CC BY
33
© Стулкова В. С., Удод О. А., Соломон В. В. УДК 616.314.9-018
1Стулiкова В. С., 1Удод О. А., 2Соломон В. В.
ДОСЛ1ДЖЕННЯ ПСТОЛОГННОУ БУДОВИ ПУЛЬПИ ТИМЧАСОВИХ ЗУБ1В В ЕКСПЕРИМЕНТ1
1Донецький нацiональний медичний унiверситет ím. М. Горького МОЗ УкраГни (м. Краматорськ, Донецька область) 2Нацюнальний унiверситет бюресурЫв i природокористування УкраГни (м. Ки'Гв)
v stulikova@mail.ua
Дана робота е фрагментом НДР кафедри стоматологи № 1 Донецького нацiонального медичного уыверситету iм. М. Горького МОЗ Украши «Оптим^ зацiя сучасних пiдходiв до дiагностики, лiкування, профiлактики та реабтггацп пацiентiв i3 захворюван-нями оргаыв порожнини рота та щелепно-лицьово'| дiлянки» (№ державно'! реестраци 0116 U 004055).
Вступ. Гострi та хроычы форми пульпiту тимча-сових i постiйних 3y6iB е розповсюдженим усклад-ненням карiозного процесу у дтей рiзного вiку [4,7,8]. Пульпгг тимчасових зубiв складае вiд 30% до 40% вщ усiх стоматолопчних захворювань у дiтей i займае друге мюце пiсля неускладненого карiесу [13,15]. Пульпiт у дiтей часто мае безсимптомний перебщ тому рання дiагностика цього захворювання спричиняе певн труднощi. З iншого боку, проблема л^вання дано|' патологи вважаеться важливою, але залишаеться неповнiстю вирiшеною. Показником цього е достатньо значна ктькють ускладнень пiсля лiкування, а також вщсутнють експериментально та клiнiчно обфунтованих лiкувальних пiдходiв, якi б забезпечували прогнозовано позитивы довгостро-ковi результати, що, на жаль, не гарантован пiсля використання вже вiдомих методiв терапп [3,5,14]. У зв'язку з цим, доцтьним виглядае проведення морфолопчних дослiджень, якi б слугували певним пщфунтям для пошуку ефективних л^вальних методик щодо пульпiту тимчасових зубiв у дiтей.
Для проведення експериментального досл^ дження запалення пульпи обирають тварин, морфо-логiя оргаыв i тканин яких подiбна до людсько'|, тому найчастiше використовують щурiв та собак [1,12]. 1снують дан про те, що за використання м^атюр-них свиней також можливо вiдтворити процеси, якi вiдбуваються в органiзмi людини [10]. Але взагалi вiдсутня iнформацiя щодо нормально'1 структури пульпи тимчасових зубiв мiнiатюрних свиней та ха-рактерних змiн при ÏÏ гострому запаленнi.
Мета дослщження. Виявити морфолопч-нi особливостi структури пульпи тимчасових зубiв в'етнамськоÏ вислобрюхо'| свинi (Sus scrofa domesticus) у нормi та змiни, якi вщбуваються при моделюваннi гострого запалення травматичного походження.
Об'ект i методи дослщження. На проведення експериментального до^дження з використанням тварин було отримано дозвт комiсiÏ з бiоетики фа-
культету ветеринарно! медицини Нацiонального уы-верситету 6iopecypcÍB i природокористування Украши. Bci дослiди проводили з дотриманням вимог Конвенци Ради бвропи щодо захисту тварин (в тому чи^ звiльнення вiд спраги, голоду, недощання, дискомфорту, страху, болю, хвороб) та у вщповщ-ностi до вимог Закону Укра!ни «Про захист тварин вщ жорстокого поводження» та бвропейсько! комiсií щодо поводження з хребетними тваринами [9].
