CC BY
78
УДК 616.61-002
К.С. Лоншакова, Е.А. Абгалдаева, А.Г. Мондодоев, И.О. Убашеев
ЭФФЕКТИВНОСТЬ НЕФРОФИТА ПРИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ НЕФРОПАТИЯХ (МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ)
Бурятский государственный университет (Улан-Удэ) Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
Установлена фармакотерапевтическая эффективность растительного средства нефрофита при лекарственных повреждениях почек.
Ключевые слова: нефрофит, лекарственная нефропатия
THE EFFECTiVENESS OF NEPHROPHYT AT DRUG-iNDUCED NEPHROPATHY (MORPHOLOGiCAL RESEARCH)
K.S. Lonshakov, E.A. Abgaldaeva, A.G. Mondodoev, I.O. Ubasheev
Buryat State University, Ulan-Ude Institute of General and Experimental Biology SB RAS, Ulan-Ude
It has been found that a complex plant remedy nephrophyt prevents the development of drug- induced, injury of kidney.
Key words: nephrophyt, drug-induced nephropathy
При лекарственной патологии особенно часто страдают почки. Лекарственные нефропатии составляют до 15 % в общей структуре почечных заболеваний [1, 4, 6].
Причиной возникновения лекарственной патологии почек может быть возникновение лекарственных метаболитов, приводящих к побочным эффектам. Большинство современных лекарств являются сложными веществами, метаболизм их осуществляется одновременно несколькими реакциями, в результате образуется множество метаболитов, некоторые из которых могут вызвать различные нежелательные побочные эффекты.
Нефротоксичными свойствами обладает такой антибиотик, относящийся к аминогликозидам, как канамицин и противовоспалительное средство бруфен.
Побочное действие канамицина и бруфена на почки изучали на крысах линии Вистар с массой 170 — 200 г. Животным вводили раствор канамици-на в дозе 300 мг/кг 1 раз в сутки в течение 14 дней [4]. Экспериментальную нефропатию у белых крыс другой группы индуцировали внутрижелудочным введением бруфена, в суточной дозе 6 мг/кг массы 1 раз в сутки в течение 14 дней [4]. Две другие группы на фоне действия канамицина и бруфена получали нефрофит в дозе 300 мг/кг массы внутри-желудочно в течение 14 суток.
В работе использовали сухой экстракт нефрофит, полученный в отделе медико-биологических исследований Отдела биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения РАН. В состав растительного экстракта нефрофит входят следующие компоненты: толокнянка обыкновенная — 2 части, ортосифон тычиночный — 4 части, горец птичий —
3, 5 части, десмодиум канадский — 0,5 частей.
Препарат канефрон широко известен как эффективное средство, обладающее мочегонным, спазмолитическим, стимулирующим кровообращение, противовоспалительным и антибактериальным действием, применяется в комплексной терапии при лечении хронических заболеваний почек неинфекционной (гломерулонефрит, интерстициальный нефрит) и инфекционной этиологии (пиелонефрит) , а также в качестве средства, препятствующего образованию мочевых камней [3, 5].
Препарат сравнения канефрон вводили лабораторным животным на фоне введения канамицина и бруфена в объеме 1,5 мг/кг массы 1 раз в сутки, внутрижелудочно, по аналогичной схеме.
Исследования проводили на 7 и 14 сутки с начала эксперимента. Животных декапитировали. Почки фиксировали в 12% растворе нейтрального формалина и фиксаторе Буэна. Структурные изменения изучали на депарафинированных гистологических препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином [2].
Микроскопирование гистологических препаратов осуществляли на микроскопе «МоМс Jmages — 2000» (Германия) и микроскопе биологическом МБИ — 6. Для осуществления морфометрических исследований и микрофотогрофирования использовали встроенную видеокамеру в «МоОс Jmages — 2000». Морфометрические исследования почечной ткани проводили в 5 полях зрения в каждом из 5 гистологических препаратов.
Полученные в ходе эксперимента данные статистически обработаны общепринятыми методами с использованием ^-критерия Уилкоксона — Манна — Уитни (Сергеенко, Бондарева, 2001). Различия считали достоверными при вероятности 95 % (Р < 0,05).
