Доклинические экспериментальные исследования аллерготропинов из клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

s

Доклинические экспериментальные

I-

исследования аллерготропинов ф из клещей домашней пыли

л

Федосеева В.Н., Камышева В.А., Мартынов А.И., Миславский О.В.,

Dermatophagoides pteronyssinus

^ Манько В.М., Лункина Е.В.,\Кравченко С.А~

ФГБУ«ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России, Москва

L.

a Preclinical experimental studies of

о

allergotropines obtained from house dust mite Dermatophagoides pteronyssinus

Fedoseyeva V.N., Kamysheva V.A., Martynov A.I., Mislavskiy O.V.,

Man'ko V.M., Lunkina E. V. Kravchenko S.A.

Federal State Budgetary Institution « State Research Center Institute oflmmunobiotogy» Federal Medical and Biological Agency of the Russian Federation, Moscow

Исследования посвящены сравнительной оценке (в эксперименте на мышах и крысах) аллергенных и иммуногенных свойств водносолевого экстракта (ВСЭ) исходного аллергена из Dermatophagoides pteronyssinus и его модифицированной формы - аллерготропина (AT) Dermatophagoides pteronyssinus. В тесте пассивной кожной анафилаксии по Овери показано, что стимулирование lgE-ответа у мышей на ВСЭ Dermatophagoides pteronyssinus было интенсивнее, в сравнении с показателями специфического lgE-ответа на введение животным сенсибилизирующих доз AT Dermatophagoides pteronyssinus (р < 0,05), что свидетельствует о снижении аллергенных свойств ВСЭ в процессе его модификации до формы аллерготропина Dermatophagoides pteronyssinus. Сравнительное изучение иммуногенных свойств указанных препаратов по результатам иммуноферментного анализа (ИФА), позволяющим судить об уровне синтеза специфических lgG-антител, выявило более выраженные lgG-стимулирующие свойства модифицированного препарата AT Dermatophagoides pteronyssinus в сравнении с препаратом ВСЭ Dermatophagoides pteronyssinus (р < 0,05), после проведения исследуемыми препаратами гипосенсибилизации животным (мышам), сенсибилизированным ВСЭ. Показатели специфического lgE-ответа, после проведения гипосенсибилизации мышам аллерготропином Dermatophagoides pteronyssinus, сенсибилизированных ранее ВСЭ, свидетельствуют о его способности уменьшать синтез го-моцитотропных (IgE) антител. Таким образом, полученные результаты дают возможность сделать вывод о преимуществе модифицированного аллергена - AT Dermatophagoides pteronyssinus в сравнении с исходной (немодифицированной) формой ВСЭ по иммуноген-ной характеристике, связной со стимуляцией синтеза специфических lgG-пблокирующих» антител, способных конкурировать с lgE-ответом. Разработана оптимальная схема введения гипосенсибилизирующих доз аллерготропина Dermatophagoides pteronyssinus в организм сенсибилированного животного, позволяющая стимулировать интенсивный синтез lgG-пблокирующих» антител.

Ключевые слова: аллерготропины, клещи домашней пыли, Dermatophagoides pteronyssinus, аллергенные и иммуногенные свойства.

Библиографическое описание: Федосеева В.Н., Камышева В.А., Мартынов А.И., Миславский О. В., Манько В. М., Лункина Е.В., Кравченко С. А. Доклинические экспериментальные исследования aллepгoтpoпинoвизклeщeйдoмaшнeйпылиDermatophagoidespteronyssinus//Биoпpeпapaты. -2012.-№ 1. -С. 42-47.