Для проведення експериментального досл^ дження було обрано 13 свиней вком 1 мiсяць, се-редня маса тiла тварин становила 6,66±0,75 кг У кожно! тварини використовували групу тимчасових рiзцiв (всього 52 зуба) та премолярiв нижньо! щеле-пи (всього 26 зубiв). У мiсячному вiцi корнi зубiв зна-ходилися в сформованому стан [2].
Пiд загальним знеболенням шляхом катетериза-ци вушно! вени тварини, яку проводили iз застосу-ванням препарату «Комбютрес» iз розрахунку 0,25 мл розчину на 1 кг маси тта та препарату «Бутом^ дор» у тому ж дозуванн [11], формували карiозну порожнину невеликого дiаметру 5 класу за Блеком у рiзцях та 1 класу в молярах нижньо! щелепи у межах бтяпульпарного дентину шароподiбним алмазним бором iз постiйним охолодженням дистильованою водою крапельним методом зi шприца, далi iз засто-суванням К-файла, робили перфора^ю порожнини зуба. Через тиждень, пiсля евтаназп тварини шляхом передозування препарата до зупинки дихання внутршньовенною Ы'ек^ею у вушну вену препаратом «Пропафол», вилучали блоки нижньо! щелепи. Отриман препарати фксували у 10% розчинi нейтрального формалЫу. Декальцинацiю проводили iз застосуванням 5% розчину мурашино! кислоти на дистильованм водi, зразки для видалення залиш-кiв декальцинуючо! сумш промивали проточною водою 24 години i заливали в целощин-парафш. Зрiзи препаратiв товщиною 7-15 мкм одержували за допомогою санного мiкротома iз застосуванням одноразових комерцiйних ножiв. Одержанi зрiзи зафарбовували гематоксилiном Карац та еозином [6]. Гiстопрепарати вивчали пщ мiкроскопом MCX 100LED виробництва фiрми Micros (Австрiя) при збтьшеннях вiд 50 х до 1000 х та фотографували за допомогою фотоапарату Canon EOS 550D.
Результати дослщжень та 'Гх обговорення. Пульпа Ытактних тимчасових рiзцiв в'етнамсько!
Рис. 1. Пульпа середньоТ частини кореня зуба в'етнамсько'Г мiнi-свинi: А — периферичний шар пульпи;
Б — промiжний шар пульпи;
В — центральний шар пульпи; 1 — тшо одонтобласта;
2 — вщросток одонтобласта; 3 — пучки колагенових волокон; 4 — слабо диференцшоваж попередники од-онтобластiв; 5 — дентин. Гематоксилш Карацi та еозин, х 400.
вислобрюхо! свин подтяеться на певнi шари, зо-крема, центральний, промiжний i периферичний. Периферичний шар пульпи складаеться iз розташо-ваних в декiлька рядiв одонтобластiв, мiж якими ви-являються пучки колагенових волокон. Вiн без чггко! границi переходить у тонкий промiжний шар, представлений слабо диференцмованими попередника-ми одонтобластiв рiзних розмiрiв i форми. Цi кгмтини мають рiзну ступiнь диференцiацiI, про що свiдчить !х рiзне ядерно-цитоплазматичне стввщношення (рис. 1). Центральний шар пульпи представлений пухкою волокнистою сполучною тканиною типово! будови. Вона мютить фiброцити та велику кiлькiсть пучюв колагенових волокон, якi орiентованi в рiзних напрямках, внаслiдок чого створюють досить щiльну й мiцну сггку. Мiж фiброцитами й пучками колагенових волокон знаходиться основна речовина. У цьому шарi пульпи проходять досить широк кровоносн ка-птяри, стiнка яких побудована з одного шару ендо-телiальних клiтин. Ц капiляри розгалужуються, утво-рюючи Ытку кровоносних судин, якi живлять пульпу. У напрямку до верхiвки зуба ктькють кровоносних капiлярiв у пульт зменшуеться. В дiлянцi шийки зуба бтьшють з них робить петлю й опускаеться до апкально! частини кореня зуба (рис. 2). Безпосе-редньо до периферичного шару пульпи прилягае дентин. Предентин представлений вузькою смуж-кою менш щтьно! тканини, а дентин - це досить широка смуга тканини високо! щтьност (iнтенсивно зафарбовуеться еозином), яка мае дещо смугас-тий вигляд. Останнм зумовлений наявнiстю велико! кiлькостi дентинових каналь^в, в яких розташованi вщростки одонтобластiв. У апiкальнiй частинi кореня зуба його порожнина поступово звужуеться й мае конусоподiбну форму. Пульпа апкально! частини каналу тимчасового зуба у площин гiстологiчного зрiзу займае невелику площу й не подтяеться на окремi шари.
