УДК 581:612.017.1:615.272
© Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко, А.А. Бони, М.А. Самотруева, 2014
ВЛИЯНИЕ ЭКСТРАКТОВ ЛОТОСА ОРЕХОНОСНОГО НА ПОКАЗАТЕЛИ ЛЕЙКОЦИТАРНОЙ ФОРМУЛЫ И ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ
Ломтева Наталья Аркадьевна, кандидат биологических наук, доцент кафедры молекулярной биологии, генетики и биохимии, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет», Россия, 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, д. 1, тел. : (8512) 52-49-95, e-mail: aspu@aspu.ru.
Кондратенко Елена Игоревна, доктор биологических наук, профессор, декан биологического факультета, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет», Россия, 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, д. 1, тел. : (8512) 52-49-99, e-mail: aspu@aspu.ru.
Бони Арсен Армель, аспирант кафедры молекулярной биологии, генетики и биохимии, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет», Россия, 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, д. 1, тел. : (8512) 52-49-99, e-mail: aspu@aspu.ru.
Самотруева Марина Александровна, доктор медицинских наук, заведующая кафедрой фармакогнозии, фармацевтической технологии и биотехнологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел. : (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Изучено влияние экстрактов листьев, лепестков, плодов и семян Лотоса орехоносного (Nelumbo nucifera) на показатели фагоцитоза, а также на лейкоцитарную формулу лабораторных животных. Анализ полученных результатов позволил выявить наличие у экстрактов Лотоса орехоносного иммунотропных свойств, степень выраженности и направленности которых определяется видом экстракта. Установлено, что экстракты плодов и листьев Лотоса орехоносного оказывают преимущественное активирующее влияние на макрофагально-фагоцитарное звено иммунитета, тогда как экстракт семян в большей степени воздействует на клетки крови, ответственные за реализацию специфических иммунных реакций.
Ключевые слова: экстракты листьев, лепестков, коробочек и семян Лотоса орехоносного; фагоцитоз; лейкоцитарная формула.
THE INFLUENCE OF NELUMBO NUCIFERA EXTRACTS ON LEUCOCYTE FORMULA AND PHAGOCYTIC ACTIVITY OF NEUTROFILES OF THE LABORATORY ANIMALS PERIPHERAL BLOOD
Lomteva Natalia A., Cand. Sci. (Biol.), Associate Professor of Department, Astrakhan State University, 1, Shaumyan Sq., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 52-49-99, e-mail: aspu@aspu.ru.
Kondratenko Elena I., Dr. Sci. (Biol.), Professor, Dean of the Biological Faculty, Astrakhan State University, 1, Shaumyan Sq., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 52-49-99, e-mail: aspu@aspu.ru.
Boni Arsen A., Post-graduate student, Astrakhan State University, 1, Shaumyan Sq., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 52-49-99, e-mail: aspu@aspu.ru.
Samotrueva Marina A., Dr. Sci. (Med.), Head of Department, Astrakhan State Medical Academy, 121, Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
The influence of extracts of Nelumbo nucifera leaves, petals, fruits and seeds on phagocytosis and leukocyte formula of laboratory animals was studied. Analysis of the results revealed that Nelumbo nucifera extracts had immuno-tropic properties and its effects was determined by the kind of extract. Extracts of Nelumbo nucifera leaves and fruits had activating effect on macrophage-phagocytic immunity and seed extract affected on the blood cells of specific immune responses.
Key words: extracts of Nelumbo nucifera leaves, petals, fruits and seeds; phagocytosis; leukocyte formula.
Введение. В настоящее время значительно возрос интерес исследователей к препаратам, способным проявлять иммунотропные свойства [3]. Нарастание числа людей с иммунологической недостаточностью, вызванной экологическими, ятрогенными, социальными и инфекционными факторами, диктует необходимость разработки стратегии оптимизации функций иммунной системы. Сис-
тема иммунитета как составляющая регуляторов гомеостаза должна постоянно поддерживаться в сбалансированном состоянии. Дисбаланс иммунной системы, проявляющийся в виде вторичных им-мунодефицитных состояний, аутоиммунных, аллергических или лимфопролиферативных синдромов, способствует снижению трудоспособности и качества жизни населения [4]. Важно отметить, что в иммунокоррекции нуждаются как люди с клиническими проявлениями, так и те, у кого дефекты иммунитета выявляются лабораторно или соответствуют состоянию предболезни [10]. При этом нередко требуется длительное применение иммуномодулирующих средств, так как адаптационные механизмы слабо влияют на клетки памяти в иммунной системе, а поддержание эффекта прямо связано с продолжительностью эффекта определенной концентрации иммуноадаптагенов, что ограничено формированием толерантности ко многим известным препаратам.