The studies focus on comparative evaluation (in mice and rats) of allergenic and immunogenic properties of salt-water extract (SWE) of the original allergen from Dermatophagoides

Э

ПРЕПАРАТЫ

f-\

pteronyssinus and its modified form - allergotropine (AT) Dermatophagoides pteronyssinus. The passive cutaneous anaphylaxis test (Ovary) shows that stimulating IgE-response in mice bySWE Dermatophagoides pteronyssinus was more intensive compared to the indicatiors of specific IgE-response to the sensibilizating doses of AT Dermatophagoides pteronyssinus (p <0.05) in animals, which confirms the decrease of allergenic properties of SWE in the process of its modification up to allergotropine Dermatophagoides pteronyssinus. A comparative study of the mentioned medicines immunogenic properties, based on the results of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), which allows to estimate the level of synthesis of specific IgG-antibodies, revealed significant IgG-stimulating properties of the modified AT Dermatophagoides pteronyssinus compared with SWE Dermatophagoides pteronyssinus (p <0.05), after desensitizating animals (mice), sensitized by SWE. Indicators of specific IgE-response after desensitization of mice by allergotropine Dermatophagoides pteronyssinus, formerly sensitized by SWE, confirm its ability to reduce the synthesis of homocytotropic (IgE) antibodies. Therefore, the obtained results demonstrate the advantages of the modified allergen - AT Dermatophagoides pteronyssinus in comparison with the original (unmodified) form SWE, in terms of immunogenic characteristics, associated with stimulating the synthesis of specific lgG-«blocking» antibodies, which are able to compete with IgE-response. An optimal dosage regimen was developed for administrating hyposensitising doses of allergotropine Dermatophagoides pteronyssinus in a sensibilized animal's body which allows to stimulate intense synthesis of lgG-«blocking» antibodies. Key words: allergotropines, house dust mite, Dermatophagoides pteronyssinus, allergenic and immunogenic properties.

Bibliographic description: Fedoseyeva V.N., Kamysheva V.A., MartynovA.I., Mislavskiy O.V., Man'ко V.M., Lunkina E.V. Kravchenko S.A. Preclinical experimental studies of allergotropines obtained from house dust mite Dermatophagoides pteronyssinus // Biopreparats (Biopharmaceuticals). -2012. -№1. P. 42-47.

\_J

Для корреспонденции:

Камышева В.A. - ведущий научный сотрудник ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России. Адрес: ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России 115478, Москва, Каширское шоссе, д. 24, корп. 2 e-mail: [email protected]

Статья поступила 14.01.11 г., принята к печати 01.11.12 г.

Известно, что клещи, находящиеся в домашней пыли, являются одним из ведущих аллергенных компонентов в ее составе. Аллергены из клещей домашней пыли входят в состав диагностических панелей для иммуноферментного анализа (ИФА) в качестве самостоятельных аллергенов. По данным ВОЗ ежегодно до 20% населения Земли обращаются в лечебные учреждения с уже сформировавшимися клиническими проявлениями аллергии к клещам. В связи с этим потребность в создании активного лечебного препарата для аплергенспецифической иммунотерапии (АСИТ) больных с аллергией к клещам домашней пыли весьма высока. ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России располагает опытом создания аллерготропи-нов на основе комплекса аллергенного компонента и иммуномодулятора полиоксидония [5]. Сотрудниками Института иммунологии в соответствии с указанной технологией был разработан модифицированный препарат - аллерготропин из клещей Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз и полиоксидония. В результате предварительных исследований было показано, что аллерготропин Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз является нетоксичным препаратом (по тесту острой токсичности),

обладает специфической активностью, соответствует критерию подлинности. В рамках данного исследования, на этапе подготовки к работе нами решены задачи методического характера, в частности, определен вид экспериментальных животных для проведения исследований. Также подготовлены необходимые условия для выявления антител к аллерготропину и водносо-левому экстракту методом ИФА: определены условия сорбции исследуемых препаратов, степень активности планшетов и другие параметры. Проведенная подготовительная работа дала возможность спланировать и осуществить цель и этапы исследования.

