CC BY
62
42
Известия ДГПУ, №2, 2014
УДК 576.89
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИНВАЗИРОВАННЫХ НЕМАТОДАМИ P. EQUORUM ЖЕРЕБЯТ В ДИНАМИКЕ ИНВАЗИИ И КОРРЕКЦИЯ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ
HEMATOLOGICAL AND BIOCHEMICAL PARAMETERS OF FOALS, INFESTED WITH NEMATODES P. EQUORUM IN THE DYNAMICS OF INVASION AND CORRECTION OF HEMATOLOGICAL PARAMETERS OF BLOOD
© 2014 Минбулатова И. С., Керимханова У. М. Дагестанский государственный педагогический университет
© 2014 Minbulatova I. S., Kerimkhanova U. M. Dagestan State Pedagogical University
Резюме. Для изучения гематологических и биохимических показателей инвазированных жеребят в условиях Дагестана в исследование включены гельминтозная и агелъминтозная (контрольная) группы жеребят. Проведенные авторами исследования подтвердили, что гематологические и биохимические показатели крови претерпевают существенные изменения при инвазии нематодами P. equorum.
Abstract. The research performed by the authors confirmed that hematological and biochemical blood indices undergone significant changes during P. equorum nematode invasion. To study the hematological and biochemical parameters of the infested foals in conditions of Dagestan they included in the study ahelminthiatic (control group) and helminthiatic group of foals. The research conducted by the authors confirmed that hematological and bio-chemical parameters of blood undergo significant changes during the nematode invasion of P. equorum.
Rezjume. Dlja izuchenija gematologicheskih i biohimicheskih pokazatelej invazirovannyh zhe-rebjat v uslovijah Dagestana vkljucheny v issledovanie agel'mintoznaja (kontrol'naja gruppa.) i gel'mintoznaja gruppy zherebjat. Provedennye avtorami issledovanija podtverdili, chto gematologi-cheskie i biohimicheskie pokazateli krovi preterpevajut sushhestvennye izmenenija pri invazii nema-todami P. equorum.
Ключевые слова: гематологические и биохимические показатели крови, нематода P. equorum, Дагестан.
Keywords: hematological and biochemical blood rates, R. equorum nematodes, Dagestan. Kljuchevye slova: gematologicheskie i biohimicheskie pokazateli krovi, nematoda P. equorum,
Dagestan.
Гематологические и биохимические показатели крови являются относительно постоянными показателями организма и при инвазии нематодами P. eguorum претерпевают существенные изменения. В связи с этим нами была поставлена цель изучить гематологические и биохимические показатели жеребят, инвазированных нематодами P. Eguorum, в динамике инвазии в условиях Дагестана, для чего в исследование были включены
гельминтозная и агельминтозная (контрольная) группы жеребят.
Проведенные нами исследования показали (табл. 1), что уже с первых дней заражения у экспериментально зараженных жеребят подопытной группы количество эритроцитов снижалось. На 30 сутки было зарегистрировано наименьшее содержание (5,7±0,3 млн/мм3, Р<0,005). В дальнейшем происходило постепенное увеличение эритроцитов, и
Естественные и точные науки
43
к 60-у дню их количество составило 7,7±0,3 млн/мм3. В контрольной группе на этот период, то есть на 60-й день, эритроцитов было на 2,2 млн/мм3 больше, чем в гельминтозной группе. К 100-у дню инвазирования количество эритроцитов уменьшалось до 5,8 ±0,3 млн/мм3, что было ниже контрольных показателей на 35%. У зараженных жеребят подопытной группы на 30 сутки количество лейкоцитов возрастало до 16,53 тыс./мм3, что было выше уровня контрольных животных на 70%. К 60-у дню число лейкоцитов у больных уменьшилось и достигло 13,91 тыс./мм3, а к 100-му дню снова повысилось до 18,06 тыс./мм3 (Р<0,005) (табл. 1). Эти показатели были ниже, чем у контрольных животных, соответствен-
но на 46 и 82%. У всех подопытных жеребят отмечалось уменьшение концентрации гемоглобина. На 30 сутки у зараженных регистрировали минимальное содержание гемоглобина - 5,30±0,28г%, а у агельминтозных жеребят 9,80г%, что соответствовало снижению содержания гемоглобина на 36%, по сравнению с показателями у контрольных животных. Существенные сдвиги наблюдали в лейкоцитарной формуле. С 5 по 30 сутки инвазии у животных регистрировали увеличение количества эозинофилов с 4,90 до 6,62%. Эозинофилы (4,40%) сохранялись по 30-й день инвазирования, в последующие дни постепенно снижались, на 60-й день после инвазирования достигли 1,50%.
