CC BY
9
УДК 619:614.48:616:579.873.21 DOI: 10.15587/2313-8416.2017.116675
ДОСЛ1ДЖЕННЯ ВПЛИВУ ОПРОМ1НЕННЯ НА УЛЬТРАСТРУКТУРУ ТА М1НЛИВ1СТЬ М1КОБАКТЕР1Й
© В. Ю. Касач, А. Г. Левченко, Ю. А. Байдевлятов, Г. I. Ребенко, В. О. Головко, О. В. Касач, В. О. Ушкалов, О. В. Волосянко
Наведет у до^дженш Mamepianu ceiduamb, що невелик дози paдiaцii не викликають змт ультраструк-тури Mycobacterium bovis та атипових мжобактерш, стимулюючи лише ix репродуктивну активтсть (Mycobacterium Intracellularae), а у Mycobacterium scrofulaceum зумовлюють змту форми та електронно-оптично'1' щiлbноcmi цитоплазми. Доза, за яко'1' мiкобaкmepii набувають дегенеративних змт, становить 154,8-206,4 Кл/кг (600000-800000 Р)
Ключовi слова: туберкульоз, штами, мiкобaкmepii, M. bovis, М. scrofulaceum, M. intracellularae елект-ронна мжроскотя, ютзуюча paдiaцiя
1. Вступ
Туберкульоз - небезпечний зооноз, е найбшьш розповсюдженою у свт шфекщею, що рееструеться i у людей, i у тварин в кра!нах рiзного економiчного рiвня розвитку, незалежно ввд полтгачних систем та вiросповiдання [1, 2].
Боротьба з туберкульозом передбачае залу-чення медичних та ветеринарних служб, прийняття серйозних оргашзацшно-правових ршень та фшан-сового забезпечення, тому програми контролю тубе-ркульозу приймаються на державному рiвнi [3].
Враховуючи реальну загрозу нацiональнiй безпецi держави та кра!нам £С у зв'язку з штегращ-ею, питання боротьби з туберкульозом е одним iз прюритепв державно! полiтики у сферi охорони здо-ров'я i соцiального розвитку. в Укра!ш стартував Ре-пональний проект ВООЗ «Змщнення систем охорони здоров'я для ефективного контролю за ТБ i МРТБ у крашах Схвдно! £вропи i Центрально! Азп» (проект TB-REP). [4]
Поява нових форм захворювання, висока роз-повсюджешсть збудник1в iз множинною л1карською стшшстю сприяли тому, що проблема туберкульозу набула маштабiв надзвичайно! ситуацi!. Спостерта-еться значне збiльшення захворювання протягом п'яти рок1в i проблема мультирезистентносп е основною у питанш лiкування [5, 6].
Основною проблемою сучасно! фтизiатрi! е т-двищення ефективностi лiкування хворих на хiмiоре-зистентний туберкульоз легень, що мае ктшчне та епiдемiологiчне значения, оскшьки скорочуе резервуар i запобтае поширенню шфекцп. Для досягнення ще! мети необхвдно вести пошуки й розробку нових методiв л1кування та режимiв хiмiотерапi!, що дозво-
лить у процеа лiкування запобiгти розвитку клшч-но! хiмiорезистентностi [7].
2. Аналiз лiтературних даних та постановка проблеми
Особливе значення алерпчних проб, як основного методу прижиттево! дiагностики туберкульозу, визначаеться !х високою специфiчнiстю [8]. Проте, реакци на туберкулiн пiд час проведення алергiчних дослвджень виникають i при сенсибшзаци макроор-ганiзму атиповими мiкобактерiями, мшрооргашзма-ми, що належать до родiв СогупеЬа^егшт, ЫосагЖа та Rodococc [9] або при впливi на оргашзм тварин рiзних несприятливих факторiв (бiлково! перегодiвлi, септичних процесах, швазуванш гельмiнтами) [10].
