CC BY
71
Journal of Stress Physiology & Biochemistry, Vol. 12 No. 1 2016, pp. 21-30 ISSN 1997-0838 Original Text Copyright © 2015 by Zhivetev, Rudikovskaya, Dudareva, Graskova and Voinikov
ORIGINAL ARTICLE
Dynamics of Vitamins and Phenols of Alchemilla subcrenata by Diurnal Variation of Temperature in
October
Zhivetev M.A.1, Rudikovskaya E.G.1, Dudareva L.V.1, Graskova I.A.1,2, Voinikov V.K.1
1 Siberian Institute of Plant Physiology and Biochemistry, SB RAS, Irkutsk, 664033, Russia
2 The Irkutsk Scientific Center of SB RAS
*E-Mail: [email protected]
Received November 3, 2015
Round-the-clock dynamics of phenols and vitamins В6, С, РР in the leaves of Alchemilla subcrenata with a glance of thermal change was shown. The maximum of content of phenols and vitamin С was observed at 6 a.m. Dynamics of vitamins В6 and PP, actively participating in the exchange of proteins and amino acids, also is subject to fluctuation during the day. More higher content of these coenzymes are the coolest time of the day. To confirm the possible involvement of vitamins В6 and PP in the biosynthesis of proteins were examined stress proteins in leaves of Alchemilla subcrenata during those same days. Heat-shock protein HSP 17.6 was detected only a day at its maximum daily temperatures and ^ld regulated protein COR14b was detected in the morning, when the temperature was minimal.
Key words: phenols, vitamins, Alchemilla subcrenata
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
22
Dynamics of Vitamins and Phenols...
С каждым годом все сильнее возрастает вещества, флавоноиды. Главный лечебный эффект
исследовательский интерес к лекарственным растений связывают именно с флавоноидами,
растениям. В связи с этим открывается все больше обладающими не только относительно высокими
новых биологически активных веществ (БАВ) в уже концентрациями в тканях растений, но и широким
известных лекарственных растениях и спектром действия на человеческий организм. С
расширяется список растений, которые могут летучими флавоноидами связывают
служить ценным источником лекарственных бактерицидный эффект лекарственных растений
соединений (Dvornikova, Turetskova, 2013). на человека (Hramova et al., 2013) и устойчивость
В то же время, содержание БАВ в тканях самих растений к грибковым и бактериальным
растений существенно отличается не только от заболеваниям (German et al., 2013). Как
вида, популяции, сорта, расы и морфы фенольные соединения, они могут активно
(Pravdivtseva and Kurkin, 2009; Karpova et al., 2009; принимать участие в окислительно-
Karpova and Karaulov, 2013), от ткани и органа восстановительных реакциях клеток растений и
растений (Gubin and Hapina, 2013; Hramova et al., участвовать в реакциях растений на стресс (Lavid
2013; Petruk, 2013), но и от климатических условий et al., 2001; Artemkina and Gorbacheva, 2009; Dai
произрастания (Shaldaeva, 2009), типа почвы, and Mumper, 2010). Накопление флавоноидов в
фитоценотического окружения (Plaksina et al., растениях находится в сильной зависимости от
2009), близости источников техногенного экологических факторов (Alekseeva et al., 2010;
загрязнения (Pell, 1984; Kurkina, 2013; Skochilova Karpova and Karaulov, 2013), что связано с
and Zakamskaja, 2013), фазы развития и региона важностью выполняемых ими функций (Kuvacheva
произрастания (Shaldaeva, 2009). Весомый вклад в et al., 2011; Hramova et al., 2013; Karpova and
изучение растительных тканей как потенциальных Karaulov, 2013). В этой связи возрастает роль
источников ценных биологически активных фенольных соединений не только как важного
компонентов внесло появление таких методов как компонента лекарственного сырья, но и как
ВЭЖХ и УФ-спектроскопия, позволивших быстро и показателя устойчивости растений (Pell, 1984).
