CC BY
143
УДК 615.322:547.913(571)
ДИНАМИКА ВЫДЕЛЕНИЯ И КОМПОНЕНТНЫЙ СОСТАВ ЭФИРНОГО МАСЛА ТЫСЯЧЕЛИСТНИКА ОБЫКНОВЕННОГО ПРИГОРОДА КРАСНОЯРСКА
© А.А. Алякин, А.А. Ефремов , С.В. Качин, Е.Г. Струкова
Сибирский федеральный университет, пр. Свободный, 79, Красноярск, 660041 (Россия) E-mail: AEfremov@sfu-kras.ru
Изучена динамика процесса выделения эфирного масла из надземной части тысячелистника обыкновенного (Achillea millefolium L.). Методом хромато-масс-спектрометрии исследован химический состав полученного масла. Показано, что компонентный состав конечного масла сильно зависит от времени его выделения.
Ключевые слова: эфирное масло тысячелистника, динамика отгонки, компонентный состав.
Введение
Тысячелистник обыкновенный (Achillea millefolium L.) давно используется в народной и современной официальной медицине как в России, так и за рубежом [1]. Это многолетнее травянистое растение с широким ареалом произрастания включено в фармакопеи более чем 10 стран. Биологически активный комплекс тысячелистника представлен всеми известными веществами, такими как фенольные соединения, полисахариды, витамины, микро- и макроэлементы и др. Особенного внимания заслуживает его эфирное масло как природный источник большого набора биологически активных веществ, главным образом это касается азу-леновых углеводородов, в которых высокое содержание хамазулена [2].
Исследованию химического состава эфирных масел тысячелистников Сибири посвящено достаточно много работ, однако анализ литературных источников показал, что эти работы не охватывают такой крупнейший регион Сибири, как Красноярский край, обладающий своеобразными уникальными климатом, структурой и составом почвы и другими метеофизическими особенностями.
Более того, следует отметить, что разные авторы по-разному подходят к организации эксперимента, в частности это касается длительности процесса выделения эфирных масел из исследуемого лекарственного растительного сырья [3, 4]. Учитывая изложенное выше, изучение компонентного состава эфирного масла тысячелистника из Красноярска представляется актуальным как с теоретической, так и с практической точек зрения. При этом возникает дополнительный интерес к рассмотрению динамики процесса выделения.
Материалы и методы
Для получения эфирного масла собирали надземную часть растений в период начала цветения в пригороде Красноярска (побережье р. Енисей, район Академгородка), сушили в сухом, хорошо проветриваемом прохладном месте в течение трех суток. Выделение масла проводили методом гидродистилляции на лабораторной установке объемом 17,0 л. Разовая загрузка воздушно-сухого сырья составляла 1,0 кг. Длительность отгонки - не менее 11 ч. Количественно собранное масло высушивали над щелочью, определяли выход и хранили в герметичной таре при 4-6 °С.
Измерение показателя преломления проводили с помощью высокоточного прибора Mettler Toledo RE40D. Компонентный состав исследовали методом хромато-масс-спектрометрии на газовом хроматографе Agilent Technologies 7890A с квадрупольным масс-спектрометром Agilent Technologies 5975C в качестве детектора.
* Автор, с которым следует вести переписку.
Идентификацию компонентов проводили по данным электронных библиотек масс-спектров NIST 05, Wiley 07 с применением компьютерных программ Agilent ChemStation и Amdis, а также с использованием линейных индексов удерживания аналогично [5].
Обсуждение результатов
Один из важнейших параметров любой технологической схемы переработки лекарственного растительного сырья - длительность процесса, от которой зависят количественный выход конечного продукта и нередко его качество. Применительно к процессу выделения эфирных масел в целом основным нормативным документом является Государственная фармакопея [6]. Однако содержание фармакопейных статей направлено на стандартизацию растительного сырья как такового, и задача этой статьи - определить наличие эфирного масла, а не получить количественный выход и все компоненты масла, имеющиеся или образующиеся в процессе отгонки. С научной точки зрения весьма полезным было бы максимально приблизиться к конечной точке процесса выделения масла и получить наиболее представительный компонентный состав.
С целью определения оптимального времени выделения эфирного масла Achillea millefolium L. была изучена динамика процесса гидродисцилляции исследуемого растительного сырья. На рисунке представлена динамика процесса выделения исследуемого эфирного масла.