Однiею з причин прояву неспецифiчних реак-цiй може бути аутосенсибшзащя продуктами розпа-ду власних тканин органiзму, що особливо виражено при променевому ураженнi. 1ошзуюча радiацiя впли-вае як на прояв туберкулiново! чутливостi та переб^ туберкульозу, так i на аугомунш процеси в оргашз-мi. У результат аварi! на Чорнобильськiй атомнш електростанцi!' радiонуклiдами забруднено значну те-риторш Укра!ни. Бiльшiсть населення та альського-сподарських тварин, у тому числ1 хворих на туберкульоз або сенсибшзованих атиповими мiкобактерiя-ми, мешкае та утримуеться на забруднених територь ях [11].
В лiтературi описанi результати досл1джень щодо впливу електромагштного опромiнення на мь кобактери, яке прискорюе рiст та розвиток культур на поживному середовищi вдвiчi порiвняно з контролем незалежно ввд температурного режиму збертан-ня суспензi! гною [12].
Вивчений також вплив ультрафiолетового
опромшення на виживання мiкобактерiй, а також на утворення ними L-форм. Дiя УФ-променiв ввдно-ситься до факторiв, якi викликають L-трансформацiю бактерш. Серед дослiдних культур бiльшою стшшс-тю в порiвняннi з референтним штамом вiдрiзнялись клiнiчнi iзоляти (К1-2, К1-3) з наявнiстю резистентно-cri до протитуберкульозних препаратiв. Встановлено, що ефективний час опромiнення для запобтання виживання L-форм складае не менше 50 хвилин на ввд-cтанi 70 см [13, 14].
Враховуючи значну мiнливicть збудник1в ту-беркульозу пвд впливом фiзичних факторiв, визна-чення епiдемiологiчного та ешзоотичного значення мiкобактерiй в умовах впливу юшзуючо! радiацi! на-бувае особливо! ваги. Вивчення особливостей бюло-пчно! дй' iонiзуючих випромiнювань рiзноl штенсив-ноcтi на макроорганiзм i на збудника хвороби, розро-бка активних та cпецифiчних заcобiв i заходiв для встановлення дiагнозу та боротьби з туберкульозом в умовах впливу юшзуючо! радiацi!, визначае актуаль-шсть даного-доcлiдження.
3. Мета та задачi дослiдження
Мета дослвдження - вивчити методом елект-ронно! мiкроcкопi! ультраструктури мiкобактерiй до та пicля опромшення, а також визначити вплив дози ра-дiацi! на репродуктивну актившсть мiкроорганiзмiв.
Для досягнення мети були поставлен наcтупнi
задачi:
1. З'ясувати вплив Y-промешв на життездат-шсть та репродуктивну здатнicть мiкобактерiй на ш-дcтавi вивчення ультраструктури бактерш у порiв-няннi з неопромшеним контролем.
2. Визначити дози радiацi!, за яких в мшобак-терiях рееструються змiни, що призводять до припи-нення подiлу та до загибелг
4. Матерiали та методи
У дослвдженш референтний (при виготовленш ППД-туберкулiну для ccавцiв) штам M. bovis Valle КМ1ЕВ-9 КМ, депонований у Депозитарй' Державного науково-дослвдного контрольного шституту бютехно-логл i шташв мiкроорганiзмiв, м. Ки!в, Укра!на. Реест-рацiйний номер 539; авiрулентний штам M. bovis (BCG), а також атиповi мiкобактерi! M. scrofulaceum (штам 31/82) та M. intracellulare (штам 78/98); музей культур лабораторп туберкульозу ННЦ 1ЕКВМ НААН Укра!ни. Накопичення бактерiально! маси мшобакте-рш проводили на поживних середовищах Павловсько-го. Доcлiднi зразки мiкроорганiзмiв поддавали опромь ненню дозами ввд 0,00645 до 206,4 Кл/кг (25 -800 тис. Р) на у-випромшювачах РОКУС (джерело ви-промiнювання 60Со, Р=0,0138 Гр/сек) (джерело ви-пром^вання 60Со, Р=180 Р/сек., 200 Р/год., 400 Р/хв). Контролем були неопромшеш культури мiкобактерiй.
