CC BY
46
УДК 612.111.2:612.112.9
ДИНАМИКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ КРЫС ПРИ ВНУТРИЖЕЛУДОЧНОМ ВВЕДЕНИИ ЭКСТРАКТА СЕМЯН ЛОТОСА ОРЕХОНОСНОГО (NELUMBO NUCIFERA)
© 2010 Н.Ю. Липсон, Е.И. Кондратенко, Бони Арсен Армель, Н.А. Ломтева,
С.К. Касимова, Н.В. Марченко
Астраханский государственный университет
Поступила в редакцию 01.10.2010
Изучена динамика показателей крови при внутрижелудочном введении экстракта семян лотоса орехоносно-го. Экстракт был приготовлен из высушенных и измельченных семян в аппарате Сокслета. Животные получали водный раствор экстракта лотоса орехоносного и в качестве группы сравнения - физиологический раствор ежедневно в одно и то же время с 10 до 12 часов, в дозе 50 мг/кг массы тела. Были исследованы: процентное соотношение между различными видами лейкоцитов, количество эритроцитов и лейкоцитов, степень перекисного гемолиза эритроцитов. Внутрижелудочное введение экстракта семян лотоса орехоносного не приводило к значительным изменениям показателей крови, что свидетельствует об отсутствии токсического эффекта экстракта.
Ключевые слова: экстракт, лотос орехоносный, лейкоцитарная формула, перекисный гемолиз эритроцитов, нейтрофилез, эозинофилез
О целебных свойствах лотоса орехоносного (Nelumbo nucífera) (ЛО) известно с древних времен. Еще в древнем Китае его корневища использовали как мочегонное, кровоостанавливающее, тонизирующее средство, а также при недостатке витамина B1 [1]. Плоды лотоса входят в состав более двухсот препаратов китайской и индийской медицины. Экстракт семян ЛО обладает гепатопротективным и снижающим интенсивность процессов свободнорадикального окисления действием [2]. Исключительной особенностью крови как функциональной системы является то, что она объединяет работу многих физиологических систем организма [3]. Таким образом, состояние крови является важнейшим показателем для определения воздействия различных факторов на живой организм.
Цель данной работы: изучить динамику показателей крови при внутрижелудочном введении экстракта семян ЛО.
Материал и методы исследования. Водно-спиртовой экстракт семян ЛО был приготовлен согласно протоколу WHO CG-04 [4]. 500 г семян высушивали, измельчали до порошкообразного состояния и подвергали спиртовому
Липсон Надежда Юльевна, аспирантка. E-mail: nlipson@rambler. ru
Кондратенко Елена Игоревна, доктор биологических наук, профессор, заведующая кафедрой молекулярной биологии, генетики и биохимии. E-mail: condr70@mail.ru Бони Арсен Армель, аспирант. E-mail: kezaqs@mail.ru Ломтева Наталья Аркадьевна, кандидат биологических наук, доцент кафедры молекулярной биологии, генетики и биохимии. E-mail: nlomtieva@mail.ru
Касимова Сауле Куаншевна, аспирантка. E-mail: saule_kasimova@mail.ru
Марченко Наталья Владимировна, кандидат биологических наук, доцент кафедры молекулярной биологии, генетики и биохимии. E-mail: nmarchenko-80@mail.ru
экстрагированию 50%-ным этиловым спиртом в аппарате Сокслета, затем отгоняли спирт в ротационном испарителе. Выход активного экстракта - около 5% вязкого смолообразного вещества. Раствор экстракта ЛО (0,5%-ный), приготовленный на физиологическом растворе, вводили животным внутрижелудочно с помощью зонда в дозе 50 мг/кг массы тела. В эксперименте были использованы 117 самок крыс (средняя масса -220 г, возраст - 20-24 мес.). Животные содержались в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище. Самки крыс были разделены на три группы: I - интактный контроль, II - животные, получавшие внутрижелудочно физиологический раствор, III - животные, получавшие внутрижелудочно раствор экстракта семян ЛО. Животные получали раствор экстракта ЛО и физиологический раствор ежедневно в одно и то же время с 10 до 12 часов. Декапита-цию животных проводили после предварительной наркотизации легким диэтиловым эфиром на 7, 14, 21, 28 и 42 дни введения растворов. Были исследованы: процентное соотношение между различными видами лейкоцитов, количество эритроцитов и лейкоцитов, степень перекисного гемолиза эритроцитов [5]. Полученные данные были подвергнуты статистической обработке с использованием критерия Стьюдента.
