CC BY
17
Е А. БОБЫЛЕВА и В. И. ПЕТРОПАВЛОВСКАЯ (Москва)
Дезинфекция бруцеллезной шерсти
Из Центральной научно-практической ветлаборатории НКЗдрава СССР (зав. дезинфекционным отделом В. М. Ковалев)
В литературе описано немало случаев заболеваний бруцеллозом людей, имеющих дело с грязной овечьей и козьей шерстью, а также с каракулевыми шкурками. Заболевшие категорически отрицали употребление ,в пищу сырых молочных продуктов и брынзы, следовательно, заражение могло произойти исключительно от контакта с инфицированной бруцеллозом шерстью или шкурами. Например, 3. И. Шиф-рин наблюдал 2 случая (из 17) заболеваний бруцеллозом шерстяника и сырьевщика каракулевых овец, последний из них определенно указывал, что заболел через 2 недели после приемки сухих шкурок каракулевых овец. Доктор Манкус наблюдал 2 случая бруцеллоза у рабочих кожевенного цеха в Ташкенте. Даркшевич приводит случай заражения бруцеллозом работника огорода через навоз. Ломакин установил, что шерсть овец, в особенности в окружности заднего* прохода, является сильно инфицированной бруцеллами.
Действительно, шерсть может инфицироваться мочой, калом, вагинальными истечениями, молоком, абортированными плодами, гнойными истечениями при абсцессах, загрязненной подстилкой и навоз-ом.
При богатом шерстяном покрове возбудитель бруцеллоза в глубоких слоях шерсти мало доступен дезинфицирующему действию солнечных лучей, а жиропот шерсти создает влажную среду для сохраняемости бактерий.
Пути заражения -рабочих бруцеллозом могут быть самые разнообразные: через инспирацию зараженной бруцеллозом пыли, через слизистые оболочки глаз, носа и полости рта, кроме того, возможно заражение через поврежденную и даже неповрежденную кожу, рпас-ность заражения усугубляется тем, что микробы бруцелл довольно долгое время остаются жизнедеятельными и патогенными в естественных условиях.
По данным доц. Бюрскер, Несговорова, в пыли бруцеллезные микробы сохраняются в течение 1 месяца, в сухой почве — 40 дней, во влажной почве — 70 дней, в свежем молоке — 60 дней, в масле —100 дней; по Ломакину, в одежде, инфицированной мочой, микробы бруцелл сохраняются 30 дней, в сухой почве — 42 дня, во влажной почве —-72 дня; холодная обработка молока не убивает бруцеллезных микробов. Рево характеризует устойчивость бруцелл типа Bang следующим образом: в навозе хлевов бруцелл может жить до 75 дней, в культурах — 6—9 месяцев. По Аввакумову, в моче и навозной жиже как при стерильных, так и нестерильных условиях все три варианта группы бруцелл погибают не раньше 57 дней. В кале крупного рогатого скота микробы остаются жизнеспособными в пробирках в течение 5 месяцев 10 дней. В навозе и огородной земле все типы бруцелл остаются жизнеспособными больше чем 2 месяца 10 дней и меньше чем 3 месяца 10 дней. В предварительно простерилизованной земле и водопроводной воде микробы бруцелл с крупного рогатого скота остаются живыми свыше 5 месяцев 10 дней. Климмер отмечает, что бруцеллы с крупного рогатого скота сохраняются в абортированных плодах до нескольких месяцев, а в культурах — в течение года. Физиологический раствор не ослабляет бруцелл в течение 4 недель. Высушивание и солнечный свет убивают бруцелл в короткий срок. Гутира и Марек пишут, что культуры типа бруцелл крупного рогатого скота при комнатной температуре сохраняются в течение 2 лет, в патологсанатомическом материале сохраняются до нескольких месяцев; физиологический раствор ослабляет, но не убивает культуры в течение 144 часов. Каммероном установлено, что при высушивании в холщевых мешочках на лабораторном столе микробы бруцеллоза сохраняются 5 дней, а при высушивании их в погребе сохраняются в течение 30 дней. При высушивании в присутствий питательных веществ микробы
сохраняют свою жизнедеятельность в течение 121 дня, а при отсутствии питательных веществ микробы сохраняются в течение 72 дней. В коровьем кале при медленном высушивании (в лабораторном шкафу) микробы сохраняют жизнеспособность в течение 120 дней, во влажном кале в холодильнике остаются жизнеспособными 100 дней. В боченочной стерильной воде при комнатной температуре микробы бруцелл остаются жизнеспособными в течение 77 дней, в боченочной воде при температуре 4° остаются живыми в течение 114 дней. При наличии гниения микробы выживают 77 дней. Бонгерт говорит, что бруцеллы типа крупного рогатого скота очень устойчивы в маточных выделениях. Метхевис (Metthe-wis) высушивал измельченные околоплодные оболочки в течение 45—49 дней и установил, что этот материал остается патогенным для морских свинок. Фельдман и Ольсон (Feldman и Olson) отмечают, что бруцеллы типа suis в бульонной среде при комнатной температуре остаются жизнеспособными и патогенными в течение 30 дней; при пониженной температуре от —15 до — 20° те же самые культуры остаются живыми и патогенными для морских свинок по истечении 13 месяцев 10 дней. В поверхностном слое почвы микробы бруцелл типа suis погибают только через 4 суток.