M. bovis Valle КМ1ЕВ-9 КМ ввдбирали центри-фугуванням протягом 10 хв. Подготовку до електрон-номiкроcкопiчного доcлiдження готували за методикою, яка включала фшсацш мiкроорганiзмiв фосфат-ним буфером та 2,5 % глютаральдепдом при 4 °С; вь дмивку ввд фшсатора; хiмiчне зневоднення. Надання зразкам електропровщносл здiйcнювали шляхом на-
пилення cрiблом у вакуумному унiверcальному поcтi "ВУП - 5М" (Виробник Укра!на).
Електронномiкроcкопiчне доcлiдження культури M. bovis Valle КМ1ЕВ-9 КМ виконували на при-ладi "РЭМ-106 И" (Виробник "SELMI", Укра!на) у Сумському нацiональному аграрному унiверcитетi, факультетi ветеринарно! медицини (Суми, Укра!на).
Електронномiкроcкопiчне дослвдження препа-ратiв з авiрулентних культур мшобактерш (M. bovis (BCG), M. scrofulaceum M. intracellulare) проводили за методиками , як описано в роботах [15-17].
5. Результати дослвджень
При вивченш препарапв з неопромшених культур M. bovis на cередовищi Павловського вщзнача-ли, що мшобактерп мають вигляд коротких або помь рно довгих паличок з округлими кшцями, iнодi роз-ташованих у виглядi значних скупчень, конгломера-ттв (рис. 1).
Рис. 1. Конгломерат паличкоподiбних мiкобактерiй штаму M. bovis Valle КМ1ЕВ-9КМ
У цигоплазмi деяких клiтин помгтш MiKporpany-ли та вакуоле OKpeMi мiкpoгpaнyли у певних випадках утворюють мaкpoгpaнyли, як1 досягають по po3Mipy дь aмегpy баш^альних клiтин, внаслвдок чого yтвopю-сться неpiвнa пoвеpхня останн1х, е клпини з пеpетяж-ками та мiжклiтинними тяжами. На пoпеpечних та по-вздoвжнiх зpiзaх у деяких клпинах дoбpе видно нуклео-!д на piзних стадах poзвигкy та подшу. Всеpедиm кль тин пoмiтнi темш кpyглi зеpнa Муха (pис. 2-5).
Ультраструктура опромтених М. bovis. У пpепapaтaх iз мiкoбaктеpiй штаму BCG, о^омше-них дозами 0,00645-0,0645 Кл/кг (25-250 Р), м^о-стpyктypa м^обних клiтин aнaлoгiчнa кон^оль-ним фис. 2).
Хapaктеpнo, що у цих пpепapaтaх пеpевaжaють мiкpoбнi клiтини у сташ pепpoдyкцi! на piзних етапах подшу. У пopiвняннi з кон^олем бiльшa к1льк1сть подовжених пaличкoпoдiбних фopм у стадй' пoдiлy, що свщчить пpo тенденцш до iнтенсивнiшoгo poзви-тку та poзмнoження кyльтypи о^омшено! у дозово-му дiaпaзoнi 25-250 Р (0,00645-0,0645 Кл/кг). Одеp-жаш дaнi електpoннo! мiкpoскoпi! кopелюють з pе-зультатами пpoведених aвтopaми кyльтypaльних дос-
лвджень опромшених малими дозами мшобактерш, як1 сввдчать про прискорення !х репродуктивно! ак-тивностi. Встановлено, що мшроструктура мшобак-терiй туберкульозу тсля опромiнення низькими (стимулюючими) дозами ращацп не порушуеться, а актившсть репродукци зростае. В поле зору часто по-
трапляють клiтини в процес подiлу (рис. 3, 4)
Окрiм iзоморфного подiлу мiкобактерiй в окремих полях зору при мшроскопп опромшених культур вiдмiчали подiл брунькуванням (рис. 5).
