CC BY
18
УДК 619:636.2.055
Динамика изменения иммуноглобулинов в сыворотке крови телят, полученных от серонегативных (РИД"
) и серопозитивных (РИД4) коров-матерей
Л.И.Мотавина, А.И.Иванов
ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»
Аннотация. В данной статье, на основании проведенных исследований, изложены результаты изменения иммуноглобулинов в сыворотке крови телят, полученных от (РИД-) и (РИД+) коров-матерей при вирусном лейкозе крупного рогатого скота.
Summary. This paper presents the results of the changes of immunoglobulins in blood serum of calves obtained from (RID-) and (RID +) cow-mothers at viral leukemia of cattle on the basis of the research.
Ключевые слова: иммуноглобулины, врожденный первичный иммунодефицит, фиксация комплемента, фагоцитоз, коровы-матери, вирус лейкоза крупного рогатого скота, коровы-матери.
Key words: immunoglobulins, congenital primary immunodeficiency, complement fixation, phagocytosis, cow-mother, viral leukemia of cattle, cow-mother.
Успешное развитие животноводства во многом зависит от направленного выращивания молодняка, сочетающего высокую продуктивность с устойчивостью организма к заболеваниям.
Результаты многочисленных исследований состояния естественной резистентности организма сельскохозяйственных животных свидетельствует о том, что защитные силы являются динамичным показателем и определяются как генетическими особенностями организма, так и воздействием различных факторов окружающей среды.
В последнее десятилетие во многих регионах Российской Федерации распространение лейкоза приняло внушительные масштабы, серьезно угрожающие развитию молочного скотоводства. Не исключением в этом ряду является Республика Башкортостан, испытывающая эпизоотический прессинг инфекции ВЛКРС.
В структуре инфекционной патологии лейкоз крупного рогатого скота в РФ занимает лидирующее место и составляет более 50% от других нозологий [1, 4]. В 2006 году число неблагополучных по лейкозу стад крупного рогатого скота достигало максимальной отметки (10,4%) от числа имеющихся в Российской Федерации. Профилактика и борьба с лейкозом базируется на основе строгого выполнения комплекса мер по охране благополучных стад от заноса инфекции вируса лейкоза крупного рогатого скота, выявлении и удалении больных и инфицированных ВЛКРС животных [2, 3].
Несмотря на несомненные успехи, достигнутые в исследованиях эпизоотологического процесса этой инфекционной болезни, остается недостаточным изучение данного аспекта. Более полные знания об эпизоотическом процессе могут обеспечить разработку и внедрение научно-обоснованных систем профилактики лейкоза и оздоровления поголовья крупного рогатого скота, с учетом уровней эпизоотической напряженности по инфекции BЛKPC и применительно к региональным технологическим особенностям ведения молочного скотоводства [5].
На сегодняшний день весьма актуальной проблемой остается широкомасштабное и многоплановое изучение особенностей эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота, уточнение некоторых теоретических и практических аспектов в целях разработки комплексной системы мер профилактики и борьбы с этой болезнью.
Т акже в литературе недостаточно данных о влиянии иммунодефицитного состояния больных вирусом коров на развитие иммунного статуса. В связи с этим, целью наших исследований явилось изучение состояния иммунного статуса телят, полученных от инфицированных и здоровых коров-матерей.
Материалы и методы. Исследования проводились на 30 новорожденных телятах черно-пестрой породы, принадлежащих неблагополучной по лейкозу МТ Ф №2 ООО «Агромир» Аургазинского района Республики Башкортостан, которые по принципу аналогов были разделены на три группы (контрольная и две опытные) по десять голов в каждой. Взятие крови из хвостовой вены с помощью одноразовых закрытых систем «Моноветт» проводили первый раз до выпойки молозива и далее на 30-й, 60-й, 90-й, 120-й, 150-й, 180-й дни после рождения для необходимых исследований.