У ходi гiстологiчного дослiдження стану пульпи тимчасових зубiв в'етнамсько! мiнi-свинi за екс-периментального пульпiту були встановлен змiни,
Рис. 2. Пульпа нижньоТ частини шийки зуба в'етнамсько'Г мЫ-свиш: 1 — пульпа; 2 — висхщне колiно кровоносного капiляру; 3 — петля кровоносного капiляру; 4 — низхщне колiно кровоносного капiляру. Гематоксилiн Карацi та еозин, х 100.
характеры для дано! патологи. У верхнм частин коронки зуба в дтянц створеного дефекту пере-важали альтеративнi змiни. Частина порожнини коронки, безпосередньо прилегла до перфорацмного отвору дентина, була порожньою (не мютила ыя-ких тканин). Центральний i частина периферичного шару пульпи тут був некротизований й просочений гемоглобшом зруйнованих еритроци^в. Реестру-вали виразну пролiферацiю фiбробластiв. У той же час, ктькють пучюв колагенових волокон в цм д^ лянцi пульпи була помiтно меншою в порiвняннi з контролем. Також виявляли вогнища некрозу одон-тоблас^в, у той час, як в шших дiлянках рееструва-лась пролiферацiя цих клiтин (рис. 3). Новоутворен одонтобласти ще не мали типово! мiкроскопiчно! будови, вони характеризувались помггно меншим об'емом цитоплазми та пперхромним, виразно ба-зофiльним ядром, яке, зазвичай, розташовувалось у центральна частин клiтини. Така реакцiя одон-
Рис. 3. Верхня частина коронки зуба в'етнамськоГ мЫ-свин за експериментального пульпiту: 1 — дентин; 2 — некротизована пульпа; 3 — пролiферацiя фiбробластiв у промiжному шарi пульпи; 4 — пролiферацiя одонтоблас-тiв у периферичному шарi пульпи; 5 — некроз одонто-блас^в у периферичному шарi пульпи.
Гематоксилш Карац та еозин, х 400.
Рис. 4. Центральний шар пульпи верхньоТ частини коре-ня зуба в'етнамсько'Г мiнi-свинi за експериментального пульшту: 1 — пролiферацiя фiбробластiв i iнфiльтрацiя клiтинами запалення; 2 — тяж!, побудоваш з ф!броблас-TiB; 3 — осередки набряку; 4 — розширений, переповне-ний кров'ю кровоносний кашляр. Гематоксилш Карац та еозин, х 100.
тоблас^в, на нашу думку, була проявом регенера-тивних процеЫв у вiдповiдь на пошкодження пульпи зуба. У дтянц шийки й апiкальноI частини кореня зуба мiкроскопiчнi змiни були дещо iншими. В центральному й промiжному шарах пульпи реестрували значне розширення й переповнення кров'ю крово-носних капiлярiв, виразну пролiферацiю фiброблас-тiв, значне потовщення пучкiв колагенових волокон та досить рiвномiрну й щтьну iнфiльтрацiю пульпи клiтинами запалення (моноцитами, нейтрофтами, лiмфоцитами й поодинокими еозинофтами) (рис. 4, 5). Мюцями реестрували тiснi контакти мiж рiз-ними клiтинами запалення (рис. 5) та вщносно ве-ликi вогнищевi скупчення лiмфоцитiв. Крiм того, в центральному шарi пульпи виявили осередки набряку рiзних розмiрiв i форми (рис. 4). Така реак^я iмунокомпетентних клiтин, на нашу думку, свщчила про вiдповiдь iмунноI системи на антигенне подраз-нення. Можливо, що пролiферацiя фiбробластiв i п-перпродукцiя пучкiв колагенових волокон виникали, як компенсаторно-пристосувний процес, спрямо-
Рис. 5. Центральний шар пульпи верхньоТ частини кореня зуба в'етнамськоГ мЫ-свиш за експериментального пульшту: 1 — товст пучки колагенових волокон; 2 — моноцит; 3 — сегментоядерний нейтрофш; 4 — лiмфоцит; 5 — контакт сегментоядерного нейтрофшу з моноцитом.