Рис. 2. Мшобактерп BCG, опромшеш дозою у-промешв (0,039 Кл/кг (150 Р). У препарап переважають подовженi паличкоподiбнi мiкроорганiзми на рiзниx стадiяx подiлу. Збiльшення: 24000 (Умовш позначення: В - вакуол^ ЗМ - зерна Муха, МК - мшрокапсула, Г - гранули)
Рис. 3. M. scrofulaceum на середовищi Павловського (10 дiб культивування). Момент розходження дочiрнix клiтин у процес iзоморфного подiлу. Форма мшробних клiтин - ово!дна. Збiльшення: 30000
Рис. 4. M. intracellularae (штам 609) на середовищi Павловського (7 дiб культивування) шсля опромшення стимулюючою дозою (0,039 Кл/кг (150 Р) у-опромшення. 1зоморфний подiл. Збiльшення: 30000 (Умовш позначення: В - вакуол^ Н - нуклеовд)
Рис. 5. M. intracellularae (штам 609) на середовищi Павловського (7 дiб культивування) шсля опромiнення стимулюючою дозою (0,039 Кл/кг (150 Р) у - опромшення. (Умовш позначення: Брунькування - Б).
Збшьшення 14000
6. Обговорення результа^в дослiдження ультраструктури та ремродуктивноТ активностi атипових мжобактерш до та пiсля омромшювання
M. scrofulaceum у препаратах, що представлеш на знiмках (рис. 3, 6), мають вигляд довгих паличок i3 заокругленими кшцями. У порiвняннi з препаратами M. bovis (BCG), M. scrofulaceum у 1,3-1,5 разiв круп-rnmi, мають бiльш витягнуту, паличкоподiбну або веретеноподiбну форму. На поперечних та повздов-жнiх зрiзах у деяких мiкробних клiтинах помiтнi елементи клтгинно! оболонки: клiтинна стiнка, цито-плазматична мембрана та, ймовiрно, мшрокапсула.
Цитоплазма зерниста, мiстить гранули, вакуо-лi, контрастована iнтенсивнiше, нж нуклео!д (на пре-
паратах - електроннощтна). Характерною особли-вiстю дослiдженого мшрооргашзму е значне збшь-шення ядерно! субстанци (до розмiру, що переважае поперечний дiаметр мiкробу) та штенсивна вакуоль защя мiкробно! клiтини у результата чого М. зсто-/ы1асеиш набувають веретеновидно! форми. При цьо-му, ядерна субстанцiя, яка в штерфазний перiод рiв-номiрно розподшена у цитоплазмi, у перiод iзоморф-ного подiлу концентруеться у центральнш частинi клiтини, що готуеться до подшу.
У нуклео!дi клiтин, що дшяться, помiтнi окре-мi фрагмента хромосоми, яка спiралiзуеться. У деяких випадках веретеноподiбна форма збертаеться й у утворених пiсля под^ дочiрнiх клiтин (рис. 6).
Рис. 6. M. scrofulaceum на середовищi Павловського (10 дiб культивування). Мшробт клтгини веретеноподiбнi. Помiтний нуклео!д (ДНК що сmралiзуeться). Збiльшення: 30000 (Умовш позначення: Н - нуклео!д)
Шсля опромiнення дозами у - промешв у дiа-пазонi 0,00645-0,0645 Кл/кг (25-250 Р) усi клiтини культури М. scrofulaceuш набували сферично! або ово!дно! форми, на препаратах представлеш у вигля-дi темних округлих тш iз окремими нечисельними свгглими гранулами-включеннями (рис. 7, 8).
Мшробт клiтини на препаратах з опромшених М. scrofulaceuш електронно щiльнiшi, !х структурнi елементи, оболонка, нуклео!д не помпш. Навкруги темних, оптично щ№них (непрозорих для електрон-ного пучка) мшробних тiл на знiмках помггао свиль шi зони (можливо мшрокапсула).
Очевидно, так! змiни М. scrofulaceuш (прид-бання сфероподiбно!' форми, ущ№нення цитоплазми, пiдвищення електронно-оптично! щiльностi) тд дiею у - радiацi!' являють собою захисну, характерну саме для цього виду мiкроорганiзмiв реакцiю.