Содержание иммуноглобулинов Е, М и G в сыворотке крови телят определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини (1965). Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по П.А. Емельяненко (1980), лизоцимную - по В.Г. Дорофейчуку (1983).
Результаты исследований. Так как основной функцией IgG является образование комплекса «антиген-антитело» (они способствуют нейтрализации бактериальных экзотоксинов, фагоцитозу, фиксации комплемента; и то, что иммуноглобулины G имеют небольшой молекулярный вес, поэтому могут (единственные из всех иммуноглобулинов) проникать через плаценту от матери к плоду), можно полагать, что снижение суммарной концентрации иммуноглобулинов класса G у телят является основанием для подозрения на врожденный первичный иммунодефицит (транзиторная гипогаммаглобулинемию).
Данные, полученные при изучении изменения динамики содержания в сыворотке крови иммуноглобулинов класса G, представлены в таблице 1 и на рисунке 1.
Таблица 1. Динамика изменения содержания иммуноглобулинов класса G в крови телят, полученных
от РИД- и РИД+ коров-матерей
Срок исследования, дни Результаты исследований (М±т, п= 10)
Контроль-здоровые РИД- родитель РИД+ родитель
иммуноглобулины класса G, %
1 22,7±0,95 18,6±1,05 14,7±2,35
30 23,8±1,02 17,2±1,35 *** 14,1±1,89***
60 21,9±1,23 16,3±0,98"* 13,3±2,03**
90 23,2±0,84 15,4±1,02** 11,7±0,98***
120 23,3±1,24 14,5±1,06*** 10,0±1,20***
150 23,1±1,10 14,4±1,24*** 9,2±1,27***
180 22,9±0,86 14,6±1,84** 8,3±1,32***
Примечание: * р < 0,001
■ достоверность различий значений показателей крови при р< 0,05; р < 0,01;
Показатель уровня IgG в сыворотке крови телят 2 группы в процессе опыта имел тенденцию к дальнейшему умеренному понижению.
Более выраженным этот процесс был в сыворотке крови телят 3 группы. К 30 дню опыта уровень IgG в сыворотке крови телят 2 и 3 групп понизился, по сравнению с показателем контроля, в 1,38 и 1,68 раза (на 6,6 и 9,7%), к 60 дню в 1,34 и 1,64 раза (на 5,6 и 8,6%), к 90 дню в 1,5 и 1,98 раза (на 7,8 и 11,5%), к 120 дню в 1,61 и 2,34 раза (на 8,9 и 13,4%), к 150 дню в 1,60 и 2,51 раза (на 8,7 и 13,9%), к 180 дню в 1,56 и 2,75 раза (на 8,3 и 14,6%).
Уровень иммуноглобулинов класса G в крови телят контрольной группы за период опытов колебался в пределах от 21,9 до 23,3%, повышаясь до 120 дня опыта в возрастном аспекте.
Антитела класса IgG играют основополагающую роль в обеспечении длительного гуморального иммунитета при инфекционных заболеваниях. В нашем случае наблюдается понижение уровня иммуноглобулина IgG, а это ведет к ослаблению сопротивляемости к инфекции.
Данные по изучению динамики изменения содержания в крови телят иммуноглобулина класса М представлены в табл. 2 и на рис. 2.
Рис. 1 - Динамика изменения содержания иммуноглобулинов класса G в крови телят, полученных от
РИД" и РИД+ коров-матерей
Таблица 2. Динамика изменения содержания иммуноглобулинов класса М в крови телят, полученных
от РИД- и РИД+ коров-матерей
Срок исследования, дни Результаты исследований (М±т, п= 10)
Контроль-здоровые РИД- родитель РИД+ родитель
иммуноглобулины класса М, %
1 1,99±1,95 2,56±1,05 3,57±2,35
30 2,18±1,02 2,74±1,35*** 3,76±1,89***
60 1,86±1,23 2,87±0,98*** 3,94±2,03**
90 2,05±0,84 2,96±1,02** 4,09±0,98***
120 2,14±1,24 3,15±1,06*** 4,26±1,20***
150 1,96±1,13 3,12±1,24*** 4,24±1,14***
180 1,89±0,86 3,1±1,84** 4,22±1,32***
Примечание: - достоверность различий значений показателей крови при р< 0,05; * р < 0,001
р < 0,01;
1§М в сыворотке крови телят контрольной группы за период опытов выделялись в пределах от 1,89 до 2,18 мг/мл.
