Дослідження остеоіндуктивних властивостей емалевих матричних протеїнів в експерименті Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

81

81

«1нноваци в стоматологи», № 3, 2015

МАТЕР1АЛИ НАУКОВО-ПРАКТИЧНО1 КОНФЕРЕНЦП «КЛ1ТИННА ТЕРАП1Я I ТКАНИННА Б1О1НЖЕНЕР1Я В СТОМАТОЛОГИ 17-19 ВЕРЕСНЯ 2015 РОКУ

УДК: 616.314:612.084

Г. Ф. БЫоклицька1, д. мед. н., Л. М. Панченко2, к. мед. н., Ю. €. Браун 1

Национальна медична академш тслядипломно! освгги теш П. Л. Шупика1 1нститут травматологй' i ортопедй' НАМН Украши2

ДОСЛ1ДЖЕННЯ ОСТЕО1НДУКТИВНИХ ВЛАСТИВОСТЕЙ ЕМАЛЕВИХ МАТРИЧНИХ ПРОТЕ1Н1В В ЕКСПЕРИМЕНТ1

Вступ. Дослщженнями останнiх десятилiть в регенераторнiй пародонтологи показано, що досягнути регенераци тканин пародонта можли-во при використанш емалевих матричних проте-1'шв (ЕМП) [2,3,5-8]. Чисельнi дослiдження свщ-чать про участь стромальних кл^ин-попередниюв кiсткового мозку у регенераци пародонта [1,4,6,8]. Результати дослщжень Sculean A. et al. (2014) показали, що ЕМП сприяють та-кож регенераци юстково! тканини. Проте наяв-нiсть суперечливих даних щодо особливостей впливу ЕМП на остеогенш прогешторш клiтини, стало пiдставою для проведення даного дослi-дження.

Мета. Дослiдити стан остеогенних клiтин -попередникiв юсткового мозку людини (колош-еутворюючих одиниць фiбробластiв - КУОф) пiд впливом Emdogain ex vivo.

Матер1али i методи. Клонування КУОф кiсткового мозку проводили зпдно методики Фрiденштейна О. Я. (1973) [5] в модифшаци Ас-тахово! В.С. (1982) [1]. Пюля забору губчасто! юстково! тканини вщ пацieнтiв згiдно вимог методики, матерiал помiщали в контейнер з пожи-вним середовищем "199". Клонування клгшн здiйснювалось згiдно методики протягом 14 днiв.

Для дослщження прямого впливу ЕМП -Emdogain на клонування КУОф юсткового мозку людини було проведено 4 сери експерименпв ex vivo. I серiя - в культуральний флакон протягом посадки матерiалу до кл^ин кiсткового мозку додавали Pref-Gel. II серiя - з додаванням Pref-Gel i Emdogain. III серiя - з додаванням лише Emdogain. IV серiя - без додавання будь-яких зазначених препаратiв, контрольна серiя. В умовах проведених серiй експериментiв було вирощено 9 експериментальних та 6 контроль-них колонiй.

Регенераторний потенцiал юстково! тканини оцiнювали згiдно значення показника ефектив-ностi клонування КУОф (ЕККУОф) юсткового

мозку людини серед 105 ядровмiщуючих клiтин. ЕККУОф = K^N*105, де K - кiлькiсть колонш, якi виросли в культуральному флакош на 105 ступеш; N - кшьюсть клiтин, якi були посажеш в культуральний флакон. Статистичний аналiз проводили в програмi "Statistica".

Результати та ix обговорення. У I та II се-рiях експерименту в 6 випадках (66,7 %) при до-даваннi травильного гелю Pref-Gel та комбшаци Pref-Gel з Emdogain рют стромальних фiбробла-спв не спостерiгався, ЕККУОф = 0 при цьому були вирощеш поодиною стромальнi фiброблас-ти без утворення колонiй. В III сери експериме-нта рiст КУОф спостерiгався в ушх культураль-них флаконах (33,3 %) з додаванням Emdogain та кшьюсть нових колонш коливалась вщ 127 до 157, ЕККУОф склала 13,23-16,35. В середньому з ще! сери виросли 145 колонш КУОф з ЕККУОф 15,10±0,95 серед 105 ядровмщуючих клггин. В IV сери (контрольнш) рiст КУОф спостерпав-ся у всiх культуральних флаконах i кiлькiсть ко-лонiй склала вщ 69 до 152 з ЕККУОф вщ 7,1915,83. В середньому в цш сери виросли 120 колонш КУОф з ЕККУОф 12,48±1,24 серед 105 ядровмщуючих клггин. При порiвняннi аd oculus морфологи колонiй трьох основних (I, II, III) та контрольно! (IV) серш, рiзницi не встановлено.

Висновки. Emdogain (ЕМП) в порiвняннi з контрольною групою на 20,8 % шдвищуе кшь-кiсть КУОф у юстковому мозку, що вказуе на наявшсть остеоiндyктивних властивостей i мож-ливiсть використання при хiрyргiчних втручан-нях на пародонтi.

Список лтератури

1. Astachova V. S. Comperative characteristics of ksenofiders during cloning of human bone marrow stromal fibroblasts / V. S. Astachova // Bulletin of experiment, biology and medicine. - 1982. - №17. - Р. 11-113.

2. Bosshardt D. D. Biological mediators and periodon-tal regeneration: a review of enamel matrix proteins at the cellular and molecular levels. J Clin Periodontol. 2008;35 (Suppl. 8):87-105 doi:10.1111/j.1600-051IX.2008.01264.x.

