CC BY
17
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ | ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ С | ИССЛЕДОВАНИЯ
Диафоразная и эстеразная активность моноцитов крови у больных хроническим вирусным гепатитом С в зависимости от вирусной нагрузки
Алиева А.А., Галимзянов Х.М., Вишневецкая И.Ф.
ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия», кафедра инфекционных болезней
Алиева Алтынай Асылбековна - e-mail: [email protected]
В данной статье представлены результаты изучения изменения диафоразной и эсте-разной активности моноцитов крови у больных хроническим вирусным гепатитом С в зависимости от вирусной нагрузки. Определено, что у больных хроническим вирусным гепатитом С с высокой вирусной нагрузкой вне зависимости от генотипа наблюдалось угнетение всего ферментного спектра моноцитов, у пациентов с низкой вирусной нагрузкой регистрировались дискордантные изменения.
Ключевые слова: хронический вирусный гепатит С, инфекция, генотип, вирус.
This article presents the results of a study changes diaphorase and esterase activity of blood monocytes in patients with chronic hepatitis C, depending on the viral load. Determined that in patients with chronic hepatitis C with high viral load, regardless of the genotype of a marked reduction in total enzyme spectrum of monocytes in patients with low viral load were recorded discordant changes.
Keywords: chronic viral hepatitis C, HCV, infection, virus.
Гепатит С - широко распространённое заболевание, занимающее одно из ведущих мест в структуре инфекционной патологии, характеризующееся высокой (до 85 %) частотой хронизации, длительным персистированием возбудителя в организме, высоким риском развития осложнений - цирроза печени (до 20-30 %), первичной гепатокарциномы (до 10 %) и является ведущим в структуре смертности от заболеваний печени [5]. В России больных хроническими формами и носителей НСУ не менее 2 млн. человек [1, 2].
Изменения, происходящие на клеточном уровне, не всегда реализуются в виде заболевания, но снижают резервные возможности организма [4]. Снижение резервных возможностей организма клинически проявляется неспособностью организма адекватно ответить на внешнее воздействие, что можно определить как изменение реактивности. Со снижением резервных возможностей клетки повышается вероятность ее гибели и развитие болезни. Цитохимический анализ является информативным и доступным методом изучения клетки [3, 6].
ЦЕЛЬРАБОТЫ
Изучить изменения диафоразной и эстеразной активности моноцитов крови у больных хроническим вирусным гепатитом С (ХВГС) в зависимости от вирусной нагрузки.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Для решения поставленных задач было проведено обследование 140 больных ХВГС до лечения в ГБУЗ «Областная инфекционная клиническая больница имени
A.М. Ничоги» (ГБУЗ «ОИКБ им. А.М. Ничоги») г Астрахани в 2009-2012 гг. Цитохимические исследования относительно несложны, дают возможность исследовать различные виды функциональной активности клеток.
В моноцитах определяли активность ферментов транспорта электронов кислорода (НАД-диафораза (НАД), НАДФ-диафораза (НАДФ)) и эстеразную активность (альфанафтилацетатэстераза (АЭ), альфанафтил-бутиратэстераза (БЭ)). Определение диафораз проводили по методу РП. Нарциссова (1970), эстераз - по методу
B.М. Вачштейна, Ф.Г. Вольфа (1973). Подсчет результатов
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ | ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ С | ИССЛЕДОВАНИЯ
проводили полуколичественным методом Каплоу (1955). За нормальные принимались следующие значения показателей: НАД = 99,8±0,02 у.е., НАДФ = 10,20±0,01 у.е., АЭ = 54,17±0,05 у.е., БЭ = 106,12±0,02 у.е.
В целях описания эффекта от терапии в основной группе и группе сравнения, рассчитывался показатель, характеризующий приближение уровня ФАНМ к нормальным значениям. Для каждого показателя рассчитывались модули разницы уровня ферментативной активности у пациента и нормального уровня активности фермента по формуле: значение ФАНМ у пациента - нормальное значение ФАНМ.
Для обработки полученного материала и проведения статистического анализа в исследованных группах использовался пакет программ Statistica 7,0 файоА:). В связи с отличным от нормального распределения признаков центральные тенденции и дисперсии количественных признаков описаны в виде медианы (интерквар-тильный размах 25-й и 75-й процентили) - Ме ир]. Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы об отсутствии различий был принят равным 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
У больных ХВГС с низкой вирусной нагрузкой (табл. 1) наблюдалось напряжение активности НАД-диафоразы в моноцитах крови (227 [133; 228] у.е., при норме 99,8±0,02 у.е.). Активность НАДФ-диафоразы и эстераз незначительно превышало норму (НАДФ = 12 [11; 12] у.е., при норме 10,20±0,01 у.е.; АЭ = 63 [54; 64] у.е., при норме 54,17±0,05 у.е.; БЭ = 116 [106; 117] у.е., при норме 106,12±0,02 у.е.). Различия ферментативной активности моноцитов крови больных ХВГС в зависимости от вирусной нагрузки являются достоверными (р<0,0001).