Морфолопчш особливостi ультраструктури опромiнених у - випромiнюванням М. scrofulaceuш пояснюють особливосп культивування цього виду мiкобактерiй. Визначено, що тшьки цей вид мшо-бактерiй не вiдповiдае прискореною репродукщею на опромiнення стимулюючими дозами радiацi!
(швидкiсть росту на живильних середовищах не змiнюеться у порiвняннi з неопромшеним контролем), та мае шдвищену стiйкiсть до високих доз опромшення (154,8 Кл/кг (600 тис. Р) i вище), якi пригшчують рiст i репродукцiю культур мшобак-терiй iнших видiв.
Рис. 7. M. scrofulaceum на середовищi Павловського (10 дiб культивування) пiсля опромшення дозою у-радiацi! 0,0516 Кл/кг (200 Р). Збiльшення: 7000
Рис. 8. M. scrofulaceum на середовищi Павловського (10 дiб культивування) шсля опромiнення дозою у-радiацп 0,0516 Кл/кг (200 Р). Збiльшення: 30000
У препаратах M. intracellularae представлен мшробт клiтини у поперечних та повздовжшх зрiзах на рiзних стадиях росту та розвитку (рис. 4, 5, 9).
Форма мiкроорганiзмiв паличкоподiбна, ви-тягнута. Чiтко помiтнi структурш елементи: кль тинна оболонка (з цитоплазматичною мембраною), цитоплазма з гранулами та включеннями. Шар ци-топлазми, що прилягае до клiтинноï стшки - елек-тронно-щiльний (на препаратах - темний), зернистий, мютить рибосоми та мiкрогранули. Цитоплазма у центральнш частинi мiкобактерiй - свь тла. У бiльшостi мшробних клiтин, представлених на препаратi (рис. 9), поминий нуклеоïд (у якому метиться ДНК мiкобактерiï). У залежносп вiд го-товностi мiкробноï клггини до под^ нуклеоïд мае рiзну форму та розмiр.
Рис. 9. M. intracellularae на середовiщi Павловського (7 дiб культивування) пiсля опромшення стимулюючою дозою (0,039 Кл/кг (150 Р) у-промешв. Помiтно хромосому у виглядi згорнутого тяжа. Збiльшення: 25000
(Умовш позначення: Н - нуклеощ)
У препаратах з опромiнених стимулюючими дозами y-випромiнювання M. intracellulare переваж-ають мiкробнi кл1тини у процеа репродукцп ^зо-морфний подiл та брунькування рис. 4, 5). У процеа iзоморфного подiлу нуклео!д та цитоплазма материн-сько! кл1тини рiвномiрно розподiляються мiж дочiрнiми клiтинами (рис. 4). При брунькуванш ввд материнсько! кл1тини вiдокремлюеться перетяжкою тiльки незначна частина цитоплазми з фрагментом ядерно! субстанцп (рис. 5).
Переважання мшробних клiтин у стадiй репродукцп у препаратах, опромiнених стимулюючими (0,00645-0,0645 Кл/кг (25-250 Р) дозами ращаци, сввдчить про прискорення процесiв розмноження та розвитку.
6. 1. Ультраструктура опромшених сте-рилiзуючими дозами мiкобактерiй
При дослвдженш препаратiв M. bovis, M. scrofulaceum, M. intracellularae, опромшених у-випромь нюванням у дозах 154,8-206,4 Кл/кг (600-800 тис. Р), встановлено, що кл1тини мiкобактерiй при таких дозо-вих навантаженнях втрачають чптасть обрису, набува-ють розмитi контури, обезбарвлену цитоплазму, яскра-во виражену деструктивну зернистiсть (велик1 зерна), ввдзначаеться частковий розпад оболонки (рис. 10-12).
Деяю кл1тини М. scrofulaceum набувають змше-но1', нетипово!' форми (рис. 12). Описат змiни сввдчать про дегенеративт процеси, як1 призводять до загибел1 мiкробних кл1тин вщ високих доз радiацi! у результат денатураци нуклешових кислот та бiлкiв.
Рис. 10. M. Bovis (BCG) на середовищi Павловського шсля опромшення стерилiзуючою дозою (154,8 Кл/кг (600 тис. Р). Млкробт клггини втрачають читасть обрисiв структурних елементiв.