Принимая во внимание значительную стойкость бруцелл в различных условиях, мы можем предполагать длительную выживаемость бруцелл и в шерсти, что связано с опасностью длительного общения с шерстью для человека и для животных, последнее подтверждено и эпидемиологическими наблюдениями заболеваний бруцеллозом людей, имеющих дело с шерстью и со шкурами.
Необходимость обеззараживания шерсти, инфицированной бруцел-лами, может возникнуть как в местах большого скопления сырья (фабрики, шерстомойки, базисные склады, заготпункты и др.), так и в отдельных колхозах, совхозах и единичных хозяйствах.
В нашу задачу входило изыскание нескольких эффективных способов, которые практический работник мог бы применить в зависимости от совокупности наличных условий.
Выбор дезсредств производился нами с учетом их бактерицид-ности, доступности в смысле приобретения, а также с точки зрения наименьшего вредного влияния цх на технологические свойства шерсти.
В качестве дезинфицирующих растворов испытывались водные растворы креолина, лизола, фенола, сулемы, формальдегида, аммиака, соляной кислоты, а также соляной кислоты в комбинации с поваренной солью.
Для работы мы взяли ряд бруцеллозных штаммов, тщательно проверенных на патогенность, токсичность и способность агглютинировать со специфическими сыворотками, характер роста на питательных средах (печоночный агар и печоночный бульон), способность к образованию сероводорода, термоагглютинацию и термостабильность. Всего было проверено 10 различных штаммов, из которых было отобрано 4 наиболее типичных штамма, по одному из каждого типа, а именно: штамм 14 566 типа крупного рогатого скота, штамм 1611 типа ovis, штамм 74 типа suis и штамм 2, выделенный Бобылевой из гнойного свища больной бруцеллозом лошади, который условно назван «штамм equi».
Бактерицидность дезинфицирующих растворов прежде всего проверялась на тест-объектах, представляющих собой кусочки батиста с фиксированными на них бруцеллами, а затем эффективность полученного режима проверялась на инфицированной шерсти.
Опыты, объектами которых были незащищенные бруцеллы, проводились в следующем порядке. Дезраствор нужной концентрации приготовлялся на стерильной воде. Содержание в растворе дезвещества исчислялось в весовых и объемных процентах, концентрация соляной кислоты и аммиака проверялась методами аци-демитрии, а формалина — методами иодометрии. Приготовленный раствор разливался в стерильные пробирки по 5 см3 в каждую. Подлежащие обеззараживанию
тряпочки помещались в дезраствор, выдерживались в нем положенное время, затем извлекались и до посева прополаскивались в стерильной воде.
Посевы производились на печоночный бульон и агар с содержанием 1% глюкозы и 5Л/о глицерина. Просмотр посевов длился в течение 3 недель. Выросшие культуры проверялись на специфичность, по морфологии, агглютинабиль-ности и на патогенность в отношении белых мышей.