точно проводить подробный анализ экстрактов на Изучение динамики аскорбиновой кислоты как
широкий спектр соединений (Poluektova et al., компонента антиоксидантной системы в листьях
2011). лекарственных растений тоже позволяет
Наиболее важными компонентами листьев оценивать влияние на растительный организм
растений являются белки, углеводы, жирные стрессовых факторов окружающей среды, включая
кислоты, витамины и широкий спектр фенольных сезонные и суточные перепады температур
соединений, включающий танины, дубильные (Skochilova and Zakamskaja, 2013; Chanishvili et al.,
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Zhivetev et al.
23
2007). разные сезоны года, но и в течение суток.
В Иркутской области и Республике Бурятия Суточная и сезонная динамика лекарственных
активно изучаются флавоноиды и другие БАВ компонентов важна для научного обоснования
рододендрона (Karpova and Karaulov, 2013; оптимальных сроков и времени сбора
Mirovich et al., 2005), шлемника байкальского растительного сырья применительно к конкретному
(Chirikova et al., 2009), ортилии однобокой региону.
(Lomboeva et al., 2008) и некоторых других Витамин РР активно выступает в роли
лекарственных растений (Lusandorzhieva, 2009). кофермента в окислительно-восстановительных
Биологически активные вещества манжетки в процессах и в обмене белков, липидов и углеводов.
условиях Прибайкалья до сих пор не исследованы. Витамин Вб, или пиридоксин, является важным
В целом, химический состав манжеток изучен коферментом в реакциях синтеза и расщепления
недостаточно. Известно, что в надземной части аминокислот. Учитывая их ключевую роль в
находятся дубильные вещества (7.2-11.3 %), белковом обмене, целесообразно было
катехины. В зелёной части растения дубильных дополнительно вместе с ними исследовать группу
веществ от 7.5 до 9.4 %, здесь же присутствуют белков, синтезируемых как при тепловом, так и при
флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты и их холодовом стрессе. Осенние перепады температур
производные (лутеоновая, эллаговая), лигнин, в Сибири при положительных температурах днем и
липиды, кумарины. В листьях дубильных веществ отрицательных ночью создают идеальные условия
значительно меньше - до 2.5 %, зато витамина С для всестороннего проявления адаптации
до 210 мг %. В различных частях растения растений, в отличие от лета и зимы, где
содержатся также железо, бор, марганец, медь, превалирует только холодовой или только тепловой
цинк, молибден, никель (Vinogradov et al., 1991; стресс. Для весны, когда наступает активная фаза
Lesovaja et al., 2010). вегетации и происходит активное наращивание
Необходимость изучения манжетки в растительной биомассы, стрессовое влияние
Прибайкалье становится актуальной, если брать во может быть замаскировано общей активацией
внимание значительные различия в содержании физиологических процессов в клетках растений.
флавоноидов, витаминов и других БАВ в В этой связи целью работы было изучение
зависимости от района произрастания. Учитывая содержания фенольных соединений, витаминов С,
то, что растения в условиях Сибири находятся под В3 и В6 и стрессовых белков в листьях манжетки
влиянием сильных перепадов температур даже в городковатой в зависимости от времени суток на
течение суток, на наш взгляд важно изучать побережье озера Байкал в октябре месяце.
содержание фенольных соединений и витаминов в MATERIALS AND METHODS
листьях лекарственных растений не только в Объектом исследования служили листья
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
24
Dynamics of Vitamins and Phenols...