Гематоксилiн Карацi та еозин, х 400.
ваний на зменшення проникливостi пульпи з метою недопущення поширення патологiчного процесу в нижче розташован частини зуба.
Висновки. У результат дослiдження встанов-лено, що морфологiчна будова пульпи тимчасових зубiв вислобрюхо! в'етнамськоУ свин iдентична такiй тимчасових зубiв дитини, що створюе пiдстави для екстраполяци отриманих результатiв та визна-ння моделi гострого пульпiту тимчасових зубiв у цих тварин цiлком адекватною. Змши, що були виявленi при моделюванн гострого запалення в пульт, ств-падають iз вже вщомими даними щодо запалення пульпи тимчасових зубiв дитини. У зв'язку з цим, ви-вчення дiI медикаментозних засобiв, якi у подальшо-му можуть бути випробуванi для л^вання цього за-хворювання у тварини, створюватиме пщфунтя для розробки вщповщних рекомендацiI щодо дитини.
Перспективи подальших дослiджень. Пла-нуеться вивчення гiстологiчних змiн у пульпi пiсля застосування медикаментозних засобiв на основi мшералтриоксидагрегату та формокрезолу при го-строму запалены пульпи тимчасових зубiв в експе-риментi.
Лiтература
1. Адаптационные механизмы защиты обнаженной пульпы у крыс: к вопросу о биомоделировании острого и хронического пульпита / А. Гаджиев, А.В. Волков, И.И. Бобиченко, Е.К. Кречина, Г.Д. Капанадзе, Н.В. Станкова // Биомедицина. - 2013. — № 3. — С. 36-41.
2. Анатомия домашних животных / А.И. Акаевский, Ю.Ф. Юдичев, Н.В. Михайлов, И.В. Хрусталева; под редакцией А.И. Ака-евского. — М.: Колос, 1984. - 543 с.
3. Белик Л.П. Терапия хронического пульпита временных зубов у детей методом девитальной пульпотомии / Л.П. Белик, Л.В. Козловская, И.А. Вислович // Современная стоматология. — 2010. — № 1. — С. 59-60.
4. Бердник О.В. Основы законом1рност1 формування здоров'я дитячого населення, що проживае в регюнах з р1зною еколопчною ситуац1ею: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук: 14.02.01 / О.В. Бердник. - К., 2003. - 19 с.
5. Гажва С.М. Ошибки и осложнения, возникающие при лечении хронического пульпита временных зубов у детей / С.М. Гажва, Е.С. Пожиток, Г.В. Агафонова // Стоматология. — 2010. — № 2. — С. 7-8.
6. Горальський Л.П. Основи пстолопчно'У технки I морфофункцюнальш методи дослщження у норм1 та при патологи / Л.П. Горальський, В.Т. Хомич, О.1. Кононський. - Житомир.: «Полюся», 2011. - 288 с.
7. Данилевский Н.Ф. Пульпит / Н.Ф. Данилевский, Л.Ф. Сидельникова, Ж.И. Рахний. — К: Здоровье, 2003. - 168 с.
8. Денисова Е.Г. Клиническая эффективность витальной пульпотомии в зубах временного прикуса / Е.Г. Денисова, И.И. Соколова // Вюник стоматолог^'. Наук.-практ. журн. — Академ1я мед. наук УкраУни, Асоц1ац1я стоматолопв УкраУни. — Одесса. - 2010. - № 2. - С. 11-12.