Цель настоящей работы - проведение доклинических экспериментальных исследований по изучению аллергенных и иммуногенных свойств модифицированного комплексного препарата ал-лерготропина (АТ) Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз в сравнении с водносолевым экстрактом (ВСЭ) Оегта(ор11адо1с1ез р(егопузз1пиз.

Материалы и методы

При проведении экспериментальных доклинических испытаний аллерготропинов следовали требованиям

€

изложенным в статье «Проблема и стандартизация аплерговакцин» [4]. Эксперименты проведены на 70 мышах (гибриды СВА><С57В1/6) Р1, самки весом 20 г) и крысах (породы Ш^аг, самках весом 200 г) из питомника «Столбовая» ГУНЦБТ РАМН. В работе использовали препараты АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз и ВСЭ Оегта(орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз, приговленные на физиологическом растворе. Иммуноферментный анализ проводили по методу, указанному в монографии «Диагностические и лечебные аллергены» [14].

На первом этапе работы было проведено исследование АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз и ВСЭ аллергена Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз по их способности инициировать образование гомоцитотропных (1дЕ) антител, характеризующей аллергенные свойства изучаемых препаратов.

Для проведения сенсибилизации животные были разделены на 3 группы:

1) ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз (45 мышей);

2) АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз (15 мышей);

3) контрольная группа (10 мышей).

Схема введения препаратов сравнения и основы (растворяющей жидкости):

• животным в группах 1 и 2 сделаны инъекции исследуемых препаратов в физиологическом растворе (в расчете 10 мкг/мышь) с неполным адъювантом Фрейнда (1:1) внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл, 3 раза с интервалом в 7 дней;

• животным в контрольной группе сделаны инъекции физиологического раствора внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл, 3 раза с интервалом в 7 дней.

На 21-й день от начала сенсибилизации животных декапитировали по 15 мышей из каждой группы, кровь собирали в пробирки, отделяли сыворотку с целью определения гомоцитотропных (1дЕ) антител методом пассивной кожной анафилаксии (ПКА), что являлось показателем наличия или отсутствия у исследуемых препаратов аллергенных свойств. Для этого полученную сыворотку крови мышей объединяли в один пул. В качестве реципиентов использовали белых крыс. В работу взяли 15 животных, которых разделили также на 3 группы: 1) ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз; 2) АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз; 3) контрольная группа (по 5 животных в группе). Сыворотку мышей последовательно кратно разводили в соотношениях 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64 и вводили внутрикожно на брюшной поверхности тела крысы по 0,05 мл на каждое разведение. В группе 1 каждому животному вводили, в указанных разведениях сыворотку от мышей, сенсибилизированных ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз, а группе 2 - сыворотку от мышей, сенсибилизированных АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз. Через 24 ч реципиентам - крысам вводили внутривенно (в хвостовую вену) 1 мл физиологического раствора, содержащего 1 мг (по белку) исследуемых препаратов с синим Эванса. Крысам в группе 1 вводили разрешающую дозу ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз, а крысам в группе 2 - разрешающую дозу АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз. Животным контрольной группы вводили 1 мл физиологического раствора с синим Эванса. Через 30 мин крыс забивали и оценивали диаметр окра-

шенного пятна на местах введения сыворотки.

Пул сывороток крови мышей контрольной группы и группы 1, сенсибилизированныхВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз, использовали при проведении ИФА для определения эффекта стимуляции синтеза специфических 1дС-антител после трехкратного введения экспериментальным животным ВСЭ с неполным адъювантом Фрейнда [8, 11-13].

На втором этапе работы были выполнены следующие задачи:

• проведена сравнительная оценка иммуногенно-сти испытуемых препаратов - ВСЭ. Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз и АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз, по их способности после проведения гипосенсибилиза-ции животным стимулировать синтез специфических 1дС-антител у мышей сенсибилизированных водносо-левым экстрактом;

• проведена сравнительная оценка уровней гомоцитотропных антител у животных после введения ги-посенсибилизирующих доз указанных препаратов сенсибилизированным мышам, с целью выявления и сравнения гипосенсибилизирующего (лечебного) эффекта у АТ и ВСЭ

Гипосенсибилизация животных осуществлялась по методитке опубликованной нами ранее [11].