В опытах, где действие дезраствора проверялось на бруцеллах, заключенных в шерсти, ванны приготовлялись на стерильной воде. Шерсть (стерилизованная) бралась мериносовая, грязная, с большим содержанием жиропота. Жидкостный коэфициент был 1 : 10 (емкость банок 9 л).
Бруцеллозные объекты располагались в массе шерсти и представляли собой: 1) тряпочки, инфицированные штаммами ovis (1611), bovis (14566), suis (74) и equi (2), заключенные в двойные стерильные полотняные мешочки (на каждый штамм особый мешочек); 2) стерильный овечий кал с вложенными во внутрь инфицированными тряпочками, также помещенный в отдельный мешочек. Отверстие мешочка с тестами плотно охватывало резиновое кольцо. Температура ванн была 15°.
По истечении испытуемой экспозиции тест-объекты извлекались из ванн, прополаскивались в стерильной воде и высевались.
Количество опытов, на основании которых делались выводы, было -не менее двух. i
Креолин в наших опытах брался в начале 0,5 и 1°/». Принимая во внимание литературные данные о хорошей бактерицидное™ этих концентраций, испытание началось с секундных экспозиций. Однако результаты были таковы, что продолжительность действия пришлось увеличивать, меньшую концентрацию изъять из испытания и включить в опыты 2°/о раствор креолина.
Опыты показали, что Р/о креолин не убивает штаммы suis и equi в течение 20 минут, шгамм типа ovis был убит в 17 минут, a bovis — в 5 минут. Полное обеззараживание всех незащищенных штаммов на тряпочках Iе/» креолином достигается в 1 час, 2% креолин в отношении штаммов ovis и bovis бактерицидным в 10 мин., тогда как штаммы типа suis и equi не были обеспложены и в 30 минут.
В опытах с инфицированной шерстью мы остановились на Р/о креолине из соображений удешевления дезинфекции и сохранения качества шерсти, на которую крепкие растворы, возможно, повлияют отрицательно.
Результаты дезинфекции шерсти в креолиновых ваннах показывают, что тряпочки, зараженные различными бруцеллозными штаммами, обеззараживаются в различные сроки, т. е. штамм ovis и bovis обеззараживаются через 1 час, штамм типа suis — через 3 часа, штамм типа equi—через 4 часа, а каловые объекты обеззараживаются только через 48 часов.
Лизол испытывался нами в концентрациях 1, 2 и 3'°/о. И здесь опыты начались с кратких экспозиций, которые по мере получения роста увеличивались. В итоге проверки 1°/о лизол оказался недеятельным в отношении всех бруцеллозных штаммов в течение 1 часа, причем 100°/о рост посевов наблюдался даже на третьи сутки. Действенность Р/о лизола сказалась лишь в экспозиции 2 часа в отношении штаммов ovis, bovis и suis; штамм equi погибает только после 3-часового воздействия.
От действия 2% лизола штаммы не гибнут и через 25 минут; в 30 минут обеззараживаются все штаммы. Впрочем, штамм equi в наших опытах не убивает даже 3fl/o лизол в экспозиции 30 минут.
Для дезинфекции шерсти применяли 2°/о лизол ввиду слабой бактерицидности Р/о лизола.
Результаты опытов по дезинфекции с лизолом бруцеллозной шерсти показывают, что 1 часа достаточно для обеззараживания шерсти, инфицированной незащищенными бруцеллозными штаммами ovis, bovis и suis, для обеззараживания штамма equi требуется по крайней мере 4-часовая экспозиция, а для шерсти, загрязненной овечьим калом, инфицированным штаммом ovis, нужна не менее чем 4-часовая экспозиция.
Для испытания фенола брали 0,5, 1 и 2"/о концентрации. Опыты производили по общей методике. В результате опытов на незащищенных бруцеллозных объектах получено следующее: 0,5в/о фенол не убивает бруцелл через 3 часа, а через 4 погибают все бруцеллозные штаммы. Р/о фенол не убивает через 10 минут и убивает через 15 минут. 2%> фенол не убивает через 5 минут только штамм suis, остальные штаммы погибают, в 10 минут убивается и штамм suis. Действие фенола в бруцеллозной шерсти испытывалось в концентрации Р/о, так как 0,5°/о концентрации недостаточно бактерицидны даже в продолжительные сроки. В итоге опытов дезинфекции бруцеллозной шерсти, загрязненной овечьим калом, мы пришли к заключению, что Р/о фенол весьма бактерициден и для шерсти, зараженной бруцеллами типа ovis и bovis, которые погибают после 15 минут
воздействия, штаммы же suis и equi оказались более устойчивыми, но и они погибают после 30 минут воздействия, а овечий кал обеззараживается 1в/о фенолом только через 2 часа.
