CC BY
5
Краткие сообщения
УДК 543.31:546.831.06
Н. А. Горячева, К■ П. Ершова ФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИРКОНИЯ В ВОДЕ
Институт общей и коммунальной гигиены им. А. А. Сысина АМН СССР, Москва
В связи с повышенным содержанием в морских водах, опресненных методами электродиализа и осмоса, биологически активных микроэлементов бора и брома разработка способов удаления из опресненных вод избыточных количеств этих микроэлементов является актуальной задачей.
Для задержания бора н брома предложено применение гидроокиси циркония, что определило необходимость проведения исследований по гигиенической оценке этого воединения и изучения возможной миграции циркония с воду.
Известные колориметрические методы определения циркония с различными реагентами предложены в основном для анализа геологических объектов, сплавов и руд. Применение атомно-абсорбциоиного и нейтронно-актива-ционного методов анализа циркония связано с эксплуатацией сложных и дорогостоящих приборов. Перед нами была поставлена задача разработать простой, чувствительный и воспроизводимый метод определения циркония в воде.
При разработке метода мы опробовали методику определения циркония с арсеназо-Ш (С. В. Елинсон, К. П. Петров), однако невозможность инструментального окончания заставила нас отказаться от ее использования. Чувствительность определения циркония с арсеназо-Ш в кислой среде в присутствии желатины оказалась недостаточной (В. Г. Горюшина, Е. В. Романова).
В последнее время широкое распространение в аналитической химии находит пикрамин-эпсилон, наиболее специфический и чувствительный реагент на цирконий (Ю. М. Дедков и соавт.), избыток которого в реакционной среде образует с цирконием комплекс 1:2с максимумом
(А. В. Долгорев и соавт.) светопоглощения при 580— 600 нм.
В водных растворах цирконий образует комплексные соединения, поэтому основной задачей при разработке метода являлось их разрушение, что достигалось кипячением пробы воды в среде 1 н. НС1 в течение 10 мин. Подобраны оптимальные условия проведения реакции и колори-метрирования. Определение проводили следующим образом. К помещенной в пробирку с притертой пробкой пробе исследуемой воды (10 мл) приливали 2 мл концентрированной НС1 и кипятили на водяной бане 10 мин для разрушения комплексных соединений. Пробирку вынимали, охлаждали при комнатной температуре и приливали 1 мл 0,1% раствора пикрамина-эпснлон. Через 10 мин окрашенный в оранжевый цвет раствор фотометрировали на спектрофотометре при длине волны 590 нм. Концентрацию циркония в исследуемой пробе определяли по калибровочному графику. Для его построения из стандартного раствора ггС14 с концентрацией 10 мг/л по иону циркония путем последовательного разведения готовили растворы с концентрацией 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,8, 1,0 1 2 и 1,5 мг/л. По 10 мл каждого раствора вносили в пробирки и обрабатывали так же, как и при анализе исследуемой воды. По полученным показателям оптической плотности строили калибровочный график.
Зависимость между оптической плотностью и концент-'] рацией подчиняется закону Ламберта — Бэра в интервале' концентраций 0,1—1,5 мг/л. Предел обнаружения 0,1 мг/л. Коэффициент вариации для концентраций 0,1—0,3 мг/л равен 3%.
Определению не мешают медь, хром, молибден и ванадий.
ЛИТЕРАТУРА
Горюшина В. Г., Романова Е. В. — Завод, лабор., Долгорев А. В. и др. — Там же, 1974, № 2, с. 129—136.
1960, № 4, с. 415—418. Елинсон С. В., Петров К■ П. Аналитическая химия цир-
Дедков Ю. М. и др. — Там же, 1971, № 12, с. 1411— кония и гафния. М., 1965.
1412. Поступила 19/Х1 1979 г.
УДК 576.851.214(Еп1егососси$).01(26 + 28)
Л. В. Алтон, П. X. Рахно
ДИНАМИКА ВЫЖИВАЕМОСТИ НЕКОТОРЫХ ШТАММОВ ЭНТЕРОКОККОВ В МОРСКОЙ И РЕЧНОЙ ВОДЕ ПРИ РАЗНЫХ ТЕМПЕРАТУРАХ
Институт экспериментальной биологии АН Эстонской ССР, Таллин
В работе представлены данные лабораторных опытов о выживаемости некоторых штаммов чистых культур энтерококков при разных температурах морской и речной воды. Исследование показало, что среди других факторов, действующих на жизнеспособность энтерококков, значительное место занимает температурный режим морской и речной воды.