Збтшення: 25000
Рис. 11. M. intracellularae на середовищi Павловсько-
го (7 дiб культивування) пiсля опромiнення стерилiзуючою дозою у - опромiнення (206,4 Кл/кг (800 тис. Р). У цитоплазмi - атипова, деструктивна зернистють. Збшьшення: 30000 (Умовнi позначення: ДЗ - деструктивна зернистють)
Одержат результата вивчення мшроструктури M. bovis й атипових мшобактерш вiдповiдають спо-стереженням iнших дослiдникiв [14]. Вiдзначаeться значний полiморфiзм культур. У цитоплазмi клтшн помiтно зернистiсть, утворену зернами Муха, вакуолi мiкрогранули та макрогранули, яю по розмiру дося-гають дiаметру бактерiальних клiтин. Утворень, якi б нагадували спори не спостерiгали, що вщповщае за-гальноввдомим фактам.
1снування спорово! форми збудника туберку-льозу повшстю заперечуеться [8, 11]. Згадаш науковцi вважають, що деяю мшобактери можуть розмножува-тись шляхом утворення "продуктивних тшець", умовно названих "спорами". По способу утворення та бюлоп-чному сенсу "спори" або "продуктивно тшьця" мгкобак-
терш абсолютно рОзняться ввд ендогенних спор бакте-рш. Морфолопчно вони не ввдрОзняються вод вегетати-вних форм, нестшш до факторОв впливу довкшля.
Рис. 12. M. scrofulaceum на середовищi Павловського
(10 дiб культивування) пiсля опромшення стерилiзуючою дозою у - опромшення (206,4 Кл/кг (800 тис. Р). Форма мшробних клггин нетипова для даного виду мшобактерш Помiтнi ущшьнення цито-плазми з утворенням крупно- гранулярних структур [КС]. Збiльшення: 33000
При електронномшроскошчних дослвдженнях встановлено, що ультраструктура M. bovis та атипо-вих-нефотохромогенних мшобактерш (M. intracellularae) шсля опромшення гамма-випрмiнюванням у дозах 0,00645-0,0645 Кл/кг (25-250 Р) не зм^ють-ся, проте у препаратах переважають мiкробнi клiтини у процеа подiлу (iзоморфного або брунькуванням).
Скотохромогенш мiкобактерiï (М. scrofulaceum) мають морфо-функцюнальш особливостi. У не-опромiнених культурах переважають мiкробнi клии-
ни, характерноï веретеноподiбноï форми. Шсля опромшення стимулюючими дозами у-випромiню-вання M. scrofulaceum набувають сферичноï форми та значноï електронноï щiльностi цитоплазми (стають непроникливими для електронного випромiнювання), що, на думку авторiв, i зумовлюе & значну стiйкiсть до ди iонiзуючоï радiацiï.
Мiкобактерiï бичачого виду та атиповi, опро-мшеш дозами 154,8 Кл/кг (600 тис. Р) i вище, набувають дегенеративних змш, що призводить до втрати культурою здатностi до репродукцп.
7. Висновки
1. Ультраструктура M. bovis i атипових нефо-тохромогенних (M. intracellularae) шсля опромшення
дозами у-ращацп в дiапазонi 0,00645-0,0645 Кл/кг (25-250 Р) не змiнюeться, проте вiдмiчено стимулю-ючий вплив невеликих доз радiацiï на ïx репродукти-вну активнiсть - переважають мшробш клiтини у процесi подiлу Изоморфного або брунькуванням).
2. Скотоxромогеннi мшобактерп (М scrofulaceum) пiсля опромшення дозами у - промешв у дiапа-зонi 0,00645-0,0645 Кл/кг (25-250 Р) змшюють вере-теноподiбну форму на сферичну або овоïдну та мають значну електронно-оптичну щ1льнсть цитоплазми, що визначае ïx значну стшкють до д11 радiацiï.
3. Доза, за яко1' M. bovis та атиповi мiкобактерiï набувають дегенеративних змш, що призводять до репродуктивно1' загибелi культур - ввд 154,8 до 206,4 Кл/кг (600-800 тис. Р).
