CC BY
44
НЕЛПиПИСКПЕ ИНУКП I Фпзнолопя
ДЕЙСТВИЕ СЕЛЕНСОДЕРЖАЩЕГО АНАЛОГА ФЕНАЗЕПАМА НА ПОВЕДЕНИЕ ЖИВОТНЫХ ПРИ СОВМЕСТНОМ ВВЕДЕНИИ С ЭПИФИЗАР-НЫМ ГОРМОНОМ МЕЛАТОНИНОМ
Э.А. Манвелян
THE EFFECT OF PHENAZEPAM SELENIUM-CONTAINING ANALOGUE UPON ANIMALS' BEHAVIOUR UNDER COMBINED INJECTION WITH EPIPHYSIAL HORMONE - MELATONIN
Manvelian E.A.
Under combined application of epiphysial hormone, melatonin, and new synthesized benzodiazepine, that is the selenium-containing analogue of phenazepam, female rats were registered the maximal anti-anxiety effect in morning hours under multiparameter testing. The combination of melatonin (0,1 mg/kg) and phenazepam selenium-containing analogue in a small dose (0,1 mg/kg) turned out to be most effective. At the same time under melatonin influence the effect of benzodiazepine upon anxiety-phobia level of the animals tended to weakening.
При совместном использовании эпифизар-ного гормона мелатонина и нового синтезированного бензодиазепина - селенсодержащего аналога феназепама у самок крыс наибольший противотревожный эффект отмечен в утренние часы при многопараметровом тестировании. Наиболее эффективной оказалась комбинация: мелатонин (0,1 мг/кг) и селенсодержащий аналог феназепама в малой дозе (0,1 мг/кг).
УДК 612.843.367:616.89-008.447
Актуальность поиска высокоэффективных транквилизаторов обусловлена ростом числа психо-неврологических заболеваний и пограничных уровней. Основными средствами фармакотерапии неврозоподоб-ных состояний являются анксиолитики, прежде всего бензодиазепинового ряда. В этой связи продолжается интенсивный поиск новых препаратов в ряду синтетических аналогов эффективных атарактиков. Особенно актуальна проблема создания лекарственных средств с заданными свойствами.
Вместе с тем, в последние годы пристальное внимание уделяется физиологической роли микроэлемента селена и интенсивно исследуются фармакологические свойства селенсодержащих препаратов, в частности, антиоксидантные, противоин-фарктные, противоопухолевые и другие.
Указанные моменты позволили предположить возможность наличия фармакологических свойств у синтетического селенсо-держащего аналога феназепама (рис. 1) - 7-бром-5 -(0-хлорфенил)-1,2-дигидро-3-Н-1,4-бензодиазепин-2-селенона [Я0] (вещество синтезировано под руководством доктора химических наук, профессора Аксенова А.В.) (1). Учитывая вовлечение эпифиза (пинеальной железы) в механизмы реализации специфических эффектов бензодиазепи-нов (8) и то, что введение экзогенного мела-тонина расценивается как гиперфункция железы (4, 5), было интересно оценить влияние комбинации синтезированного вещества и
эпифизарного гормона на поведение животных в разное время суток.
ННС1
Рис. 1. 7-бром-5/0-хлорфенил/-1,2-дигидро-3-Н,1,4-бензодиазепин-2-селенон.
Методика
Экспериментальным материалом служили лабораторные крысы - половозрелые крысы-самки. Поведение животных оценивали методикой многопараметрового тестирования (11), позволяющей характеризовать индивидуальный тревожно-фобический уровень крыс по ранжированной шкале. Растворяли эпифизарный гормон мелатонин в растворе этилового спирта (1:90) и применяли в дозе 0,1 мг/кг за 1 час до опыта. Исследуемое вещество вводили в дозах 0,1; 0,2; 0,5; 1,0 мг/кг за 30 минут до тестирования. Контролем служили животные, получавшие инъекции одного растворителя. Учитывая, что при введениях в клинических условиях транквилизаторов бензодиазепиновой структуры наблюдается снижение активности препаратов, все вещества инъецировались внутрибрюшинно остро.