Испытание сулемы производилось в концентрациях 1:10 000 и 1:20 000. В итоге испытания в самых минимальных экспозициях (10 секунд) сулема бактерицидна в отношении всех штаммов на незащищенных бруцеллозных объектах. В шерсти же и особенно в кале сулема не дает мгновенного эффекта, а убивает бруцелл в шерсти в 30 минут и в инфицированном кале обеззараживание происходит только после 48 часов.
Испытанные нами 0,5, 1 и УР/о растворы соляной кислоты дали весьма высокие показатели бактерицидности в отношении бруцелл, фиксированных на стерильных батистовых тряпочках, а именно: 0,5°/о раствор соляной кислоты после 5 минут воздействия убивает штаммы ovis и bovis; штаммы же типа suis и equi обеззараживаются через 10 минут. 1%> раствор оказался губительным для бруцелл уже после 1 минуты воздействия. При обеззараживании шерсти полный бактерицидный эффект был получен после 10 минут воздействия, а в шерсти, загрязненной овечьим калом, бруцеллы противостояли действию 0,5°/о раствора соляной кислоты в течение 16 часов и погибали лишь после 20 часов. Прибавление к 1,5% раствору соляной кислоты 8"Vo поваренной соли дает прекрасный бактерицидный эффект — даже инфицированный бруцеллозом овечий кал полностью обеззараживался в течение 30 минут.
Для дезинфекции незащищенных бруцелл формалин испытывался в концентрации 0,35, 0,5 и 1в/о. Опыты показали, что 0,5ю/о концентрация формалина в течение 30 минут не убивает бруцелл типа bovis и equi; штамм же типа suis погибает после 30 минут воздействия, а штамм типа ovis и овечий кал обеззараживаются после 2-часового воздействия 0,5в/о формалина.
Для дезинфекции бруцеллозной шерсти нами были испытаны также 0,5% аммиачные ванны при 15 и 45°. Та и другая дезинфекции дали хорошую бакте-рицидность водных растворов аммиака, а именно: при 15° достигается псглное обеззараживание всех штаммов и объектов бруцелл через 2 часа. Повышение температуры до 45° увеличивало бактерицидность аммиачных ванн в 6 раз; обеззараживание шерсти от незащищенных и защищенных бруцелл достигалось в 20 минут. J ,
Необходимо отметить, что не все варианты микробов из группы бруцелл одинаково чувствительны к действию различных дезинфицирующих веществ; например, штамм № 2 оказался наиболее устойчивым по отношению к лизолу и креолину, а штамм № 1611 более устойчив к формалину. Затем неоднократно наблюдалось явление задержки роста микробов после критических воздействий высоких температур или дезинфицирующих веществ (на 6—11-й день) против нормы. Иногда наблюдалось явление диссоциации колоний, особенно после критических воздействий дезинфицирующего вещества, как, например, аммиака в водном растворе, лизола, креолина и в одном случае формалина. Токсичность культур, полученных после некоторых дезинфицирующих веществ, как аммиак, сулема, лизол, нередко ослабевала. В случаях проверки на мышах патогенность иногда утрачивалась (у патогенных штаммов). Полученные после воздействия дезинфицирующих веществ культуры не теряли способности агглютинировать с бруцеллозной сывороткой, но- иногда оказывались с пониженной агглютинабильностью. Различные бруцеллозные штаммы далеко не одинаково устойчивы к различным дезинфицирующим веществам. Этим можно объяснить до некоторой степени противоречия, имеющиеся в литературе по вопросу дезинфекции при бруцеллозе. Судя по нашим опытам, различные бруцеллозные объекты требуют различных сроков дезинфекции. Незащищенные батистовые тряпочки, зараженные бруцеллозом, обеззараживаются гораздо быстрее, чем заключенные в шерсть. Чистая шерсть обеззараживается быстрее, чем загрязненная калом.