В течение последних лет многие отечественные и зарубежные исследователи изучали пригодность использования энтерококков в качестве индикаторов фекального загрязнения среды. Одни работы посвящены определению биохимических и эпидемиологических свойств энтерококков и методам идентификации разных их штаммов в прл бах воды и почвы, в других рассматривается выживаемость энтерококков во внешней среде. Остановимся на некоторых из них.
Во всех этих исследованиях отмечается тесная корреляционная связь между энтерококками н санитарным состоянием водоемов. Установлена стабильность энтерококков к физическим и химическим воздействиям при использовании избирательных сред, благодаря чему эти микроорганизмы можно относительно легко обнаружить в загрязненных объектах. Значительная работа по изучению температурного режима выроста колоний энтерококков в лабораторных условиях проведена Н. А. Ахмедо-вым. Из 561 штамма энтерококков, которые выросли при м5 °С, 557 выросли и при 10 °С, т. е. при температуре, ко-Шорая часто встречается в условиях внешней среды.
Большую работу по определению санитарно-показа-тельного значения различных видов энтерококков проводила Г. Г. Калина. В результате этого изучен видовой состав энтерококков человека, теплокровных животных и птиц. Установлены степени санитарной показательности разных видов энтерококков по корреляции их с санитарным состоянием воды. Имеются также данные, что в отличие от кишечных палочек они не размножаются вне животного или человеческого организма (Г. Г. Калина).
По данным Н. А. Ахмедова, фекальные стрептококки сохраняют в водопроводной хлорированной воде жизнеспособность в теплое время года от 9 до 60 сут, в зимнее — от 14 до 70 сут. По данным Р. И. Левиной, энтерококки Str. faecalis при температуре речной воды 20 и 10° С погибли соответственно через 14 и 28 сут. Выживаемость колибактерий в тех же условиях была соответственно 18 и 22 сут.
Целью нашей работы являлось дополнение результатов предыдущих исследований и определение выживаемости различных штаммов чистых культур энтерококков при разных температурах морской и речной воды.
Объектами исследования служили чистые • культуры Streptococcus faecalis, штамм № 467, Streptococcus faecium, штамм № 2—1, Streptococcus faecalis var. Zymogenes (особое название штамма 6/63 группы D) и Streptococcus faecalis var. lignefaciens (особое название штамма № 50a), .которые были получены из Государственного научно-ис-Имедовательского института стандартизации и контроля ^медицинских биологических препаратов им. Л. А. Тара-севича.
Опыты проводили с морской водой из Таллинской бухты и с водой р. Пирита. Химический состав речной и морской воды определяли по общепринятой методике («Унифицированные методы», 1971). Полученные данные представлены в табл. I.
Для устранения влияния других факторов, кроме температуры и химического состава воды, которые могли бы оказать угнетающее действие на жизнеспособность энтерококков, часть воды была стерилизована в автоклаве при 0,5 атм в течение 20 мин, а часть использована в нестерильном виде.
В качестве зараженного материала использовали 3-суточную культуру соответствующих штаммов энтерококков, выращенных в среде Эйкмана с агаром при 37 С.
Морскую и речную воду после посева в нее 3-суточной культуры энтерококков разливали в равных количествах по стериЛьным колбам и выдерживали при 20, 10, 5, 2 и 0°С (±1°С), что соответствовало сезонным изменениям температуры воды в водоемах Эстонии. Для определения изменения численности энтерококков проводили периодические высевы на среду Бартлей и Сланеца (Bartley и Slanez), инкубированием посевов перед вычислением количества выросших колоний на чашках Петри при 37° С в течение 3 сут. Опыты считались законченными, когда в 1 мл воды не содержалось более 1—2 энтерококков.
Эксперименты выполнены в 80 вариантах и примерно в 500 посевах. Статистическую обработку результатов параллельных посевов проводили по Руминскому; коэффициент вариаций не превышал 10%.
