CC BY
101
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015 УДК 616.314-002-07:616.316.078.33
Хейгетян А.В.1, Брагин Е.А.2, Максюков С.Ю.1, Лабуш кина А.В.1, Алутина Э.Л.1, Харсеева Г.Г.1
ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ У БОЛЬНЫХ С КАРИЕСОМ КОНТАКТНЫХ ПОВЕРХНОСТЕЙ БОКОВЫХ ЗУБОВ
1ГБОУ ВПО Ростовский государственный медицинский университет Минздрава России, 344022, г. Ростов-на-Дону, Россия, 2ГБОУ ВПО Ставропольский государственный медицинский университет Минздрава России, 355017, г. Ставрополь, Россия
Обследованы больные 18-45 лет с кариесом контактных поверхностей боковых зубов (n = 38) и практически здоровые взрослые 18-20 лет с интактными зубами (n = 18). Материалом для исследования послужила слюна, взятая натощак в объеме 3-4мл в центрифужную пробирку. Для определения секреторного иммуноглобулина (sIgA), интерлейкина (ИЛ) 1р, ИЛ-4 и интерферона у (ИФН-у) слюну центрифугировали 15 мин при 1500 об/мин и исследовали надосадочную жидкость методом иммуноферментного анализа (тест-системы фирмы «Вектор-Бест», Новосибирск). Учет реакции осуществляли с помощью мультискана фирмы Labsystem при длине волны 450 нм. Содержание sIgA выражали в мг/л, цитоки-нов - в пг/мл. Показано, что средний уровень ИЛ-ip у больных кариесом почти в два раза выше (р < 0,05) аналогичного показателя у здоровых обследованных. Средний уровень ИФН-у у практически здоровых пациентов значительно (более чем в 10 раз) превышал верхнюю границу допустимой нормы и был выше (р < 0,05) по сравнению с таковым у больных кариесом контактных поверхностей. При изучении содержания sIgA в слюне установлено, что у практически здоровых пациентов средние значения данного показателя были выше (р < 0,05), чем у больных кариесом контактных поверхностей боковых зубов.
У больных кариесом контактных поверхностей боковых зубов обнаружено пониженное содержание в слюне sIgA и ИФН-у на фоне повышенного уровня ИЛ-ip, что может рассматриваться как фактор, предрасполагающий к развитию кариозного процесса.
Ключевые слова: кариес контактных поверхностей; цитокины; секреторный иммуноглобулин A.
Для цитирования: Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60 (8): 52-54. HeigetyanA.V.1, BraginE.A.2, MaksiukovS.Yu.1, LabushkinaA.V.1, AlutinaE.L.1, Harseeva G.G.1 THE IMMUNOLOGIC INDICATORS IN PATIENTS WITH CARIES OF CONTACT SURFACES OF LATERAL TEETH
1The Rostov state medical university of Minzdrav of Russia, 344022 Rostov-on-Don, Russia; 2The Stavropol state medical university of Minzdrav of Russia, 355017 Stavropol, Russia
The samplings of patients aged 18-45 years with caries of contact surfaces of lateral teeth (n=18) and healthy adults aged 18-20 years with intact teeth (n=18) were examined. The saliva taken in rotary vial on empty .stomach in amount of 3-4 ml served as assay for analysis. To identify secretory immunoglobulin A, interleukin 1p, interleukin-4 and interferon у saliva was centrifuged during 15 min under 1500 rpm. The supernatantfluid was analyzed using enzymoimmunoassay (test-systems "Vector-Best", Novosibirsk). The registration of reaction was implemented using multiscan Labsystem under wavelength 450 nm. The content of secretory immunoglobulin A was expressed in mg/l, cytokines - in pg/ml. It is demonstrated that in patients with caries average level of interleukin 1p was almost two times higher (p<0.05) than analogous indicator in healthy examined patients. In healthy patients average level of interferon у significantly (more than in 10 times) exceeded upper limit of allowable standard and was higher (p<0.05) in comparison with such in patients with caries of contact surfaces. The analysis of content of secretory immunoglobulin A in saliva established that in healthy patients average values of the given indicator were higher (p<0.05) than in patients with caries of contact surfaces of lateral teeth. The lower content of secretory immunoglobulin A and interferon у against the background of increased level of interleukin 1p was detected in saliva ofpatients with caries of contact surfaces of lateral teeth. This occurrence can be considered as factor predisposing to development of caries process.
Keywords: caries of contact surfaces; cytokines; secretory immunoglobulin A
Citation: Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2015; 60 (8): 52-54. (in Russ.)