Таблица 1
Гематологические показатели жеребят, иивазироваиных нематодами P. equorum, n= 5
Дни после эксперимента Эритро- циты, млн/мм3 Лейкоциты тыс./мм3 Гемоглобин, % Лейкоцитарная формула, %
Базофи- лы Эозинофи- лы Юные нейтрофи- лы Палочкоядерные нейтрофилы Сегментарные нейтрофилы Лимфоци- ты
5 7,6±0,3 13,1±0,18 6,14±0,22 1,80±0,12 4,90±0,28 - 2,70±0,26 43,30±2,2 41,65±0,89
15 6,9±0,5 15,21 ±0,47 5,78±0,16 1,45±0,17 6,50±0,14 0,65±0,03 4,90±0,62 47,10±1,8 34,85±1,13
30 5,7±0,3 16,53±0,31 5,30±0,28 1,30±0,12 4,40±0,38 0,80±0,012 4,55±0,19 46,38±0,92 38,45±0,7
45 7,5±0,3 14,76±0,36 7,10±0,12 1,70±0,18 1,80±0,22 0,33±0,010 2,60±0,10 43,80±1,24 45,25±2,19
60 7,7±0,3 13,91 ±0,25 7,23±0,31 1,70±0,12 1,50±0,28 - 2,60±0,18 43,80±1,60 45,55±1,33
80 6,6±0,4 17,52±0,32 6,11±0,29 1,50±0,26 5,30±0,44 0,45±0,05 3,80±0,28 45,85±0,73 38,40±0,6
100 5,8±0,3 18,06±0,48 5,43±0,37 1,45±0,19 6,62±0,36 0,57±0,011 4,70±0,16 49,50±1,30 33,96±0,74
В динамике инвазии на 80 и 100-й дни количество эозинофилов увеличивалось (5,3 и 6,2%). Через 15 дней после заражения P. equorum наблюдали появление юных нейтрофилов (0,65%), максимальное их содержание обнаружили на 30-е сутки (0,80%). Затем происходило постепенное снижение содержания юных нейтрофилов. На 45-е сутки их количество составило 0,33%, на 60-е сутки их не обнаруживали. На 80 и 100-е сутки инвазирования отмечали повторное появление в крови юных нейтрофилов, соответственно 0,45% и 0,57% (табл. 1). Количество палочкоядерных нейтрофилов на протяжении опыта оставалось ниже, чем у контрольных агельминтозных особей. Максимальное число их регистрировали на 15 сутки -4,9%, на 80 сутки их было 3,8%, на 100 -4,7% (табл. 1). Количество сегментоядерных нейтрофилов увеличивалось с первых дней и достигало уровня 47,0 и 46,3% на 15 и 30 дни после заражения P. equorum. До 60 дня происходило их постепенное снижение. С 60 по 100 дни инвазирования количество сегментоядерных нейтрофилов у
зараженных жеребят было больше, чем у контрольных животных, на 23%. Количество лимфоцитов максимально уменьшалось на 15 сутки. На 60-е сутки количество лимфоцитов увеличивалось до 45,5% и к 100-му дню достигало 33,96% (табл. 1). У опытных животных в течение всего периода наблюдений содержание лимфоцитов в крови постоянно было меньше, чем у агельминтозных аналогов. Содержание моноцитов у зараженных особей было больше на 8,4%. У контрольных жеребят среднее количество общего белка сыворотки составляло 6,45г%, Р<0,005 (табл. 2). У подопытных жеребят с первых дней заражения наблюдали увеличение количества общего белка в сыворотке крови. Максимум его отмечали на 30-й день заражения 7,48г%, (табл.3). В дальнейшем происходило постепенное уменьшение. На 80100 сутки количество общего белка увеличивалось соответственно до 6,90-7,65г% (Р <0,005) (табл. 3), что свидетельствовало о подъеме уровня белка в крови у зараженных животных до 23,8% [3. С. 16].
