УДК:612-083:615.36:616-084
Сф1мов В.Г., к.вет.н., доцент1 Кокарев А.В., астрант1 Б1бен 1.А., к.вет.н., доцент1 1ванова В.С., студентка1 © Волковинська В.В., мапстр ветеринарно! медицини2 1 Днтропетровський державный аграрный утверситет 2ТОВ «Л1фармавет», м. Днтропетровськ
ЕФЕКТИВН1СТЬ СТИМУЛЯЦП НЕСПЕЦИФ1ЧНО1 РЕЗИСТЕНТНОСТ1 ПОРОСЯТ ПРЕПАРАТОМ «СУ1ГАМ1Н»
У статт1 наведено результаты дослгджень з вивчення dii препарату «Суйамт» на стан неспецифiчноí резистентностi поросят в тдсисний перюд. Встановлено, що за дп препарату в дозах 0,75 i 1 мл на 1 кг маси тыа зростае кыьюсть лейкоцитiв за рахунок лiмфоцитiв та моноцитiв. Одночасно у тварин спостерйаеться посилення Т-хелперног ланки клтинного iмунimеmу, зростае кыьюсть 0-лiмфоциmiв в кровi, що свiдчиmь про тдвищення рiвня неспецифiчноí резисmенmносmi поросят.
Ключоei слова: поросята, резистенттсть, суiгамiн, Т- i В- лiмфоциmи.
В умовах сучасного ведення свинарства задля тдвищення рентабельное^ галузi доводиться скорочувати тривалють пщсисного утримання поросят. Водночас ранне !х вщлучення зумовлюе розвиток стресового стану та зниження !х резистентност [4]. Крiм того, на технолопчш чинники нашаровуеться i прояв перюду вжового iмунодефiциту в поросят, що пов'язане з розпадом материнських iмуноглобулiнiв та початком функщонування власно! iмунноl системи [6]. Сукупнiсть цих факторiв зумовлюе зниження рiвня неспецифiчноl резистентной та пiдвищення захворюваностi поросят тсля вiдлучення. Враховуючи це, актуальним е пошук препаратiв, що могли б стимулювати резистентнiсть поросят та зменшити негативнi наслiдки вiдлучного стресу [1, 2], на що i були спрямоваш нашi дослiдження.
Метою роботи було встановити вплив препарату «Су^амш» на рiвень неспецифiчноl резистентностi поросят в перюд вщлучення.
Матер1али i методи дослщжень. Робота виконувалася в ТОВ «Агро-Овен» Магдалинiвського району Дшпропетровсько! областi, лабораторнi дослiдження - в НДЦ бiобезпеки та екологiчного контролю ресурав АПК Днiпропетровського ДАУ.
Для проведення дослщжень за принципом аналогiчних груп було сформовано чотири групи поросят по 10 тварин у кожнш. За 9 дiб до вщлучення тваринам одноразово внутршньом'язово вводився Су^амш в розрахунку (на 1 кг маси тша): 1-ша група - 0,5 мл, 2-га група - 0,75 мл; 3-тя група - 1,0 мл. Тварини
© £ф1мов В.Г., Кокарев А.В., Б1бен I.A., 1ванова В.С., Волковинська В.В., 2011
119
четверто! групи слугували контролем, !м замють препарату вводився фiзiологiчний розчин (0,75 мл на 1 кг маси тша). Су^амш являе собою 10 % ш'екцшний розчин свинячих iмуноглобулiнiв (виробництво Biowet, Польща). Безпосередньо перед вiдлученням поросят, що проводили в 28-добовому вщ, було вiдiбрано зразки кровi з яремно! вени у 5 поросят з кожно! групи для проведення лабораторних дослiджень.
Морфологiчний склад кров^ а також показники гемоглобiну, гематокрит i еритроцитарнi iндекси визначали у стабЫзованш ЕДТА кровi за допомогою автоматичного гематологiчного аналiзатору для ветеринарно! медицини PCE90Vet («High Technology», США). Для пщрахунку лейкоформули готували мазки кровi за Паппенгеймом.
В кровi тварин контрольно! i 2-! дослщно! групи визначали кшьюсть Т-лiмфоцитiв за допомогою методу спонтанного Е-розеткоутворення з еритроцитами барана та В^мфоциив за допомогою ЕАС-комплексу з кролячим гемолiзином та сироваткою морсько! свинки. Диференщащю Т-лiмфоцитiв на Т-хелпери та Т-супресори виконували шляхом визначення !х чутливостi до теофiлiну у реакци Е-розеткоутворення. Нульовi лiмфоцити визначали розрахунковим методом [6].
Отриманi даш статистично оброблялися за допомогою пакету прикладних програм MS Excel iз використанням критерiю вiрогiдностi Стьюдента.
Результати дослщжень та ix аналп. Отриманi результати свiдчать, що в дозах 0,75 i 1,0 мл на 1 кг маси тша Су^амш не впливае на кiлькiснi та яюсш характеристики еритропоезу (табл. 1).