Введение. Кариес зубов до настоящего времени остается одним из самых распространенных заболеваний, несмотря на постоянно совершенствующиеся методы его профилактики, диагностики и лечения [1-3]. У взрослых людей различных возрастных групп кариес контактных поверхностей боковых зубов стоит по распространенности на втором месте после кариеса их окклюзионных поверхностей [4] и сопровождается изменением иммунологических показателей слюны пациентов [5]. Одним из важнейших условий возникновения кариеса является недостаточность местного врожденного и адаптивного иммунитета полости рта [5].
Основным фактором защиты зубов от кариеса, способ-
Для корреспонденции: Хейгетян Артур Вараздатович, e-mail: [email protected]
For correspondence: HeigetianA.V, [email protected]
ствующим поддержанию гомеостаза полости рта, является слюна, содержащая иммуноглобулины (в основном секреторный иммуноглобулин А ^^А)), цитокины, лизоцим, протеолитические ферменты, муцин [6]. sIgА отличается устойчивостью к воздействию протеолитических ферментов, которые содержатся в слюне. Микроорганизмы, входящие в состав зубной бактериальной бляшки, усиливают синтез sIgА [7]. У лиц, страдающих кариесом, установлена четкая зависимость пораженности кариозным процессом от уровня секреторного sIgА в смешанной слюне [8]. Качественные и количественные изменения слюны, характер слюноотделения, рН в значительной степени влияют на кариес-устойчивость и кариес-восприимчивость. Как известно, цитокины являются регуляторами иммунного ответа в организме при различных патологических состояниях воспалительного и невоспалительного характера [9, 10]. Содержащиеся в зубном налете микроорганизмы стимулируют выработку цитокинов. В свою
ИММУНОЛОГИЯ
Таблица 1
Содержание цитокинов в слюне
Группа ИЛ-ф (норма 0-107 пг/мл) ИЛ-4 (норма 0-2 пг/мл) ИФН-у (норма 0-6 пг/мл)
Практически здоровые пациенты (n = 18):
уровень цитокинов (М±т) 111,3±12,5* 7,1±1,0 75,2±18,0*
количество пациентов, имевших значения выше нормы 8 (44,4±11,7%) 7 (38,9±11,5%) 18 (100%)
Пациенты с кариесом контактных поверхностей (n = 38):
уровень цитокинов (М±т) 220±11,3* 8,4±1,6 44,7±3,4*
количество пациентов, имевших значения выше нормы 13 (34,2±7,7%) 16 (42,2±8,01%) 37 (97,4±2,6%)
П р и м е ч а н и е. Здесь и в табл. 2: * - достоверность различий (р < 0,05) между аналогичными показателями у здоровых и больных кариесом контактных поверхностей.
Таблица 2
Концентрация секреторного IgА в слюне
Группа slgA в норме (115,3-299,7 мг/л) slgA выше нормы slgA ниже нормы
Практически здоровые пациенты (n = 18):
уровень slgA (М±т) 218,7±22,4* 409,7±15,9 105,0±3,0
количество пациентов 10 (55,6±11,7%) 6 (33,3±11,1%) 2 (11,1±7,4%)
Пациенты с кариесом контактных поверхностей (n = 38):
уровень slgA (М±т) 162,4±12,0* 382,9±27,9 107,0±1,8
количество пациентов 18 (47,4±8,2%) 11 (28,9±7,4%) 9 (23,7±6,9%)
очередь, провоспалительные цитокины усиливают проницаемость тканей ротовой полости, что имеет важное значение в патогенезе кариеса. Однако единого мнения о роли про- и противовоспалительных цитокинов в развитии кариеса пока нет [11]. В связи с этим представляет интерес исследование изменений уровня иммунологических показателей в слюне у людей с кариозными поражениями контактных поверхностей боковых зубов.
Целью настоящего исследования явилось определение уровней slgA, про- и противовоспалительных цитокинов в слюне у больных кариесом контактных поверхностей боковых зубов.
Материалы и методы. Обследовано 18 практически здоровых людей 18-20 лет и 38 больных кариесом контактных поверхностей боковых зубов 18-45 лет.
