CC BY
46
УДК 619:616.995.121.56636.612.015:11/.12
ДИНАМИКА ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ И БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ОВЕЦ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЭХИНОКОККОЗЕ
А.М. БИТТИРОВ доктор биологических наук А.Б. ФИАПШЕВА кандидат биологических наук А.С. КАНОКОВА кандидат биологических наук Кабардино-Балкарская Государственная сельскохозяйственная академия
С.Ш. ЧИЛАЕВ кандидат сельскохозяйственных наук Серноводский сельскохозяйственный техникум
Резюме
Изучена динамика гематологических и биохимических показателей овец при экспериментальном эхинококкозе. К 120му дню инвазии эхинококками у овец количество эритроцитов
-5
уменьшалось до 6,46 млн./мм , что было ниже контрольных показателей на 30,5%, количество лейкоцитов возрастало до
-5
16,35 тыс./мм на 7-30-е сутки заражения, что было выше уровня контрольных животных на 73,5%.
Введение
По данным литературы (3) при заражении в дозе 5000 протосколек-сов эхинококка признаки кишечного кровотечения у овец появляются на 4-е сутки после заражения и сохраняются до 11-го дня. Через 20 и более дней после заражения развивается анемия. Миграцию личинок эхинококков в печени, сердечной мышце наблюдают уже на 3-й день после заражения. Этот период болезни характеризуется сильным угнетением животных, отказом от корма, поносами с примесью крови, гиперемией слизистой оболочки глаз, уменьшением гемоглобина, увеличением лейкоцитов, появлением болезненности брюшной стенки, учащением пульса и дыхания.
Эхинококки на различных стадиях развития оказывают механическое, токсическое, инокуляторное и трофическое воздействия на структуры печени, легких, на весь организм животного.
Купцов (4) при эхинококкозе овец наблюдал изменения протеинограммы крови сразу после заражения (в течение 21 дня) и на 5-8 мес.
При эхинококкозной инвазии овец отмечается снижение содержания сахара и резервной щелочности крови в первые 3 недели после экспериментального заражения (6). На 3-й день инвазии у ягнят регистрируются увеличение СОЭ и количества эритроцитов, уменьшение содержания сахара, общего белка (до 5,7 г %), альбуминов (до 2,26%), увеличение глобулиновых
фракций. На 10-й день количество лейкоцитов достигало 28,3 тыс./мм , эозинофилов - 2,3%, к 30 и до 80-90 дней основные клинические и биохимические показатели находились в нижних пределах нормы. Начиная с 90-го дня эти показатели имеют тенденцию к снижению. Кучеренко (5) в крови и некоторых органах и тканях ягнят, экспериментально зараженных эхинококкозом, исследовал суммарное количество нуклеиновых кислот (АСТ и АЛТ). Через сутки после первого заражения ягнят 3 тыс. онкосфер наблюдали повышение суммарного количества нуклеиновых кислот крови до 0,19, через 5 дней - до 0,21, 15 дней - до 0,24 г %. Через 45 дней после заражения суммарное их содержание снизилось до 0,14 г%.
Бессонов (2), обобщая результаты исследований, пишет, что уровень общего белка в сыворотке крови ягнят через 10 дней после заражения эхинококками составил 6,83±0,57, через 30
- 7,26±0,39, 90 - 5,94±0,38 при норме 5,95 г%.
В свете современных требований, изучение изменений содержания белка, активности ферментов крови с учётом гематологических и биохимических показателей в динамике при эхинококкозе овец до и после проведения лечебных мероприятий позволяют понять сущность патологического процесса и дать объективную оценку предлагаемым методам терапии. Вышеизложенное послужило основанием для проведения наших исследований.
Материалы и методы
Экспериментальному заражению в дозе 5 тысяч онкосфер Echinococcus granulosus подвергали 26 ягнят. Ягнят
подопытных и контрольных групп содержали в условиях, исключающих спонтанное заражение гельминтами. Гематологические исследования проводили за 5 дней до и через 5, 18, 30, 60, 90, 120 и 170 дней после заражения по общепринятой методике. Лейкоцитарную формулу выводили по Николаеву и Филипченко, фагоцитарную активность лейкоцитов - по Косту и Стенько (1992) с использованием суточных агаровых культур и эталонных штаммов стафилококков и эшерихий, выделенных из кишечника ягнят. Содержание общего белка в сыворотке крови определяли рефрактометрическим методом, белковых фракций -электрофорезом на агаровом теле, активность АЛТ и ACT - по Reitman, Frankel (1962), содержание кальция и фосфора определяли по Лебедеву и Усович (1976). Полученные результаты обработали статистически с расчетом средних величин.