В соответствии с разработанной нами методикой, была определена схема проведения гипосенсибилиза-ции АТ и ВСЭ сенсибилизированным животным. С 21 -го дня от начала сенсибилизации, оставшимся животным в группе 1 - ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз (30 мышей) проводили курс гипосенсибилизации испытуемыми препаратами, без добавления неполоного адъ-юванта Френда. Для этого животных разделили на две группы:

1) ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз (15 мышей);

2) АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз (15 мышей).

Курс гипосенсибилизации проводили по следующей

схеме, с интервалом в 2 дня между введениями:

1. Инъекция 0,01 мкг/мышь

2. Инъекция 0,05 мкг/мышь

3. Инъекция 0,1 мкг/мышь

4. Инъекция 0,1 мкг/мышь

5. Инъекция 0,1 мкг/мышь

6. Инъекция 0,5 мкг/мышь

7. Инъекция 0,5 мкг/мышь

8. Инъекция 1,0 мкг/мышь

9. Инъекция 1,0 мкг/мышь

10. Инъекция 2,0 мкг/мышь

11. Инъекция 2,0 мкг/мышь.

В группе 1 мышам вводили по указанной схеме во-дносолевой экстракт в объеме 0,2 мл каждому животному, а группе 2 каждому животному аналогично вводили аплерготропин.

Через 3 суток после завершения гипосенсибилизации животных декапитировали, собирали кровь в пробирки, центрифугировали и отделяли сыворотку, которую затем использовали для определения в ИФА специфических 1дС-антител и определения гомоцитотропных (1дЕ) антител методом ПКА по схеме, описанной для проведения ПКА на крысах при исследовании аллергенных свойств изучаемых препаратов. Стати-

ПРЕПАРАТЫ

стическую обработку проводили, используя ^критерий Стьюдента.

Результаты и обсуждение

Результаты первого этапа работы, по исследованию аллергенных свойств у изучаемых препаратов, оценивали по выявлению уровня продукции гомоцито-тропных антител (1дЕ) после сенсибилизации мышей АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз (АТ О.р^) и ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз (ВСЭ О.рО, которые представлены в таблице 1,

Из данных, представленных в таблице 1 видно, что стимулирование 1дЕ-ответа у мышей ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз выражено интенсивнее, в сравнении с АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз. При введении крысам сыворотки крови мышей с разведением 1:16, сенсибилизированных АТ, уже отмечалось статистически достоверное различие по средней величине диаметра пятна 0,5 ± 0,25 (р < 0,05) от результатов, полученных в группе 1 (ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз). Введение крысам группы 2 (АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз) этого разведения сыворотки является началом проявления реакции ПКА после действия АТ на стимуляцию синтеза гомоцито-тропных антител у мышей, в отличие от действия ВСЭ на синтез антител у мышей, которое было выявлено при введении крысам сыворотки в разведении 1:64.

Таблица 1. Результаты определения гомоцитотропных антител в реакции ПКА по Овери после сенсибилизации мышей ВСЭ Оегта^рЬадоШев рТегопуэвтив и АТ Оегта^рЬадоШев рТегопуэвтив

При сравнении средних значений диаметров пятен, полученных от введения крысам меньших разведений сывороток мышей (1:8, 1:4, 1:2), между группой 1 и группой 2 достоверные отличия (р < 0,05) сохранялись.

После трехкратного введения физиологического раствора мышам контрольной группы, были получено методом ИФА следующие средние значение оптической плотности 0,202 ± 0,014, по специфическому связыванию 1дС-антител. Результатом проведения сенсибилизации ВСЭ, с использованием неполного адъюванта Фрейнда, в группе 1 было стимулирование выработки специфических 1дС-антител, которое характеризовалось средним значением оптической плотности на уровне 0,325 ± 0,019. Полученный результат является базовым для сравнения иммуногенных свойств изучаемых препратов.