9. Закон УкраУни про захист тварин вщ жорстокого поводження (Вщомост Верховно! Ради УкраУни (ВВР), 2006, № 27, ст. 230). — http://zakon0.rada.gov.ua/laws/show/3447-15.
10. Капанадзе Г.Д. Использование миниатюрных свиней в биомедицинских экспериментах / Г.Д. Капанадзе // Биомедицина. - 2006. — № 2. — С. 40-51.
11. Пламб Д.К. Фармокологические препараты в ветеринарной медицине / Д.К. Пламб, перевод с англ. Е.И. Осипова. — М.: Аквариум ЛТД, 2002. - 855 с.
12. Сирак С.В. Изучение морфологических изменений в пульпе зубов экспериментальных животных при лечении глубокого кариеса и острого очагового пульпита / С.В. Сирак, А.Г. Сирак, И.А. Копылова, А.К. Бирагова // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2011. — № 3. - С. 29-33.
13. Смоляр Н.1. Ураженють карieсом тимчасових зубiв у дггей дошктьного в^ м. Львова / Н.1. Смоляр, 1.С. Дубецька // УкраУнський стоматолопчний альманах. - 2004. - № 3-4. - С. 68-71.
14. Хоменко Л.А. Врачебные вмешательства в корневых каналах временных зубов. Часть 2: Как лечить? / Л.А. Хоменко, Н.В. Биденко, А.И. Зеленкова // Современная стоматология. - 2008. - № 2. - С. 100-107.
15. Sheiham A. Dental caries affects body weight, growth and quality of life in pre-school children / A. Sheiham // British Dental Journal. - 2006. - 201. - P. 625-626.
УДК 616.314.9-018
ДОСЛ1ДЖЕННЯ ПСТОЛОПЧНОТ БУДОВИ ПУЛЬПИ ТИМЧАСОВИХ ЗУБ1В В ЕКСПЕРИМЕНТ1 Стулшова В. С., Удод О. А., Соломон В. В.
Резюме. У робот1 представлен! дан1 щодо вивчення пстолопчно! структури пульпи в норм1 та змши, як1 вщ-буваються при моделюванн гострого запалення травматичного походження тимчасових зуб1в в'етнамсько! вислобрюхо! свин1. Було встановлено, що пстолопчна будова пульпи щентична таюй тимчасових зуб1в ди-тини, що створюе пщстави для екстраполяци отриманих результат1в та визнання модел1 гострого пульпггу тимчасових зуб1в у цих тварин цтком адекватною. Змши, що були виявлен при моделюванн гострого запалення в пульп1, також сп1впадають 1з вже в1домими даними щодо запалення пульпи тимчасових зуб1в ди-тини. У зв'язку з цим, вивчення дм медикаментозних засоб1в, як1 у подальшому можуть бути випробуван для л1кування цього захворювання у тварини, створюватиме пщфунтя для розробки вщповщних рекомендацп щодо дитини.
Ключовi слова: лабораторн тварини, тимчасов1 зуби, пульпа, пстолопчна будова, експериментальний пульпт
УДК 616.314.9-018
ИЗУЧЕНИЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО СТРОЕНИЯ ПУЛЬПЫ ВРЕМЕННЫХ ЗУБОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Стуликова В. С., Удод А. А., Соломон В. В.
Резюме. В работе представлены данные изучения гистологического строения пульпы в норме и изменений, которые происходят при моделировании острого воспаления травматического происхождения во временных зубах вьетнамской вислобрюхой свиньи. Было установлено, что гистологическое строение пульпы идентично строению пульпы временных зубов у детей, что служит обоснованием для определения модели острого пульпита временных зубов данных животных абсолютно адекватной. Изменения, которые были выявлены при моделировании острого воспаления в пульпе, также совпадают с уже известными данными о воспалении в пульпе временных зубов у детей. В связи с этим, изучение действия медикаментозных препаратов, которые впоследствии могут быть испытаны для лечения данного заболевания у животных, смогут служить обоснованием применения их у детей.