Благодаря широкому распространению, доступности и ценным свойствам лекарственные растения используются с древнейших времен. Опыт применения их накапливался веками и привел к созданию народной медицины, а в последующем и к разработке такого научно-практического направления, как фитотерапия. Актуальность использования лекарственных растений неизмеримо повысилась в последние десятилетия. Такое обстоятельство обусловлено тем, что и поныне мы являемся свидетелями терапевтических неудач, развития резистентности к терапии и ятрогенных осложнений. В связи с преимуществом лекарственных растений из-за их малой токсичности и возможности длительного приема без существенных побочных явлений, терапевтическое значение их порой незаменимо.
Рассмотрим растение, являющееся достопримечательностью Астраханского региона, - Лотос орехоносный (Nelumbo nucífera), который относится к семейству Лотосовые (Nelumbonaceae) и произрастает на мелководных участках устья Волги вдоль берегов небольших рек, ериков, дельты [1, 11]. Первое упоминание лотоса в числе других лекарственных растений находят в китайских источниках, составленных более 3 000 лет до н.э. Еще в те далекие времена опыт народной медицины показал, что Лотос орехоносный оказывает успокаивающее, жаропонижающее, кровоостанавливающее, мочегонное, антитоксическое действие на организм человека. В последние десятилетия отечественными и зарубежными учеными доказано, что активные вещества Лотоса орехоносного обладают также гипоглике-мической, антиоксидантной, метаболической, психотропной и другими видами активности [5-18, 20].
Учитывая, что активные вещества Лотоса орехоносного обладают многопрофильным биологическим действием, считаем важным оценить влияние экстрактов, полученных из различных частей Лотоса орехоносного, на активность иммунной системы.
Цель: изучить влияние различных экстрактов Лотоса орехоносного на показатели фагоцитоза и лейкоцитарную формулу лабораторных животных.
Материалы и методы исследования. Исследование выполнено на 35 самцах белых беспородных крыс средней массой 220 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище, при естественном освещении [8]. При проведении экспериментов учитывали требования Комиссии по проблеме этики отношения к животным Российского национального Комитета по биоэтике при Российской академии наук и этические нормы, изложенные в «Международных рекомендациях по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1989).
Животные были разделены на следующие группы: I (контроль) - особи, получавшие внутриже-лудочно физиологический раствор в эквивалентном объеме, II-V - особи, получавшие внутрижелу-дочно растворы экстрактов из листьев, лепестков, плодов и семян Лотоса орехоносного, соответственно. Водно-спиртовые экстракты Лотоса орехоносного были приготовлены согласно протоколу WHO CG-04 [19]: 500 г растительного материала высушивали, измельчали до порошкообразного состояния и подвергали спиртовому экстрагированию 50 % этиловым спиртом в аппарате Сокслета, затем отгоняли спирт в ротационном испарителе. Выход активного экстракта - около 5 % вязкого смолообразного вещества. Растворы экстрактов Лотоса орехоносного, приготовленные на физиологическом растворе, вводили животным внутрижелудочно с помощью зонда в дозе 100 мг/кг массы тела. Животные получали раствор экстрактов Лотоса орехоносного ежедневно в одно и то же время с 10 до 12 часов в течение 8 недель.
Подсчет лейкоцитарной формулы крови производили в окрашенных по Романовскому-Гимзе мазках крови. В мазке подсчитывали процентное содержание лимфоцитов, нейтрофилов, эозинофи-лов и моноцитов.