Учитывая неодинаковую циркадиан-ную чувствительность к экзогенному мела-тонину, особенно заметно меняющуюся в переходные фазы суток - утром и вечером (14), действие препаратов оценивали в утренние (8-10) и вечерние (18-20) часы при изменении внешней освещенности с переходом от темноты к свету и наоборот.
Проводили относительный сравнительный анализ опытных и контрольных данных. Достоверность обнаруженных отличий определяли при помощи критерия Вилкоксона-Манна-Уитни (7).
Результаты исследования и их обсуждение
Выполненные эксперименты показали, что при введении мелатонина 0,1 мг/кг совместно с селенсодержащим аналогом фена-зепама в дозе 0,1 мг/кг утром понижался уровень тревожности самок крыс (рис. 2), о чем свидетельствовало понижение интегрального показателя тревожности ИПТ (р<0,001). При этом комбинация препаратов влияла практически на все показатели теста, лишь ограничивая переходы в двухкамерном боксе. Вечером под действием веществ величина ИПТ незначительно понижалась. В это время суток комплекс препаратов заметно снижал эмоциональную реактивность, но ограничивал двигательную активность.
С увеличением дозы исследуемого вещества (0,2 мг/кг) в комбинации с эпифи-зарным гормоном противотревожное влияние сохранялось в утренние часы, но индекс тревожности понижался на меньшую величину. Вечером суммарный показатель ИПТ несколько повышался, что прежде всего было связано с уменьшением подвижности животных. Вместе с тем, и утром и вечером при сочетанном использовании веществ эмоциональная реактивность самок крыс подавлялась.
Как было установлено, при совместном введении мелатонина и вещества в дозе 0,5 мг/кг отмечалось некоторое понижение индекса тревожности самок крыс. При этом заметных различий в утренних и вечерних исследованиях не наблюдалось. Понижение ИПТ было связано с подавлением реакций животных на «живой объект». Однако при этом утром ограничивались переходы в двухкамерном боксе, а вечером еще и замедлялись спуск с высоты и выход из освещенного «домика».
С увеличением дозы вещества (1 мг/кг) в комбинации с гормоном индекс тревожности достоверно понижался, но утром эффект был более выражен и статистически
уровень самок крыс при многопараметровом тестировании.
А-результаты утреннего, Б - вечернего тестирования. Столбики и векторограммы: черной линией -1-МТ 0,1 мг/кг и Я0 0,1мг/кг;2-МТ 0,1 мг/кг и Я0 0,2мг/кг;3-МТ 0,1 мг/кг и Я0 0,5мг/кг; 4-МТ 0,1 мг/кг и Я0 1,0мг/кг. Серой линией обозначен контрольный уровень поведенческих показателей (самки крыс, получавшие растворитель). На векторограмме:1-1У-латентные периоды соответственно спуска с высоты, прохождения через отверстие, выхода из «домика» и центра «открытого поля»(с), У-У1-иячение 1и2, УП-затаивание,УШ-вокализация, 1Х-прижимание ушей. * - р <0,05;* -р<0,01 **- р<0,01
*и**-статистически значимые сдвиги показателей по отношению к контролю, соответственно при Р
высокозначим (р<0,01). При этом спектр его влияния на поведение животных был аналогичен действию комплекса с малой дозой бензодиазепина и мелатонина.
Таким образом, при многопараметрической оценке поведения самок крыс при комплексном введении эпифизарного гормона мелатонина (0,1 мг/кг) и селенсодер-жащего аналога феназепама наибольший противотревожный эффект отмечался в утренние часы.
Для более точного и полного представления о взаимном влиянии веществ при совместном введении полученные данные сравнивали с результатами изолированного применения транквилизатора и гормона. Для того проводили анализ характера воздействия комбинации препаратов на тревожный статус крыс в сравнении с поведением животных, получавших вещества раздельно.
В частности, вычленяли эффект последнего, принимая показатели многопараметрического тестирования на фоне изоли-
рованного введения мелатонина за точку отсчета, по отношению к которой и высчи-тывались отклонения при комплексном использовании препаратов (рис. 3).
При анализе с вычленением эффектов препаратов обнаруживалось сохранение эффектов селенсодержащего аналога феназе-пама в виде понижения ИПТ в утренние часы (9, 10).
На фоне мелатонина величина сдвигов несколько увеличивалась.