манжетки городковатой Alchemilla subcrenata при 4000 об/мин, супернатант фильтровали
Buser, произрастающей на левом берегу реки (фильтр 0.45 мкм). В 0.5-1 мл фильтрата
Выдриная в 700 м от уреза озера Байкал, определяли содержание водорастворимых
стационар Сибирского института физиологии и витаминов методом капиллярного электрофореза в
биохимии растений (СИФИБР) СО РАН «Речка системе G1600AX CE 3D (Agilent Technologies,
Выдриная», юго-восточное побережье Байкала, Германия). Условия анализа: кварцевый капилляр,
разнотравный луг. Пробы отбирались в течение полная длина 48 см, рабочая длина 40 см,
суток с интервалом в 3-6 часов: в 6 , 9 , 15 , 20 и внутренний диаметр 50 мкм. Для разделения
2400 часа во вторую декаду октября. Выбор использовали 20 мМ тетраборатный буфер с рН
времени суток для отбора был привязан к наиболее 9.3. Ввод пробы осуществляли гидродинамическим
заметным изменениям в суточном ходе температур способом (50 мбар • 4 сек), рабочее напряжение 20
атмосферного воздуха. В листьях определялось кВ, температура в кассете с капилляром 30 °С.
содержание ФС и витаминов C, РР и В6. Сухой вес Детектирование осуществляли с помощью диодной
определялся стандартным методом высушивания матрицы, на длинах волн 200, 254, 280, 599 нм.
при температуре 105 °С до постоянного веса. Выделение белка осуществляли по
Определение содержания фенольных общепринятой методике с выравнием белка по
соединений (ФС) осуществляли после тройного методу Лоури и последующим электрофорезом в
экстрагирования кипящим 80% метанолом и ПААГ в модифицированной системе Лэммли на
очисткой объединенного экстракта хлороформом приборе Mini-PROTEAN III Cell (BIO-RAD, США)
от липофильных пигментов с последующей (Pobezhimova et a/., 2004). Перенос белков на
экстракцией фенольного комплекса этилацетатом. нитроцеллюлозную мембрану (“AMERSHAM”,
Общее содержание ФС определяли с помощью США) и последующую обработку антителами
реактива Фолина-Дениса при 720 нм с помощью проводили в соответствии с рекомендациями
SPECORD S 100 («Analytikjena», Германия). Для фирмы-изготовителя. Концентрацию белка
построения калибровочной кривой использовали определяли по интенсивности окраски мембраны в
коммерческий препарат кверцитина («Sigma», программе GEL Analysis (1.0).
США). Все образцы исследовались в трех
Определение содержания витаминов в биологических повторностях. На графиках
листьях растений осуществляли следующим приведены средние значения и стандартные
образом. Измельченное растительное сырье (2 г) с отклонения содержания фенольных соединений и
2 мл 40 мМ раствора аммиака подвергали витаминов. Рассчитывали линейные
обработке ультразвуком при 30-40 °С в течение 15 коэффициенты корреляции и уровень значимости
мин. Полученную смесь центрифугировали 20 мин по Спирману в программе StatSoft (Statistica 6.0).
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Zhivetev et al.
25
RESULTS AND DISCUSSION 2013).
Суточная динамика температуры в дни Содержание аскорбиновой кислоты
исследования. Суточный ход температур осенью, (витамина С). Максимум содержания АСК
зафиксированный на участке отбора проб во время приходится тоже на 6 часов утра (648.2 мкг/г
исследований показал значительную амплитуду сухого веса), а минимум на 15 часов (5.0 мкг/г). К
температур даже в пределах одних суток с 20 и 24 часам содержание АСК снова возрастает
минимумом в 6-9 часов и максимумом значений в (до 17.6 и 48.6 мкг/г соответственно). Обращает на
15-17 часов, что характерно для территории себя внимание тот факт, что суточная динамика
Сибири. Разница температур в течение суток АСК повторяет динамику ФС.
достигает 14 °С и выше. Учитывая динамику Динамика некоторых витаминов группы В.