44
Известия ДГПУ, №2, 2014
Таблица 2
Биохимические показатели сыворотки крови агельминтозных жеребят ___________________(контрольная группа), n=5 _____________________
Дни эксперимента Общий белок, г % Кальций, мг % Фосфор, мг % Активность щелочной фосфатазы (ЩФ) (усл. ед.) Активность кислой фосфатазы (КФ) (усл. ед.) Нуклеиновые кислоты крови (мг %)
5 6,10±0,14 10,60±0,30 5,70±0,10 7,10±0,12 12,91±0,19 0,107±0,005
15 6,16±0,21 10,45±0,20 6,10±0,22 7,12±0,08 13,60±0,36 0,110±0,02
30 6,22±0,16 11,30±0,42 5,80±0,16 7,12±0,08 14,10±0,46 0,095±0,003
45 6,30±0,27 10,44±0,26 6,10±0,20 7,12±0,08 13,97±0,31 0,100±0,005
60 6,17±0,12 11,0±0,35 6,10±0,14 7,18±0,23 13,76±0,28 0,108±0,004
80 6,31±0,16 10,50±0,15 5,95±0,19 7,22±0,18 13,90±0,16 0,100±0,005
100 6,45±0,38 10,80±0,28 6,10±0,20 7,14±0,13 13,78±0,34 0,110±0,002
Количество неорганического кальция на протяжении опыта варьировало в сторону увеличения или уменьшения, но оставалось в пределах физиологической нормы до конца исследований (таблица 2 и 3). Существенные колебания регистрировались в содержании неорганического фосфора в сыворотке крови в разные сроки после заражения. Пик уменьшения его количества наблюдали на 30-е сутки (1,58 мг%, Р <0,005), тогда как контрольные показатели составляли 5,80 мг%, Р>0,005. Количество неорганического фосфора постепенно увеличивалось к 60 дню (2,8 мг%, Р <0,005), а к 80100 дню снова уменьшалось до 1,3-1,5 мг% (табл. 3). В целом у подопытных жеребят количество неорганического фосфора в сыворотке крови было меньше более чем в 2 раза, по сравнению с контрольными (незараженными) жеребятами (табл. 2 и 3). Соотношение фосфора и кальция в опыте составило 1:4,5 против 1:2 в контрольной группе. У жеребят контрольной группы среднее суммарное количество нуклеиновых кислот составило 0,100 мг% (Р <0,005), а у жеребят подопытной группы с первых дней после заражения регистрировали постепенное увеличение суммарного содержания нуклеиновых кислот в крови.
Особенно были заметными 2 подъема их количества на 30 и 100 сутки (0,19 и 0,24 мг% соответственно). Уровень содержания нуклеиновых кислот у зараженных животных в среднем был ниже, чем у здоровых аналогов, в 1,8 раза. У контрольных животных на протяжении эксперимента активность щелочной фосфатазы (ЩФ) в сыворотке крови колебалась в пределах 7,10-7,22 усл. ед., кислой фосфатазы (КФ) - 12,91-14,10 усл. ед. (табл. 2). У подопытных жеребят активность ЩФ и КФ увеличивалась соответственно до 18,47 и 18,91 усл. ед. на 15-й день после заражения. Это было больше контрольных показателей на 32-65%. В дальнейшем активности фосфатаз возрастали. С 60 дня инвазирования регистрировали подъем активности щелочной фосфатазы (ЩФ), которая достигала 22,83-29,15 усл. ед. на 80-100-е сутки. Напротив, активность кислой фосфатазы (КФ) имела тенденцию к постепенному уменьшению и на 100-е сутки составила 16,58 усл. ед. У жеребят при инвазии P. equorum активности фосфатаз в крови всегда были выше, чем у агельминтозных аналогов, что является критерием оценки степени развития патоморфологических изменений в организме (табл. 2 и 3).