Выводы
1. Обеззараживание бруцеллозной шерсти возможно с помощью каждого из испытанных нами водных растворов дезинфицирующих
средств (аммиака, формалина, сулемы, соляной кислоты, соляной кислоты ,в смеси с поваренной солью, креолина, лизола, фенола).
2. Шерсть, загрязненная инфицированным калом, обеззараживается в сроки более длительные, чем бруцеллозная шерсть, не имеющая загрязнителей.
3. По степени дезинфекционной активности перечисленные растворы можно разделить на 3 группы: к I 'группе, наиболее действенной, относятся: а) 0,5% аммиак, б) 0,5% НО+ 8% ЫаС1; ко II группе относятся: а) 1,5% формалин, б) 1% фенол и в) 2% лизол; к III группе относятся: а) 1 : 10 000 сулема, б) 1,5% соляная кислота и в) 1% креолин. ,
4. На основании полученных результатов для дезинфекции шерсти, инфицированной бруцеллами, можно рекомендовать ванны из упомянутых дезинфицирующих средств с жидкостным коэфициен-том 1 : 10. ;
0,5% аммиак.............при температуре
0,5% » ..........................»
0,5 % НС1 + 8% NaCl..................»
0,5% формалин......................»
1% фенол............................»
2о/0 лизол............................»
1:10 000 сулемы для загрязненной
шерсти.......... i . . »
1 : 10 00ü сулемы для незагрязненной
шерсти............................»
0,5% соляная кислота для загрязненной
шерсти ... . ............»
0,5% соляная кислота для незагрязненной шерсти............
1% креолин для загрязненной шерсти 1 % креолин для незагрязненной шерсти
45° не менее 20 минут
15—20° » 2 часов
15—20° » 30 минут
15—20° » 2 часов
15—20° » 2 »
15-20° » 4 »
15—20° » 28 »
15—20° » 30 минут
15—20° » 20 часов
15 -20° » 10 минут
15—20° » 48 часов
15—20° » 4 .
ЛИТЕРАТУРА
1. П. Ф. Здрадовский, Учение о бруцеллозе, 1933.—2. И. Н. Даршкевич, К эпидемиологии бруцеллоза, Сов. врач, газета, №23—24, 1932.—3. 3. И. Шиф-р и н, Труды Гос. научного института физ. и курорт., сб. V, Ташкент, 19И5.—
4. T. X. H а д д ж и м и д и н о в, За соц. здравоохранение Узбекистана, 1935.—•
5. Е. Я. Мадиевская, Заболевание глаз при бруцеллозе, Сов. вестник офталмологии, № 2,1935.—6. Г. В. Б у р с к е р, Труды Института микробиологии и иммунолопги НКЗдпава УзССР, т. II, 1935.—7. А. П. Ломакин, Сов. ветерин., 1934.-8. М. А. Черняк, Сов. ветерин., № 10, 1934.—9. Клим мер, Эпизоотология,-10. Г1. Е. Раткевич, Сборник по бруцеллозу с.-х. животных НКЗдрава, 1935.—11. Б. Е. Несговоров, Казанский медицинский журнал, № 1 и № ,№ 11—12, 1933,—12. M. Е. Аввакумов, Сборник по бруцеллозу с.-х. животных НКЗдрава за 1935,—13. Литвинов» и Пана с е н к о. Сборник по бруцеллозу с.-х. животных НКЗдрава за 19<5. 14. Гутира и Марек, Частная патология и терапия домашних животных.—15. С. Н. В и ш е л е в-ский и Мазек, Частная эпизоотология за 1935,—16. Ш и и т м а и, Эпидемиология и микробиология, M» 2, 1934.—17. И. Ф. Гордеев, Труды Института эпидемиологии и микробиологии НКЗдрава УзССР, т. II, 1935,—18. F е 1 d m a n n of О 1 s о n, Journ. of the American vet. Med. Association, Febr., 1935 и реферативные данные друглх авторов.