температурного режима, образцы листьев Была изучена суточная динамика витаминов РР и
манжетки городковатой отбирались в 6, 9, 15, 20 и Вб (табл. 1). Витамин РР, или Вз, активно
24 часа (табл. 1). выступающий в роли кофермента в окислительно-
Суточные изменения содержания восстановительных процессах и в белково-
фенольных соединений. Общее содержание липидно-углеводном обмене через обмен
ФС существенно изменялось в течение суток (табл. пировиноградной кислоты, показал максимум
1) и максимальное содержание в пересчете на содержания в 9-15 часов дня (96.1-174.5 мкг/г),
сухой вес приходилось на шесть часов утра (28.8 что может быть связано с активизацией
мг/г сухого веса). В освещенное время суток биосинтетических процессов на фоне активного
содержание ФС значительно ниже и минимально в фотосинтеза. Витамин В6, или пиридоксин, показал
послеполуденное время (4.7 мг/г в 15 ч). К 20-24 в 9 и 15 часов содержание 216.2-217.9 мкг/г сухого
часам вечера содержание ФС постепенно веса. В то же время, его содержание в
возрастает до 10.2-11.0 мг/г. Такая суточная относительно холодное время суток повышалось
динамика вероятно объясняется тем, что ФС на еще сильнее (259.0-328.7 мкг/г). Возможно, это
свету активно окисляются, а также возможным было связано с усиленным синтезом белков
накоплением ФС в холодное время суток как теплового и холодового шока, возможно - с
адаптивную реакцию на гипотермию и накоплением аминокислот, выполняющих
усиливающийся окислительный стресс. криопротекторную функцию.
Подтверждает нашу гипотезу суточная динамика Суточные изменения в количестве БТШ в
содержания аскорбиновой кислоты (АСК) (табл. 1), зависимости от содержания витаминов. Для
являющейся важным индикатором окислительных проверки гипотезы нами был проведен
процессов в клетках и тканях растений (Maevskaja иммуноблотинг проб листьев манжетки на
and Nikolaeva, 2013; Skochilova and Zakamskaja, следующие стрессовые белки: белки теплового
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
26
Dynamics of Vitamins and Phenols...
шока БТШ 70, 60, 101 и 17.6, а также на экспрессирующийся при холодовом воздействии (cold regulated protein) COR14b (табл. 2).
Конститутивные БТШ 70 и 60 присутствовали во всех образцах листьев манжетки. БТШ 101, который синтезируется в ответ на тепловой стресс, не был обнаружен. Эти результаты согласуются с ранее изученной сезонной динамикой БТШ манжетки городковатой, у которой БТШ 101 детектировался в августе, когда относительно жарко и сухо, а в октябре его не наблюдалось (Zhivetev et a/., 2014). БТШ 17.6, ранее выявленный (Zhivetev et a/., 2014) при сезонной динамике в октябре и отсутствующий в августе (пробы отбирались в 14 ч) был снова обнаружен нами в образцах, но отобранных после полудня (15 и 20 часов). В холодное время суток БТШ 17.6 не детектировался. Шаперон COR14b, участвующий в защите митохондрий от холодового шока, присутствовал в листьях манжетки городковатой только в 6 часов утра. Таким образом, показан синтез белков теплового шока (БТШ) днем и
холодового шока (БХШ) ночью. С этим может быть связано стабильно высокое содержание пиридоксина в листьях манжетки городковатой в течение суток. Более высокие содержания витамина В6 при понижении температуры по-видимому связаны с тем, что при этих условиях адаптивный синтез БХШ ночью важнее синтеза БТШ днем. В то же время, не исключен более высокий синтез пролина в холодное время суток, что также может отражаться на содержании пиридоксина.
Корреляционная зависимость БАВ от изменений температуры в течение суток. Для
более глубокого понимания суточного хода температуры на содержание БАВ в листьях манжетки городковатой нами был использован метод корреляционного анализа (табл. 3). С его помощью выявлено, что с понижением температур воздуха достоверно увеличивается содержание витамина С и общего содержания фенольных соединений. Понижение температуры воздуха недостоверно приводило к увеличению содержания пиридоксина и уменьшению РР.