Для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов использовалась гепаринизированная кровь животных [11]. Предварительно готовилась суспензия из частиц латекса размером 1,3-1,5 мкм («МинМедБиопром», Россия). Исходную взвесь латекса отмывали трижды 0,9 % раствором NaCl при
3 000 об/мин по 10 мин. Осадок ресуспензировали в среде 199, число частиц подсчитывали в камере Горяева и доводили до конечной концентрации 150 000 в 1 мкл. Через 24-48 часов после введения исследуемых веществ (в контрольной группе - физиологический раствор) животных выводили из опыта и производили забор крови. 50 мкл рабочего раствора латекса смешивали с 50 мкл гепаринизи-рованной крови и ставили на 30 мин в термостат при 37 °С, периодически встряхивая пробирки вручную каждые 10 мин, с последующим центрифугированием. Из осадка делали мазки, высушивали их, фиксировали в смеси Никифорова из равных частей абсолютного этилового спирта и эфира (10 мин) и окрашивали их на следующий день по Романовскому-Гимзе (20-30 мин). По истечении этого срока мазки промывали водой и высушивали на воздухе. Окрашенные мазки просматривали под микроскопом в иммерсионной системе. В мазке подсчитывали количество лейкоцитов, нейтрофилов с латексом и без него. Одновременно подсчитывали количество частиц латекса в нейтрофилах. О фагоцитарной активности нейтрофилов судили по следующим показателям: фагоцитарный индекс (% фагоцитоза) -количество нейтрофилов с латексом из 100; фагоцитарное число = количество частиц латекса / 100.
Статистическую обработку данных проводили с использованием критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони [2].
Результаты исследования и их обсуждение. В ходе проведения работы установлено, что применение экстрактов, полученных из различных частей Лотоса орехоносного, сопровождается неодинаковыми изменениями в лейкоцитарной формуле. Выявлено, что под влиянием экстракта листьев Лотоса орехоносного происходит снижение количества лимфоцитов при одновременном нарастании моноцитов по сравнению с показателями в контрольной группе (табл. 1).
Введение животным экстракта плодов Лотоса орехоносного также приводило к изменению лейкоцитарной формулы в виде увеличения количества нейтрофилов на фоне снижения относительного содержания лимфоцитов. Принимая во внимание роль каждой популяции лейкоцитов в реализации различных звеньев иммунной реакции, можно предположить, что в проявлении иммунотропного действия экстрактов листьев и плодов Лотоса орехоносного вовлечена макрофагально-фагоцитарная, то есть неспецифическая «ветвь» иммунитета. На фоне применения экстракта семян Лотоса орехо-носного, наоборот, происходило соотношение лейкоцитов в сторону увеличения числа лимфоцитов, что свидетельствует об активирующем действии экстракта семян Лотоса орехоносного на специфическое звено иммунореактивности (табл. 1). Применение экстракта лепестков Лотоса орехоносного практически не сопровождалось у животных изменением лейкоформулы, наблюдалось лишь некоторое снижение числа эозинофилов.
Таблица 1
Влияние различных экстрактов Лотоса орехоносного на показатели лейкоцитарной формулы
Показатели лейкоцитарной формулы Контроль Экстракты Лотоса орехоносного
листья лепестки семена плоды
Нейтрофилы, М ± т, % 54,5 ± 1,62 55,5 ± 1,33 54,7 ± 1,46 47,9 ± 2,01* 60,4 ± 1,45*
Лимфоциты, М ± т, % 37,7 ± 1,86 33,8 ± 1,08 37,7 ± 2,00 42,8 ± 1,49* 31,1 ± 1,72*
Эозинофилы, М ± т, % 1,9 ± 0,43 2,0 ± 0,40 1,1 ± 0,27* 2,0 ± 0,42 1,5 ± 0,28
Моноциты, М ± т, % 6,0 ± 0,39 8,6 ± 0,74* 6,1 ± 0,22 7,1 ± 0,77 7,3 ± 0,58
Примечание: * - р < 0,05 - достоверность различий между группами животных по сравнению с контролем
Что касается функционального состояния лейкоцитов, то отмечено, что введение экстракта плодов Лотоса орехоносного приводило к значительной активации фагоцитарной активности нейтрофилов, что проявлялось в увеличении по сравнению с аналогичным показателем у контрольных животных процентного содержания нейтрофилов, участвующих в процессах фагоцитоза (р < 0,05) (табл. 2). Экстракты листьев, лепестков и семян Лотоса орехоносного способствовали незначительному нарастанию фагоцитарного индекса относительно контрольных значений. Количество частиц латекса, захваченных нейтрофилом, возрастало на фоне применения экстрактов, полученных из листьев и плодов Лотоса орехоносного, однако данные изменения не носили достоверного характера (табл. 2).