Результаты и обсуждение
У ягнят подопытной группы (табл. 1) количество эритроцитов снижалось с первых дней заражения. Наименьшее содержание регистрировали на 18-е сутки (5,26 млн./мм3, Р<0,05). В дальнейшем происходило постепенное увеличение эритроцитов и к 90-му дню
-5
оно составило 7,7 млн./мм (Р<0,05). У контрольных ягнят на 90-й день эрит-
-5
роцитов было на 2,12 млн./мм больше, чем у зараженных. К 120-му дню инвазии количество эритроцитов снизилось
-5
до 6,5 млн./мм , что было ниже контрольных показателей на 30,5%. У больных овец на 7-30-е сутки количество лейкоцитов возрастало до 16,4
-5
тыс./мм3, что было выше уровня контрольных животных на 73,5%. Затем число лейкоцитов у больных уменьша-
лось и к 90-му дню достигало 13,9, к 120-му дню снова повысилось до 17,52 тыс./мм3 (Р<0,05). Эти показатели были ниже, чем у контрольных животных, соответственно, на 45,9 и 85,2%. У всех подопытных ягнят отмечали снижение концентрации гемоглобина. На 20-е сутки у зараженных регистрировали минимальное содержание гемоглобина - 5,2, а у незара-женных ягнят - 11,7 г %, что соответствовало снижению содержания гемоглобина на 52,8% по сравнению с показателями контрольных животных. Существенные сдвиги наблюдали в лейкоцитарной формуле. С 5 по 18-е дни инвазии у животных регистрировали увеличение количества эозино-филов с 4,90 до 6,50 %. Эозинофилия (4,40%) сохранялась по 30-й день инвазии. В последующие дни она постепенно снижалась до 1,5% к 90-му дню заражения. Количество палочкоядерных нейтрофилов на протяжении опыта оставалось ниже, чем у контрольных незараженных ягнят. Максимальное число их регистрировали на 18-е сутки (4,90%), на 30-е сутки их было 4,55, на 170-е - 4,70%. Количество сегментоядерных нейтрофилов увеличивалось с первых дней и достигало уровня 47,1 и 46,38% на 18 и 30-й дни после заражения. До 60-го дня происходило их постепенное снижение. С 60 по 90-й дни инвазии количество сегментоядерных нейтро-филов у зараженных ягнят было больше, чем у контрольных животных на 19%. У подопытных зараженных животных в течение всего периода наблюдений содержание лимфоцитов в крови постоянно было меньше, чем у незараженных.
Содержание моноцитов у зараженных ягнят было больше на 8,35%
по сравнению с показателями на 5-й день после заражения эхинококкозом. В другие дни наблюдений количество моноцитов у зараженных эхинококками и незараженных животных было почти одинаковым. У контрольных ягнят среднее количеств общего белка сыворотки составляло 6,2 г% (табл. 2). У подопытных ягнят с первых дней заражения наблюдали увеличение количества общего белка в сыворотке крови. Максимум его отмечали на 30-й день заражения (7,4 г%). В дальнейшем происходило постепенное уменьшение, достигая контрольных показателей на 90-е сутки. На 120 и 170-е сутки количество общего белка увеличивалось, соответственно, до 6,92 и 7,54 г%, что свидетельствовало о подъеме уровня белка в крови у зараженных животных до 20,5%. У двух ягнят количество общего белка в сыворотке крови снижалось до 3,8 и 3,4 г %, что было ниже нормы на 39,5 и 46,4%. Количество неорганического кальция на протяжении опыта варьировало в сторону увеличения или уменьшения, но оставалось в пределах физиологической нормы. Существенные изменения регистрировали в содержании неорганического фосфора в сыворотке крови в разные сроки после заражения. Максимальное уменьшение его количества наблюдали на 30-й день (1,6 мг%, Р<0,005), тогда как контрольные показатели составляли 5,8 мг% (Р>0,05). Количество неорганического фосфора постепенно увеличивалось к 90-му дню (2,9 мг%), а к 120 и 170 дню снова уменьшалось до 1,3 и 1,5 мг%. В целом, у подопытных зараженных ягнят, количество неорганического фосфора в сыворотке крови было меньше более в чем в 2 раза по сравнению с контрольными (незара-женными) животными.
