CC BY
22
ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ И ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ ЖИВОТНОВОДСТВА
УДК 63.636
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ БИФЕРОНА-Б КОРОВАМ В ПЕРИОД ЗАПУСКА И ПЕРЕД ОТЕЛОМ
О. А. КОЗЛОВА, Г. Ф. МЕДВЕДЕВ
УО «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия», г. Горки, Беларусь, 213407
М. И. ПОТАПОВИЧ, В. А. ПРОКУЛЕВИЧ
УО «Белорусский государственный университет», г. Минск, Беларусь, 220108
(Поступила в редакцию 10.01.2018)
Изучалось влияние рекомбинантных бычьих а- и у-интерферонов в составе биопрепарата «Биферон-Б» на характер завершения стельности, состояние коров и телят после рождения. Коровам через 4—6 дней после последнего доения инъецировали «Бифе-рон-2», а через сутки — вакцину «Ротавек®Корона» (2 группа). Коровам третьей группы была сделана инъекция «Биферона-Б», через 48 ч — вторая инъекция и третья инъекция за 4,4±0,4 дней до отела. Коровам контрольной группы инъецирована только вакцина.
Установлено, что применение интерферонов в период запуска и перед отелом снижает вариабельность продолжительности стельности, частоту мертворождаемо-сти телят и заболеваемости вымени у коров, а также выбытия их в начале лактации.
Ключевые слова: коровы, стельность, телята, иммунизация, роды, послеродовой период и молочная продуктивность.
The effect of recombinant bovine а- and y-interferons in the biopreparation "Biferon-B" on the nature of completion of pregnancy, the state of cows and calves after birth was studied. Cows 4-6 days after the last milking were injected with "Biferon-2", and a day later - the vaccine "Rotavec® Corona" (group 2). Cows of the third group received an injection of "Biferon-B," 48 hours later, a second injection and a third injection 4.4 ± 0.4 days before calving. The vaccine was injected into the control group cows. It has been established that the use of interferons during the start-up and before calving reduces the variability of the duration of pregnancy, the rate of stillbirth in calves and the incidence of udders in cows, and their retirement at the beginning of lactation.
Key words: cows, pregnancy, calves, immunization, childbirth, postpartum period and milk productivity.
Введение. Интерфероны (ИФН) являются одной из важнейших групп цитокинов - белковых молекул (протеинов или пептидов, в т. ч. гликозилированных), с помощью которых клетки иммунной системы могут обмениваться друг с другом информацией и осуществлять координацию действий. Контролируют цитокины многие биохимические
реакции и в значительной мере являются видоспецифичными по своему действию.
В организме человека и животных ИФН вырабатываются естественным образом в ответ на сигналы внешних и внутренних агентов инфекционной и неинфекционной природы. Воздействуют ИФН на клетки животного, а не на возбудителей заболеваний, чем можно объяснить универсальность их действия как в отношении различных патогенов, так и регуляции многих функций, не связанных с инфекционным процессом.
Анализ источников. Известны три группы человечьих интерферо-нов: альфа (а), бета (Р) и гамма (у) [1]. Они обладают многими биологическими свойствами, включая ингибирование репликации вирусов, регулирование иммунной функции и роста и дифференциации клеток. Гамма интерферон активизирует рост и дифференциацию различных типов клеток, включенных в иммунный и воспалительный процесс. В качестве терапевтических средств (компонентов) используют интер-фероны а-2а, а-2б и аНасоп-1, а также peginterferon а-2а, peginterferon а -2Ь и peginterferon Ь-1Ь.
На сегодняшний день различают три типа ИФН. Наиболее многочисленными являются интерфероны типа I, куда относят а-, Р-, дельта (5), эпсилон (е), каппа (к), омега (ю), тау (т) и другие. К ИФН типа II относят у-ИФН, а к типу III - лямбда (Х)-интерферон.
Получают рекомбинантные (генноинженерные) интерфероны биотехнологическим путем. Ген ИФН человека или животного переносится в бактериальную клетку. Бактерия, в которой проявится экспрессия гена интерферона, становится продуцентом этого белка. Создается биологическая фабрика по производству белка [2].