Таблица 2
Влияние экстрактов Лотоса орехоносного на фагоцитарную активность_
Показатели фагоцитарной активности Контроль Экстракты Лотоса орехоносного
листья лепестки семена коробочки
Фагоцитарный индекс, % 24,7 + 5,08 34,5 + 6,51 29,4 + 4,17 37,0 + 6,48 47,8 + 4,76*
Фагоцитарное число 6,9 + 0,52 7,5 + 0,60 6,9 + 0,36 6,1 + 0,51 7,5 + 0,36
Заключение. Выявлено наличие у экстрактов Лотоса орехоносного иммунотропных свойств, степень выраженности и направленности которых определяется видом экстракта. Установлено, что экстракты плодов и листьев Лотоса орехоносного оказывают преимущественно активирующее влияние на макрофагально-фагоцитарное звено иммунитета, тогда как экстракт семян в большей степени воздействует на клетки крови, ответственные за реализацию специфических иммунных реакций.
Список литературы
1. Бармин, А. Н. Некоторые дополнительные данные о динамике почвенно-растительного покрова Дельты р. Волги / А. Н. Бармин, В. Б. Голуб, В. П. Моров // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. - 2002. - Т. 4, № 2. - С. 223-227.
2. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - М. : Практика, 1999. - 459 с.
3. Дейл, М. М. Руководство по иммунофармакологии / под ред. М. М. Дейла, Дж. К. Формена. - М. : Медицина, 1998. - 332 с.
4. Игнатьева, Г. А. Современные представления об иммунитете / Г. А. Игнатьева // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2003. - № 2. - С. 2-7.
5. Кондратенко, Е. И. Динамика параметров липидного обмена крыс при внутрижелудочном введении экстракта семян Лотоса орехоносного (Nelumbo nucifera) / Е. И. Кондратенко, А. Э. С. А. Мохамад, Н. А. Ломтева, С. К. Касимова, Н. Ю. Липсон, Н. В. Марченко // Известия Самарского научного центра Российской академии наук, 2010. - Т. 12. - № 1-8. - С. 2062-2064.
6. Kondratenko, E. I. Changes in lipid profile of blood plasma by extract of Nelumbo nucifera seeds in rats / E. I. Kondratenko, A. E. S. A. Mohamad, N. A. Lomteva // Естественные науки. - 2011. - № 3. - С. 114-119.
7. Кржечковская, В. В. Лекарственные средства и иммунная система / В. В. Кржечковская. -Ростов-н/Д. : Феникс, 2006. - 285 с.
8. Лабораторные животные : положение и руководство / под ред. Н. Н. Каркищенко. - М. : Межакадемическое изд-во «ВПК», 2003. - 138 с.
9. Лактионов, А. П. Флора Астраханской области : монография / А. П. Лактионов. - Астрахань : ИД «Астраханский университет», 2009. - 296 с.
10. Михайлов, Г. М. Адаптогенные свойства Астраханской популяции Лотоса орехоносного. Влияние на некоторые физиологические процессы и системы биохимической защиты организма от низкомолекулярных ксенобиотиков / Г. М. Михайлов, И. Н. Тюренков, В. С. Чуйков, А. А. Варыханов, А. А. Масленников // Каспий - настоящее и будущее : тезисы докладов Международной конференции (Астрахань, 16-17 ноября 1995 г.). -Астрахань : Интерпресс, 1995. - С. 256-258.
11. Фримель, Г. Иммунологические методы / Г. Фримель; пер. с нем. - М. : Медицина, 1987. - 476 с.
12. Badami, S. Antioxidant activity of Caesalpinia sappan heartwood / S. Badami, S. Moorkoth, S. R. Rai, E. Kannan, S. Bhojraj // Biological and Pharmaceutical Bulletin. - 2003. - Vol. 26, № 11. - P. 1534-1537.
13. Huang, B. Hepatoprotective and antioxidant activity of ethanolic extracts of edible lotus (Nelumbo nucifera Gaertn.) leaves / B. Huang, B. Xiaoquan, H. Jingsheng, T. Jing, T. Jun, W. Youwei // Food Chemistry. - 2010. -Vol. 120. - P. 873-878.