Из рисунка видно, что процесс выделения эфирного масла тысячелистника занимает чуть более 11 ч и сохраняет тенденцию дальнейшего протекания с малозначительным выходом. Вместе с тем видно, что наибольшая часть масла (-75%) была выделена в течение 2 ч.
В ходе выделения эфирного масла Achillea millefolium L. наблюдалось изменение его окраски на протяжении всего процесса гидродистилляции (от бледно-голубой до густой темно-фиолетовой), предположительно это связано с разной скоростью выделения отдельных компонентов, в частности окрашенных веществ. Это предположение также подтверждается результатами измерения показателя преломления отдельных образцов масла, взятых в ходе выделения. Для этого на разных этапах процесса извлекали масло из приемника перегонной установки, не прибегая к полной остановке процесса гидродистилляции.
Результаты исследования изменения показателя преломления представлены в таблице 1.
Таблица 1. Изменение показателя преломления эфирного масла Achillea millefolium L. в течение процесса выделения
№ фракции Время выделения фракции, мин n 20 nd
1 10 1,4753
2 10 1,4770
3 20 1,4848
4 30 1,5005
5 60 1,5192
6 180 1,5456
7 360 1,5538
Итого: 670 1,5110
t, мин
Динамика выделения эфирного масла Achillea millefolium L. % - доля выделившегося масла на момент измерения относительно общего количества масла; t - время гидродистилляции
Из таблицы 1 видно, что показатель преломления эфирного масла тысячелистника меняется в широких пределах (1,4753-1,5538) в зависимости от длительности процесса гидродистилляции, в то время как для цельного эфирного масла исследуемой травы тысячелистника показатель преломления составил 1,5110.
Для детального изучения процесса выделения эфирного масла было проведено хромато-масс-спектрометрическое исследование как цельного эфирного масла Achillea millefolium L., так и отдельно отобранных фракций в ходе процесса выделения, как это было сделано для изучения изменения показателя преломления.
В цельном эфирном масле тысячелистника обыкновенного было обнаружено 145 компонентов, из которых 95 оказались основными и были идентифицированы, их общая концентрация составила 98,076%. В таблице 2 представлены идентифицированные компоненты исследуемого масла, их концентрации, а также их содержание в разных фракциях полученного масла.
Как видно из таблицы 2, основными компонентами эфирного масла Achillea millefolium L., произрастающего в пригороде Красноярска являются гермакрен D (21,769%) и хамазулен (28,672%). Также весьма высока доля компонентов с содержанием более 1%, в числе которых а-пинен (2,595%), сабинен (1,889%), р-пинен (9,343%), 1,8-цинеол (6,361%), борнеол (1,122%), а-терпринеол (1,093%), кариофиллен (5,411%), би-циклогермакрен (1,539%), 5-кадинен (1,619%), а-кадинол (1,075%). Суммарная концентрация всех упомянутых выше компонентов составляет 82,488%. Вещества с содержанием от 0,100 до 0,965% (35 компонентов) составляют 13,982% от всего масла. Оставшаяся часть идентифицированных компонентов (1,573%) образована 47 веществами с индивидуальными содержаниями 0,002-0,098%. Доля неидентифицированных компонентов (50 веществ) едва достигает 2% от цельного масла.
Таблица 2. Идентифицированные компоненты эфирного масла Achillea millefolium L.