Интерфероны - ключевые многофункциональные цитокины, обеспечивающие интегративную деятельность нейро-иммунно-эндокринного комплекса [3, 4]. Они обладают антивирусным, имму-номодулирующим и антипролиферативным свойствами, вызывают активацию внутриклеточных ферментов, которые препятствуют репликации вирусной РНК и ДНК. Уже через сутки после инъекции интерферона повышается бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови, увеличивается содержание ^ и B-лимфоцитов.
Интерферон-т играет непосредственную роль в стабилизации, продлении функции желтого тела и успешной имплантации плода в процессе наступления беременности. Этот белок также имеет противовирусное действие. Недостаточная выработка интерферона-т приводит к потере эмбриона на ранних сроках [5, 6].
Основным биологическим эффектом а- интерферона является ин-гибирование синтеза вирусных белков. Кроме того, он является имму-
номодулятором и влияет на усиление противоинфекционного иммунитета. Для у-ИФН основная функция заключается в регуляции иммунного ответа, в силу чего он получил название «иммунный интерферон». Тем не менее он также обладает антивирусной активностью и регулирует выраженность воспалительных реакций [7, 8].
Цель работы - изучить влияние рекомбинантных бычьих а- и у-интерферонов в составе биопрепарата «Биферон-Б» на характер завершения стельности, состояние коров и телят после рождения.
Материал и методика исследований. Биферон-Б - зарегистрированный ветеринарный препарат. Производится в Беларуси ООО «НПЦ ПроБиоТех». В качестве действующих веществ содержит смесь бычьих рекомбинантных а- и у-интерферонов в растворителе с добавлением стабилизаторов (в пролонгирующей основе). В 1 см3 биопрепарата содержится не менее 1,0х104 МЕ суммарной антивирусной активности белков. Обладает антивирусной, антибактериальной, антипаразитарной и иммуностимулирующей активностью. Предназначается для им-муностимуляции глубоко стельных и отелившихся коров, усиления колострального иммунитета, а также для антивирусной санации быков перед получением спермы и коров перед осеменением. Усиливает действие вакцин и сывороток. Без сроков выдержки по молоку и мясу. Есть сведения о профилактической эффективности при нодулярном дерматите.
На молочно-товарном комплексе РУП «Учхоз БГСХА» в периоды формирования групп для запуска было отобрано 60 стельных коров в возрасте от двух до восьми лет (первого-шестого отелов). Эти животные были плодотворно осеменены в ноябре 2016 - феврале 2017 г. Отобранных первоначально в июне 40 коров разделили случайным образом на три группы. Через месяц группы были пополнены до 20 животных в каждой.
Сразу же после формирования или пополнения групп (6-го июня и 7-го июля 2017 г.) был проведен маститный тест с использованием «Соматик-эксперт». Трех коров с выявленным субклиническим и одну с клиническим маститом в первой опытной группе, двух коров с субклиническим маститом во второй опытной группе и шесть коров с субклиническим маститом в контрольной группе лечили с использованием «Мастисана». Запуск коров провели после выздоровления всех коров 15 июля (по 13 коров в опытных и 14 - в контрольной группе) и 15 августа (соответственно по 7 и 6 коров). После последнего доения всем подопытным животным был введен в соски вымени «Мастоце-фур». Показатели молочной продуктивности определены за 305 дней или укороченную завершенную лактацию.
После запуска коровы были переведены в родильное отделение. Коровам 1-й опытной группы через 4-6 дней после последнего доения (19 и 21 июля, соответственно 13 и 7 животным) был инъецирован «Биферон-2» в дозе 10 мл, а через сутки - вакцина «Ротавек®Корона». Это инактивированная эмульгированная вакцина против ротавирусной и коронавирусной инфекций и эшерихиоза молодняка крупного рогатого скота. Изготавливается фирмой «Burgwedel Biotech GmbH". Вводится за 3-12 недель до предполагаемого отела. Коровам второй опытной группы также через 4-6 дней после последнего доения была сделана первая инъекция «Биферона-Б», а через 48 ч - вторая инъекция. Третья инъекция интерферонов сделана при проявлении предвестников родов: за 2 дня до отела (трем коровам), за 3 - 5 дней (4, 4 и 4 коровам), за 6 дней (двум), за 7 дней (одной) и за 8 дней до отела (двум коровам). Коровам контрольной группы была инъецирована только вакцина в соответствии со сроками запуска - 20.07.17 (14 коровам) и 22.08.17 - шести коровам.
