64
Ветеринария
www.agroyug.ru
УДК 619: 615.371
И.Ю. Литенкова1, руководитель службы развития, кандидат ветеринарных наук, LitenkovaIY@biocombinat.ru O.A. Богомолова2, старший научный сотрудник отдела иммунологии, кандидат биологических наук, ch7_lime@mail.ru И.Н. Матвеева2, заведующая отделом молекулярной биологии и вирусологии, доктор биологических наук, профессор, biolog1967@mail.ru
М.С. Чумакова1, специалист по продвижению, ChumakovaMS@biocombinat.ru
1 ФКП «Щелковский биокомбинат»,
2 ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности» (ФГБНУ ВНИТИБП)
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ВАКЦИНАЦИИ ПОРОСЯТ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ЦЕЛЬНОВИРИОННОЙ ВАКЦИНОЙ ПРОТИВ ЦИРКОВИРУСА СВИНЕЙ ВТОРОГО ТИПА
Аннотация. В статье представлены результаты изучения эффективности вакцинации поросят инактивиро-ванной цельновирионной вакциной против цирковируса свиней второго типа - Циркостоп производства ФКП «Щелковский биокомбинат». В период наблюдения за иммунизированными поросятами с 1 по 170 день вакцинации установлено, что через 28 дней после введения вакцины в сыворотках крови фиксировался высокий уровень антител к вирусу PCV2, который сохранялся в течение 170 дней после вакцинации при значительном снижении виремии.
Ключевые слова: цирковирус свиней, вакцинация, поросята, цельновирионная вакцина.
Введение. Цирковирус относится к ДНК-содер-жащим вирусам семейства Circoviridae, роду Цирковирус, представляет собой небольшую молекулу ДНК, имеющую односпиральную кольцевую форму. Цирковирусная инфекция вызывает значительный экономический ущерб в свиноводческой отрасли во всем мире, который обусловлен в первую очередь падежом и снижением репродуктивных качеств животных [1]. PCV2 может вызвать клинические симптомы синдрома мультисистемного послеотъ-емного истощения свиней, синдрома дерматита и нефропатии, заболеваний репродуктивной, дыхательной, пищеварительной, лимфатической, кровеносной, нервной систем, а также изменений на коже. Когда первоначальная экспозиция PCV2 не контролируется достаточно мощным материнским иммунитетом, вирус подавляет дендритные клетки иммунной системы, которые усваивают антиген и представляют его в иммуногенной форме на своей поверхности для распознавания [4, 5]. На определённом этапе вирус PCV2 нарушает распознавание других антигенов через поверхностные рецепторы, так называемые «Toll Like Receptors» (TLR), а также секрецию некоторых ключевых цитокинов, таких как TNFa и INFa. Вследствие чего дендритные клетки не
Abstract. The article presents the results of studying the effectiveness of vaccination of piglets with an inactivated whole-virion vaccine against porcine circovirus of the second type - Circostop produced by the FSE Shchelkovo Biocombinat. During the observation period of immunized piglets from 1 to 170 days of vaccination, it was found that 28 days after the introduction of the vaccine, a high level of antibodies to the PCV2 virus was recorded in blood sera, which persisted for 170 days after vaccination, with a significant decrease in viremia.
Key words: porcine circovirus, vaccination, piglets, whole-virion vaccine.
мигрируют к лимфатическим узлам, где они должны встречаться с «Т-хелперами» [6]. В связи с этим действие таких факторов, как иммуностимуляция, коинфекции, стрессы, непременно могут привести к активной репликации и распространению в организме животного вируса PCV2, вызывая выраженные клинические признаки. Поэтому своевременное выявление и специфическая профилактика играют важную роль при ликвидации заболевания [2, 3]. Таким образом разработка и применение эффективных вакцин против вируса PCV2 является ключевым методом контроля цирковирусной инфекции и профилактики сопутствующих заболеваний.
Материалы и методы исследования. Исследование выполнено на базе лаборатории службы развития ФКП «Щелковский биокомбинат» и отдела молекулярной биологии и вирусологии ФГБНУ ВНИТИБП. Животные, участвовавшие в эксперименте содержались в ЛПХ Ефимовское, Владимирской области. В опыт отобрали 10 трехнедельных помесных поросят. Животные были разделены на две группы по пять голов в каждой и выращивались отдельно в двух изолированных помещениях. На протяжении опыта животные получали одинаковый коммерческий рацион, в соответствие с
ЭФФЕКТИВНОЕ ЖИВОТНОВОДСТВО
ГЕНЕРАЛЬНЫЙ ПАРТНЕР КОМПАНИЯ БИОТРОФ
Ф 65
физиологическими потребностями. В возрасте 4 недель поросята первой группы были вакцинированы вакциной «Циркостоп» производства ФКП «Щелковский биокомбинат», согласно инструкции производителя. Второй группе был введен физиологический раствор в качестве плацебо, данные животные служили контролем. На протяжении опыта животных взвешивали и брали пробы крови для оценки их серологического и вирусологического статуса на Р^2. Кровь для исследования получали из ушной и хвостовой вен в утренние часы до кормления животных. Исследования сыворотки крови на наличие антител к Р^2 проводили с использованием диагностического набора производства
140 120
100 80
60 40
20
до вакцинации
170 дней после вакцинации
11 группа
12 группа
Рисунок. Динамика массы тела у опытных животных.