•'•Исследованные нами штаммы энтерококков не дали Ярироста в морской и речной водах, что подтверждает пригодность их в качестве индикаторных организмов для санитарно-гигиенической характеристики качества воды. Исключение составлял Streptococcus faecium штамм № 2—1,
Таблица 1 Химический состав морской и речной воды
Показатель Морская вода Речнап вода
Биохимическое потребле- %
ние кислорода, мг/л 2,9 |,б •
Общий фосфэр, мг/л 0,04 0,036
Ортофосфаты, мг Р/л 0 0,0015
Хлориды, мгС1/л 2960,0 14,0
Аммиак, мгЫ/л 0,20 0,00
Нитраты, мгЫ/л 0,014 0,02
Нитриты, мгЫ/л 0.1 2,3
рн 8,4 8,2
Таблица 2
Выживаемость энтерококков (в сут) при разных температурах морской и речной воды
Температура воды °C (±I°C)
20 10 & 2 0
А Б A Б А Б А Б А в
Streptococcus faecium 15 25 25 45 50 55 60 60 65 60
штамм № 2—1 20 35 35 50 55 65 65 65 70 70
Streptococcus faecalis 7 15 25 45 45 50 55 60 55 60
штамм № 467 15 25 50 55 55 60 60 65 60 65
Streptococcus faecalis 7 10 10 15 15 15 20 20 20 20
var: zymogenes 10 15 15 20 20 25 25 25 25 30
Streptococcus faecalis 5 7 7 15 7 15 15 20 15 20
var. lignefaciens 7 10 15 20 15 20 20 25 20 25
Примечание. А — морская вода, Б — речная; в верхней строке — показатели для нестерилизованной воды, в нижней — для стерилизованной.
численность которого при 20°С в течение первых 2 сут опыта несколько повышалась. В нестерилизованной воде энтерококки погибали быстрее, чем в стерилизованной. Причиной этого могло быть антагонистическое влияние других бактерий (Anson и Ware), присутствующих в нестерилизованной воде.
Опыты показали, что энтерококки не погибали при кратковременном выдерживании в морской и речной воде. Выживаемость их увеличивалась во всех вариантах опытов с понижением температуры воды. При одинаковых температурных условиях хранения проб разные штаммы погибали в разное время (табл. 2). Более устойчивыми оказались Streptococcus faecium штамм № 2—1 и Streptococcus faecalis штамм № 467. Энтерококки погибали в морехой воде быстрее, чем в речной. Одной из причин этого могло быть бактерицидное действие морской воды (Крисс и со-авт.). При стерилизации морской воды бактерицидное действие ее, по данным Крисса, исчезает. Энтерококки погибали и в стерилизованной морской воде быстрее, чем в стерилизованной речной. Отсюда следует, что должны существовать и другие причины, кроме бактерицидности, вызывающие более быструю гибель энтерококков в морской воде (например, солевой состав воды).
Выживаемость энтерококков колебалась в нестерилизованной морской и речной воде в зависимости от ее температуры и исследованного штамма от 5 до 65 дней, в стерилизованной морской и речной воде — от 7 до 70 дней (см. табл. 2).
Результаты исследования показали, что среди других факторов, действующих ла жизнеспособность энтерококков в морской и речной воде значительное место занимает температурный режим воды, который неодинаково влияет на разные штаммы указанных бактерий. Поэтому нет возможности обсудить выживаемость последних в морской и речной воде без указания на температурный режим и конкретный штамм.
ЛИТЕРАТУРА
Ахмедов Н. А. Санитарно-бактериологическое значение' находок Streptococcus faecälis (энтерококка) в воде. Автореф. дис. канд. Ташкент, 1958. Калина Г. Г. Санитарно-показательное значение различных видов энтерококков при оценке качества воды. Автореф. дис. канд. М., 1973. Микробное население мирового океана./Крисс А. Е., Мишустина' И. Е.( Мицкевич И. Н. и др. М., 1964.
Крисс А■ Е. Микробиологическая океанография. М., 1976.
Левина Р. И. — Гиг. и сан., № 10, 1968, с. 103—104. Унифицированные методы анализа вод. Под ред.
Ю. Ю. Лурье. М., 1971. Anson А. Е„ Ware С. С. — Water Res., 1975, v. 9, p. 895—899.
Поступил» 28/VI 1979 л
УДК 612.111.4
Канд. мед. наук И. А. Грибова, канд. биол. наук И. А. Гусейнов, И. П. Павмоченко, канд. мед. наук И. С. Сорокина, проф. В. В. Соколов
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ТОКСИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ
Научно-исследовательский институт гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР,
Москва
В настоящее время при токсиколого-гигиенических исследованиях возрастает интерес к изучению эритроцитов. Это связано с имеющимися данными о большой чувствительности ик к * воздействию токсичных веществ (И. И. Гительзон; Я. Г. Ужанский; Е. И. Долидзе и соавт.; Hasan, и др.), а также с появлением в последнее годы указаний о том, что контакт со многими химическими веществами различного действия в небольших концентрациях обусловливает тенденцию к снижению показателей красной крови или развитию умеренной анемии (Л. Н. Архангельская и А. А. Каспаров; Л. А. Даниелянц и соавт.; Я. Г. Двоскин и соавт.; Е. Д. Дорофеева; Н. И. Иванова; В. В. Соколов и соавт.; Pod и соавт.; Kociba и соавт., и др.).