В период отелов учитывали тяжесть родового процесса, состояние родившихся телят, приблизительное время их вставания после рождения (до 5 мин, 6-15 мин, 16 мин и более), затем определяли живую массу. Кормление молозивом проводили в течение первых двух часов. Содержание иммуноглобулина IG в сыворотке крови определяли на третий день в лабораторно-диагностическом отделе ВСУ «Горецкая райветстанция» по реакции с натрием сульфитом. При возникновении диареи их лечили принятыми в хозяйстве методами. При передаче из родильного отделения в телятник телят взвешивали.
После завершения отелов определена продолжительность стельности. За коровами было налажено наблюдение. При выявлении заболеваний метритного комплекса их лечили с использованием «Рифапри-ма» (внутриматочное введение) и других средств, а при заболевании вымени применяли «Мастисан».
Данные обработаны математически с использованием программы Microsoft Excel.
Результаты исследований и их обсуждение. Краткая характеристика подопытных коров с учетом распределения их в группы приведена в табл. 1.
Возраст коров во всех группах в среднем составил около 5,5 лет или был несколько больше, число лактаций - 3,5-3,6. Различия по этим показателям между группами несущественны. Удой за лактацию у коров контрольной группы колебался от 4146 кг до 7819 кг (в среднем 5790 кг), первой опытной - 3663-6735 кг (5604 кг) и второй опытной группы - 3755-7165 кг (5519 кг). Различия между группами по удою также не существенны. Несущественны они и по содержанию
жира и белка в молоке, за исключением различия между двумя опытным группами по содержанию жира (Р <0,05).
Отелы проходили в период с 6.09 по 18.11.2017 г. в первой опытной группе, с 26.08 по 3.11.2017 г. (4,4±0,4 дней после третьей инъекции интерферона) во второй опытной и 6.09 по 18.11.2017 г. - контрольной группе.
Таблица 1. Возраст, молочная продуктивность, продолжительность стельности и тяжесть отела у подопытных коров
Показатели Контрольная 1-я опытная 2-я опытная
X + т х X + т X X + т X
Возраст, лет 5,8 ±0,3 5,4 ±0,23 5,6 ±0,4
Отёл по счёту 3,5 ± 0,2 3,6 ± 0,23 3,6 ± 0,4
Удой за 305 дней или законченную лактацию, кг 5790 ± 234 5604 ± 202 5519±244
Содержание жир в молоке, % 3,85 ± 0,04 3,81 ± 0,03 3,91 ± 0,02
Содержание белка в молоке, % 3,50 ± 0,06 3,49 ± 0,01 3,54 ± 0,04
Продолжительность стельность, дней 281,6 ± 2,2 283,4 ± 1,7 283,3 ± 0,7
Интервал от третьей инъекции интерферона до отёла, дней 4,4±0,4
Тяжесть отела* 1,74 ± 0,18 1,74 ± 0,21 1,50 ± 0,15
*Тяжесть отела: 1 - рождение теленка самостоятельно; 2 - оказание помощи одним человеком; 3 - извлечение плода несколькими работниками; 4 - патологические роды.
Тяжесть отелов в контрольной группе составила в среднем 1,74 (13, соответственно 10, 7 и 3 животных), 1-й опытной группе 1,74 (1-4; 10, 5, 3 и 1) и во 2-й опытной 1,50 (1-3; 12, 6 и 2).
