CC BY
22
http://bloodjournal.ru/ V Евразийский гематологический форум 539
Методы. Проводили количественную оценку мРНК PARP1 в образцах костного мозга пациентов с МДС с помощью ПЦР в реальном времени на основе SYBR-green и последующий корреляционный анализ результатов (в соотношении с конститутивными генами в-актина) с их прогностическими характеристиками.
Результаты. Средние уровни мРНК PARP1 у 74 пациентов с МДС были сопоставлены с типом МДС (классификация ВОЗ, р = 0,005; шкала IPSS, р = 0,002 и шкала IPSS-R, р = 0,011). В группах повышенного риска были обнаружены более высокие значения PARP1. Выявлена взаимосвязь с цитогенетическим риском (р = 0,008). Самые низкие уровни наблюдались при МДС без избытка бластных клеток (в 16 раз ниже, чем при МДС с избытком бластных клеток; р = 0,0001), а также при МДС с более низким показателем IPSS (почти в 10 раз меньше, чем при МДС с более высоким риском; р = 0,003). Отмечались более низкие показатели выживаемости у пациентов с высоким уровнем PARP1 (медиана 40 мес. по сравнению с пациентами с более низким уровнем; р = 0,0001). С помощью многофакторного регрессионного анализа Кокса было показано, что PARP1 — более сильный предиктор общей выживаемости по сравнению с прогностическими шкалами ВОЗ, IPSS, IPSS-R и цитогенетического риска (отношение рисков 8,4-9,5 в каждом сравнении).
Заключение. В данном исследовании были впервые получены данные о взаимосвязи высоких уровней мРНК PARP1 при МДС с повышенным риском неблагоприятного течения заболевания. Это единственное наблюдение, в котором показано, насколько сильна корреляция одной молекулы с выживаемостью больных МДС. Полученные данные могут стать основой использования PARP1 в качестве прогностического фактора для МДС. Более того, этот результат может служить основой для разработки клинических исследований с целью оценить использование ингибиторов PARP1 у пациентов с МДС высокого риска.
Конфликты интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
Источники финансирования. Работа не имела спонсорской поддержки.
Methods. Quantitative estimation of PARP1 mRNA was performed in bone marrow samples of patients with MDS using real-time PCR based on SYBR-green, and the results (expressed in relation to constitutive p-actin genes) correlated with their prognostic characteristics.
Results. The mean levels of PARP1 mRNA in 74 patients with MDS were compared with the type of MDS (WHO classification, p = 0.005; IPSS scale, p = 0.002 and IPSS-R scale, p = 0.011). Higher levels were detected in the categories of increased risk. An association with cytogenetic risk was found (p = 0.008). The lowest levels were found in patients with MDS without excess blasts (16 times lower than in patients with MDS with excess blast cells, p = 0.0001), and in patients with MDS with a lower IPSS score (almost 10 times less than with MDS with increased risk, p = 0.003). Survival rates in patients with a higher level of PARP1 were worse (the median rate was 40 months compared with patients with a lower level, p = 0.0001). The Cox's multivariate regression analysis showed that PARP1 was the single most powerful predictor of overall survival in comparison with the WHO, IPSS and IPSS-R prognostic scales, and cytogenetic risk scales (risk ratio 8.4-9.5 in each comparison).
Conclusion. Information on the interrelation of higher levels of PARP1 mRNA in patients with MDS and an increased risk was obtained for the first time. Moreover, this is the first time that the levels of one molecule are so strongly correlated with the survival of patients with MDS. These correlations can make PARP1 a prognostic factor for MDS. Besides, this result can serve as a basis for the development of clinical studies to evaluate the use of PARP1 inhibitors in patients with a higher-risk MDS.
Conflicts of interest. The authors declare no conflicts of interest.
Funding. The study received no external funding.
ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ ФАКТОРА РОСТА ЭНДОТЕЛИЯ СОСУДОВ (VEGF-A) И ЕГО РЕЦЕПТОРОВ (VEGFR1 И VEGFR2) ПРИ МИЕЛОДИСПЛАСТИЧЕСКОМ СИНДРОМЕ НИЗКОГО И ПРОМЕЖУТОЧНОГО-1 РИСКА
Г.А. Дудина1, Н.Н. Калитин2, С.В. Семочкин3
1 ГБУЗ «Московский клинический научно-практический центр им. А.С. Логинова» ДЗМ, Москва, Российская Федерация
2 ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Российская Федерация
3 ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва, Российская Федерация
Введение. Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF-A) и его рецепторы (VEGFR1 и VEGFR2) относятся к суперсемейству VEGF. Эти молекулы не только принимают участие в регуляции неоангиогенеза в нормальных условиях и при злокачественной трансформации, но и способствуют пролиферации клеток при многих опухолях. В то же время значение экспрессии VEGF-A, а также его рецепторов VEGFR1 и VEGFR2 в качестве возможных молекулярных звеньев в патогенезе миелодиспластического синдрома (МДС) до сих пор не изучено.
Материалы и методы. Исследована группа из 15 здоровых добровольцев и 12 пациентов с впервые установленным диагно-
THE DIAGNOSTIC VALUE OF VEGF-A, VEGFR1 AND VEGFR2 EXPRESSION IN LOW AND INTERMEDIATE-1 RISK MYELODYSPLASTIC SYNDROME
GA Dudina1, NN Kalitin2, SV Semochkin3
1 Loginov Moscow Clinical Scientific Center, Moscow, Russian Federation
2 NN Blokhin National Medical Cancer Research Center, Moscow, Russian Federation
3 NI Pirogov Russian National Research University, Moscow, Russian Federation
Background. Vascular endothelial growth factor (VEGF-A) and its receptors VEGFR1 and VEGFR2 belong to the superfamily of VEGF. These molecules are involved not only in the regulation of neoangio-genesis and malignant transformation, but also promote the cells proliferation of a number of cancers. However, the role of VEGF-A, VEGFR1, and VEGFR2 expression as possible molecular links in the pathogen-esis of the myelodysplastic syndrome (MDS) has not yet been studied.
Materials & Methods. A group of 15 healthy volunteers and 12 patients with a newly diagnosed MDS of low and intermediate-1 risk was included in the study. The levels of mononuclear cell fraction (MPC) was evaluated. MPC was obtained by dividing the peripheral blood of healthy individuals and bone marrow aspirates of patients in the Ficoll gradient. Subsequent isolation of total RNA from the MPC and cDNA
V Евразийский гематологический форум
КЛИНИЧЕСКАЯ ОНКОГЕМАТОЛОГИЯ
зом МДС низкого и промежуточного-1 риска. Материалом исследования служила мононуклеарная фракция клеток (МФК), которую получали путем разделения периферической крови здоровых лиц и аспиратов костного мозга больных в градиенте Ficoll. Последующее выделение из МФК тотальной РНК и синтез из нее кДНК в ходе обратной транскрипции были выполнены по стандартным протоколам. Для определения уровня экспрессии генов VEGF-A, VEGFR1 и VEGFR2 в контрольной группе и у больных МДС использовали метод ПЦР в реальном времени. Для нормирования данных использовали экспрессию гена 60Б-субъединицы рибосомы RPL27. Обработку результатов проводили с использованием пакета статистических программ GraphPad Prism 5.02.
Результаты. Обнаружено статистически значимое различие в уровне экспрессии гена VEGF-A между контрольной группой и группой больных МДС низкого и промежуточного-1 риска: среднее значение экспрессии VEGF-A у пациентов было в 4,59 раза выше (p < 0,0001) по сравнению с группой здоровых лиц. Изменения экспрессии гена VEGF-A между двумя исследованными группами были конкордантны изменениям экспрессии VEGFR1. Так, мы определили, что уровень экспрессии гена VEGFR1 в группе больных МДС был в 2,28 раза выше (p < 0,01), чем в группе здоровых добровольцев. Аналогичная тенденция была отмечена и для соотношения средних показателей экспрессии между этими группами при анализе гена VEGFR2. Разница в экспрессии гена VEGFR2 у группы больных относительно группы здоровых добровольцев была наибольшей: средний уровень экспрессии VEGFR2 у больных был в 46,25 раза выше (p < 0,01), чем у здоровых лиц. Как подтвердили результаты ROC-анализа, уровень экспрессии генов VEGF-A (p < 0,0001) и VEGFR2 (p < 0,0001), а также гена VEGFR1 (p < 0,05) может служить независимым диагностическим маркером при МДС. Превалирование экспрессии лиганда VEGF-A и двух его рецепторов VEGFR1 и VEGFR2 в группе больных МДС может свидетельствовать о гипотетически большей интенсификации аутокрин-ных и паракринных сигналов через соответствующие сигнальные системы (VEGF-A-VEGFR1) и/или (VEGF-A-VEGFR2) и, как следствие, о неблагоприятном прогностическом значении при МДС.