14. Mukherjee, P. K. Antipyretic activity of Nelumbo nucifera rhizome extract / P. K. Mukherjee, J. Das, K. Saha, S. N. Giri, M. Pal, B. P. Saha // Indian Journal of Experimental Biology. - 1996. - Vol. 34, № 3. - P. 275-276.
15. Mukherjee, P. K. Diuretic activity of the rhizomes of Nelumbo nucifera Gaertn. (Fam. Nymphaeaceae) / P. K. Mukherjee, J. Das, K. Saha, M. Pal, B. P. Saha // Phytotherapy Research. - 1996. - № 10. - P. 424-425.
16. Mukherjee, P. K. Studies on psychopharmacological effects of Nelumbo nucifera Gaertn rhizome extract / P. K. Mukherjee, K. Saha, R. Balasubramanian, M. Pal, B. P. Saha // Journal of Ethnopharmacology 1996. - Vol. 54, № 2-3. - P. 63-67.
17. Sugimoto, Y. Antidepressant-like effects of neferine in the forced swimming test involve the serotonin1A (5-HT1A) receptor in mice / Y. Sugimoto, S. Furutani, K. Nishimura, A. Itoh, T. Tanahashi, H. Nakajima, H. Oshiro, S. Sun, J. Yamada // European Journal of Pharmacology. - 2010. - Vol. 634, № 1-3. - С. 62-67.
18. Sugimoto, Y. Effects of extracts and neferine from the embryo of Nelumbo nucifera seeds on the central nervous system / Y. Sugimoto, S. Furutani, A. Itoh, T. Tanahashi, H. Nakajima, H. Oshiro, S. Sun, J. Yamada // Phytomedicine. - 2008. - Vol. 15, № 12. - С. 1117-1124.
19. WHO : protocol CG-04. Preparation of alcoholic extract for bioassay and phytochemical studies (APJF/IP, 1001 A). Geneva, World Health Organization. - 1983.
20. Wu, M. J. Antioxidant activity of methanol extract of the lotus leaf (Nelumbo nucifera Gaertn.) / M. J. Wu, L. Wang, C.Y. Weng, J. H. Yen // The American Journal of Chinese Medicine. - 2003. - Vol. 31, № 5. - P. 687-698.
References
1. Barmin A. N., Golub V. B., Morov V. P. Nekotorye dopolnitel'nye dannye o dinamike pochvenno-rastitel'nogo pokrova Del'ty r. Volgi [Some additional information about the dynamics of the Delta River. Volga land cover]. Izvestija Samarskogo nauchnogo centra Rossijskoj akademii nauk [Proceedings of Samara Scientific Center of the Russian Academy of Sciences], 2002, vol. 4, no. 2, pp. 223-227.
2. Giants S., Mediko-biologicheskaya statistika [Biomedical statistics]. Moscow, Praktika, 1999, 459 p.
3. Deyl M. M., Formena Dzh. K. Rukovodstvo po immunofarmakologii [The immunology handbook]. Moscow, Medicine, 1998, 332 p.
4. Ignatyeva G. A. Sovremennye predstavleniya ob immunitete [Modern concepts of immunity]. Pa-
tologicheskaya fiziologiya i eksperimentalnaya terapiya [Pathological Physiology and Experimental Therapy], 2003, no. 2, pp. 2-7.
5. Kondratenko E. I., Mokhamad A. E. S. A., Lomteva N. A., Kasimova S. K., Lipson N. Yu., Marchenko N. V. Dinamika parametrov lipidnogo obmena krys pri vnutrizheludochnom vvedenii jekstrakta semjan Lotosa orehonosnogo (Nelumbo nucifera) [The dynamics parameters of lipid metabolism in rats with intragastric administration of nelumbo nucifera seeds extract]. Izvestija Samarskogo nauchnogo centra Rossijskoj akademii nauk [Proceedings of Samara Scientific Center of the Russian Academy of Sciences], 2010, vol. 12, no. 1-8, pp. 2062-2064.
6. Kondratenko E. I., Mohamad A. E. S. A., Lomteva N. A., Changes in lipid profile of blood plasma by extract of Nelumbo nucifera seeds in rats. Estestvennye nauki [Natural sciences], 2011, no. 3, pp. 114-119.
7. Krzhechkovskaya V. V. Lekarstvennye sredstva i immunnaya sistema [Drugs and the immunological system], Rostov/Don, Feniks, 2006, 285 p.