Table 1. Суточная динамика температуры, содержания биологически активных веществ и доли сухого веса в листьях манжетки городковатой в середине октября, р. Выдриная
Время суток, часы
О о о о о О) о о ю ГО о о о о о OJ
Температура, °С СО о о + о О +9 °С +5 °С + о О
Общее содержание фенольных соединений, мг/г сухого веса 28.8±1.7 12.7±1.0 4.7±0.2 10.2±0.7 11.0±0.9
Содержание аскорбиновой кислоты, мкг/г сухого веса 648.2±101.8 65.4±8.9 5.0±0.4 17.6±1.2 48.6±6.1
Содержание РР (витамина B3), мкг/г сухого веса 3.1±0.4 96.1±13.2 174.5±13.4 2.2±0.1 6.7±0.8
Содержание витамина B6, мкг/г сухого веса 328.7±51.,6 216.2±29.7 217.9±16.7 259.0±17.1 312.6±39.0
Доля сухого вещества, доли ед. 0.19±0.03 0.20±0.03 0.30±0.02 0.27±0.02 0.28±0.03
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Zhivetev et al.
27
Table 2. Содержание стрессовых белков в листьях манжетки городковатой в течение суток14-15 октября, р. Выдриная (у.е. или нг белка)
Стрессовый белок Время суток, часы
О о о о о О) о о ю ГО о о о о о OJ
БТШ 70 8457 ± 372 14623±223 18394 ±354 12897±424 8393±314
БТШ 60 7240 ± 73 9721 ±121 13377 ±110 9369 ± 46 6282±132
БТШ 101 0 0 0 0 0
БТШ 17,6 0 0 11793±203 6643 ± 324 0
COR 14 b 11702±132 0 0 0 0
Примечание: БТШ - белки теплового шока; COR - cold regulated protein.
Table 3. Корреляционные зависимости содержания биологически активных веществ с температурой и долей сухого веса
Сравниваемые характеристики Корреляция по Спирману
с температурой с долей сухого веса
R p R p
Фенольные соединения -0.975 0.005 -0.900 0.037
Витамин В6 -0.564 0.322 -0.300 0.624
Витамин С -0.975 0.005 -0.900 0.037
Витамин РР 0.360 0.553 0.500 0.391
Доля сухого веса 0.821 0.089 1.000 0.000
Температура 1.000 0.000 0.821 0.089
Примечание: R - коэффициент корреляции, p - уровень значимости
Увеличение температуры в течение суток закономерно приводило к увеличению доли сухого веса, но сопровождалось уменьшением концентрации БАВ, за исключение витамина РР.
CONCLUSIONS
Таким образом, в результате исследований круглосуточной динамики содержания фенолов, витаминов В6, С и РР в тканях листьев манжетки городковатой Alchemilla subcrenata Buser была показана реализация адаптационного потенциала травянистых растений в естественных условиях в течение короткого периода времени при воздействии резкой смены температурных условий. Был выявлен максимум содержания фенолов и витамина С в 6 ч, которые по всей видимости задействованы в адаптации растительных клеток к
утреннему минимуму суточной температуры. Устойчивость к гипотермии ночью главным образом может реализовываться за счет активного участия этих соединений в окислительных и антиоксидантных процессах. В то же время, выраженная суточная динамика содержания пролина и витамина РР, активно участвующих в белковом обмене, вместе с закономерным изменением в составе и содержании БТШ и шаперонов, свидетельствует о более тонкой регуляции белкового обмена в течение суток, чем могло предполагаться ранее. Как известно, в модельных экспериментах накопление БТШ обычно регистрируют уже через несколько часов после стрессового воздействия. Полученных результаты показывают, как это происходит в естественных
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
28
Dynamics of Vitamins and Phenols...
условиях. Причем увеличение содержания стрессовых белков, защищающих от гипертермии, сопряжено с уменьшением содержания белков, защищающих от холода, что очевидно связано с комплексом ограничивающих растительную клетку факторов.
ACKNOWLEDGMENT
Работа выполнена при поддержке Интеграционной программы «Фундаментальные исследования и прорывные технологии как основа опережающего развития Байкальского региона и его межрегиональных связей».
REFERENCES
Alekseeva L.I., Bystrushkin A.G., Teterjuk L.V. and Bulysheva M.A. (2010) Fenolnye soedinenija i antioksidantnaja aktivnost uralskih predstavitelei roda Thymus (Lamiaceae). Rastitelnye resursy,
1, 110-118. (in Russian).