Содержание 1§М в сыворотке крови телят опытных групп уже к началу исследований было выше контрольных цифр. Уровень 1§М в сыворотке крови телят 2 группы продолжал повышаться по ходу опытов.
В сыворотке крови телят 2 группы описываемый показатель увеличился, по сравнению с контрольной цифрой, к 30, 60, 90, 120,150, 180 дням опыта соответственно в 1,26 раза (на 0,57 мг/мл), в 1,54 раза (на
1,01 мг/мл), в 1,44 раза (на 0,9мг/мл), в 1,47 раза (на 1,01мг/мл), в 1,59 раза (на 1,16 мг/мл), в 1,64 раза (на 1,21 мг/мл).
4,5 -С
Контроль-здоровые РИД"-" родитель РИД"+" родитель
Срок исследования, дни
■ 1 «30 ■ 60 ■ 90 ■ 120 ■ 150 ■ 180
Рис. 2 - Динамика содержания иммуноглобулина М в сыворотке крови телят, полученных от РИД и
РИД+ коров-матерей
Уровень ^Е в сыворотке крови телят опытных групп к началу исследований был значительно повышен. Их значение в сыворотке крови телят 2 группы (от РИД- коров-матерей) составило 136,8- 139,4 МЕ/мл, а 3 группы (от РИД+ коров-матерей)-182,0- 186,4 МЕ/мл.
Более выраженное повышение уровня 1§М регистрировалось в сыворотке крови телят 3 группы. К этим же срокам опыта их значения превысили контрольный уровень соответственно в 1,73 раза (на 1,59 мг/мл), в 2,11 раза (на 2,08 мг/мл), в 1,99 раза (на 2,04 мг/мл), в 1,99 раза (на 2,12 мг/мл), в 2,16 раза (на 2,28 мг/мл), в 2,23 раза (на 2,33 мг/мл).
Результаты исследования в сыворотке крови телят динамики изменения содержания иммуноглобулина класса Е представлены в табл. 3 и на рис. 3.
Таблица 3. Динамика изменения содержания иммуноглобулинов класса Е в крови телят, полученных
от РИД- и РИД+ коров-матерей
Срок исследования, дни Результаты исследований (М±т, п= =10)
Контроль-здоровые РИД- родитель РИД+ родитель
иммуноглобулины класса Е, %
1 59,4±1,95 136,8±1,05 186,4±2,35
30 57,7±1,02 144,3±1,35*** 205,7±1,89***
60 59,7±1,23 150,9±0,98*** 220,5±2,03**
90 55,5±0,84 168,6±1,02** 244,4±0,98***
120 56,7±1,24 170,5±1,06*** 260,9±1,20***
150 57,1 ±0,95 176,3±1,24*** 256,6±1,24***
180 57,8±0,86 182,0±1,84** 252,2±1,32***
Примечание: * р < 0,001
-достоверность различий значений показателей крови при р< 0,05; р < 0,01;
В процессе опыта уровень 1§Е в сыворотке крови телят вышеприведенных групп имел тенденцию к дальнейшему увеличению.
280 -260 -240 -220 -200 -180 -160 -140 120 -100 -80 -60 -40 -20 ~
0 1
Контроль-здоровые РИД"-" родитель РИД"+" родитель
Срок исследования, дни
■ 1 "30 *60 ■ 90 ■ 120 ■ 150 ■ 180
Рис. 3 - Динамика изменения содержания иммуноглобулинов класса Е в крови телят, полученных от РИД" и РИД+ коров-матерей
Содержание 1§Е в сыворотке крови телят 1 контрольной группы за период опытов находилось на уровне от 55,5 до 59,7 МЕ/мл.