Таблиця 1
Гематологiчнi показники поросят тсля застосування Суiгамiну, M±m, n = 5
Показник контрольна група 1-а дослщна 2-га дослвдна 3-я дослвдна
Еритроцити, Т/л 5,50±0,23 5,38±0,13 5,08±0,22 5,20±0,08
Гемоглобш, г/л 108,2±3,19 98,4±2,25* 98,6±2,97 101,0±3,00
Гематокрит, % 35,68±1,39 32,17±0,77 31,81±1,07 32,87±0,85
Об'ем еритроципв, фл 64,94±0,50 59,78±0,14*** 62,72±1,06 63,24±1,07
Вмют гемоглоб1ну в еритроцитах, пг 19,71±0,29 18,29±0,1** 19,50±0,8 19,42±0,39
Концентрация гемоглобшу в еритроцитах, % 30,35±0,34 30,59±0,24 31,09±1,23 30,70±0,16
Кшьшсть тромбоципв, Г/л 285,2±57,14 495,6±29,23* 431,6±29,96 549±47,25**
Об'ем тромбоципв, фл 9,66±0,14 9,34±0,20 9,22±0,30 9,14±0,15
Кольоровий показник, од. 0,59±0,01 0,55±0,003** 0,58±0,02 0,58±0,01
Примггки: *-Р<0,05; **-Р<0,01; ***-Р<0,001 у вщношенш до контролю
Водночас, за введення препарату в дозi 0,5 мл на 1 кг маси спостер^аеться незначне вiрогiдне зменшення вмiсту гемоглобiну в кровi поросят i, вiдповiдно, зменшення кольорового показника. На rai цього зменшуеться на 7,2 % (Р<0,01) також масова концентращя гемоглобiну в одному еритроцшг Можливо, це пов'язано з певним незначним посиленням гемолiзу еритроцитiв за дi! препарату в низьких дозах. Напевне, вщповщна реакщя органiзму за таких умов розвиваеться повшьшше, нiж у поросят 2-о! i 3-о! дослiдно! груп, в яких щ показники встигають вщновлюватися за перiод дослiджень.
Варто також вщзначити, що застосування Суiгамiну зумовлюе тдвищення юлькосп тромбоциив у перифершнш кровi поросят за незмшних !х об'емних характеристик. Очевидно, що така дiя спричинюеться бiологiчно активними речовинами препарату i мае призводити до тдвищення швидкост зсiдання кровi.
Проведенi нами дослщження вказують на розвиток лейкоцитозу у тварин, яким вводили Су^амш (табл. 2). Щодо цього показника нами вщзначено позитивний доза-залежний ефект: найбшьшою кiлькiсть лейкоцитiв була за ди препарату в дозi 1,0 мл на 1 кг маси тша, перевищуючи контрольт значення в 1,66 рази (Р<0,05).
Таблиця 2
Кшьккть лейкоцит1в та лейкограма кров1 поросят пiсля застосування
Суiгамiну, М±т, п = 5
Показник Контрольна група 1-а дослщна 2-га дослвдна 3-я дослвдна
Лейкоцити, Г/л 15,10±1,35 16,76±1,17 21,5±2,64 25,08±2,19**
Еозинофши, % 1,20±0,55 2,00±0,71 0,89±1,79 0,89±1,79
Нейтрофши: паличкоядерш, % 2,40±0,45 0±0*** 2,00±1,00 2,40±0,84
сегментоядерш, % 34,80±4,04 36,40±2,39 32,80±2,88 31,20±3,65
Л1мфоцити, % 60,80±3,51 56,80±1,52 59,20±3,05 62,00±5,15
Моноцити, % 0,80±0,55 4,80±0,55*** 2,80±1,14 3,20±0,87*
Еозинофши, Г/л 0,16±0,07 0,31±0,10 0,70±0,23 0,25±0,18
Нейтрофши: паличкоядерш, Г/л 0,38±0,11 0±0** 0,36±0,17 0,57±0,18
сегментоядерш, Г/л 5,27±0,84 6,15±0,78 6,82±0,36 7,75±0,99
Л1мфоцити, Г/л 9,17±0,87 9,49±0,56 12,96±2,15 15,68±2,61*
Моноцити, Г/л 0,12±0,08 0,81±0,11** 0,66±0,28* 0,85±0,31*
Примггки: *-Р<0,05; **-Р<0,01; ***-Р<0,001 у вщношенш до контролю
Ми схильт розцiнювати цей факт як наслщок стимуляци неспецифiчно! резистентностi поросят. Враховуючи, що за ди Суiгамiну спостерiгаеться вiрогiдне збшьшення кiлькостi моноцитiв, можна припускати посилення механiзмiв клiтинного захисту за рахунок макрофагiв та, одночасно, пiдвищення рiвня гуморально! ланки iмунiтету. Про останне свщчить збiльшення абсолютно! кiлькостi лiмфоцитiв у тварин, яким вводився препарат у дозах 0,75 i 1,0 мл (вщповщно на 41,3 i 71,0 %). Поряд iз цим, низька доза Суiгамiну не лише не викликала такого ефекту, але й зумовлювала зменшення кiлькостi паличкоядерних нейтрофшв. Напевне, це вказуе на значно нижчий рiвень вiдповiдi органiзму поросят на введення препарату в дозi 0,5 мл на 1 кг маси тша.