У животных, получавших канамицин, характерными морфологическими признаками являлись
поражения проксимальных и дистальных канальцев. Клубочки и эпителий прямых канальцев были сохранены. В их клетках содержались ядра. Во многих клетках проксимальных канальцев обнаруживались изменения, соответствующие некрозу. Эпителий канальцев проксимальных и дистальных отделов нефрона не содержал ядер. Происходили процессы кариолиза. Цитоплазма большинства клеток гомогенная, эозинофильная в состоянии коагуляции. В других клетках цитоплазма имела вид глыбок, происходила плазморрагия. Местами базальная мембрана извитых канальцев разрушена, выявлен тубулорексис.
На фоне нарастающего интерстициального отека (14 сутки) выявлялась обильная кругоклеточная инфильтрация вокруг канальцев, содержащих белковые массы.
Повсеместно наблюдалась дилятация канальцев и вакуолизация отдельных нефроцитов. Сами канальцы представляли собой образования, напоминающие маленькие кисты с расширенным просветом и уплощенным эпителием. В зоне дистрофических изменений нефроцитов на 14 сутки исследований обнаруживались отложения извести в канальцах и строме. Интенсивность кальцификации значительно варьировала от случая к случаю, что по-видимому, было связано с обменом нарушения кальция, от тяжести почечной недостаточности.
При введении нефрофита в корковом слое почек отсутствовали очаговые повреждения вакуольной и гидропической дистрофии. В цитоплазме выявлялась в основном белковая дистрофия, значительно снижалась круглоклеточная инфильтрация, в отдаленные сроки не просматривались участки кальцинозов.
Для количественной оценки влияния нефрофита на патоморфологические изменения в почках белых крыс при канамициновой нефропатии были проведены морфометрические исследования следующих показателей: количество кальцинатов в поле зрения, количество дилятированных нефроцитов, количество канальцев с различными включениями, а также площадь и периметр дилятированных и вакуолизированных канальцев. Результаты цифровых исследований приведены в таблице 1.
Как видно из таблицы 1, курсовое введение нефрофита сопровождалось: снижением количества кальцинозов в почечной ткани на 83 %; уменьшением числа расширенных и вакуолизированных нефроцитов и канальцев, содержащих различные включения на 83 и 79 % соответственно; уменьшением площади и периметра канальцев на 75 и 49 % соответственно, по сравнению с показателями у крыс, получавших канамицин.
Применение противовоспалительного средства бруфена вызывало изменения в почках, представляющих группу различных патологических процессов, представленных большей частью дистрофических, такими как зернистое перерождение или еще называют этот вид дистрофии «мутное набухание». Клетки эпителия канальцев были увеличены в размерах, цитоплазма их утрачивала обычный однородный, прозрачный вид и под микроскопом такие клетки как бы состояли из отдельных мелких зернистых зернышек. Особенностью в данном случае служило то обстоятельство, что не все клетки канальцев в равной степени обнаруживали соответстветствующие изменения. Они обнаруживались, главным образом, в извитых канальцах, в первую очередь соприкасающихся с вредными веществами, которые выделялись из крови.
Клетки эпителия канальцев увеличены, вдавались в просвет канальцев, благодаря чему последний представлялся суженным. Ядра были слабо контурированны. Более тонкие особенности строения цитоплазмы в виде палочковой исчерченности и краевых волосков не определялись. В просвете канальцев выделившийся через измененные клетки белок образовывал цилиндры. Такие же белковые цилиндры просматривались также в нижележащих отделах канальцев в результате передвижения их с мочой.
У некоторых животных в почках среди измененных канальцев в корковом слое просматривались кровоизлияния с выпадением гемосидерина.