Результаты и их обсуждение. В ходе эксперимента было выявлено, что в группе, где животные получали экстракт ЛО, количество эритроцитов на 21-й день после начала введения достоверно повышалось по сравнению с интактным контролем. На 28 день после начала введения данный показатель практически не отличался от контрольного значения. Перекисный гемолиз эритроцитов (ПГЭ) является чувствительным показателем, отражающим про- и антиоксидантный
2073
Известия Самарского научного центра Российской академии наук, т. 12, № 1(8), 2010
баланс организма. Внутрижелудочное введение экстракта ЛО не приводило к существенным изменениям исследуемого показателя. На 28 день была отмечена тенденция к росту ПГЭ при внут-рижелудочном введении физиологического раствора, в то время как при введении экстракта данный показатель стабилизировался после незначительного увеличения на 14 день. Вероятно, это может быть связано с мембраностабилизи-рующим действием экстракта ЛО. Количество лимфоцитов в группе, где животные получали экстракт ЛО, резко понизилось на 7 день введения, а в последующие 14, 21, 28 и 42 дни эксперимента стабильно повышалось и достигло контрольного значения. В группе, где животные получали физиологический раствор, данный показатель на 7 день эксперимента не отличался от контрольного значения, а в последующие дни введения незначительно понижался (рис. 1).
80 -, 70
У животных, получавших физиологический раствор, количество нейтрофилов повышалось только на 14 и 21 день эксперимента, а в остальные дни не отличалось от интактного контроля (рис. 3).
60 50 40 30 20 10
0
контроль 7 д 14 д 21 д 28 д 42 д
□ физиологический р-р; □ экстракт Л. Орехоносного
Рис. 1. Влияние экстракта ЛО на количество лимфоцитов, %
Условные обозначения (здесь и далее): * - достоверность различий между группами животных интактного контроля и остальными группами животных (по Стьюденту); * - р<0,05;
** - р<0,01;*** - р<0,001. # - достоверность различий между группами животных физ. р-р. 1 гр. и экстракт лотоса 1 гр. (по Стьюденту): # - р<0,05; ## - р<0,01;### - р<0,001; о -достоверность различий между группами животных физ. р-р. 3 гр. и экстракт лотоса 3 гр. (по Стьюденту): о - р<0,05; оо - р<0,01; ооо - р<0,001; ■ - достоверность различий между группами животных физ. р-р. 4 гр. и экстракт лотоса 4 гр. (по Стьюденту): • - р<0,05; •• - р<0,01; ••• - р<0,001; • - достоверность различий между группами животных физ. р-р. 5 гр. и экстракт лотоса 5 гр. (по Стьюденту): • - р<0,05; •• -р<0,01; ••• - р<0,001.
Количество моноцитов на 7, 14 день после начала эксперимента практически не отличалось от контрольного значения как у животных, получавших физиологический раствор, так и у животных, получавших экстракт ЛО. В последующие 21, 28 и 42 дни после начала введения, у животных получавших экстракт, данный показатель повышался практически в 2 раза, а у животных, получавших физиологический раствор - в 10 раз (рис. 2).
Количество нейтрофилов изменялось следующим образом: в группе, где животные получали экстракт ЛО, самый высокий уровень данный показатель достигал на 7 день эксперимента, затем стабильно понижался и на 28, 42 день введения не отличался от контрольного значения.
контроль 7 д 14 д 21 д 28 д 42 д
□ физиологический р-р; □ экстракт Л. Орехоносного
Рис. 2. Влияние экстракта ЛО на количество моноцитов, %
контроль 7 д 14 д 21 д 28 д 42 д
□ физиологический р-р; □ экстракт Л. Орехоносного
Рис. 3. Влияние экстракта ЛО на количество нейтрофилов, %
Уровень эозинофилов при введении физиологического раствора незначительно повышался на 7, 14, 28 и 42 день эксперимента, на 21 день от начала эксперимента данный показатель достоверно понизился. У животных, получавших экстракт ЛО, количество эозинофилов достоверно повышалось практически в 2 раза на 28 и 42 дни введения, в остальные дни отличия от контроля незначительны (рис. 4).