Материалом для исследования послужила слюна, взятая натощак в объеме 3-4 мл в центрифужную пробирку. Слюну центрифугировали 15 мин при 1500 об/мин и исследовали надосадочную жидкость методом иммуноферментного анализа с помощью тест-систем (фирма «Вектор-Бест», Новосибирск) для определения slgA, интерлейкина (ИЛ) 1ß, ИЛ-4 и интерферона у (ИФН-у). Учет реакции осуществляли с помощью мультискана фирмы Labsystem при длине волны 450 нм. Расчет количества slgA, ИЛ-ф, ИЛ-4 и ИФН-у проводили в соответствии с прилагаемой инструкцией с помощью калибровочной кривой. Содержание slgA выражали в мг/л, цитокинов - в пг/мл. Статистическую обработку результатов проводили с использованием статистических пакетов Microsoft Excel 2000 и Statistica для Windows ХР с использованием параметрических и непараметрических методов статистики. При анализе полученных результатов определяли средние величины и стандартную ошибку (M±m). Достоверность полученных данных оценивали при уровне значимостиp < 0,05.
Результаты и обсуждение. При исследовании содержания цитокинов в слюне у практически здоровых пациентов установили, что средний уровень ИЛ-ф (113±12,5 пг/мл) незначительно превышал верхнюю границу нормальных значений (107 пг/мл) (табл. 1). При этом у пациентов с кариесом контактных поверхностей боковых зубов средние показатели RH-1ß (220±11,3 пг/мл) были почти в два раза выше (р < 0,05) аналогичного показателя у здоровых обследованных. Это свидетельствует о роли данно-
го цитокина в формировании кариозного процесса, связанного с деструкцией и повреждением твердой ткани зуба. При этом, сравнивая количество лиц, имевших значения ИЛ-1Р выше нормы, никаких отличий между группами практически здоровых и больных кариесом контактных поверхностей мы не выявили. Средние значения ИЛ-4 у здоровых пациентов (7,1±1,0 пг/мл) почти в три раза превышали верхнюю границу нормы (2 пг/мл) и статистически не отличались от аналогичного показателя у пациентов с кариесом контактных поверхностей. Количество лиц с показателями ИЛ-4 выше нормы у больных с кариесом не имело статистически значимых отличий от такового у здоровых. Возможно, фактором, предрасполагающим к возникновению кариеса, является гуморальная направленность иммунитета, о чем свидетельствует повышенный уровень ИЛ-4 у обследованных. У здоровых обследованных, несмотря на отсутствие кариозного процесса, содержание ИЛ-4 было выше нормы, что можно рассматривать как настораживающий факт относительно дальнейшей перспективы развития кариеса.
Средний уровень ИФН-у (75,2±18 пг/мл) у практически здоровых пациентов значительно (более чем в 10 раз) превышал верхнюю границу допустимой нормы (6 пг/мл) и был выше (р < 0,05) по сравнению с таковым у больных с кариесом контактных поверхностей (44,7±3,4 пг/мл). При сравнении количества лиц, имевших значения ИФН-у выше нормы, отличий между пациентами двух исследованных групп не обнаружено (см. табл. 1).
Пониженный уровень ИФН-у в слюне у пациентов с кариесом контактных поверхностей меняет соотношение регу-ляторных цитокинов в пользу ИЛ-4, что свидетельствует о превалировании у них №2-направленности иммунного ответа. Выраженная гуморальная направленность иммунного ответа, зафиксированная на основании динамики содержания ИФН-у и ИЛ-4 в слюне, была выявлена у больных кариесом.
При изучении содержания sIgА в слюне установлено, что у практически здоровых пациентов средние значения данного показателя (218,7±22,4 мг/л) были выше (р < 0,05), чем у больных кариесом контактных поверхностей боковых зубов (162,4±12,0 мг/л) (табл. 2).
Среди здоровых обследованных и больных кариесом были обнаружены пациенты, имевшие средние показатели как выше (28,9±7,4 и 33,3±11,1% соответственно), так и ниже
нормальных значений (11,1±7,4 и 23,7±6,9% соответственно). При этом ни по уровню sIgA, ни по числу обследованных среди них никаких отличий не обнаружено.
Выявленное понижение содержания sIgA в слюне у обследованных с кариесом контактных поверхностей боковых зубов является свидетельством ослабления местной защиты слизистых оболочек, приводящего к увеличению вероятности возникновения кариозного процесса. Пониженное содержание sIgA приводит к созданию условий в полости рта, предрасполагающих к снижению устойчивости ткани зуба к адгезии кариесогенными микроорганизмами по сравнению с группой здоровых лиц.
Заключение. У больных кариесом контактных поверхностей боковых зубов обнаружено пониженное содержание в слюне sIgA и ИФН-у на фоне повышенного уровня ИЛ-lß, что может рассматриваться как фактор, предрасполагающий к развитию кариозного процесса.