© Бiлоклицька Г. Ф., Панченко Л. М., Браун Ю. С., 2015.

«Ыновацй в стоматологи», № 3, 2015

3. Bosshardt D. D. Hertwig's root sheath, enamel matrix proteins, and initiation of cementogenesis in porcine teeth. / D. D. Bosshardt, A. Nanci // Journal of Clinical Periodontol-ogy. - 2004. - №31. - P. 184-192.

4. Fridenstein A. J. Induction of bone tissue and osteogenous progenitor cells / A. J. Fridenstein, K. S. Lalikina. - Moskow, "Medicine". - 1973. - 223 p.

5. Osteopretegerin and receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand modulation by enamel matrix derivate in human alveolar osteoblasts. / C. Galli, G. M. Macaluso, S. Guizzardi [et al.] // Journal of Periodontology 2006. -№77. - P. 1223-1228.

6. In vitro biologic response of human bone marrow stromal cells to enamel matrix derivative / L. Guida, M. Annunziata, F. Carinci [et al.] // Journal of Periodontology 2007. -№78. - P. 2190-2196.

7. Soft-tissue wound healing following periodontal surgery and Emdogain applicaton / S. Hagenaars, PGH. Louwerse, M. F. Timmerman [et al.] // J Clin Periodontol. - 2004. - №31. - P. 850.

8. Hammaström L. Enamel matrix, cementum development and regeneration / L. J. Hammaström // Clin Periodontol. - 1997. - № 24. - P. 658-68.

УДК: 616.314:616.71-003.93

Г. Ф. БЫоклицька1, д. мед. н., Л. М. Панченко2, к. мед. н., Ю. €. Браун 1

Национальна медична академш шслядипломно! освгги iMeHi П. Л. Шупика1 1нститут травматологи i ортопедй' НАМН Украши2

ЗНАЧЕННЯ РЕГЕНЕРАТОРНОГО ПОТЕНЦ1АЛУ К1СТКОВО1 ТКАНИНИ ПРИ ПРОВЕДЕНН1 Х1РУРГ1ЧНИХ ВТРУЧАНЬ НА ПАРОДОНТ1

Вступ. Сучасш методики оперативних втручань на пародонт набули меншо. швазивносп i ма-ють на мет регенеращю пародонтальних тканин з одночасним максимальним збереженням ix рельефу [2-4]. Завдяки застосуванню сучасних зоноспецифiчниx шструмештв та приладiв в д^нщ наявно. пародонтально].' кишеш (ПК), стало можливим збереження юсткового контуру ПК, нехтуючи швелю-ванням юсткових стiнок [2]. Особливостi регенераторного потенщалу юстково. тканини вiдiграють важливе ктшчне значення при проведеннi xiрургiчниx втручань у хворих на генералiзований паро-донтит (ГП) та на еташ пiдготовки таких пацiентiв до iмплантацii.

Мета. Дослiдити регенераторний потенцiал юстково. тканини у хворих на ГП II, II-III ступеня.

Матер1али i методи. Дослiджено спонгiозну кiстку щелеп 25 хворих на ГП II, II-III ступеня (основна группа) та 10 пащенив з штактним пародонтом (група порiвняння), яку у основно. групи забирали тд час проведення клаптево. операци за методикою MIST (Corteüini P., Tonetti M., 2007, 2009), а у групи порiвняння - при екстракци вiтальниx iнтактниx зубiв за ортодонтичними та ортопедичними показаннями.

Клонування остеогенних клiтин-попередникiв (КУОф) кiсткового мозку щелеп проводили за методикою Фрщенштейна О. Я. (1973) - Астахово. В.С. (1982) [1], зпдно яко. губчасту кiсткову тканину помщали в контейнер з поживним середовищем "199" з подальшою обробкою протягом 14 днiв.

Регенераторний потенцiал юстково. тканини оцiнювали за величиною показника ефективносп клонування КУОф - ЕККУОф юсткового мозку людини серед 105 ядровмiщуючиx клiтин. ЕККУОф = К^КХ105, де K - кшьюсть колонiй, якi виросли в культуральному флаконi на 105 ступенi; N - кшь-кiсть клiтин, яю були посаженi в культуральний флакон. Статистичний аналiз проводили за програ-мою "Statistica".

Результати та ix обговорення. В результат проведених дослщжень було вирощено 33 експе-риментальних та 10 контрольних колонiй, що дозволило визначити вiдсутнiсть росту колонш КУОф кiсткового мозку (ЕККУОф =0) у 27 з 33 хворих на ГП II, II-III ступеня, тобто у 82 % вирощених культур. Рют колонш стромальних фiбробластiв з ефектившстю клонування 0,64±0,33 (стандартне вщ-хилення 1,86) серед 105 ядровмiсниx клiтин був визначений тшьки у 6 випадках (18 %).

З 10 культур пащентв групи порiвняння рiст колонiй КУОф виявлено у 20%, проте ефектившсть клонування склала 11,2±7,1 серед 105 ядровмiсниx клiтин (стандартне вiдxилення 15,9), що в 17,5 ра-зiв вище (Р<0,01) нiж у хворих на ГП.

Висновки. Регенераторний потенщал кютково. тканини хворих на ГП II, II-III у порiвняннi з ш-тактним пародонтом значно (Р<0,05) знижений, що вказуе на доцшьшсть розробок нових органозбе-рiгаючиx втручань з мiнiмiзацiею втрати природнix зубiв i пiдсиленням ошташзацп регенераторних можливостей кютково. тканини у хворих на ГП. Врахування особливостей регенераторного потенща