Таблица 3
Биохимические показатели сыворотки крови жеребят, зараженных нематодами ______________________________P. equorum________________________________
Дни Общий белок г % Кальций мг % Фосфор мг % ЩФ (усл. ед.) КФ усл. ед. Нуклеиновые кислоты (мг %)
5 6,93±0,31 9,36±0,16 3,28±0,12 16,00±0,40 16,28±0,52 0,164±0,08
15 7,32±0,26 11,20±0,24 2,43±0,17 18,47±0,37 18,91 ±0,67 0,214±0,06
30 7,48±0,52 10,80±0,30 1,58±0,11 17,80±0,30 17,38±0,46 0,195±0,01
45 6,60±0,24 10,44±0,18 2,16±0,24 12,64±0,46 15,10±0,32 0,170±0,01
60 6,25±0,37 11,10±0,12 2,85±0,30 16,05±0,19 14,91 ±0,39 0,200±0,04
80 6,90±0,18 10,76±0,38 1,52±0,16 22,83±0,31 15,70±0,40 0,216±0,02
100 7,65±0,42 10,94±0,26 1,30±0,10 29,15±0,67 16,58±0,28 0,248±0,06
Естественные и точные науки •••
В опытах установлено, что содержание эритроцитов в крови животных 2-5 групп, зараженных параскаридозной инвазией, снижается в 1,7-2,0 раза (на 4,3-
5,2 млн/мкл). Во 2-ой группе лошадей показатель уровня эритроцитов в крови в течение опыта имел тенденцию к дальнейшему снижению пропорционально прогрессированию инвазии. В конечном этапе опыта (60-й день) значение описываемого показателя было ниже уровня фона и контрольной цифры в 2,2 и 3,0 раза (на 3,29 и 6,2 млн/мкл). Обработка лошадей (3 группа) «нилсалом» в дозе 25 мг/кг массы тела вызывала торможение в крови процессов гемолиза эритроцитов и незначительное повышение их количества по сравнению с фоновым показателем. Более высокая активность эритро-поэза в организме лошадей отмечалась при дегельминтизации «нилсалом в дозе 25 мг/кг массы тела на фоне применения комплекса «поливит» + «иммунопарази-тан» (витамин и иммуностимулятор) (5 группа). Содержание эритроцитов в крови животных 5-ой группы на 15 день опыта было больше показателей лошадей 2, 3 и 4 групп в 1,42, в 1,23 и 1,27 раза (на 1,83, на 0,91 и 0,98 млн/мкл), на 30 день - в 2,72, в 1,91 и 1,30 раза (на 7,50, на 5,8 и 2,52 млн/мкл), на 45 день - в 2,80, в 1,50 и 1,20 раза (на 6,90, на 3,52 и 1,03 млн/мкл), на 60 день - в 3,49, в 1,74 и 1,20 раза (на 7,7, на 4,5 и 1,8 млн/мкл). В начале опытов у зараженных лошадей 2-5 групп содержание эозинофилов в крови было повышено в 1,26-1,32 раза (на 104,2-130,6 ед./мкл). Уровень эозинофилов в крови лошадей 2 группы прогрессивно увеличивался, по срокам исследований, и превысил контрольное значение к концу опыта в 2,82 раза (на 813,4 ед./мкл). В крови лошадей 3, 4 и 5 групп отмечалось постепенное уменьшение содержания эозинофилов, а затем и их полное восстановление на фоне комплексной терапии (5 группа).
Динамика изменения показателей ли-зоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови лошадей при параскаридозе и на фоне применения этиотропной и иммунопатогенетической терапии не изучена.