№ R.T. Название компонента Концентрация компонента, % от цельного масла R.I. Концентрация компонента, % содержания во фракции
1 фракция 1-10 мин й о р2 ф 021 3 фракция 20-40 мин й о ра 7 ф 044 5 фракция 70-130 мин 6 фракция 130-310 мин 7 фракция 310-670 мин
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1 7,966 Трициклен 0,012 921 0,074 0,051 0,020 0,007 - - -
2 8,140 а-туйен 0,058 926 0,301 0,231 0,103 0,035 0,016 - -
3 8,380 а-пинен 2,595 932 10,557 8,360 3,669 1,163 0,298 0,156 0,035
4 8,869 Камфен 0,244 947 1,150 0,862 0,386 0,134 0,062 0,039 -
5 9,278 Бензальдегид 0,037 958 0,080 0,081 0,079 0,064 0,047 - -
6 9,791 Сабинен 1,889 973 - - 2,614 0,836 0,171 0,036 -
7 9,938 Р-пинен 9,343 975 36,192 31,956 14,779 6,452 2,291 1,220 -
8 10,238 6-метил-1-гептенон-2 0,019 987 0,033 0,034 0,034 0,027 0,005 - -
9 10,387 Р-мирцен 0,648 991 2,770 2,404 1,340 0,587 0,185 0,102 -
10 10,865 а-фелландрен 0,100 1004 0,291 0,243 0,153 0,084 0,037 - -
11 11,323 а-тепинен 0,413 1017 1,008 1,196 0,896 0,502 0,257 0,168 -
12 11,632 п-цимол 0,243 1024 0,810 0,752 0,489 0,250 0,132 0,080 -
13 11,818 Р-фелландрен 0,642 1028 - - 1,066 0,709 0,363 0,234 -
14 11,914 1,8-цинеол 6,361 1031 16,618 16,214 10,596 5,438 2,462 1,148 0,199
15 11,969 Фенилэтанол 0,166 1033 - - 0,406 0,362 8,872 5,650 6,393
16 12,129 транс-а-оцимен 0,409 1038 0,943 0,874 0,571 0,287 0,397 0,293 -
17 12,347 Фенилацетальдегид 0,029 1042 0,029 0,033 0,044 0,052 0,122 0,165 0,097
18 12,519 транс-Р-оцимен 0,364 1048 0,885 0,800 0,542 0,279 0,148 0,118 -
19 12,926 у-терпинен 0,842 1058 1,837 2,017 1,605 0,951 0,522 0,382 -
20 13,255 транс-сабинен гидрат 0,008 1066 0,198 0,086 0,033 0,005 - - -
21 13,809 а-терпинолен 0,004 1088 0,003 0,004 0,006 0,003 0,076 0,050 0,053
22 14,047 2,6-диметил-2,4,6-октатриен 0,148 1089 0,163 0,227 0,228 0,176 0,104 0,112 -
23 14,480 3-карен 0,076 1010 0,038 0,039 0,041 0,029 0,016 - -
24 14,643 Изоамил валерианат 0,045 1101 0,040 0,044 0,040 0,029 - - -
25 15,124 Р-туйон 0,022 1116 0,136 0,138 0,145 0,109 0,072 0,039 0,015
26 15,592 алло-оцимен 0,005 1129 0,013 0,012 0,011 0,009 - - -
27 15,875 транс-хризантенол 0,027 1116 0,005 0,015 0,029 0,053 0,067 0,086 0,044
28 16,016 Нопенон 0,010 1136 0,082 0,114 0,157 0,166 0,099 0,080 -
29 16,190 Камфора 0,659 1144 1,010 1,155 1,410 1,261 0,763 0,502 0,333
30 16,903 Пинокарвон 0,094 1162 0,144 0,186 0,279 0,302 0,473 0,308 0,292
31 17,036 Борнеол 1,122 1166 1,376 1,699 2,566 2,869 2,086 1,607 1,190
32 17,346 Изопинокамфон 0,014 1175 0,026 0,028 0,038 0,041 0,024 - -
33 17,462 Терпинеол-4 0,713 1177 0,321 0,593 1,023 1,212 1,260 1,057 0,918
34 17,858 1,6-диметилдекалин 0,007 1189 0,012 0,013 0,015 0,015 0,210 0,123 0,153
35 17,981 а-терпринеол 1,093 1191 0,652 0,865 1,401 1,711 1,340 1,238 1,142
Окончание таблицы 2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
36 18,107 Метилсфилицилат 0,222 1193 0,024 0,036 0,043 0,052 0,172 0,112 0,142
37 18,749 транс-3(10)-карен-2-ол 0,015 1212 0,100 0,137 0,222 0,273 0,099 0,070 0,035
38 19,383 2,3-диметилдекалин 0,006 1225 0,011 0,014 0,014 0,015 0,237 0,164 0,178
