CC BY
198
УДК 616.316-008.8-078.33-053.2
диагностическое значение определения концентрации иммуноглобулинов в секрете ротовой полости
Е. В. Троицкая, И. П. Корюкина, Т. Ю. Цветкова, Л. В. Софронова
Пермская государственная медицинская академия им. ак. Е. А. Вагнера, г. Пермь
У 32 детей из группы часто болеющих и у 8 человек с первичными иммунодефицитами (7 — с селективным дефицитом иммуноглобулина А, 1 — с Х-сцепленной агаммаглобулинемией) определялось содержание в слюне секреторного иммуноглобулина А, иммуноглобулинов М и & Выявлена крайне низкая концентрация секреторного иммуноглобулина А в слюне при исследуемых первичных иммунодефицитах. У часто болеющих детей, не имевших признаков первичных иммунодефицитов, отмечалось повышение содержания иммуноглобулинов исследуемых классов в слюне в связи с воспалительным процессом в верхних дыхательных путях. После проведения иммуностимулирующей терапии полиоксидонием 11 пациентам из группы часто болеющих без признаков первичных иммунодефици-тов было получено достоверное нарастание уровня секреторного иммуноглобулина А в слюне.
Ключевые слова: секреторный иммуноглобулин А, иммунодефициты, слюна, дети, полиоксидоний.
Введение
С начала ХХ века слюна активно используется в качестве «диагностической жидкости» [8]. Этому способствует неинвазивность забора и относительная дешевизна методик [7]. В последнее время возрос интерес к определению содержания различных защитных факторов в слюне с целью оценки иммунного статуса обследуемых [2, 3, 4].
В слюне содержатся иммуноглобулины всех трех основных классов: А, О, М [6]. Основным фактором иммунной защиты слизистых являются секреторные иммуноглобулины А представляющие собой диме-ры или более крупные полимеры из ^-мономеров, соединенные с секреторным компонентом, который образуется эпителиальными клетками [1]. Определенную роль играют ^О и ^М [5].
Цель исследования — изучение уровня sIgА, ^М, ^О в слюне у часто болеющих детей и оценка их диагностической значимости.
Материалы и методы исследования
Всего обследовано 40 человек: 32 ребенка в возрасте от 4 до 17 лет из группы часто болеющих, не имевших клинико-лабораторных признаков первичных имму-нодефицитов, и 8 пациентов с первичными иммунодефицитами по гуморальному типу.
Часто болеющие дети (некоторые из которых обследованы в динамике) были разделены на следующие группы:
1-я — пациент здоров на момент обследования и не болел в течение месяца до него («здоровые» часто болеющие — ЗдЧ) — 9 человек;
2-я — пациент в течение месяца перенес ОРЗ и на момент обследования имеет катаральные явления (рецидивирующий или затяжной воспалительный процесс — РЗ) — 11 человек;
3-я — пациент в течение месяца не болел, на момент обследования имеются катараль-
Полученные результаты обрабатывались с помощью методов вариационной статистики. Результаты представлены в виде средней арифметической и ее стандартной ошибки. Достоверность различий между группами (р) оценивалась согласно t-критерия Стьюдента. В некоторых случаях использовали корреляционный анализ (коэффициент корреляции рангов Спирмена). Различия показателей считали значимыми при р<0,05. Расчеты проведены с использованием IBM PC программы Excell.
Результаты и их обсуждение
Изучение содержания sIgA, ^М и IgG в слюне у часто болеющих детей в возрастном аспекте с использованием корреляционного анализа не выявило достоверных различий во всех группах обследуемых.
Сравнение уровней иммуноглобулинов слюны у часто болеющих детей показало их более высокое значение у пациентов, имевших признаки воспалительного процесса верхних дыхательных путей на момент забора анализа или в течение последнего месяца до него, что видно из таблицы 1.
Наиболее высокие концентрации s^ наблюдались у детей с острым воспалительным процессом в верхних дыхательных путях: уровень s^ у этих пациентов в 3 раза превышал показатель обследуемых, не имевших воспалительных процессов на момент забо-
Таблица 1
Уровень иммуноглобулинов в слюне у часто болеющих детей в зависимости от стадии
воспалительного процесса (М+m)
ные явления (острый воспалительный процесс — ОВ) — 7 человек;
4-я — пациент на момент обследования здоров, в течение последнего месяца перенес ОРЗ (реконвалесцент — Рек.) — 11 человек.
Отдельную группу составили больные со снижением ^ в сыворотке крови ниже 0,05 г/л: 7 человек в возрасте от 3 до 18 лет с селективным дефицитом ^ (у 3 содержание sIgA в слюне определено 2 раза, у 1 — 3 раза, у 3 — 1 раз) и один четырнадцатилетний мальчик с Х-сцепленной гипогам-маглобулинемией (уровень sIgA определялся 3 раза, ^М и ^ — 2 раза).