Л^ература
1. Фещенко, Ю. I. Погляд на проблему боротьби з туберкульозом в Укра!т [Текст] / Ю. I. Фещенко // Укра!нський пульмонологiчний журнал. - 2016. - № 3. - С. 5-10. - Режим доступу: http://lib.inmeds.com.ua:8080/jspui/handle/lib/3458
2. Fujiwara, P. I. Editorial Commentary: Why It Is Important to DistinguishMycobacterium bovisas a Causal Agent of Human Tuberculosis [Text] / P. I. Fujiwara, F. Olea-Popelka // Clinical Infectious Diseases. - 2016. - Vol. 63, Issue 5. - P. 602-603. doi: 10.1093/cid/ciw374
3. Woodruff, R. S. Y. The US National Tuberculosis Surveillance System: A Descriptive Assessment of the Completeness and Consistency of Data Reported from 2008 to 2012 [Text] / R. S. Yelk Woodruff, R. H. Pratt, L. R. Armstrong // JMIR Public Health and Surveillance. - 2015. - Vol. 1, Issue 2. - P. e15. doi: 10.2196/publichealth.4991
4. Устшов, О. В. МОЗ Укра!ни поввдомляе по розроблення концепцй программ протидп туберкульозу [Електронний ресурс] / О. В. Устшов // Украшський медичний часопис. - 2017. - Режим доступу: http://www.umj.com.ua/article/104403/ moz-ukrayini-povidomlyaye-po-rozroblennya-kontseptsiyi-programi-protidiyi-tuberkulozu
5. Кундiев, Ю. I. Професшт шфекцшт хвороби [Текст] / Ю. I. Кундiев, М. А. Андрейчин, А. М. Нагорна, Д. В. Ва-ривончик. - Ки!в: ВД «Авщена», 2014. - 529 с.
6. Lan, Z. Treatment of human disease due toMycobacterium bovis: a systematic review [Text] / Z. Lan, M. Bastos, D. Men-zies // European Respiratory Journal. - 2016. - Vol. 48, Issue 5. - P. 1500-1503. doi: 10.1183/13993003.00629-2016
7. Мельник, В. М. Хiмiорезистентний туберкульоз: поширешсть та профшь стшкосп мжобактерш туберкульозу до антимiкобактерiальних препаратш [Текст] / В. М. Мельник, I. О. Новожилова, В. Г. Матусевич, А. М. Приходько, I. В. Бу-шура // Украшський пульмонолопчний журнал. - 2013. - № 3. - С. 19-23.
8. Кассич, Ю. Я. Туберкулез животных и меры борьбы с ним [Текст] / Ю. Я. Кассич, А. Т. Борзяк, А. Ф. Кочмарский и др.; под ред. Ю. Я. Кассича. - Киев: "Урожай", 1990. - 304 c.
9. Tarekegn, B. G. Factors affecting the frequency of lipid body positive tubercle bacilli in human sputum [Text]: Doctoral Theses / B. G. Tarekegn. - Leicester, 2013. - 310 p. - Available at: http://hdl.handle.net/2381/28630
10. Стегнш, Б. Т. Визначення природи реакцш на туберкулш у велико! рогато! худоби [Текст] / Б. Т. Стегнш, А. I. Завгороднш, М. В. Калашник // Ветеринарна медицина. - 2014. - № 99. - С. 86-89.
11. Кассч, В. Ю. Мшливють мжобактерш, етзоотолопчний мониторинг, засоби i заходи боротьби з туберкульозом тварин в умовах радiацiйного впливу [Текст]: дис. ... д-ра. вет. наук / В. Ю. Касач. - Харкiв, 2004. - 408 с.
12. Блащук, В. Ввиживання (адаптогеннiсть) мiкобактерiй у вiдходах тваринництва за впливу електромагнiтного опром1нення [Текст] / В. Блащук // Науковий вюник ЛНУВМБТ iменi С. З. Гжицького. - 2015. - Т. 17, № 3 (63). - С. 130-133.