Таблица 1
Г ематологические показатели ягнят, зараженных E. granulosus в дозе 5000 онкосфер (P<0,05)
Дни опыта Эритро- циты, млн./мм3 Лейкоци- ты, -5 тыс./мм Г емогло-бин, % Лейкоцитарная формула, %
базофилы эозино- филы юные нейтро- филы палоч-коядер-ные ней-трофилы сегмен- тарные нейтро- филы лимфо- циты моноци- ты
5 7,52±0,30 13,1±0,18 6,14±0,22 1,80±0,12 4,90±0,28 0,65±0,03 2,70±0,26 43,30±2,2 41,65±0,9 4,80±0,32
18 5,26±0,22 15,2±0,47 5,18±0,16 1,45±0,17 6,50±0,14 0,80±0,02 4,90±0,62 47,10±1,8 34,81±1,3 4,40±0,26
30 5,74±0,16 16,5±0,31 5,50±0,28 1,30±0,12 4,40±0,38 0,33±0,01 4,55±0,19 46,38±0,9 38,42±0,7 4,59±0,17
60 7,51±0,23 14,8±0,36 7,10±0,12 1,70±0,18 1,80±0,22 - 2,60±0,10 43,80±1,2 45,25±2,9 4,60±0,31
90 7,72±0,38 13,9±0,25 7,23±0,31 1,70±0,12 1,50±0,28 - 2,60±0,18 43,80±1,6 45,57±1,3 4,53±0,25
120 6,46±0,24 17,5±0,32 6,11±0,29 1,50±0,26 5,30±0,44 - 3,80±0,28 45,85±0,7 38,40±0,6 4,72±0,12
170 5,68±0,32 18,1±0,48 5,43±0,37 1,45±0,19 6,62±0,36 - 4,70±0,16 49,50±1,3 32,96±0,6 4,43±0,38
Контр. 7,63±0,34 11,8±0,13 6,25±0,19 1,80±0,17 4,08±0,32 - 2,50±0,26 46,38±2,2 40,33±0,8 4,91±0,36
Таблица 2
Биохимические показатели сыворотки крови ягнят, зараженных E. granulosus в дозе 5000 онкосфер (Р<0,05)
Дни опыта Общий белок, г% Кальций, мг% Фосфор, мг% Активность АЛТ (усл. ед.) Активность АСТ (усл. ед.) Никотиновая кислота, мг%
5 6,93±0,31 9,36±0,16 3,28±0,12 16,00±0,40 16,28±0,52 0,364±0,08
18 7,32±0,26 11,20±0,24 2,43±0,17 18,47±0,37 18,91±0,67 0,312±0,06
30 7,42±0,52 10,80±0,30 1,58±0,11 17,80±0,30 17,38±0,46 0,265±0,01
60 6,60±0,24 10,44±0,18 2,16±0,24 12,64±0,46 15,10±0,32 0,217±0,01
90 6,25±0,37 11,10±0,12 2,85±0,30 16,05±0,19 14,91±0,39 0,200±0,04
120 6,92±0,18 10,76±0,38 1,52±0,16 22,83±0,31 15,70±0,40 0,176±0,02
170 7,54±0,42 10,94±0,26 1,30±0,10 29,15±0,67 16,58±0,28 0,148±0,06
Контроль 6,25±0,38 10,80±0,28 6,10±0,20 7,14±0,13 13,78±0,34 0,370±0,002
Российский паразитологический журнал, 2007, № 1
Соотношение фосфора к кальцию в опыте составило 1:4,5 против 1:2 в контрольной группе. У ягнят контрольной группы среднее суммарное количество никотиновой кислоты составило 0,370±0,002 мг% (Р <0,05), а у ягнят подопытной группы с первых дней после заражения регистрировали постепенное уменьшение суммарного содержания никотиновой кислоты в крови до 0,148±0,06 мг% на 170-е сутки. У контрольных животных на протяжении эксперимента активность АЛТ в сыворотке крови колебалась в пределах 7,10-7,22, аспартатами-нотрансферазы (АСТ) - 12,91-14,10 усл. ед. У подопытных ягнят активность АЛТ и АСТ увеличивалась, соответственно, до 18,47 и 18,91 усл. ед. на 20-й день после заражения. Это было выше контрольных показателей для АЛТ в 2,6 раза, а для АСТ - на 39%. В дальнейшем активность трансфераз падала и на 60-е сутки инвазии составила - АЛТ - 12,64, АСТ - 15,10 усл. ед. С 90-го дня инвазии регистрировали подъём активности АЛТ, которая достигала 22,83 и 29,15 усл. ед. (Р <0,05) на 120 и 170-е сутки. Напротив, активность АСТ имела тенденцию к постепенному уменьшению и на 120-е сутки составила 15,70 усл. ед. (Р <0,05). У зараженных эхинококками ягнят активность трансаминаз в крови всегда была выше, чем у незаражен-ных.
Литература
1. Бессонов А.С. // Матер. науч.-практ. конф. Всерос. о-ва гельминтол.
- М., 1997. - С. 2-4.
2. Бессонов А.С. Эхинококкоз животных и человека. - Монография.
- Москва: «Колос», 2001. - 276 с.
3. Бондаренко В.С. Патогенез эхинококкоза овец: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Новосибирск, 1991. - 21 с.
4. Купцов С.Б. // Ветеринарная служба. - 1995. - № 11. - С. 2.
5. Кучеренко Ю.И. // Матер. науч.-практ. конф. Курской ГСХА.-Курск, 1999. - С. 86-88.
6. Солоненков В.К. // Матер. науч. -практ. конф. Тамбовской ГСХА. -Тамбов, 2002. - С. 48-50.
Dynamics of hematological and biochemical parameters of sheep at experimental echinococcosis
A.M. Bittirov, A.B. Fiapsheva, A.S. Kanokova, S.S. Chilaev
Summary
Dynamics of hematological and biochemical parameters of sheep at experimental echinococcosis is investigated. The quantity of erythrocites to 120 day of Echinococcus granulosus
infection decreased up to 6,46 mil-5
lion/mm that was below control parameters on 30,5%, the quantity of leuko-
-5
cytes grew up to 16,35 thousand/ mm by 7-30 day of infection that was higher than a level of control animals at 73,5 %.