В контрольной группе родилось 8 бычков и 11 телочек; один бычок мертворожденный (табл. 2). Живая масса при рождении от 29 до 45 кг. В первой опытной группе бычков 13 (одна двойня) и телочек 7. Две телочки мертворожденные. Живая масса при рождении от 29 до 40 кг. Во второй опытной группе бычков 11 и телочек 9; живая масса при рождении от 30 до 36 кг. Мертворожденных телят не было. Таблица 2. Характеристика приплода
Показатели Контрольная (п=20) 1 опытная (п=21) 2 опытная (п=20)
п % п % п %
Родившихся живых телят 19 95,0 19 91,5 20 100,0
в том числе тёлочек 11 55,0 6 28,6 9 45
бычков 8 40,0 13 61,9 11 55
Мертворожденных телят 1 5,0 2 9,5 0 0
Количество заболевших телят 8 42,1 5 26,3 4 20,0
Выбыло телят в течение 3-х месяцев 0 0,0 2 10,5 2 10,0
Живая масса телят в среднем по группам показана в табл. 3. Различия между контрольной группой и обеими опытными несущественные.
Однако имеется достоверное различие по этому показателю между опытными группами (Р <0,05). В значительной мере это связано с различием в соотношении бычков и телочек.
Таблица 3. Заболеваемость новорожденных телят и сроки выздоровления
Показатели Контрольная (п=20) 1 опытная (П=21) 2 опытная (П=20)
X + m х X + m X X + m X
Живая масса при рождении, кг 33,2 ±0,7 35,3 ±0,9 32,3 ± 0,5
Содержание иммуноглобулинов, мг/мл 15,7 ± 0,9 16,6 ± 0,6 17,8 ± 0,7
Интервал от рождения до заболевания, дней 2,9 ± 0,2 3,2 ± 0,2 3,5 ± 0,3
Продолжительность лечения, дней 3,7 ± 0,2 4,0 ± 0,3 3,5 ± 0,3
Среднесуточный прирост, кг 0,71 ± 0,03 0,71 ± 0,04 0,73 ± 0,03
Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови телят во всех группах в среднем соответствовало нижней границе нормы. Различие между контрольной группой и второй опытной заметное, но недостоверно = 1,84). Прослеживалась некоторая связь содержания иммуноглобулинов со сроком возникновения расстройств пищеварения у телят и проявления диареи. У телят контрольной группы диарею выявляли на 2-4-й день после рождения у 8 телят. Выздоровление происходило через 3-5 дней. Перевеска осуществлялась через 34-63 дня, прирост среднесуточный от 0,48 кг до 1,01 кг. У телят первой опытной группы диарею выявляли на 3-4-й день после рождения у 5 телят; выздоровление через 3-5 дней. Перевеска осуществлялась через 45-53 дня, прирост среднесуточный от 0,60 кг до 1,04 кг. У телят второй опытной группы заболевание выявляли на 3-4-й день, выздоровление происходило через 3-4 дня. Повторно живая масса определена через 41-43 дня (у одного теленка в 62 дня), прирост среднесуточный от 0,73 кг до 1,19 кг.
Продолжительность стельности у животных обеих опытных групп почти на 2 дня была дольше, чем контрольной группы (табл. 2).
Связано это в основном с большим количеством бычков в опытных группах. Однако обращает на себя внимание уменьшение стандартной ошибки среднего арифметического продолжительности стельности в первой группе и, особенно, во второй опытной группе (табл. 1). Существенно уменьшалось и стандартное отклонение показателя (9,7 дней в контрольной, 7,3 и 3,1 дней в первой и второй опытных группах), а также коэффициент изменчивости -94,3 %, 53,6 % и 10,1 % соответственно.
Эти данные убедительно показывают, что даже однократное применение «Биферона-Б» в комплексе с вакциной в период запуска коров уменьшало вариабельность продолжительности стельности. Применение одного препарата интерферонов в период запуска и перед отелом
не только стабилизировало срок беременности, но и заметно снижало тяжесть отелов и риск мертворождаемости телят.
