурятского государственного университета (670002, г. Улан-Удэ, ул. Октябрьская, 36а: тел.: 8 (3012) 28-39-26)
Ажунова Татьяна Александровна - доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории экспериментальной фармакологии Института общей и экспериментальной биологии СО РАН (670047, г Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; тел.: 8 (30l2) 43-34-63; e-mail: t.azhunova@mail.ru)