8. Laboratornye zhivotnye (polozheniye i rukovodstvo) [Laboratory animals (position and leadership)] Ed. N. N. Karkishchenko. Moscow, Mezhakademicheskoye izd-vo «VPK», 2003, 138 p.
9. Laktionov A. P. Flora Astrakhanskoy oblasti: monografiya [Flora of Astrakhan region, monography], Astrakhan, Izdatelsky dom «Astrakhansky universitet», 2009, 296 p.
10. Mikhaylov G. M., Tyurenkov I. N., Chuykov V. S., Varykhanov A. A., Maslennikov A. A. Adaptogennye svoystva Astrakhanskoy populyatsii Lotosa orekhonosnogo. Vliyaniye na nekotorye fiziologicheskiye protsessy i sis-temy biokhimicheskoy zashchity organizma ot nizkomolekulyarnykh ksenobiotikov [Adaptogenic properties of the Astrakhan population of Nelumbo nucifera. The influence on some physiological processes and biochemical system of defense against low molecular xenobiotics]. Tez. dokl. mezhdun. konf. «Kaspy - nastoyashcheye i budushcheye» [Abstracts of the international conference. The present and future of Caspian], Astrakhan, 1995, pp. 256-258.
11. Frimel G. Immunologicheskiye metody [Immunological methods]. Moscow, Medicine, 1987, 476 p.
12. Badami S., Moorkoth S., Rai S.R., Kannan E., Bhojraj S. Antioxidant activity of Caesalpinia sappan heart-wood. Biological a Pharmaceutical Bulletin, 2003, vol. 26, no. 11, pp. 1534-1537.
13. Huang B., Xiaoquan B., Jingsheng H., Jing T., Jun T., Youwei W. Hepatoprotective and antioxidant activity of ethanolic extracts of edible lotus (Nelumbo nucifera Gaertn.) leaves. Food Chemistry, 2010, vol. 120, pp. 873-878.
14. Mukherjee P. K., Das J., Saha K., Giri S. N., Pal M., Saha B. P. Antipyretic activity of Nelumbo nucifera rhizome extract, Indian Journal of Experimental Biology, 1996, vol. 34, no. 3, pp. 275-276.
15. Mukherjee P. K., Das J., Saha K., Pal M., Saha B. P. Diuretic activity of the rhizomes of Nelumbo nucifera Gaertn. (Fam. Nymphaeaceae), Phytotherapy Research, 1996, no. 10, pp. 424-425.
16. Mukherjee P. K., Saha K., Balasubramanian R., Pal M., Saha B. P. Studies on psychopharmacological effects of Nelumbo nucifera Gaertn rhizome extract, Journal of Ethnopharmacology, 1996, vol. 54, no. 2-3, pp. 63-67.
17. Sugimoto Y., Furutani S., Nishimura K., Itoh A., Tanahashi T., Nakajima H., Oshiro H., Sun S., Yamada J. Antidepressant-like effects of neferine in the forced swimming test involve the serotonin1A (5-HT1A) receptor in mice. European Journal of Pharmacology, 2010, vol. 634, no. 1-3, pp. 62-67.
18. Sugimoto Y., Furutani S., Itoh A., Tanahashi T., Nakajima H., Oshiro H., Sun S., Yamada J. Effects of extracts and neferine from the embryo of Nelumbo nucifera seeds on the central nervous system, Phytomedicine, 2008, vol. 15, no. 12, pp.1117-1124.
19. WHO: protocol CG-04. Preparation of alcoholic extract for bioassay and phytochemical studies (APJF/IP, 1001 A). Geneva, World Health Organization, 1983.
20. Wu M. J., Wang L., Weng C. Y., Yen J. H. Antioxidant activity of methanol extract of the lotus leaf (Nelumbo nucifera Gaertn.). The American Journal of Chinese Medicine, 2003, vol. 31, no. 5, pp. 687-698.
УДК 616.65-002-036.12
© А.А. Полунин, В.М. Мирошников, Л.П. Воронина, Р.А. Садретдинов, В.И. Браташ, Ф.Р. Асфандияров, 2014
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ФЕРТИЛЬНОСТИ У МУЖЧИН С ХРОНИЧЕСКИМ ПРОСТАТИТОМ
Полунин Андрей Андреевич, ординатор кафедры урологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел. : (8512) 52-41-43, е-mail: agma@astranet.ru.