Таблица 1
Показатели ферментативной активности
моноцитов больных ХВГС в зависимости от вирусной нагрузки
Показатель Низкая вирусная нагрузка (п=63) Высокая вирусная нагрузка (п=77) Р
НАД 227[133; 228] 45 [44; 80] 0,0001
НАДФ 12 [11; 12] 8 [7; 10] 0,0001
АЭ 63 [54; 64] 23 [21; 54] 0,0001
БЭ 116 [106; 117] 59 [58; 100] 0,0001
У больных ХВГС с высокой вирусной нагрузкой отмечаются дискордантные изменения в виде падения активности всех исследуемых ферментов (НАД в 2,2 раза, НАДФ в 1,3 раза; АЭ в 2,4 раза; БЭ в 1,8 раза).
Интересным является оценка различий ферментативной активности моноцитов крови у пациентов 4-х подгрупп, а именно: с высокой вирусной нагрузкой + 1 генотип, с высокой вирусной нагрузкой + «не 1» генотип, с низкой вирусной нагрузкой + 1 генотип, с низкой вирусной нагрузкой + «не 1» генотип.
У больных ХВГС с высокой вирусной нагрузкой с «1» и «не 1» генотипом имеются различия ферментативной активности моноцитов крови, которые являются достоверными (р<0,0001). Так, в группе с «1» генотипом про-сл еживается угнетение всего ферментного спектра моноцитов крови. Отмечалось угнетение диафораз (НАД в 2,2 раза; НАДФ в 1,3раза) и эстераз (АЭ в 2,5 раза и БЭ в 1,8 раза).
У пациентов с высокой вирусной нагрузкой с «не 1» генотипом регистрируется усиление активности НАД-диафоразы в 2,3 раза (НАД = 228 [227; 228] у.е.). Активность НАДФ-диафоразы и эстераз незначительно превышала показатели у контрольной группы (НАДФ на 2 у.е., АЭ на 10 у.е., БЭ на 11 у.е.).
Как видно из таблицы 2, у больных ХВГС с низкой вирусной нагрузкой с «1» и «не 1» генотипом имеются достоверные различия (р<0,0001). У пациентов с «1» генотипом отмечается напряжение активности НАД-диафоразы в 1,3 раза. Активность НАДФ-диафоразы незначительно выше нормы. Эстеразная активность в пределах нормы.
В группе больных ХВГС с низкой вирусной нагрузкой с «не 1» генотипом определялось напряжение НАД-диафоразы моноцитов крови примерно в 2,3 раза (НАД = 228 [227; 229] у.е.). Активность НАДФ-диафоразы и эстераз незначительно превышали норму (НАДФ = 12 [11; 13] у.е., АЭ = 64 [63; 65] у.е., БЭ = 117 [117; 118] у.е.
При анализе ферментативной активности моноцитов крови у больных ХВГС с разной вирусной нагрузкой в группах с «1» и «не 1» генотипом достоверные отличия (р<0,0001) регистрируются при сравнении в группе с «1» генотипом.
У больных ХВГС с «1» генотипом при высокой вирусной нагрузке отмечается снижение активности ферментов в разной степени: НАД в 2,2 раза, НАДФ в 1,3 раза, АЭ в 2,5 раза, БЭ в 1,8 раза.
У пациентов с «1» генотипом с низкой вирусной на-
www.mia-med.ru
№ 1 (1) август 2014
5
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ | ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ С | ИССЛЕДОВАНИЯ
грузкой наблюдается нарастание активности НАД-диа-форазы в 1,3 раза (132 [131; 133] у.е.). Отмечается незначительное повышение НАДФ-диафоразы, АЭ и БЭ соот-
ветствуют норме. Исследования не выявили существенных различий у больных ХВГС с «не 1» генотипом при высокой и низкой вирусной нагрузке (р>0,05) (таб. 2, 3).