В связи с указанным представлялось важным изучить некоторые показатели морфофункционального состояния эритроцитов у практически здоровых рабочих, подвергающихся воздействию как отдельных токсичных веществ, так и их комплекса в концентрациях, не вызывающих клинических проявлений интоксикации.
Обследованы 2 группы рабочих —51 аппаратчик цеха получения синтетического левомицетина (20 "Мужчин и 31 женщина) и 27 печатников цеха глубокой печати (мужчин). Аппаратчики в течение 3—10 лет подвергались комплексному воздействию ряда токсичных веществ: стирола, метанола, дихлорэтана, изопропилового спирта, брома, «оксиметильного соединения», dj-теамина, формальдегида в концентрациях, превышающих санитарные нормы в среднем в 2—5 раз (Н. И. Мачюлнте). Печатники длительное время (7 до 10 лет, 20 от 10 до 20 лет) имели контакт с толуолом, концентрации которого а воздухе колебались от 20 до 500 мг/м3, превышая ПДК в среднем в 2—4 раза. Подавляющее большинство обследованных было в возрасте от 20 до 49 лет. При ретроспективном анализе результатов периодических медицинских осмотров и углубленном обследовании не выявлено признаков интоксикации ни у рабочих цеха производства левомицетина, ни у печатников. В отдельных случаях диагностированы заболевания сердечно-сосудистой системы (гипертоническая болезнь, вегетативно-сосудистая дистопия) и органов пищеварения (хронический холецистит, диски-незия желчных путей), т. е. такие, которые не могли оказать существенного влияния на состояние эритропоэза.
Поскольку среди обследованных были как мужчины, так и женщины, подобраны две адекватные по возрасту и состоянию здоровья контрольные группы, состоявшие из 30 женщин и 22 мужчин.
Для характеристики эритроцитов использовали цито-метрические данные, осмотическую резистентность эритроцитов, а также некоторые показатели состояния гемоглобина. Диаметр эритроцитов определяли винтовым оку-ляр-микрометром, показатель гематокрита — с помощью
микроцентрифуги МГЦ-8, средний объем толщину, индекс сферичности и площадь поверхности — расчетным путем. Для изучения осмотической резистентности эритроцитов применяли унифицированный метод. Состояние гемоглобина оценивали по результатам общего количества его в крови (гемоглобннцианидным методом), среднего содержания и средней концентрации в одном эритроците (расчетным путем). Помимо этого, спектрофотометрически (по М. С. Кушаковскому) измеряли процентное содержание в крови метгемоглобина. Для характеристики суммарного содержания неактивных дериватов гемоглобина исполь-Ре.» X Ю~2
зовали соотношение -ñ-, где Del0 — оптиче-
640 "V-
ская плотность 1% раствора крови; D640 — оптическая! плотность того же раствора после добавления цианистого^ калия и красной кровяной соли. Известно, что продукты окислительной деструкции гемоглобина поглощают свет в красной области спентра более резко, чем гемоглобин с максимальной разницей при 610 нм. DsiB соответствует общему содержанию гемоглобина. Количество билирубина в плазме определяли спектрофотометрическим методом Schinowara и Walters. Судя по результатам, полученным у лиц контрольных групп, у мужчин и женщин наряду с различиями общего количества эритроцитов и гемоглобина были неодинаковы н другие изученные показатели состояния гемоглобина. Половых различий эритроцито-метрических характеристик эритроцитов и кх осмотической резистентности не выявлено, что согласуется с данными литературы (Г. Д. Левина; Л. М. Фридман, и др.). Эти данные позволили рассматривать результаты эритро-цитометрин и осмотическую резистентность эритроцитов независимо от пола.
У лиц, занятых на производстве левомицетина, а также у рабочих цехов глубокой печати число эритроцитов в крови находилось в пределах физиологических колебаний нормы. Однако при статистической обработке выявлена склонность к их снижению по сравнению с контролем. Так, у женщин контрольной группы число эритроцитов в среднем было 4 104 000+38 100 в I мкл, а у сотрудниц цеха производства левомицетина — 3 926 000+38 600 (Р<0,05). У мужчин того же цеха в 1 мкл крови их содержалось 4 505 000+64 500, а у печатников — 4 506 000+30 000, в то время как у мужчин контрольной группы этот показатель был достоверно выше (4 699 000 +38 800, Я <0,05).
При воздействии токсичных факторов выявлено также изменение геометрических параметров эритроцич^р (табл. 1). У лиц обеих групп был повышен средний объем и диаметр эритроцитов, причем толщина клеток и степень их сферичности существенно не изменялись, а площадь поверхности увеличивалась.