Заключение. Данные ROC-анализа о дифференциальном характере экспрессии генов VEGF-A, VEGFR1 и VEGFR2 у здоровых лиц и пациентов с МДС позволяют рассматривать их в качестве потенциальных диагностических факторов при этом заболевании.
Конфликты интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
Источники финансирования. Работа не имела спонсорской поддержки.
synthesis from it during the reverse transcription were performed according to standard protocols. To determine the expression levels of the VEGF-A, VEGFR1 and VEGFR2 in the control group and in MDS patients, the real-time PCR was used. The expression of the 60S gene of the ribosome subunit of RPL27 was used to evaluate the data. The results were processed using GraphPad Prism 5.02 statistical software package.
Results. A statistically significant difference in the expression of the VEGF-A between the control group and the group with MDS of low and intermediate-1 risk was found: the mean VEGF-A expression in MDS group was 4.59 times higher (p < 0.0001) compared to controls. Changes in the VEGF-A expression in the two groups correlated with changes in VEGFR1 expression (VEGFR1 expression in the MDS group was 2.28 times higher, p < 0.01). A similar trend was noted for the VEGFR2 expression. The difference in the expression of the VEGFR2 gene in the group of patients compared to the group of healthy volunteers was the biggest: the average level of VEGFR2 expression in the patients was 46.25 times higher (p < 0.01) compared to controls. As confirmed by the results of the ROC analysis, the expression of VEGF-A (p < 0.0001), VEGFR2 (p < 0.0001), and VEGFR1 (p < 0.05) may serve as independent diagnostic markers for MDS. The increase in of these parameters in the MDS group may indicate a hypothetical increase of autocrine and paracrine signaling through the corresponding signaling systems VEGF-A-VEGFR1 and/or VEGF-A-VEGFR2, and, consequently, an adverse prognostic value for MDS.
Conclusion. The ROC analysis data of the increased expression of VEGF-A, VEGFR1 and VEGFR2 in patients with MDS compared to healthy individuals allow them to be considered as potential diagnostic factors of MDS.
Conflicts of interest. The authors declare no conflicts of interest.
Funding. The study received no external funding.
ДОСТИЖЕНИЕ ПОЛНОЙ МОЛЕКУЛЯРНОЙ РЕМИССИИ У БОЛЬНОГО ОСТРЫМ ЛИМФОБЛАСТНЫМ ЛЕЙКОЗОМ С МУТАЦИЕЙ FLT3-ITD ПРИ ТЕРАПИИ СОРАФЕНИБОМ И БЛИНАТУМОМАБОМ
К.И. Зарубина, Е.В. Усикова, А.В. Абрамова, И.А. Лукьянова, Г.А. Басхаева, О.А. Гаврилина, А.Н. Соколов, В.В. Троицкая, Е.Н. Паровичникова
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва, Российская Федерация
Введение. Мутации гена FLT3 наиболее часто выявляются у больных острым миелобластным лейкозом. При остром лим-фобластном лейкозе мутации в этом гене определяются редко, однако они также служат фактором неблагоприятного прогноза.
COMPLETE MOLECULAR REMISSION IN PATIENT WITH ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA WITH A FLT3-ITD MUTATION AFTER SORAFENIB AND PANCANTUMOMAB THERAPY
KI Zarubina, EV Usikova, AVAbramova, IA Luk'yanova, GA Baskhaeva, OA Gavrilina, AN Sokolov, VV Troitskaya, EN Parovichnikova
National Medical Hematology Research Center, Moscow, Russian Federation
Background. Mutations of FLT3 are most often detected in patients with acute myeloblastic leukemia. Although the proportion of FLT3 mutation in acute lymphoblastic leukemia is low, it is associated with poor prognosis. Targeted therapy in this category of patients has a great potential for improving treatment outcomes.