39 19,435 1,5-диметилдекалин 0,004 1231 0,006 0,010 0,007 0,012 0,151 0,094 0,117
40 19,816 2-метил-3-фенил-пропаналь 0,015 1242 0,013 0,013 0,019 0,025 0,013 - -
41 20,575 Хризантелил ацетат 0,055 1263 0,042 0,050 0,058 0,058 0,052 0,041 0,008
42 21,071 4-туйен-2-а-ил ацетат 0,036 1277 0,050 0,066 0,092 0,086 0,059 0,015 -
43 21,482 Борнилацетат 0,070 1287 0,137 0,163 0,226 0,214 0,434 0,309 0,300
44 21,604 Лавандулил ацетат 0,100 1292 0,035 0,047 0,076 0,090 0,068 0,058 0,040
45 22,216 1,1,5,6-тетраметилиндиан 0,018 1308 0,002 0,002 0,007 0,011 0,033 0,033 0,025
46 23,331 Изотерпинолен 0,004 1339 0,020 0,027 0,050 0,083 0,086 0,077 0,074
47 23,762 а-кубебен 0,066 1351 0,007 0,012 0,027 0,050 0,034 0,065 0,112
48 24,016 Евгенол 0,131 1359 0,035 0,044 0,090 0,151 0,106 0,091 0,063
49 24,189 Нерилацетат 0,040 1366 0,034 0,047 0,081 0,092 0,054 0,061 0,008
50 25,542 а-иланген 0,017 1372 0,001 0,005 0,016 0,033 0,020 0,038 0,077
51 24,708 а-копаен 0,185 1378 0,162 0,193 0,303 0,348 0,234 0,212 0,287
52 25,038 Р-бурбонен 0,326 1387 0,333 0,362 0,521 0,502 0,285 0,235 0,274
53 25,191 Бензил 2-метилбутаноат 0,027 1388 0,023 0,035 0,137 0,162 0,091 0,064 -
54 25,690 а-цедрен 0,012 1412 0,014 0,017 0,032 0,042 - - -
55 25,805 Изокариофиллен 0,005 1412 0,005 0,010 0,015 0,017 - - -
56 25,885 а-гурьюнен 0,009 1412 0,016 0,019 0,031 0,036 0,036 0,014 0,041
57 26,281 Кариофиллен 5,411 1422 6,613 7,693 11,384 10,620 7,012 4,961 5,343
58 26,544 Р-копаен 0,151 1432 0,057 0,077 0,152 0,211 0,161 0,153 0,264
59 26,704 а-бергамотен 0,088 1436 0,103 0,128 0,205 0,210 0,122 0,093 0,107
60 26,948 транс-Р-фарнезен 0,067 1444 0,104 0,127 0,208 0,212 0,081 0,076 0,063
61 27,057 Изогермакрен Б 0,065 1445 0,041 0,057 0,110 0,141 0,102 0,077 0,073
62 27,257 цис-мурола-3,5-диен 0,042 1448 0,011 0,020 0,044 0,080 0,063 0,046 0,107
63 27,381 а-гумулен 0,965 1456 0,850 1,036 1,764 1,945 1,174 0,845 1,004
64 27,617 алло-аромадендрен 0,017 1464 0,013 0,021 0,043 0,078 0,041 0,026 0,069
65 27,800 Дегидросесквиценеол 0,562 1471 0,117 0,334 1,173 2,045 1,216 0,401 0,094
66 28,219 у-муролен 0,511 1480 0,232 0,329 0,699 0,473 0,662 0,719 1,165
67 28,426 Гермакрен Б 21,769 1484 9,963 13,197 23,543 27,053 25,878 17,994 9,035
68 28,591 Z,E-а-фaрнезен 0,203 1496 0,034 0,046 0,083 0,099 0,073 0,102 0,091
69 28,669 Зингибирен 0,891 1496 - - 0,060 0,152 1,542 0,127 -
70 28,811 Бициклогермакрен 1,539 1500 0,579 0,817 1,661 2,663 1,667 1,079 0,465
71 28,874 а-муролен 0,340 1502 0,041 0,082 0,214 0,376 0,538 0,658 1,058
72 29,030 Е,Е-а-фарнезен 0,118 1510 - - - - 0,902 0,774 0,064
73 29,095 Р-бизаболен 0,378 1510 0,493 0,587 1,041 1,273 0,875 0,800 0,883
74 29,190 Р-куркумен 0,014 1513 - - 0,043 0,101 0,102 0,106 0,122
75 29,342 у-кадинен 0,297 1517 0,037 0,070 0,190 0,329 0,299 0,363 0,597
76 29,621 5-кадинен 1,619 1527 0,488 0,710 1,515 2,208 1,920 2,024 3,189
77 29,704 зонарен 0,038 1528 0,005 0,003 0,015 0,025 0,059 0,050 0,104
78 29,912 транс-кадина-1,4-диен 0,065 1536 - 0,006 0,028 0,064 0,096 0,094 0,145
79 30,082 а-кадинен 0,106 1541 0,004 0,011 0,034 0,078 0,085 0,135 0,122
80 30,128 цис-а-бизаболен 0,023 1545 0,020 0,022 0,053 0,088 0,078 0,077 0,061