Исследование гипосенсибилизирующих свойств изучаемых препаратов проводили на животных, у которых в сыворотке крови было выявлено максимальное содержание гомоцитотропных (1дЕ) антител, а именно в группе 1 (ВСЭ Оегта1орЬадо1с1езр(егопузз1пиз).

Результаты второго этапа работы, по исследованию иммуногенных свойств у изучаемых препаратов, показали, что проведение гипосенсибилизации одиннадцатью инъекциями АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз оказалось достаточным для получения интенсивной стимуляции 1дС-ответа.

Таблица 3. Результаты определения гомоцитотропных антител в реакции ПКА по Овери после гипосенсибилизации мышей ВСЭ Оегта^рЬадоШев рТегопуэз/пив и АТ Оегта^рЬадоШев рТегопуэз/пив

Разведение сыворотки Среднее значение диаметра окрашенного пятна в (см)на месте кожной реакции (М ± Дт), после введения разрешающих доз исследуемых препаратов

ВСЭ Р.рЬ АТ Р.рЬ

1:2 3,0 + 0,20 2,0+0,15

1:4 2,5 + 0,15 1,5 +0,20

1:8 2,0 + 0,25 1,0 +0,20

1:16 2,0 + 0,20# 0,5 + 0,25

1:32 0,7 +0,10 -

1:64 0,5 + 0,10 -

Разведение сыворотки Среднее значение диаметра окрашенного пятна в (см)на месте кожной реакции (М ± Дт), после введения разрешающих доз исследуемых препаратов

ВСЭ 04*. АТ Р.рЬ

1 2 2,5 + 0,25 2,0 +0,15

1 4 2,5 +0,15 1,5 +0,20

1 8 2,0 + 0,20 1,0 +0,20

1:16 2,0 + 0,25 # 0,5 + 0,20

1:32 0,6 + 0,10 -

1:64 0,5 + 0,15 -

Примечание Примечание

# - Реакция очень сильная, «-» - пятно отсутствует. # - Реакция очень сильная, «-» - пятно отсутствует.

Таблица 2. Показатели характеризующие специфический 1дС-ответ после проведения сенсибилизации ВСЭ и гипосенсибилизации ВСЭ Оегта^рЬадоШев рТегопуввтив и АТ Оегта^р11адоШев рТегопуввтив

Анализируемые показатели Этапы исследования и экспериментальные группы животных

Сенсибилизация группы ВСЭ 0. рЬ Гипосенсибилизация группы ВСЭ 0. рЬ Гипосенсибилиза-ция группы АТ О.р^

Результаты в экспериментальных группах по оптической плотности (0П) 492 нм (М + Дт) 0,325 + 0,019 0,500 + 0,017 0,646 + 0,022

Кратные увели-чения значений результатов в группах после гипосенсибилизации по отношению к группе ВСЭ 0. р1:. - ~ 1,5 -2,0

В сравнении с показателями специфического 1дС-ответа у сенсибилизированных ВСЭ мышей при длительной гипосенсибилизации (11 инъекций) тем же препаратом отмечали увеличение специфических 1дС-антител приблизительно в 1,5 раза, а при гипосенсибилизации по той же схеме аплерготропином кратность увеличения 1дС-антител составила примерно 2 раза.

Из данных таблицы 2 также видно, что показатели ОП после проведения гипосенсибилизации аллерго-тропином Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз достоверно выше, чем показатели ОП при гипосенсибилизации ВСЭ Оегта1орЬадо1с1езр(егопузз1пиз (р < 0,05).

