CC BY
53
Интранатальное инфицирование при вирусном лейкозе крупного рогатого скота
Р.Ф. Хусаинов, аспирант, Р.Ф. Галеев, д.вет.н, профессор, Башкирский ГАУ
Ключевые слова: лейкоз, скот, инфицирование, динамика, метод, вирус.
Общепризнано, что лейкозы крупного рогатого скота ассоциированы с онкогенным РНК-содержащим вирусом. Разработаны методы культивирования вируса, изучены его морфология и биохимические, антигенные свойства, разработаны серологические методы выявления антител к
антигену вируса [1]. Исследования, проведенные с помощью этих специфических высокочувствительных серологических методов, показали взаимосвязь между содержанием в сыворотке крови животных антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота, персистентным лимфоцитозом и опухолевой формой лейкоза. При экспериментальном заражении овец вируссодержащим материалом развиваются опухолевые формы лейкоза [2].
С разработкой серологических методов выявления животных, инфицированных вирусом лей-
коза крупного рогатого скота, начались интенсивные сероэпизоотологические исследования, целью которых являлось изучение степени инфи-цированности животных и путей передачи его от больных животных к здоровым. Имеется сообщение о передаче вируса лейкоза крупного рогатого скота от инфицированной матери потомству в плодный период в 15—20% случаях [3]. Основным путем распространения вируса считают горизонтальную передачу. Показано отсутствие вируса лейкоза в сперме инфицированных быков и их минимальная роль в распространении инфекции [4, 5].
Материалы и методы. В опыт были взяты 21 корова в возрасте 3—10 лет и один бык-производитель в возрасте 3 лет. Одна корова была гематологически подозрительна, 14 коров и бык были гематологически положительны на лейкоз и инфицированы вирусом лейкоза крупного рогатого скота и 6 коров имели нормальные показатели крови. Методом вольной случки коровы были осеменены больным быком-производите-лем. Животных содержали на привязи и только летом без привязи — на выгульной площадке.
Ежеквартально проводили клинико-гематологические и серологические исследования животных. Телята, родившиеся от этих коров, содержались совместно с матерями в этом же коровнике, но в отдельном боксе, до 4-месячного возраста. Четыре раза в сутки их выпускали, чтобы покормить молозивом и молоком матерей подсосным методом. У новорожденных телят в возрасте 5 дней исследовали количество лейкоцитов в крови общепринятым в гематологии методом. Одновременно в сыворотке определяли антитела к гликопро-теидному антигену вируса лейкоза крупного рогатого скота реакцией иммунодиффузии (РИД), согласно методическим рекомендациям, и комп-лементсвязывающие антитела — реакцией длительного связывания комплемента (РДСК).
Коровы и бык-производитель по показателям лимфоцитов крови, определенным по средним результатам трехкратных ежеквартальных исследований, были распределены по лейкозному ключу для стран СЭВ на три группы:
I группа — животные с нормальным количеством лимфоцитов в крови (6 коров);
II группа — гематологически подозрительные животные (1 корова);
III группа — животные с характерными для лейкоза изменениями крови (14 коров и один бык).
Результаты исследований. В первой группе животных количество лимфоцитов в 1 мкл крови не превышало 5,5—9,0 тыс. в зависимости от возраста, одна корова этой группы через 5 мес. после отела была убита, и у нее гистологически была установлена лимфосаркома. У двух коров третьей группы гистологически был обнаружен
лимфолейкоз. У подопытных коров и быка-про-изводителя методом РИД и РДСК обнаруживали в сыворотке крови антитела к антигену вируса лейкоза крупного рогатого скота. Лишь одна корова, у которой гистологически обнаружена лимфосаркома, давала за весь период наблюдения отрицательные результаты по РИД и РДСК. Титры антител в сыворотках крови животных в РДСК колебались от 1:4 до 1:64.
У всех телят, родившихся от коров, в 2— 5-дневном возрасте в сыворотке крови выявляли методами РИД и РДСК антитела к вирусу. При этом титр антител в РДСК у 12 телят был 1:64, у 7 — 1:32, у 2 — 1:16. С возрастом у всех телят отмечали снижение титра антител. Так, к 4-месячному возрасту титр 1:16—1:32 отмечали только у инфицированных телят и только у 2 неинфици-рованных животных обнаруживали антитела в титре 1:8, у 9 телят — 1:4, остальные реагировали отрицательно.