Таблица.
Результаты выявления виремии и титра антител к РСУ2 в сыворотке крови поросят.
0
Перед вакцинацией 28 дней после вакцинации 120 дней после вакцинации 170 дней после вакцинации
Кол-во копий ДНК/см3 Титр антител Кол-во копий ДНК/см3 Титр антител Кол-во копий ДНК/см3 Титр антител Кол-во копий ДНК/см3 Титр антител
1 группа 1428614±251 2739±123 576439±162 4661±84 Не обнаружено 6574±121 Не обнаружено 3721±163
2 группа 1219272±184 2596±243 1578163±214 1962±231 1201194±129 1702±154 980245±219 1271±171
«Biochek». Полученные результаты обрабатывали с помощью компьютерной программы «Biochek». Наличие виремии оценивали ПЦР в реальном времени. Статистическую обработку результатов проводили с использованием операционной системы Microsoft Excel-2010.
Результаты исследований. Исследование сыворотки крови, отобранной до начала опыта показал наличие антител и виремии у животных двух групп. Далее пробы сыворотки крови отбирали и исследовали через 28 дней, 120 дней и 170 дней после введения вакцины животным. Результаты исследования напряженности иммунитета (титр антител) в ИФА и наличия виремии (генома вируса) в ПЦР представлены в таблице.
Результаты исследований сывороток крови свиней до вакцинации и в течение 170 дней после вакцинации (срок наблюдения) показали нарастание титра антител у вакцинированных животных при значительном снижении уровня виремии в крови. Во второй группе (не вакцинированные животные) наоборот титр антител менялся незначительно, при сохранении достаточно высокого уровня виремии в крови.
При обследовании места введения вакцины и плацебо воспалительных реакций выявлено не было. В течение 7 дней после введения вакцины проводили измерения температуры тела, отклонений от физиологической нормы в обоих группах выявлено не было. Аппетит и подвижность животных не изменялись. На протяжении всего опыта контролировали клиническое состояние животных. До вакцинации и в конце опыта животных взвешивали. Данные по массе тела представлены на рисунке.
Полученные данные при взвешивание показали, что вакцинированные животные хорошо набирали вес и превосходили по этому показателю не вакцинированных животных на 6,1%.
Заключение. Проведенный эксперимент позволил сделать вывод, что вакцина «Циркостоп» производства ФКП «Щёлковский биокомбинат» безвредна, ареактогенна и способна индуцировать формирование иммунитета у вакцинированных животных, напряженность которого сохранялась до 6 месяцев (срок исследования), при снижении ви-ремии в крови до нулевой отметки. Эффективность вакцины подтверждается данными, полученными при взвешивании животных: вакцинированные животные хорошо набирали вес и превосходили по этому показателю не вакцинированных животных на 6,1%.
ЛИТЕРАТУРА
1. Актуальные инфекционные болезни свиней. Руководство для студентов, научных и практических специалистов. Под ред. Алипера Т.И. - М.:ЗооВетКнига. 2019. - С. 211-217.
2. Петрова О.Г. Профилактика цирковирусной инфекции свиней / О.Г. Петрова, И.М. Донник, А.Г. Исаева, Ю.Г. Крысенко // Аграрный вестник Урала. - 2014. - № 5 (123).- С. 30-35.
3. Fort M., Sibila M., Allepuz A., Mateu E., Roerink F., Segales J. Porcine circovirus type 2 (PCV2) vaccination of conventional pigs prevents viremia against PCV2 isolates of different genotypes and geographic origins / М. Fort, М. Sibila, А. Allepuz, Е. Mateu, F. Roerink, J. Segales // Vaccine. - 2008.
- № 26 (8). - P. 1063-1071.
4. Martelli P. Impact of maternally derived immunity on piglets' immune response and protection against porcine circovirus type 2 (PCV2) after vaccination against PCV2 at different age / P.Martelli, S.Roberta, G.Ferrarini, E. De Angelis, V. Cavalli, M. Benetti, L. Ferrari, E. Canelli, P. Bonilauri, E. Arioli, A. Caleffi, H. Nathues & P. Borghetti // BMC Veterinary Research. - 2016. - №12:77 - P. 2-12.
5. Segales J. Porcine circovirus type 2 (PCV2) infections: clinical signs, pathology and laboratory diagnosis / J. Segales // Virus Research. - 2012. - vol. 164, no. 1-2. - P. 10-19.
6. Vincent I.E., Silencing of natural interferon producing cell activation by porcine circovirus type 2 DNA / I.E. Vincent, C. Balmelli, B. Meehan, G. Allan, A. Summerfield, K.C. McCullough // Immunology. - 2007. - 120 (1). - P. 47-56.