Уровень sIgА слюны определяли методом иммуноферментного анализа на твердофазном носителе с использованием набора реагентов для иммуноферментного определения концентрации секреторного иммуноглобулина А в биологических жидкостях человека; уровень иммуноглобулинов М и G в слюне определяли методом иммуноферментного анализа на твердофазном носителе с использованием набора реагентов для иммунофер-ментного определения концентрации иммуноглобулинов М и G в сыворотке крови и других биологических жидкостях человека. Уровень сывороточных иммуноглобулинов А, М, G в сыворотке крови определялся методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини. Применялись тест-системы производства ЗАО «Вектор-Бест» (пос. Коль-цово Новосибирской области).
ЗдЧ ОВ РЗ Рек.
(n=9) (n=7) (n=11) (n=11)
sIgА, мкг/мл 191,67+66,48 636,33+169,31 * 487,09+136,29* 297,73+43,13** ***
IgM, мкг/мл 2,63±0,77 11,03+3,99* 7,39+1,85* 8,02+2,72*
IgG, мкг/мл 15,06+8,71 42,43+14,19 77,80+29,75* 30,41 + 11,28
Примечание. * — разница статистически достоверна при сравнении с группой ЗдЧ (р<0,05); ** — разница статистически достоверна при сравнении с группой ОВ (р<0,05); *** — разница низкодостоверна при сравнении с группой ЗдЧ (0,05<р<0,1).
ра анализов и в течение месяца до него. В период реконвалесценции и в группе РЗ повышение уровня sIgА было менее выраженным. Данный факт позволяет считать высокую концентрацию sIgА в слюне маркером острого воспалительного процесса в дыхательных путях.
Уровень ^М в слюне также достоверно повышался при воспалительном процессе в верхних дыхательных путях.
Наиболее высокие концентрации ^О в слюне отмечались у детей с затяжным или рецидивирующим воспалительным процессом в верхних дыхательных путях, что свидетельствует о более позднем синтезе иммуноглобулинов этого класса.
У пациентов с селективным дефицитом ^ и Х-сцепленной гипогаммаглобулинеми-ей уровень sIgА в слюне составлял от 0 до 73 мкг/мл. У детей, не имевших первичных иммунодефицитов, содержание sIgА в слюне никогда не было ниже 50 мкг/мл. Средние значения концентрации иммуноглобулинов в слюне у детей с селективным дефицитом иммуноглобулина А и у часто болеющих детей без первичных иммунодефицитов представлены в таблице 2.
Концентрация ^М в слюне у пациентов с селективным дефицитом ^ была несколько выше фоновой (соответствуя уровню при остром воспалительном процессе у детей без первичного иммунодефицита), что согласу-
ется с литературными данными о возможности компенсаторного замещения недостатка sIgА иммуноглобулинами класса М [5].
У мальчика с Х-сцепленной гипогамма-глобулинемией уровень ^М в слюне был практически нулевым, а уровень ^О слюны — низким. В анализе, взятом до очередного сеанса заместительной терапии внутривенными иммуноглобулинами, при концентрации ^О в сыворотке крови 3,5 г/л, содержание иммуноглобулинов этого класса в слюне составило 1 мкг/мл. В контрольном анализе, взятом после проведения заместительной терапии, приведшей к повышению концентрации ^О в сыворотке крови до 8,5 г/л, содержание иммуноглобулинов этого класса в слюне возросло до 6,9 мкг/мл.
При индивидуальном сравнении содержания в слюне sIgА, ^О и ^М у часто болеющих детей без первичного иммунодефицита с использованием корреляционного анализа отмечена прямая корреляция между концентрациями иммуноглобулинов всех исследуемых классов.
Из числа обследованных 15 человек получили иммуностимулирующую терапию полиоксидонием с последующим контрольным обследованием, в том числе 3 ребенка с селективным дефицитом ^ и один ребенок с Х-сцепленной гипогаммаглобулине-мией. У детей, не имевших первичного иммунодефицита (11 человек), наряду с клиниче-
Таблица 2
Уровень иммуноглобулинов в слюне у пациентов с селективным дефицитом иммуноглобулина А и у часто болеющих детей (М±m)
Селективный дефицит IgА Группа ОВ Группа ЗдЧ
(П=7) (П=7) (П=9)
sIgА, мкг/мл 6,15±2,86 636,33+169,31 ** 191,67+66,48 **
^М, мкг/мл 13,10+3,22 11,03+3,99 2,63+0,77**
IgG, мкг/мл 21,86±10,08 42,43+14,19 15,06+8,71
Примечание. * — разница достоверна по сравнению с показателем при селективном дефиците IgA (р<0,05); ** — разница высокодостоверна по сравнению с показателем при селективном дефиците IgA (р<0,005).