В последующем сохранение телят в период выращивания зависит от многих факторов. В течение 2-3-х месяцев из двух опытных групп выбыло 4 теленка. По одному теленку в каждой группе выбытие связано с переломом конечностей, случившимся в процессе групповой погрузки в кузов автомобиля для перевозки. Выбытие третьего теленка из 1-й опытной группы связано с незаразным заболеванием пищеварительной системы и выпадением прямой кишки, а четвертого из второй опытной группы - развивающейся устойчивой тимпании.
Среднесуточные приросты телят во всех группах были примерно одинаковыми.
Частота проявления заболеваний метритного комплекса (задержание последа, метрит, эндометрит и пиометра) у коров после отела в хозяйстве в последние годы постоянно высокая. Это связано с нарушением условий содержания, приема родов и другими факторами.
В нашем опыте у животных контрольной группы и второй опытной заболевания различной степени тяжести проявлялись у всех животных, а у коров 1 опытной группы - у 68,4 %. Для лечения использовался «Рифаприм».
Так как на ферме контроль течения послеродового периода и лечение животных проводилось один раз в неделю, а выбор препарата не был удачным, процесс полного выздоровления растягивался у многих животных на несколько недель. Количество терапевтических процедур колебалось от 2-х до 9-11 и в среднем составило более 5.
Процент заболеваемости маститом после отела у коров контрольной группы остался довольно высоким, как и до отела (30 %), а у животных опытных групп первой и второй сократился в 1,5 и 2 раза, соответственно.
Одним из важнейших показателей эффективной работы ферм является частота выбраковки коров после отела. Из контрольной группы в течение первых двух месяцев выбыло по различным причинам 3 коровы, из первой опытной - две и из второй опытной группы - одна корова.
Заключение. Применение смеси бычьих рекомбинантных а- и у-интерферонов в форме препарата «Биферон-Б» в период запуска и перед отелом снижало вариабельность продолжительности стельности, частоту мертворождаемости телят и заболеваемости вымени у коров, а также выбытия их в начале лактации.
ЛИТЕРАТУРА
1. Kresse, Georg-B. Recombinant proteins of high value. In "Basic Biotechnology. Third Edition." Edited by Colin Ratledge and Bj0rn Kristiansen. - Cambridge University Press. -2006. - P. 506, 514-515.
2. Биотехнология: учеб. пособие для вузов. / Под ред. Н. С. Егорова, В. Д. Самуило-ва. Кн.2. Современные методы создания промышленных штаммов микроорганизмов / В. Г. Дебабов, В. А. Лившиц. - М.: Высш. Шк., 1988. - 208 с.
3. Goodbourn, S. Interferons: cell signalling, immune modulation, antiviral responses and virus countermeasures/ S. Goodbourn, L. Didcock, R.E. Randall // Journal of General Virology. - 2000. 81, P. 2341-2364.
4. G.C. Sen, P. Lengyels The interferon system / G.C. Sen, P. Lengyels // The Journal of Biological Chemistry. - 1992, Vol. 267, №8. Р.5017-5020.
5. J.L. Martal, N.M. Che ne, L.E Huynh, R.M. L'Haridon, P.B. Reinaud, M.W. Guillomot, M.A. Charlier, S.Y. Charpigny IFN-tau: A novel subtype I IFN1. Structural characteristics, non-ubiquitous expression, structure-function relationships, a pregnancy hormonal embryonic signal and cross-species therapeutic potentialities // Biochimie. - 1998. 80, P.755-777.
6. D. Kang, S. Ryoo, B. Chung, J. Lee, S. Park, J. Han, S. Jeong, G. Rho, J. Hong, S. Bae, T. Kang, S. Kim, S. Kim, Amino acid differences in interferon-tau (IFN-т) of Bos taurus Coreanae and Holstein // Cytokine. - 2012. 59, P.273-279.
7. B. Velan, S. CohenH, Grosfeld, M. Leitner, A. Shafferman Bovine interferon a-genes // The Journal of Biological Chemistry. - 1985. Vol. 260, №9. Р.5498-5504.
8. A. Meager (ed.) The interferons: characterization and application // Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim. - 2006, 410 p.