81 30,264 а-калакорен 0,013 1546 - - - 0,020 0,033 0,038 0,066
82 30,456 Р-элемен 0,097 1553 0,005 0,007 0,024 0,066 0,075 0,077 0,081
83 30,802 Ниролидол 0,220 1565 0,029 0,046 0,125 0,246 0,151 0,164 0,166
84 30,878 Е-Р-фарнезен 0,022 1570 0,004 0,009 0,010 0,026 0,083 0,067 0,082
85 31,415 Спатуленол 0,034 1580 - 0,038 0,161 0,294 0,215 0,229 0,236
86 31,566 Кариофиллен-а-оксид 0,467 1586 0,175 0,230 0,572 0,958 0,798 0,727 0,592
87 32,225 Копаборнеол 0,044 1605 0,054 0,062 0,179 0,393 0,363 0,463 0,791
88 32,899 1-эпи-кубенол 0,098 1632 0,021 0,027 0,077 0,175 0,143 0,194 0,326
89 33,325 т-муролол 0,669 1644 0,022 0,038 0,128 0,327 0,382 0,740 1,711
90 33,620 Р-евдесмол 0,619 1651 0,053 0,078 0,205 0,426 0,465 0,766 1,137
91 33,712 а-кадинол 1,075 1658 0,027 0,053 0,183 0,557 0,509 1,077 2,204
92 34,144 Р-ватиренен 0,166 1677 - 0,010 0,034 0,124 0,052 0,293 0,450
93 34,513 а-бисаболол 0,764 1688 0,043 0,066 0,201 0,481 0,455 0,843 1,426
94 36,119 Хамазулен 28,672 1730 0,129 0,466 3,369 13,902 23,345 42,756 47,907
Итого идентж ицировано 98,076 99,239 99,144 98,421 97,122 96,156 96,174 93,993
Детальное изучение данных таблицы 2 показало, что на начальной стадии процесса гидродистилляции происходит активное выделение монотерпеноидов, наиболее заметными в этом отношении выглядят некоторые монотерпены бициклической структуры, такие как a- и р-пинены, 1,8-цинеол и камфен, в то же время некоторые другие бициклические монотерпеноиды с более высокими температурами кипения (борнеол, борнилацетат, камфора и пинокарвон) выделяются с меньшей интенсивностью и гораздо продолжительнее. Большинство сесквитерпе-новых углеводородов и их производных в ходе выделения постепенно увеличивают свой вклад в химический состав конечного эфирного масла на фоне снижающейся динамики выделения монотерпеновых углеводородов в целом, большинство из которых выделяются в течение 5 ч. Отдельно следует отметить сесвитерпены азуленовой природы, в частности это касается хамазулена. Его концентрация сильно возрастает в ходе процесса, и сохраняется тенденция его дальнейшего выделения в незначительных количествах. Интересно отметить, что некоторые компоненты начинают выделяться не сразу, а по истечении от 20 до 60 мин.
В ходе практического изучения процесса выделения эфирного масла Achillea millefolium L. возник интерес к сравнению полученных данных с аналогичными данными других исследователей из территорий, сопредельных Красноярскому краю.
В таблице 3 представлены данные по содержанию некоторых компонентов, свойственных тысячелистнику (с содержанием более 0,1%), в эфирных маслах тысячелистника обыкновенного, собранного в Красноярске, с. Кожевниково (Томская область) [3] и г. Белово (Кемеровская область) [4]. Следует отметить, что в данном случае сравнить удастся лишь качественный состав упомянутых выше образцов, так как для сравнения количественного содержания отдельных компонентов необходимо было бы проводить процесс выделения в пределах сопоставимых времен. В нашем случае такие времена сильно разнятся и соотносятся между собой 11 : 8 : 4 ч (в порядке упоминания).