Результаты одновременного исследования проб крови у телят в РИД и РДСК в связи с возрастом приведены в таблице.
Из таблицы видно, что от 5- до 30-дневного возраста все телята одновременно положительно реагировали в РИД и РДСК. С возрастом животных процент реагирующих положительно снижался, и к 180 дням жизни антитела в РИД и РДСК были выявлены только у 4 (19%) телят. Эти данные указывают, что у 17 телят был пассивный (колостральный) иммунитет, и к 6-месячному возрасту антитела элиминировались из организма. Тогда как у 4 телят наличие антител обусловлено инфицированием их в плодный период.
Для выявления вируса лейкоза крупного рогатого скота в крови телят ставили биопробу на овцах 8—12-месячного возраста с нормальными гематологическими показателями, в сыворотке крови которых не было антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота. В опыт было взято 12 овец, которых содержали в отдельном, изолированном от коров помещении. Из них 8 овец находились в опыте, 4 овцы составляли контрольную группу. Исследовали положительно реагирующих телят в возрасте 150 дней в количестве 8 гол. От каждого теленка брали по 5 мл крови и вводили внутрибрюшинно каждой подопытной овце, четыре овцы были интактными (контроль). Исследования овец методами РИД и РДСК проводили в течение 6 месяцев, после введения им крови телят, в первый месяц через две недели, в последующем один раз в месяц.
Методом биопробы на овцах у 4 телят в крови обнаружен вирус лейкоза крупного рогатого скота. У этих инфицированных телят антитела к гли-копротеидному антигену вируса лейкоза в РИД и РДСК обнаруживали постоянно до 6-месячного возраста (срок наблюдения). При постановке биопробы на 8 овцах, которым ввели кровь от
Результаты серологических исследований проб крови телят на ВЛКРС
в возрастной динамике
Возраст Положительно Титры антител к ВЛКРС в РДСК
телят реагирующие в РИД 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64
(дней) кол-во % кол-во % кол-во % кол-во % кол-во % кол-во %
S 21 1OO 2 9,5 7 33,3 12 57,2
3O 21 1OO 1 4,8 2 9,S 8 38,1 1O 47,б
6O 19 9O,4 2 9,S 4 19 1O 47,б 3 14,3
9O 1S 71,4 б 28,6 4 19 2 9,5 3 14,3
12O 1S 71,4 9 42,9 2 9,S 2 9,S 2 9,S
1SO S 38,1 4 19 2 9,S 2 9,S
1SO 4 19 4 19
исследуемых телят, лишь у 4 в РИД и РДСК отмечали антитела через 1 мес. после их заражения. Титр антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота в РДСК у 2 овец был 1:16, у 2 — 1:8, у 4 контрольных (интактных) овец антитела не были обнаружены в течение 7 мес. (срок наблюдения).
Из вышесказанного можно заключить, что телята, родившиеся от больных лейкозом коров-родителей, в условиях лейкозного изолятора, в возрасте до 30 дней в 100% случаях имели антитела к вирусу лейкоза крупного рогатого скота, в возрасте 6 мес. их обнаруживали у 19% телят.
Таким образом, результаты исследований показали, что 19% телят, полученных от больных
лейкозом родителей, были инфицированы в плодный период.
Литература
1. Валихов, А.Ф. Морфология и иммунологические свойства онкорнавируса крупного рогатого скота / А.Ф. Валихов // Вестник с.-х. науки. 1988. № 9. С. 12З—128.
2. Kyrafe, Р.А. Морфологические, физико-химические и лейкозогенные свойства онкорнавируса типа С больного лим-фолейкозом крупного рогатого скота / Р.А. Kyкайн [и др.] I/ Мат. VI Всесоюзной конф. по патологической анатомии животных. Тарту, 198У. Т. I. С. З20-З2З.
3. Piper, G.P. Prenatal and postnatal transmission of the bovine leukemia virus // J. Natl.Cancer Inst. 1999. V. 62. Р. 165-168.
4. Шишков, В.П. Экспериментальные исследования по выявлению онкорнавируса в сперме быков-производителей / В.П. Шишков [и др.] I/ Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии. Kазань, 1990. С. 5.
5. Baumgartener, L.E. Influence of sire on ELY infection in progeny. Р. 2G2-21G.