Artemkina N.A. and Gorbacheva T.T. (2009) Sodershanije fenolov v kore eli na raznyh stadijah tehnogennoj suktsessii biogeotsenozov Kolskogo poluostrova. Himiya rastitelnogo syrja,
2, 111-116. (in Russian).
Chanishvili Sh., Badridze G., Rapava L. and Dzhanukashvili N. (2007) Vlijanije vysotnogo faktora na soderzhanie antioksidantov v listjah nekotoryh travjanistyh rastenij. Ekologija, 5, 395400. (in Russian).
Chirikova N.K., Olennikov D.N. and Tanhaeva L.M. (2009) Farmakognosticheskoe issledovanie nazemnoj chasti shlemnika baiklskogo (Scutellaria baikalensis Georgi). Himiya
rastitelnogo syrja, 1 , 73-78. (in Russian).
Dai J. and Mumper R.J. (2010) Plant Phenolics: Extraction, Analysis and Their Antioxidant and Anticancer Properties. Molecules, 15, 73137352.
Dvornikova L.D. and Turetskova V.F. (2013) Izuchenie sostava fenolnyh soedinenij stolbikov s rylzami kukuruzy, zagotovlennyh na Altae. Himiya rastitelnogo syrja, 2, 127-134. (in
Russian).
German A., Bochenek Zh. and German A.P. (2013) Dejstvija masel koritsy i lavandy na ekspressiju gena FtsZ Stafilococcus aureus АТСС 29213. Prikladnaja biohimija i mikrobiologija, 49 (5), 476-480. (in Russian).
Gubin K.V. and Hapina M.A. (2009) Izuchenie himicheskogo sostava nadzemnoi chasti Urtica cannabina L. flory Sibiri. Himiya rastitelnogo syrja, 2, 89-92. (in Russian).
Hramova E.P., Tsybulja N.V. and Chindjaeva L.N. (2013) Antimikrobnaja aktivnost letuchih soedinenij i soderzhanie fenolnyh komponentov u nekotoryh vidov roda Pentaphylloides (RosaceaeJ. Rastitelnye resursy, 49, 598-612. (in Russian).
Karpova E.A. and Karaulov A.V. (2013) Flavonoidy nekotoryh vidov roda Rododendron L. flory Sibiri i Dalnego Vostoka. Himiya rastitelnogo syrja, 2, 119-126. (in Russian).
Karpova E.A., Hramova E.P. and Fershalova T.D. (2009) Flavonoidy i askorbinovaja kislota u nekotoryh predstavitelej roda Begonia L. Himiya
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Zhivetev et al.
29
rastitelnogo syrja, 2, 105-110. (in Russian).
Kurkina A.V. (2013) Novye podhody k standartizatsii zvetkov bojaryshnika. Himiya rastitelnogo syrja, 2, 171-176. (in Russian).
Kuvacheva N.V., Shilova I.V., Pjak A.I. and Amelchenko V.P. (2011) Soderzhanie i sostav flavonoidov i fenilcarbonovyh kislot Alfredia cernua (Asteraceae). Rastitelnye resursy, 4, 105-113. (in Russian).
Lavid N., Schwartz A., Yarden O. and Tel-Or E. (2001) The involvement of polyphenols and peroxidase activities in heavy-metal
accumulation by epi-dermal glands of the waterlily (Nymphaeaceae). Planta, 212, 323331.
Lesovaja Zh.S., Pisarev D.I., Novikov O.O. and
Romanova T.A. (2010) Razrabotka metodiki
kolichestvennogo opredelenija flavonoidov v
trave manzhetki obyknovennoi Alchemilla
vulgaris L.S.L. Nuchnyje vedomosti belgorodskogo gosudarstvennogo universiteta.
Serija Meditsina. Farmatseja, 22(93), 145-149.
(in Russian).