Постановка реакции ПКА с использованием сыворотки мышей гипосенсибилизированных ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз и АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз выявила, что АТ уменьшает синтез гомо-цитотропных антител у животных сенсибилизированных ВСЭ, в отличие от действия самого водносолевого экстракта. Результаты гипосенсибилирующего действия изучаемых препаратов представлены втаблицеЗ. Из данных таблицы 3 видно, что гипосенсибилиза-ция экспериментальных животных группы 1 (ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз) не привела к продукции у мышей, сенсибилизированных ВСЭ, дополнительных гомоцитотропных антител. Реакция ПКА также начиналась с разведения мышиной сыворотки 1:64 (0,5 ±0,15 см) после введения крысе в вену разрешающей дозы ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз. Диаметр окрашенных пятен на введение крысам пула сывороток гипосенсибилизированных мышей в разведении 1:16 у крыс-реципиентов составил в среднем: 2,0 ± 0,25 см, что показывало отсутствие различий со средним значением диаметра пятна: 2,0 ± 0,20 см (р > 0,05) после сенсибилизации мышей ВСЭ Оегта(орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз, В остальных разведениях (1:8, 1:4, 1:2) наблюдались схожие результаты.

После постановки реакции ПКА с использованием сыворотки мышей, гипосенсибилизированных АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз было выявлено, что окрашенные пятна диаметром 0,5 ± 0,2 см наблюдались в разведении 1:16, а в разведении 1:32 и 1:64 пятна на коже крыс (реципиентов) не отмечались. Диаметр пятен при исследовании разведений сывороток (1:8, 1:4, 1:2) представлен в таблице 3. Результаты постановки ПКА свидетельствуют о том, что введение гипосенси-билизирующих доз препарата АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз приводит к уменьшению уровня синтеза гомоцитотропных антител, полученного у мышей после сенсибилизции ВСЭ.

Заключение

Проведена сравнительная оценка аллергенных свойств АТ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз и ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз по способности (в экспериментах на мышах) инициировать образование гомоцитотропных (1дЕ) антител, с использованием

метода пассивной кожной анафилаксии. Иммуноген-ные свойства исследуемых препаратов оценивались с помощью ИФА, по оптической плотности, которая показывала уровень связывания специфических 1дС-антител с исследуемыми препаратами.

Изучение аллергенных и иммуногенных свойств исходного аллергена (ВСЭ) и модифицированного комплексного препарата - аллерготропина Оегта(орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз проводили, используя рекомедации Государственной фармакопеи и данные, опубликованные в журналах, сборниках и монографиях [1-4, 6, 12-17]. На основании опыта наших предшествующих работ по изучению качества аллерго-тропинов [8-11] был проведен сравнительный анализ аллергенной активности и иммуногенности ВСЭ и аллерготропина Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз. Полученные результаты позволяют судить об аллергенных и иммуногенных свойствах аллерготропина и сделать вывод о его преимуществе по сравнению с исходной формой ВСЭ.

Выводы:

1. Стимулирование синтеза гомоцитотропных антител (1дЕ-ответа) у мышей на введение ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз выражено интенсивнее (р < 0,05) в сравнении с аллерготропином Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз, что означает наличие у ВСЭ более выраженных аллергенных свойств, чем у АТ.

2. Результаты, полученные по стимуляции специфического 1дС-ответа, после проведения гипосенсибилизации, достоверно показывают (р < 0,05) преимущество АТ перед ВСЭ. Данные, полученные по исследованию влияния на синтез гомоцитотропных антител у сенсибилизированных ВСЭ мышей, показывают, что гипосенсибилизация аллерготропином приводит к снижению выработки 1дЕ-антител, а гипосенсибилизация ВСЭ только стабилизирует их уровень. Таким образом, гипосенсибилизция аллерготропином Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз приводит к стимулированию специфических 1дС-«блокирующих» антител, способных конкурировать с синтезом 1дЕ-антител.