ским улучшением отмечено повышение в слюне иммуноглобулинов всех исследуемых классов. Средние значения концентрации иммуноглобулинов слюны у часто болеющих детей до и после терапии полиоксидо-нием представлены в таблице 3.
Таблица 3
Результаты терапии полиоксидонием у часто болеющих детей (М+m)
До лечения (n=11) После лечения (n=11)
sIgA, мкг/мл 238,00+38,01 361,55+41,87*
IgM, мкг/мл 5,22+1,81 6,64+1,70
IgG, мкг/мл 19,61+8,96 31,20+8,76
Примечание. * — разница достоверна (р=0,02).
Из 3 пациентов с селективным дефицитом ^ после терапии полиоксидонием у одной девочки отмечено значительное повышение концентрации sIgА (с 24 до 73 г/л), у остальных сохранился нулевой уровень, но клинически наблюдалось улучшение.
Использование полиоксидония у ребенка с Х-сцепленной гипогаммаглобулинемией не дало заметного эффекта.
Выводы
Определение уровня секреторного иммуноглобулина А в слюне может использоваться для скрининговой диагностики форм первичных иммунодефицитов, при которых отсутствует синтез иммуноглобулинов класса А.
Повышение концентрации иммуноглобулинов в слюне может служить маркером текущего или недавно перенесенного воспалительного процесса в верхних дыхательных путях.
Определение уровня иммуноглобулинов слюны в динамике может использоваться для
динамического наблюдения за состоянием
иммунной системы и оценки эффективности терапии.
Библиографический список
1. Беляков И. М. Иммунная система слизистых/И. М. Беляков///Иммунология— 1997.- № 4.— С. 7—13.
2. Диагностика состояния общего и местного гуморального иммунитета у больных поллинозом при сублингвальной ал-лергенспецифической иммунотерапии/ М. В. Манжос, Е. С. Феденко, М. А. Мягкова и др.//Иммунология, аллергология, инфек-тология— 2009.— № 3.— С. 27—31.
3. Колонизационная резистентность и иммунологическая реактивность слизистых ротоглотки у детей в норме и при бронхо-легочных заболеваниях/В. А. Метельская,
B. А. Алешкин, Е. А. Воропаева и др.//Вест-ник Российской АМН.— 2010.— № 7—
C. 10—15.
4. Попов Н. Н. Состояние местного и общего иммунитета у часто болеющих детей с синдромом лимфаденопатии/Н. Н. Попов, А. Н. Савво, Е. А. Романова//Медицинская иммунология.— 2009.— Т. 11.— № 6— С. 581—586.
5. Рязанцев С. В. Роль слизистой оболочки в защите ЛОР-органов от потенциально патогенных для организма факторов/ С. В. Рязанцев, Н. М. Хмельницкая, Е. В. Тыр-нова//Вестник отоларингологии.— 2000— № 3.— С. 60—65.
6. Тотолян А А. Современные подходы к диагностике иммунопатологических со-стояний//Медицинская иммунология.— 1999.— Т. 1.— № 1—2— С. 75—107.
7. Hofman L. F. Human saliva as a diagnostic specimen//}. Nutr— 2001.— Vol. 131.— № 5— P. 1621—1626.
8. Tabak L. A. A revolution in biomedical assessment: the development of salivary diag-
nostics//J. Dent. Educ.- 2001.- Vol. 65.-№ 12.- P. 1335-1344.
E. V. Troitskaya, I. P. Koryukina, T. Yu. Tsvetkova, L. V. Sofronova
diagnostic value of assessing immunoglobulin concentration in oral secretion
The salivary secretory immunoglobulin A, immunoglobulins M and G content was assessed in 32 children from the group of high sickness rate and in 8 subjects with primary immunodeficiency (7 — with selective deficiency of immunoglobulin A, 1 — with X-linked agammaglobulinemia). Extremely low salivary secretory immunoglobulin A concentration in primary immunodeficiencies was detected. In children with high sickness rate without primary immunodeficiency signs, increase in
the salivary immunoglobulin content (of the investigated classes) connected with inflammatory process of the upper airways was observed. After the immunostimulating polyoxidonium therapy, 11 patients from the group of high sickness rate without primary immunodeficiency signs had significant growth of the salivary secretory immunoglobulin A level.
Keywords: secretory immunoglobulin A, immune deficiency, saliva, children, poly-oxidonium.
Контактная информация: Троицкая Екатерина Валерьевна, аспирант кафедры педиатрии ФПК и ППС Пермской государственной медицинской академии им. ак. Е. А. Вагнера, 614000, г. Пермь, ул. Петропавловская, 26, тел. 8 (342) 212-79-16
Материал поступил в редакцию 12.01.2011