Ключевые слова: лабораторные животные, временные зубы, пульпа, гистологическое строение, экспериментальный пульпит.
UDC 616.314.9-018
HISTOLOGICAL RESEARCH STRUCTURE OF THE PULP IN PRIMARY TEETH IN EXPERIMENT Stulikova V. S., Udod O. A., Solomon V. V.
Abstract. Acute and chronic forms of pulpitis of primary and permanent teeth are common complication of caries process among children of all ages. Pulpitis of primary teeth accounts for 30% to 40% of all dental diseases among children and comes second after uncomplicated caries. In the literature, a small amount of research deals with the study of changes in acute inflammation of the pulp of animals in order to further study the impact of drugs on the possibility of its regeneration.
Aim of research. To study the morphological structure of the pulp in primary teeth of Vietnamese pot-bellied pig and the changes that occur when simulating acute pulpitis.
Research objects and methods. For the experimental study 13 pigs aged 1 month were selected, the average weight of animals was 6.66 ± 0.75 kg. In each group of animals primary incisors (total 52 teeth) and mandibular premolars (total 26 teeth) were involved in the study. At the age of one month the roots of teeth were fully grown. The perforation of pulp chamber was performed under general anesthesia using the drug «Kombistres» and «Buto-midor» by means of ear vein catheterization of the animal. Jaw parts were removed after euthanasia of the animals by means of ear vein catheterization using the preparation «Propafol». The extracted specimens were fixed in 10% neutral formalin solution and decalcification was performed. The resulting cuts were colored by hematoxylin Carazzi and eosin.
The results of the research and their discussion. It was found that the normal structure of dental pulp and peri-odont of Vietnamese pot-bellied pig is not different from the structure of human pulp.
In the process of studying the changes during acute pulp inflammation it was found that the central and peripheral layers of pulp were necrotic and impregnated with hemoglobin and destroyed red blood cells. Distinct fibroblast proliferation was registered. Number of collagen bundles in this pulp area was significantly lower compared with the control specimen. Some areas of odontoblasts' necrosis were detected, while in other areas proliferation of these cells has been registered. Newly-formed odontoblasts did not have the typical microscopic structure yet — they were characterized by a significantly smaller amount of cytoplasm and hyperchromic distinctly basophilic nucleus, which usually was located in the center of the cell. Such reaction of odontoblasts was a manifestation of regenerative processes in response to damage to the tooth. In the area of the neck of the tooth root and pulp canal microscopic changes were somewhat different. In central and intermediate layers of pulp a significant distension and overflow of blood capillaries, distinct fibroblast proliferation, a significant thickening of collagen bundles and fairly uniform and dense infiltration of the pulp by inflammatory cells were registered. In some areas close contacts between inflammatory cells and relatively large focal accumulations of lymphocytes were registered. In addition, the central layer of pulp cells revealed edema of various sizes and shapes. This reaction of immune competent cells, in our view, is indicative of immune response to antigenic stimulation. The proliferation of fibroblasts and collagen fiber bundles hyperproduction emerged as compensatory and adaptive process aimed at reducing the permeability of the pulp in order to prevent the spread of the pathological process to the deeper areas of the tooth.
Conclusions. The study found that the histological structure of the pulp of primary teeth of Vietnamese potbellied pigs is identical to that of the primary teeth of a child, which fact gives grounds for the extrapolation of the obtained results and recognizing that the model of acute pulpitis of primary teeth of these animals is quite adequate. The changes found when simulating acute inflammation in the pulp coincide with already known data on inflammation of primary teeth pulp of a child. In this regard, the study of the action of medications that can be further tested for the treatment of diseases of animals, creates basis for developing appropriate recommendations in relation to a child.
Keywords: laboratory animals, temporary teeth, pulp, histology, experimental pulpitis.
Рецензент — проф. ГасюкА. П.
Стаття надшшла 03.10.2016 року