Таблица 3. Сравнительный анализ компонентного состава эфирных масел Achillea millefolium L.,
произрастающего в регионах Сибири
№ Название компонента Содержание компонента, % от цельного эфирного масла
Красноярский край Томская область Кемеровская область
1 a-туйен 0,06 - 0,40
2 a-пинен 2,60 2,67 5,30
3 Камфен 0,24 0,78 0,90
4 Сабинен 1,89 9,11 10,00
5 Р-нинен 9,34 19,24 22,90
6 Р-мирцен 0,65 - 5,20
7 a-фелландрен 0,10 1,31 1,70
8 a-тепинен 0,41 2,33 0,00
9 и-цимол 0,24 2,06 1,40
10 Р-фелландрен 0,64 0,94 5,30
11 1,8-цинеол 6,36 12,78 6,00
12 mpaHC-a-оцимен 0,41 - 0,30
13 транс-Р-оцимен 0,36 - 0,40
14 у-тернинен 0,84 2,91 1,70
18 Камфора 0,66 0,18 0,70
20 Борнеол 1,12 2,13 1,30
21 Терпинеол-4 0,71 - 0,40
22 a-тернринеол 1,09 0,58 0,50
24 Борнилацетат 0,07 - 0,20
26 a-конаен 0,19 - 0,80
27 Р-бурбонен 0,33 - 0,20
28 Кариофиллен 5,41 6,06 6,70
30 a-гумулен 0,97 0,97 0,80
31 у-муролен 0,51 — 0,10
32 Гермакрен D 21,77 8,47 6,70
33 Зингибирен 0,89 - 2,10
35 a-муролен 0,34 - 0,30
37 у-кадинен 0,30 1,16 0,10
38 5-кадинен 1,62 1,11 1,50
40 Ниролидол 0,22 - 0,30
42 Кариофиллен- a-оксид 0,47 0,97 0,80
47 a-бисаболол 0,76 - 0,10
48 Хамазулен 28,67 5,14 3,60
Подводя итог сравнительного анализа компонентного состава эфирных масел Achillea millefolium L., произрастающего в регионах Сибири, важно отметить, что набор основных компонентов всех трех образцов в достаточной степени однообразен, существенная разница в концентрациях индивидуальных веществ, входящих в состав масла, обусловлена разными временами гидродистилляции, о чем сообщалось выше. В целом данные таблицы 3 удачно дополняют тезис об индивидуальной динамике выделения компонентов.
Выводы
1. При исследовании компонентного состава эфирного масла тысячелистника обыкновенного, произрастающего в пригороде Красноярска, методом хромато-масс-спектрометрии обнаружено 145 компонентов, из которых 95 были идентифицированы. Общая концентрация идентифицированных компонентов составила 98,091%.
2. Изучена динамика процесса гидродистилляции исследуемого лекарственного растительного сырья. Установлено, что выделение эфирного масла из тысячелистника обыкновенного протекает в течение 11 ч и сохраняется тенденция продолжения процесса с малозначительным выходом масла.
3. Методом хромато-масс-спектрометрии изучено изменение химического состава эфирного масла Achillea millefolium L. в течение процесса гидродистилляции. Показано, что компонентный состав конечного эфирного масла в значительной степени зависит от времени его выделения. Полученные данные были подтверждены результатами сравнительного анализа аналогичных исследований в области химического состава эфирных масел тысячелистника Сибири.
Список литературы
1. Шауло Д.Н. Род Achillea L. - тысячелистник // Флора Сибири / Под ред. И.М. Красноборова. Новосибирск, 1997. Т. 13. С. 65-70.
2. Коновалов Д.А. Природные азулены // Растительные ресурсы. 1995. Т. 31. Вып. 1. С. 101-132.
3. Калинкина Г.И., Дембицкий А.Д., Березовская Т.П. Химический состав эфирных масел некоторых видов тысячелистника флоры Сибири // Химия растительного сырья. 2000. №3. С. 13-18.
4. Юсубов М.С., Калинкина Г.И., Дрыгунова Л.А., Покровский Л.М., Королюк Е.А., Ткачев А.В. Химический состав эфирного масла тысячелистников обыкновенного (Achellea Millefolium L.) и азиатского (Achellea Asiatica Serg.) // Химия растительного сырья. 2000. №3. С. 25-32.
5. Ткачев А.В. Исследование летучих веществ растений. Новосибирск, 2008. 969 с.
6. Государственная фармакопея. Вып. 2. Общие методы анализа, лекарственное растительное сырье. XI изд. М., 1990. 400 с.
Поступило в редакцию 22 июля 2009 г.
После переработки 10 октября 2009.