3. По данным экспериментальных исследований ал-лерготропин Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз в сравнении с ВСЭ Оегта1орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз, является препаратом со сниженными аллергенными свойствами и обладает повышенными иммуноген-ными свойствами.

4. Предложенная схема гипосенсибилизации животных аллерготропином может составить основу для дальнейшей разработки схемы аллерготропин-специфической иммунотерапии лечебным препаратом аплерготропин Оегта(орЬадо1с1ез р(егопузз1пиз.

БИО

ПРЕПАРАТЫ

Литература:

1. Адо А.Д. «Общая аллергология» М. 1978. 464 с.

2. Гэсударственная Фармакопея СССР. XI издание. 1, 2 т. М. 1998.

3. Петров Р.В., Хаитов P.M., Некрасов A.B. // В сб.: Вакцины третьего поколения, ВНИИ ММТИ МЗ СССРМ. 1987. С. 1-37.

4. Федосеева В.Н., Камышева В.А., Кравченко С.А., Некрасов A.B., Пучкова Н.Г., Медведев С.А., Радунская С.Ф., Невская Л.В., Лавренчик Е.И. Проблема контроля и стандартизации аллерговакцин // Биопрепараты. - 2010. - № 1. - С. 35-38.

5. Петров Р.В., Хаитов Р.М, Некрасов A.B., Федосеева В.Н., Пучкова Н.Г, Камышева В.А., Мартынов А.И. Аллерготропин для лечения поллинозов и способ лечения поллинозов. Патент РФ № 2205661 от 10 июня 2003 г.

6. Райкис Б.Н., Казиев А.Х. Настоящее и будущее лечебных аллергенов. М.: Триада-Х, 2001. 248 с.

7. Федосеева В.Н., Кудрина Г.П. Методические рекомендации по оценке аллергенных свойств фармакологических средств. М.: МЗ СССР, 1988. 22 с.

8. Федосеева В.Н., Некрасов А. В, Ильина Н.И., Хаитов P.M., Петров Р.В. //В сб. тр.: 5-й Конгресс «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии». М. 2002. С. 91-112.

9. Федосеева В.Н., Камышева В.А., Читаева В.Г. и др. Пыльцевые аллергоиды - основа создания безопасных препаратов для СИТ // Материалы V съезда иммунологов и аллергологов СНГ. Санкт-Петербург. 8-11 июля 2003. С. 83.

10. Хаитов P.M., Федосеева В.Н., Некрасов А.В. и др. О снижении анафилактогенных свойств аллерго-ида, конъюгированного с синтетическим полимером // Иммунология. 1996. № 6. С. 40-42.

11. Петров Р.В., Хаитов P.M., Федосеева В.Н., Некрасов А.В., Камышева В.А. и др. Разработка пыльцевых аллерговакцин ( аллерготропинов ) //Аллергия, астма и клиническая иммунология. 2003 Т. 7. № 9 С. 9- 14.

12. Хутуева С.Х. Бронхиальная астма. Нальчик. 1988. С. 127.

13. Шустова В.И., Дзантиев Б.В. Иммуноферментный метод определения блокирующих lgG-антител к аллергену амброзии // Иммунология. 1985. № 3. С. 2-74.

14. Фрадкин В.А. «Диагностические и лечебные аллергены». М.: Медицина, 1990. С. 356.

15. Henszel К., Kuzna-Grygiel W. House dust mites in the etiology of allergic diseases //Ann Acad Med Stelin. 2006. V. 52 № 2. P. 123.

16. Katial R., Lin F., Stafford W.W. Mugwort and sage (Artemisia) pollen cross-reactivity: ELISA inhibition and immunoblot evaluation //Annals Allergy, Asthma Immunology. 1997. V. 79 P. 340.

17. Reha C.M., Ebru A. Specific immunotherapy is effective in the prevention of new sensitivities // Allergol. Immunopathol. (Madr). 2007. V. 35. № 2. P. 44-51.

G