В наших исследованиях показатель комплементарной активности сыворотки крови животных 2-5 групп к началу опытов был понижен в 1,6-1,7 раза (на
4,8-5,3 ед.). В сыворотке крови кобыл 2 группы, не подвергнутых лечению, ее
45
значение уменьшилось, по сравнению с контрольным показателем, к 15, 30, 45 и 60-м дням в 1,55; 2,18; 2,37 и 3,10 раза (на 4,2; 7,5; 7,2 и 8,0 ед.). В опытных группах комплементарная активность сыворотки крови лошадей имела тенденцию к повышению. Максимума активность комплемента достигла у лошадей 5 группы к 45 дню и превышала контрольную цифру в 3,5 раза (на 32,4 ед.). Аналогичные показатели кобыл 2, 3 и 4 групп были больше в 8,2; 2,8 и 1,4 раза (на 38,0; 27,1 и
12.2 ед.). Комплементарная активность сыворотки крови лошадей 5 группы до конца опыта оставалась на высоком уровне, при этом она была выше контрольной цифры в 3,5 раза (на 28,5 ед.), лошадей 2, 3 и 4 групп в 9,8; 2,9 и 1,7 раза (на 36,3; 25,9 и 14,0 ед.).
Показатели Т- и В-систем иммунитета при параскаридозе лошадей в зависимости от интенсивности инвазии имеют тенденцию к снижению. Анализ фактического материала показал, что уровень Т-Е-РОК-лимфоцитов к началу опытов в крови больных животных 2, 3, 4 и 5 групп был понижен в 1,38-1,42 раза (на
12.8- 14,2%). Показатель Т-Е-РОК-лимфоцитов в крови лошадей 2 группы имел тенденцию к дальнейшему снижению: на 15-60-е дни - в 1,2; 1,3; 1,4 и 1,7 раза (на 4,0; 7,1; 9,7 и 12,5%). Содержание Т-Е-РОК-лимфоцитов в крови лошадей 3, 4 и 5 опытных групп по срокам опыта, напротив, имело тенденцию к повышению. Максимальное повышение уровня Т-Е-РОК-лимфоцитов отмечалось в крови лошадей 5 группы. К 30 дню показатель Т-Е-РОК-лимфоцитов в крови лошадей 5 группы был выше значений их у животных 1 контрольной и 2, 3 и 4-ой групп в 1,1; 2,0; 1,5 и 1,3 раза (на 3,6; 27,0;
14.2 и 10,3%), к 45-у дню - в 1,3; 2,5; 1,4 и
1.2 раза (на 5,6; 30,2; 13,1 и 9,0%), к 60-у дню - в 1,2; 2,4; 1,3 и 1,2 раза (на 2,9; 31,3;
10,4 и 7,2%). Значение В-ЕАС-лимфоцитов в крови животных 2, 3 и 4 групп было снижено в 1,4-1,6 раза (на
4.8- 5,2%). Содержание В-ЕАС-клеток в
крови лошадей 2 группы интенсивно снижалось дальше по срокам исследований и уступало контрольному показателю на 15-60-е дни опыта в 1,5; 1,8; 2,2 и 3,1 раза (на 5,3; 7,9; 10,3 и 11,0%). Дегельминтизация лошадей 3 группы способствовала некоторому повышению содержания В-лимфоцитов в крови. Максимального значения В-ЕАС-
лимфоциты достигли в крови животных
46
Известия ДГПУ, №2, 2014
5 группы. К 15 дню опыта их уровень превышал показатели 2, 3 и 4-й групп в 1,48; 1,26 и 1,13 раза (на 4,8; 2,9 и 1,3%), к 30 дню - 2,2; 1,6 и 1,4 раза (на 9,4; 4,6 и 2,5%), к 45-му дню - в 2,8; 1,3 и 1,6 раза (на 12,0; 3,3 и 2,6%). До конца опытов показатель В-лимфоцитов в крови кобыл 5 группы оставался на самом высоком физиологическом уровне [3. С. 17].
Выводы
При параскаридозе лошадей: 1) отмечаются замедление гемо- и эритропоэза, развитие лейкоцитоза, эозинофилия;
снижение лизоцимной, бактерицидной, комплементарной активности сыворотки и фагоцитарной активности лейкоцитов крови [3. С. 21];
2) наблюдается нарушение баланса клеток Т- и В-систем иммунитета в виде уменьшения в крови содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов, В-ЕАС-лимфоцитов при увеличении уровня Т-супрессоров;
3) отмечается усиление активности макрофагов, нейтрофилов, моноцитов на фоне снижения содержания лимфоцитов и плазматических клеток.