контроль 7 д 14 д 21 д 28 д 42 д
□ физиологический р-р; □ экстракт Л. Орехоносного
Рис. 4. Влияние экстракта ЛО на количество эозинофилов, %
25 -
20
15
10
5
0
0
6
5
4
3
2
0
2074
Общее количество лейкоцитов значительно понизилось на 7 день эксперимента, как в группе, где животные получали экстракт ЛО, так и в группе, где животные получали физиологический раствор. В последующие 14, 21, 28 и 42 дни введения, показатели практически не отличались от контрольного значения в обеих группах. Ней-трофилия, сочетающееся с лейкопенией на 7 день эксперимента при воздействии на животных экстракта семян ЛО может являться своеобразной защитой организма в ответ на действие экзогенных (стресс животного при внутрижелудоч-ном введении экстракта) и эндогенных (действие экстракта) факторов [6]. Это подтверждает и тот факт, что в последующие дни эксперимента оба показателя нормализовались и на 42 день введения практически не отличались от контрольного значения. Понижение количества эозинофилов на 7, 14, 21 дни введения может быть реакцией организма на стресс, а последующее резкое возрастание, практически в 2 раза, данного показателя является гиперкомпенсаторной реакцией системы крови.
Выводы: внутрижелудочное введение экстракта семян ЛО не приводило к патологическим изменениям показателей крови, что свидетельствует об отсутствии токсического эффекта экстракта.
DYNAMICS OF BLOOD PARAMETERS IN RATS AT INTRAGASTRIC INTRODUCTION OF LOTUS NUT-FRUITED (NELUMBO NUCIFERA)
SEEDS EXTRACT
© 2010 N.Yu. Lipson, E.I. Kondratenko, Bonnie Arsene Armel, N.A. Lomteva, S.K. Kasimova, N.V. Marchenko
Astrakhan State University
Dynamics of blood parameters at intragastric introduction of lotus nut-fruited seeds extract is studied. The extract has been prepared from the dried up and crushed seeds in apparatus Soksleta. Animals received an aqueous solution of lotus nut-fruited extract and as group of comparison - a normal saline solution daily at a time from 10 o'clock till 12 o'clock, in a dose of body mass of 50 mg/kg. Have been researched: percentage ratio between various kinds of leucocytes, amount of erythrocytes and leucocytes, degree of peroxide hemolysis of erythrocytes. Intragastric introduction of lotus nut-fruited seeds extract did not lead to appreciable changes of blood parameters that testifies to absence of toxic effect of extract.
Key words: extract, lotus nut-fruited, leukocytic formula, peroxide hemolysis of erythrocytes, neutrocytosis, eosino-phylesis
Nadezhda Lipson, Post-graduate Student. E-mail: nlipson@rambler.ru Elena kondratenko, Doctor of Biology, Professor, Head of the Department of Molecular Biology, Genetics and Biochemistry. E-mail: condr70@mail.ru Arsen Bony, Post-graduate Student. E-mail: kezaqs@mail.ru Nataliya Lomteva, Candidate of Biology, Associate Professor at the Department of Molecular Biology, Genetics and Biochemistry. E-mail: nlomtieva@mail.ru Saule Kasimova, Post-graduate Student. E-mail: saule_kasimova@mail.ru Nataliya Marchenko, Candidate of Biology, Associate Professor at the Department of Molecular Biology, Genetics and Biochemistry. E-mail: nmarchenko-80@mail.ru
2075
4,5 -,
4 3,5 3 2,5 2 1,5 1
0,5
контроль 7 д 14 д 21 д 28 д 42 д
□ физиологический р-р; □ экстракт Л. Орехоносного
Рис. 5. Влияние экстракта ЛО на количество лейкоцитов(х 109)
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Mukherjee, P.K. Studies on psychopharmacological effects of Nelumbo nucifera Gaertn rhizome extract / P.K. Mukherjee, K. Saha, R. Balasubramanian et al. // Journal of Ethnopharmacology 1996. 54. P. 63-67.
2. Sohn, D.H. Hepatoprotective and free radical scavenging effects of Nelumbo nucifera / D.H. Sohn, Y.C. Kim, S.H. Oh et al. // Phytomedicine. 2003. № 10. P. 165-169.
3. Иржак, Л.И. Состав и функции крови // Соросовский образовательный журнал. 2001. Т. 7, № 2. С. 11-19.
4. WHO: protocol CG-04. Preparation of alcoholic extract for bioassay and phytochemical studies (APJF/IP, 1001 A). Geneva, World Health Organization, 1983.
5. Лазько, А.Е. Состояние мембран эритроцитов при воздействии серосодержащего газа / А.Е. Лазько, Р.И. Ас-фандияров, А.А. Рязаев // Актуальные вопросы медицинской фармакологии. 1993. С. 41-47.
6. Погорелов, В.М. Цветной атлас клеток системы крови (Один источник и четыре составные части миелопоэза) / В.М. Погорелов, Г.И. Козинец, О.А. Дягилева, Д.Д. Проценко. - М.: Практическая медицина, 2007. 176 с.
0