На 14 сутки исследования обнаруживали эпителиальные выстилки нефронов, а также полнокровие сосудов пирамид. Повреждения ту-булоэпительального компонента представлялись в канальцах почки различными видами дистрофий и коагуляционным некрозом. Все эти изменения
Таблица 1
Влияние нефрофита на показатели морфометрического исследования почек при канамициновой нефропатии
Показатель Группы животных
канамицин канамицин + нефрофит
Количество кальцинатов 4,83 ± 0,19 0,82 ± 0,04*
Количество дилятированных нефроцитов 6,07 ± 0,28 1,01 ± 0,05*
Количество канальцев, содержащих включения 5,45 ± 0,27 1,14 ± 0,05*
Площадь канальцев, мкм2 6747,3 ± 202,42 1658,50 ± 61,34*
Периметр канальцев, мкм 325,93 ± 9,78 165,41 ± 4,95*
Примечание: * - разница достоверна по сравнению с показателями у животных, получавших канамицин при р < 0,05.
были локализованы в определенных сегментах не-фрона (проксимальных или дистальных).
Что касается клубочков, то никаких изменений в их структурах не отмечалось, капиллярные петли их выглядели то спавшимися, то напротив, полнокровными.
Введение нефрофита положительно сказывалось на состоянии структуры элементов почек. Проксимальные и дистальные извитые канальцы были в меньшей степени подвержены различным видам дистрофии и некрозам, просматривались только единичные канальцы почек в состоянии некроза, с наличием гиалиноподобных капель в просвете канальцев.
На 14 сутки исследований при введении нефро-фита структура большей части канальцев нормализовалась. Четко просматривались ядра в клетках канальцев, сами канальцы плотно прилегали друг к другу, цитоплазма в нефроцитах канальцев распределялась ровным слоем, просветы в канальцах выглядели в пределах нормы.
Действие канефрона на почки проявлялось слабее, о чем свидетельствовали очаговые инфильтрации в строме, многочисленные очажки обызвествления в строме и канальцах, также присутствие гемолизированных эритроцитов в просвете расширенных сосудов.
Таким образом морфологические исследования показали, что канамицин из класса антибиотиков в дозе 300 мг/кг массы и противовоспалительный препарат бруфен в дозе 6 мг/кг массы обладали нефротоксическими свойствами. Большинство форм повреждения затрагивали канальцы и интерстиций. Токсические повреждения, приводящие к некрозу канальцев, а также воспалительные изменения канальцев интерсти-ция (тубулоинтерстиций) приводили к острой почечной недостаточности. Гломерулярные и сосудистые повреждения также встречались, хотя
и были слабо выражены, особенно повреждения в клубочках.
Фармакотерапия разработанным средством — нефрофитом и препаратом канефрон, тубулопатий, вызванных канамицином и бруфеном, позволила выявить, что хорошо сбалансированное по химическому составу многокомпонентное средство нефрофит благоприятно воздействовало непосредственно на очаг поражения и обеспечивало тем самым функциональную регуляцию и активность органов выделения — почек. Положительное влияние нефрофита на морфофункциональное состояние почек при интоксикации их канами-цином и бруфеном обеспечивалось комплексом биологически активных веществ, содержащихся в растениях, являющихся компонентами изучаемого средства. Данные, полученные при фармакотерапии канефроном, позволили сравнить полученные данные в сравнительном аспекте с нефрофитом. Результаты, полученные в эксперименте, показали, что нефрофит по своему терапевтическому действию превосходит препарат канефрон.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гематурия как проявление лекарственной болезни / В.И. Зак [и др.] // Терап. Архив. — 1992.
- № 7. - С. 97-99.
2. Волкова О.В. Основы гистологии с гистологической техникой / О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий.
- М., 1982. - 304 с.
3. Корсун Ф.В. Фитотерапия мочеполовых болезней / Ф.В. Корсун, А.П. Суворов. - СПб., 1999. - 224 с.
4. Рябов С.И. Нефрология: Руководство для врачей / С.И. Рябов. - СПб., 2000. - С. 416-427.
5. Справочник ВИДАЛЬ. Лекарственные препараты в России. - М., 2004. - 1488 с.
6. Current Therapy in Nephrology and Hypertension / E.R. Yessork [et al.]. - 1987.
Сведения об авторах:
К.С. Лоншакова. Бурятский государственный университет: Россия, Улан-Удэ, ул. Смолина 24 «а».