Литература
1. Двойное Г. М. Прижизненная и посмертная диагностика и идентификация гельминтов лошадей // Г. М. Двойнос // Методические рекомендации. М. : Агропромиздат, 1993. 86 с. 2. Зотов В. А. Опыт оздоровления хозяйств Смоленской области от параскаридоза лошадей // Зотов В. А. // Легочные гельминты жвачных животных. М., 1981. С. 239-242. 3. Минбулатова И. С. Влияние кишечных нематод и методов регуляции их численности на биоресурсный потенциал лошадей в условиях Дагестана. Автореф. дисс. ... канд. биол. наук. Владикавказ, 2011. 24 с. 4. Петров Ю. Ф. Динамика эпизоотии параскаридоза лошадей // Ю. Ф. Петров // Ветеринария. 1998. № 4. С. 17-19. 5. Понаморев Н. М. Локализация параскарид в кишечнике лошадей // Понаморев
H. М. // Паразиты и вызываемые ими болезни в Сибири. Новосибирск, 1997. С. 99-100.
6. Скрябин К. И. Параскаридоз лошадей и меры борьбы с ним // Скрябин К. И. // M. : Изд-во «Жизнь и знание». 1935. С. 55-78.
References
I. DvoynosG. M. Life-timeandante-mortem diagnostics and identification of horse helminthes //
G. M. Dvoynos // Methodical recommendations. M. : Agropromizdat, 1993. 86 p. 2. Zotov V. A. Wellness experience of farms in Smolensk region from horse parascariosis // V. A. Zotov // Coll: Pulmonary helminthes of ruminants. M. : 1981. P. 239-242. 3. Minbulatova I. S. Effect of intestinal nematodes and methods of regulation of their numbers on the bioresource potential of horses in conditions of Dagestan. Abstr. Diss. Cand. Biol.. Vladikavkaz, 2011. 24 p. 4. Petrov Yu. F. The dynamics of the epizooty of horses parascariosis // Yu. F. Petrov // Veterinary. 1998. # 4. P. 17-19. 5. Ponamorev N. M. Localization of parascarides in the horses intestine // N. M. Ponamorev // Parasites and related diseases in Siberia. Novosibirsk. 1997. P. 99-100. 6. Scryabin K. I. Parascaridosis of horses and control measures // K. I. Skryabin // M. : Publ. "Life and Knowledge”. 1935. P. 55-78. Literatura
1. Dvojnos G. M. Prizhiznennaja I posmertnaja diagnostika, iidentifikacija gel'mintov loshadej //
G. M. Dvojnos // Metodicheskie rekomendacii. M. : Agropromizdat, 1993. 86 s. 2. Zotov V. A. Opyt ozdorovlenija hozjajstv Smolenskoj oblasti ot paraskaridoza loshadej // V. A. Zotov // Legochnye gel'minty zhvachnyh zhivotnyh. M. . 1981. S. 239-242. 3. Minbulatova I. S. Vlijanie kishechnyh ne-matod i metodov reguljacii ih chislennosti na bioresursnyj potencial loshadej v uslovijah Dagestana / I. S. Minbulatova // Avtoref. diss. kand. biol. nauk. Vladikavkaz, 2011. 24 s. 4. Petrov Ju. F. Dinami-ka jepizootii paraskaridoza loshadej // Ju. F. Petrov // Veterinarija. 1998. № 4. S. 17-19. 5. Ponamorev N. M. Lokalizacija paraskarid v kishechnike loshadej // N. M. Ponamorev // Parazity i vyzyvaemye imi bolezni v Sibiri. Novosibirsk. 1997. S. 99-100. 6. Skrjabin K. I. Paraskaridoz loshadej i mery bor'by s nim // K. I. Skrjabin // M. : Izd. "Zhizn' I znanie". 1935. S. 55-78.
Статья поступила в редакцию 26.03.2014 г.