Таблица 2
Сравнение ферментативной активности нейтрофилов больных ХВГС с разными генотипами в группе
с высокой и низкой вирусной нагрузкой
Показатель Высокая вирусная нагрузка Низкая вирусная нагрузка
Генотип «1» (п=62) Генотип «не 1» (п=15) Р Генотип «1» (п=27) Генотип «не 1» (п=36) Р
НАД 45 [44; 46] 228 [227; 228] 0,0001 132 [131; 133] 228 [227; 229] 0,0001
НАДФ 8 [7; 9] 12 [11; 13] 0,0001 11 [10; 12] 12 [11; 13] 0,0001
АЭ 22 [21; 23] 64 [63; 65] 0,0001 54 [53; 55] 64 [63; 65] 0,0001
БЭ 59 [58; 88] 117 [116; 118] 0,0001 106 [105; 107] 117 [117; 118] 0,0001
Таблица 3
Сравнение ферментативной активности нейтрофилов больных ХВГС с разной вирусной нагрузкой
в группах с «1» генотипом и «не 1»генотипом
Показатель Генотип «1» Генотип «не 1»
Высокая вирусная нагрузка (п=62) Низкая вирусная нагрузка (п=27) Р Высокая вирусная нагрузка (п=15) Низкая вирусная нагрузка (п=3 6) Р
НАД 45 [44; 46] 132 [131; 133] 0,0001 228 [227; 228] 228 [227; 229] 0,2305
НАДФ 8 [7; 9] 11 [10; 12] 0,0001 12 [11; 13] 12 [11; 13] 0,4025
АЭ 22 [21; 23] 54 [53; 55] 0,0001 64 [63; 65J 64 [63; 65] 0,3111
БЭ 59 [58; 88] 106 [105; 107] 0,0001 117 [116; 118] 117 [117; 118] 0.26S7
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
У больных ХВГС с высокой вирусной нагрузкой вне зависимости от генотипа наблюдалось угнетение всего ферментного спектра моноцитов, более выраженное в НАД-диафоразе и АЭ. У пациентов с низкой вирусной нагрузкой регистрировались дискордантные изменения, отмечалось напряжение НАД-диафоразы. Активность эстераз и НАДФ-диафоразы незначительно превышали норму. Ферментативная активность моноцитов при «1» генотипе достоверно ниже, чем при генотипе «не 1» вне зависимости от вирусной нагрузки (высокая или низкая). Однако же, у пациентов с генотипом «1» высокая вирусная активность достоверно снижает активность ферментов, чего не наблюдается у пациентов с генотипами «не 1».
У больных ХВГС с «1» генотипом при высокой и низкой вирусной нагрузке обнаруживаются достоверные разли-
чия активности ферментов в моноцитах крови (р<0,0001). У пациентов с «1» генотипом высокой вирусной нагрузке отмечается угнетение всего ферментного спектра моноцитов . А при низкой вирусной нагрузке напряжение диа-фораз, при нормальных значениях эстераз. У больных с «не 1» генотипом с высокой и низкой вирусной нагрузкой достоверных различий наши исследования не выявили (р>0,05). У данной группы отмечаются конкордантные изменения ферментативной активности моноцитов крови, в сторону повышения активности НАД-диафоразы, при незначительном увеличении НАДФ-диафоразы и эстераз.
ЛИТЕРАТУРА
1. Баранов, А. В. Эпидемиологические и клинические особенности хронического гепатита С / А.В. Баранов, В.В. Малеев // Эпид. и инф. бол. - 2008. - № 2. - С. 32-35.
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ | ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ С | ИССЛЕДОВАНИЯ
2. Бондаренко, А.Н. Этиотропная терапия вирусных гепатитов у лиц, употребляющих наркотик / А.Н. Бондарен-ко // Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И. И. Мечникова - 2006. - № 4. -С. 168-174.
3. Игнатова, Т.М. Внепеченочные проявления хронической НСУ-инфекции / Т. М. Игнатова, З.Г. Апрок-сина, В. В. Серов и др. // Российский медицинский журнал. -2001. - № 2. - С. 13-18.
4. Ильин, Д.А. Оценка активности макрофагов по пло-
щади распластывания в генотипически различных культурах перитонеальных клеток / Д.А. Ильин, С.А. Архипов // Естествознание и гуманизм. - Т. 1. - № 2. - 2004. - С. 29.
5. Лобзин, Ю.В. Вирусные гепатиты: диагностика, лечение / Ю.В. Лобзин, К.В. Жданов, М.В. Волжанин, Д.А. Гусев. - СПб.: ООО «Изд-во Фолиант». 2003. - 192 с.
6. Москалев, A.B. Латентные формы вирусных гепатитов В и С. Оптимизация диагностики / A.B. Москалев // Новости «Вектор-Бест». - 2009. - № 1. - С. 7-12.
www.mia-med.ru
7