Уровень ^Е в сыворотке крови телят превысили контрольную цифру к 30 дню опыта по 2 группе в 2,5 раза (на 86,6 МЕ/мл), по 3 группе в 3,56 раза (на 148,0 МЕ/мл), к 60 дню в 2,53 и 3,69 раза (на 91,3 и 160,9 МЕ/мл), к 90 дню в 3,03 и 4,4 раза (на 113,1 и 188,9 МЕ/мл), к 120 дню в 3,0 и 4,6 раза (на 113,8 и 204,2 МЕ/мл), к 150 дню в 3,08 и 4,49 раза (на 119,2 и 199,5 МЕ/мл), к 180 дню в 3,14 и 4,36 раза ( на 124,2 и 194,4 МЕ/мл).
Повышенные уровни общего ^ Е связаны с гиперчувствительностью немедленного типа. У животных, инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота, ^ Е повышен, как во время скрытого периода инфицирования так и болезни, так и между ними. Концентрация ^ Е зависит от длительности заболевания и числа предшествующих контактов с источником болезни.
Заключение. В организме телят, полученных от РИД+ коров-матерей развиваются первичные иммунодефициты, характеризующиеся затормаживанием продукции сывороточного IgG в 1,56 и 2,75 раза (на 8,3 и 14,6%), активизацией 1§М в 1,64 и 2,23 раза (на 1,21 и 2,33%) и 1§Е в 3,14 и 4,36 раза (на 124,2 и 194,4 МЕ/мл), также этому свидетельствовали ранее нами проведенные исследования, где были установлены: повышение уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в 1,44 и 1,93 раза (на 12,3 и 25,5 у.е.); нарушение гематологических показателей (анемией, эозинофилией, нейтрофилией, лейкоцитозом); понижение факторов естественной резистентости (лизоцимной активности сыворотки крови в 2,49 и 4,69 раза (на 13,9 и 18,2%), бактерицидной в 2,07 и 4,56 раза (на 23,8 и 36,4%); уменьшение содержания Т- лимфоцитов в крови в 2,37 и 3,53 раза (на 25,6 и 31,7%), Т- хелперов в 1,88 и 2,77 раза (на 9,9 и 13,5%), В- лимфоцитов в 1,26 и
2,02 раза (на 3,8 и 9,2%), усилением реакции Т- супрессоров в крови в 1,37 и 1,64 раза (на 5,4 и 9,2%).
Литература
1. Гулюкин М.И. и др. Аналитический обзор эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота в Российской Федерации (1996-2010) //Всерос. науч.-исслед. ин-т эксперим. ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ). М., 2011. С. 24-48.
2. Мотавина Л.И., Иванов А.И. Диагностика и меры ликвидации лейкоза крупного рогатого скота (методические рекомендации). Уфа, БГАУ. 2012. 21 с.
3. Мотавин Л.И. Эпизоотология, иммунологический статус коров-матерей и телят, инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого: автореф. дисс.... канд. биолог. наук. Уфа: ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2012. С. 80-82.
4. Смирнов А.М. Борьба с лейкозом крупного рогатого скота важнейшей элемент системы обеспечения ветеринарного благополучия российского животноводства // Научные основы профилактики и лечение болезней животных. Екатеринбург. 2005. С. 5-9.
5. Якупов Т.Р. Молекулярно-генетические и иммунохимические методы в диагностике, индикации и идентификации возбудителей туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота [ИФА и ПЦР]: автореф. дис.... докт. ветерин. наук. Казань, 2011. 49 с.
Мотавина Людмила Ивановна, кандидат биологических наук
Иванов Александр Ильич, доктор ветеринарных наук, профессор