Lomboeva S.S., Tanhaeva L.M. and Olennikov D.N. (2008) Metodika kolichestvennogo opredelenija summarnogo soderzhanija flavonoidov v nazemnoj chasti ortilii odnobokoj (Orthillia secunda (L.) house). Himiya rastitelnogo syrja, 2, 65-68. (in Russian)
Lusandorzhieva P.B. (2009) Soderzhanije
biologicheski aktivnyh veshchestv v nekotoryh ratenijah Zabaikalja i ih antioksidantnaja
aktivnost. Himiya rastitelnogo syrja, 3, 133-137. (in Russian).
Maevskaja S.N. and Nikolaeva M.K. (2013) Reaktsija antioksidantnoj i osmoprotektornoj sistem prorostkov pshenitsy na zasuhu i regidratatsiju. Fiziologija rastenij, 60(3), 351-359. (in Russian).
Mirovich V.M., Fedoseeva G.M., Leventa A.I. and Makarenko S.P. (2005) Opredelenie summarnogo soderzhanija flavonoidov v nazemnoi chasti Rododendron adamsii (Ericaceae) spektroskopicheskim metodom. Rastitelnye resursy, 4, 67-73. (in Russian).
Pell E.J. (1984) Secondary metabolism and air pollutants. In: Gaseous air pollutants and plant metabolism, Koziot M.J., Wratley F.R. (ed.) Butterworths: London, 222-237.
Petruk A.A. (2013) Sezonnaja dinamika soderzhanija dubilnyh veshchestv v listjah i sozvetijah nekotoryh vidov roda Salix (Salicaceae) pri introdukzii. Himiya rastitelnogo syrja, 2, 135-138. (in Russian).
Plaksina I.V., Sudachkova N.E., Romanova L.I. and Miljutina I.L. (2009) Sezonnaja dinamika fenolnyh soedinenii v lube I hvoe sosny obyknovennoi i cedra sibirskogo v posadkah razlichnoi gustoty. Himiya rastitelnogo syrja, 1 , 103-108. (in Russian).
Pobezhimova T.P., Kolesnichenko A.V. and Grabelnyh O.I. (2004) Metody izuchenija mitochondrij rastenij. Poljarografija i elektroforez. M.: OOO “NPK “PROMEKOBEZOPASNOST”, 98 s. (in Russian).
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
30
Dynamics of Vitamins and Phenols...
Poluektova T.V., Kolomiets N.E. and Kalinkina G. I. (2011) Hromatograficheskoje issledovanije isoflovanoidov klimaktericheskogo sbora. Himiya rastitelnogo syrja, 2, 145-148. (in Russian).
Pravdivtseva O.E. and Kurkin V.A. (2009) Sravnitelnoe issledovanie himicheskogo sostava nadzemnoj chasti nekotoryh vidov roda Hypericum L. Himiya rastitelnogo syrja, 2, 79-82. (in Russian).
Shaldaeva T.M. (2009) Soderzhanije flavonoidov v prirodnyh populjazijah Artemisia absinthium L., proizrastajushchei v lesostepnoi zone zapadnoi Sibiri. Himiya rastitelnogo syrja, 2, 169-170. (in Russian).
Skochilova E.A. and Zakamskaja E.S. (2013) Vlijanije gorodskoi sredy na soderzhanije hlorofilla i askorbinovoi kisloty v listjah Tilia cordata (Tiliaceae). Rastitelnye resursy, 4, 541-546. (in Russian).
Vinogradov V.M., Martynov V.K. and Chernakova V.V. (1991) Lekarstvennyje rastenija v lechenii zabolevanij organov pishchevarenija. L: Znanie, 192 s. (in Russian).
Zhivetiev M.A., Kolesnichenko A.V., Graskova I.A. and Voinikov V.K. (2014) Seasonal Dynamics of Stress Proteins in Leaves of Medicinal Plants in a Natural Environment of Irkutsk andon the Shores of the Lake Baikal. Journal of Stress Physiology & Biochemistry, 10 (4), 42-50.
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