13. Моюеенко, Т. М. Визначення необхвдних режитв ультрафюлетового опромiнювання, якi запобiгають виживан-ню Mycobacterium tuberculosis та перетворенню !х в L-форми [Текст] / Т. М. Моюеенко, А. Ю. Волянський, Г. О. Ковальова // Аннали Мечниковського !нституту. - 2015. - № 1. - С. 60-65.
14. Jeevan, A. Ultraviolet radiation reduces resistance to Mycobacterium tuberculosis infection in BCG-vaccinated guinea pigs [Text] / A. Jeevan, A. K. Sharma, D. N. McMurray // Tuberculosis. - 2009. - Vol. 89, Issue 6. - P. 431-438. doi: 10.1016/j.tube.2009.09.004
15. Салига, Ю. Т. Електронна мжроскотя бiологiчних об'ектiв [Текст] / Ю. Т. Салига, В. В. Сштинський. - Льв1в, 1999. - 152 с.
16. Li, Z. Industrial applications of electron microscopy [Text] / Z. Li. - CRC Press, 2002. - 644 p. doi: 10.1201/ 9780203910306
17. Морфоогическая диагностика. Подготовка материала для гистологического исследования и электронной микроскопии [Текст] / под ред. Д. Э. Коржевского. - СПб.: СпецЛит, 2017. - 127 с.
Дата надходження рукопису 26.09.2017
Касач Володимир Юршович, доктор ветеринарних наук, професор, кафедра ешзоотологп та паразитологи, Сумський нацюнальний аграрний ушверситет, вул. Г. Кондратьева, 160, м. Суми, Укра!на, 40021 E-mail: kassich_v_u@ukr.net
Ушкалов Валерш Олександрович, доктор ветеринарних наук, професор, Укра!нська лабораторiя якосп i безпеки продукци АПК, Нацiональний унiверситет бiоресурсiв i природокористування Укра!ни, вул. Геро!в Оборони, 15, м. Ки!в, Укра1на, 03041 E-mail: ushkalov63@gmail.com
Волосянко Олена Володимирiвна, доктор ветеринарних наук, старший науковий сшвробггаик, Украш-ська лаборатория якостi i безпеки продукци АПК, Нацiональний унiверситет бюресурав i природокорис-тування Украши, вул. Геро!в Оборони, 15, м. Кшв, Украша, 03041 E-mail: lybenko55@gmail.com
Левченко Анна Tp^opiBHa, кандидат ветеринарних наук, кафедра фiзiологii, бiохiмii та шкробюлоги, Одеський державний аграрний унiверситет, вул. Пантелеймошвська, 13, м. Одеса, Украша, 65012 E-mail: AnnLevchenko22.12@gmail.com
Байдевлятов Юрш Анварович, кандидат ветеринарних наук, доцент, кафедра ешзоотологи та паразитологи, Сумський нацiональний аграрний унiверситет, вул. Г. Кондратьева, 160, м. Суми, Украша, 40021 E-mail: yurbayd@ukr.net
Ребенко Галина 1вашвна, кандидат ветеринарних наук, доцент, кафедра ешзоотологи та паразитологи, Сумський нацюнальний аграрний ушверситет, вул. Г. Кондратьева, 160, м. Суми, Украша, 40021 E-mail: rebenkogi@ukr.net
Головко Валерш Олексшович, доктор ветеринарних наук, професор, кафедра ешзоотологи ветеринарного медеджменту, Харшвська державна зооветеринарна академiя, вул. Академiчна, 1, смт. Мала Дани-ловка, Харшвсько1' обл., 62341 E-mail: epizootology@hdzva.edu.ua
Касмч Олексiй Володимирович, асшрант, кафедра епiзоотологii ветеринарного медеджменту, Харшвська державна зооветеринарна академiя , вул. Академiчна, 1, смт. Мала Даниловка, Харшвсько1' обл., 62341, Завщувач лабораторii, Лабораторiя ветеринарно-санiтарноi експертизи на ринку, м. Люботин, Ха-ркiвськоi областi E-mail: asot.alex@yandex.ua