Проведет дослщження свщчать, що застосування препарату пщвищуе рiвень неспецифiчно! резистентностi поросят 2-го! дослщно! групи внаслiдок стимулюючого впливу на утворення i диференцiацiю Т-лiмфоцитiв. Зокрема, дослщжуючи субпопуляци лiмфоцитiв в кровi поросят за впливу препарату (табл. 3), нами було вiдмiчено вiрогiдне зростання в дослiднiй групi вщносно! та абсолютно! кiлькостi теофiлiнрезистентних Т-хелперiв вiдповiдно на 16,0 та 64,0 % (Р<0,05).
Таблиця 3
Показники клопиного iмунiтету поросят за дй* Су^амшу, М±т, п = 5
Показники Контрольна група 2-га дослiдна група
Т^мфоцити % 52,4±1,4 50,8±2,6
Г/л 4,8±0,5 6,7±1,2
Т-хелпери (теофшнрезистентш) % 27,4±1,5 31,8±0,7*
Г/л 2,5±0,2 4,1±0,7*
Т-супресори (теофшнчутливГ) % 25,0±2,6 19,0±2,9
Г/л 2,3±0,4 2,6±0,6
В^мфоцити % 28,4±1,4 26,6±1,7
Г/л 2,6±0,3 3,4±0,6
0^мфоцити % 19,2±1,9 22,6±1,4
Г/л 1,7±0,1 2,9±0,4*
Примгткн:* - Р<0,05 у ввдношенш до контролю
На тл1 цього спостер1галась тенденщя до зросгання абсолютно! кшькост загальних Е-розегкоугворюючих л1мфоцит1в, а гакож зросла абсолютна кшьюсть нульових л1мфоцит1в на 71,0 % (Р<0,05).
Вщомо, що Т-хелперш л1мфоцити передаюгь шформацш щодо антигену га сингезуюгь еритропоетини цим самим вони активують I стимулюють прол1ферацш з наступною диференщацш ефекторних кл1тин [5]. Можна припустити, що збшьшення кшькост моноцит1в та нульових л1мфоцит1в в наших дослщженнях е наслщком активно! ди Т-хелперно! ланки кл1тинного !муштету.
Висновки. 1. Застосування препарату Су1гамш поросятам спричинюе пщвищення р1вня резистентност !х оргашзму, стимулюючи актившсть фактор1в кл1тинно! ланки !муштету.
2. Су1гамш може використовуватися як зааб стимулювання резистентност та життездатност поросят, а найбшьш оптимальними його дозами слщ вважати 0,75 I 1,0 мл на 1 кг маси тша.
Л^ература
1. Вщур О.1. Формування Т- I В-кл1тинно! ланки !муштету у поросят раннього в1ку за ди препарату «1нтерфлок» / О.1. Вщур, Ю.Ф.Ушкова // Бюлопя тварин. - 2009. - Т. 11, № 1-2. - С. 282-287.
2. Ковальчук Я.Я. Т- I В-л1мфоцити кров1 поросят при вщлученш !х ввд свиноматок та за умов згодовування бюмаси др1ждж1в Saccharomices еегеу181е / Я.Я. Ковальчук, О.1. В1щур, В.В. Вл1зло // Бюлопя тварин. - 2009. - Т. 11, № 1-2. -С. 287-291.
3. Новиков Д.К. Выявление розеткообразующих Т-и В-лимфоцитов и других лейкоцитов крови человека / Д.К. Новиков, В. А. Новикова // Лабораторное дело. - 1976. - № 12. - С. 35.
4. Чумаченко В.В. Стан резистентност в свиней при стрес / В.В. Чумаченко // Ветеринарна медицини Укра!ни. - 2004. - № 12. - С.33-35.
5. Ярилин А.А. Основы иммунологии: Учебник / А.А. Ярилин. - М.: Медицина, 1999. - 608 с.
6. Appearance of immunoglobulin G in the plasma of piglets following intake of colostrum, with or without a delay in sucking / Bland I. M., Rooke J. A., Bland V. C. [et al.] // Animal Science. - 2003. - Vol. 77. - P. 277-278.
Summary
V. Yefimov, A Kokarev, I. Biben, V. Ivanova, V. Volkovyns'ka EFFICIENCY OF STIMULATION NONSPECIFIC RESISTANCE PIGLETS BY
"SUIGAMMIN"
The article contains results of research study of the "Suigammin" of the nonspecific resistance in piglets sucking period. It is established, that "Suigammin" at a dose of 0.75 and 1 ml per 1 kg body weight will increase the number of white blood cells by lymphocytes and monocytes. At the same time in animals there has been increasing T-helper cell level, increasing the number of 0-lymphocytes in the blood, indicating that increase nonspecific resistance of piglets.
Рецензент - д.б.н., проф. Маслянко Р.П.