ЛИТЕРАТУРА
1. Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. М.: Медицинская книга; Н. Новгород: Изд-во НГМА; 2001.
2. Кузьмина Э.М. Стоматологическая заболеваемость населения России. Состояние твердых тканей зубов. Распространенность зубочелюстных аномалий. Потребность в протезировании. М.: МГМСУ; 2009.
3. Рабинович И.М., Величко И.В. Фотодинамическая терапия при лечении кариеса зубов. Клиническая стоматология. 2012; 3: 8-11.
4. Адкина Г.В. Локализация кариеса по поверхностям зуба у лиц разного возраста. В кн.: Новые методы лечения и профилактика в стоматологии. Омск; 1984: 38-42.
5. Slotwinska S.M., Zaleska М. Salivary interleukin-1ß and Streptococcus mutans level in oral cavity. Centml European Journal Immunology. 2012; 37 (2): 151-3.
6. Bytnerowicz A. Integrated effects of air pollution and climate change on forests: A northern hemisphere perspective. Environmental Pollution. 2007; 147 (3): 438-45.
7. Передерий В.Т., Земсков А.М., Бычова Н.Г., Земсков В.М. Иммунный статус. Принципы его оценки и коррекции иммунных нарушений. Киев; 1995.
8. Гилязева В.В., Абдулхаков С.Р., Гиниятуллин И.И., Валеева И.Х. Оценка состояния мукозального иммунитета полости рта у больных, страдающих кариесом зубов, по цитокиновому профилю смешанной слюны. Современные проблемы науки и образования. 2012; 1. URL: www.science-education.ru/101-5548
9. Хаитов Р.М., Ильина Н.И., ред. Аллергология и иммунология: национальное руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2009.
10. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Ярилин А.А. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы: руководство для врачей. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2009.
11. Маркелова Е.В., Милехина С.А., Шушанян Л.С. Роль локального цитокинового дисбаланса в патогенезе кариеса у детей. Фундаментальные исследования. 2011; 5: 104-8.
Поступила 18.05.15
REFERENCES
1. Borovskiy E.V., Leont'ev V.K. Oral cavity biology. Moscow: Medical book; Nizhniy Novgorod: NGMA; 2001. (in Russian)
2. Kuz'mina E.M. The Russian Federation Population Dental Disease Incidence Rate. Tooth Solid Tissue Status. The Oral Cavity Abnormalities Prevalence Rate. Dental Prosthetic Demand. Moscow: MGMSU; 2009. (in Russian)
3. Rabinovich I.M., Velichko I.V. Photodynamic Therapy at Tooth Caries Treatment. Klinicheskaya stomatologiya. 2012; 3: 8-11. (in Russian)
4. Adkina G.V. Different Age Patients Tooth Surface Caries Localization. In book: Dentistry New Treatment Methods and Prophylaxis. Omsk; 1984: 38-42. (in Russian)
5. Slotwinska S.M., Zaleska M. Salivary interleukin-1p and Streptococcus mutans level in oral cavity. Centml European Journal Immunology. 2012; 37 (2): 151-3.
6. Bytnerowicz A. Integrated effects of air pollution and climate change on forests: A northern hemisphere perspective. Environmental Pollution. 2007; 147 (3): 438-45
7. Perederiy V.T., Zemskov A.M., Bychova N.G., Zemskov V.M. Immunity State Evaluation and Immunity Disorders Enhancement. Kiev; 1995. (in Russian)
8. Gilyazeva V.V., Abdulkhakov S.R., Giniyatullin I.I., Valeeva I.H. The Oral Cavity Mucosal Immunity Status Evaluation at Patiens with Tooth Caries, according to the Cytokine Mixed Saliva Profile. The Modern Science and Education. 2012; l. URL: www.science-education.ru/101-5548
9. Khaitov R.M., Il'ina N.I. Allergology and Immunology: National Manual under the editorship. Moscow: GEOTAR-Media; 2009.
10. Khaitov R.M., Pinegin B.V., Yarilin A.A. Clinical Immunology Manual .Immunity Related Diseases Diagnostics : Doctor's Manual. Moscow: GEOTAR-Media; 2009.
11. Markelova E.V., Milekhina S.A., Shushanyan L.A. The Local Cytokine Imbalance Causation at Children's Cariogenesis. Fundamental'nye issledovaniya. 2011; 5: 104-8.
Received 18.05.15