Вместе с тем, в вечерние часы эпифи-зарный гормон ослаблял противотревожное действие малой дозы синтезированного бен-зодиазепина (0,1 мг/кг), изменяя направленность сдвига ИПТ.
Таким образом, на фоне мелатонина влияние селенсодержащего аналога феназе-пама на тревожно-фобический статус самок крыс несколько усиливалось в утреннее время, и имело тенденцию к ослаблению в вечерние часы.
Ü5
78
Я7
5S
107
117
lllfi
Г9
Рис. 3. Влияние комбинированного использования мелатонина и на тревожно-фобический уровень у самок крыс при многопараметрическом тестировании.
Сплошной серой линией обозначен контрольный уровень поведенческих показателей (самки крыс, получавшие соответственно мелатонин 0,1 мг/кг), принятый за 100%. Остальные обозначения см. рис. 2.
Интересным представляется факт, что совокупный эффект гормона и селенсодер-жащего бензодиазепина по ряду показателей был даже слабее активности бензодиазепи-на.
Подобный результат, может быть, в первую очередь, объяснен тем, что мелато-нин, согласно многочисленным наблюдениям, обладает модулирующими свойствами (6, 8, 16). Во-вторых, он является мощным индуктором микросомальных ферментов печени (3), в связи с чем может резко увеличиваться метаболизм транквилизаторов, и, следовательно, ослабляться их эффект.
Естественно предположить, что эффекты нового вещества, реализуемые с участием эпифиза, связаны с влиянием препарата на специфические рецепторы в железе. Действительно, в эпифизе уже сравнительно давно обнаружены места специфического связывания меченого диазепама. В этой связи предполагается, что именно таким путем диазепам повышает активность эпифизарной К-ацетилтрансферазы. Последняя играет важную роль в синтезе мелатонина (2, 4, 5).
Вместе с тем, возможен и иной уровень участия эпифизарных факторов в регуляции эффектов вещества.
Согласно современным представлениям, эпифизарный мелатонин способен, влияя на специфические мелатониновые рецепторы повысить проницаемость мембран к ионам хлора, что в свою очередь, обуславливает возрастание чувствительности ГАМК-бензодизепиновых комплексов (12, 13).
Вместе с тем, имеются данные и о способности мелатонина тормозить связывание меченого диазепама с синаптосомами мембран, полученными из переднего мозга крыс (15). Следовательно, и на этом уровне прослеживается модулирующее влияние ме-латонина.
Таким образом, выполненные исследования и анализ данных литературы позволяет думать о том, что эпифизарные механизмы вовлечены в регуляцию специфической психотропной активности нового синтезированного вещества - селенсодержаще-го аналога феназепама.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аксенова И.В., Манвелян Э.А., Самсонова О.Е., Аксенов А.В. Синтез Se-содержащего аналога феназепама как возможного противотре-вожного средства // Материалы I Международной научно-практической конференции «Биоэлементы». — Оренбург, 2004. — С.210-233.
2. Арушанян Э.Б., Батурин В.А. Основы хро-фармакологии. - Ставрополь, 1989. - 84 с.
3. Арушанян Э.Б. К фармакологии мелатонина // Фармакология и токсикология. - 1992. - № 3. -С. 68-74.
4. Арушанян Э.Б. Хронофармакология. -Ставрополь, 2000. - 424 с.
5. Арушанян Э.Б. Анксиолитические средства. - Ставрополь, 2001. - 238 с.
6. Бейер Э.В. Хронофармакологические аспекты действия бета-адреноблокаторов: Автореф. дис... канд. мед. наук. - Ростов-на-Дону, 1994. -
24 с.
7. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. -М.: Медицина, 1978. - 152 с.
8. Манвелян Э.А. Роль эпифизарных механизмов в реализации специфической психотропной активности бензодиазепиновых транквилизаторов: Автореф. дис... канд. фармацевт. наук. -Пятигорск: Пятиг. гос. Фарм. акад., 1997. -
25 с.
9. Манвелян Э.А. Нейрофизиология влияния селенсодержащего аналога феназепама на тре-вожно-фобический статус самок и самцов крыс // Материалы Х1Х съезда физиологического общества имени И. П. Павлова. - Екатеринбург, 2004. - С. 148-149.
10. Манвелян Э.А. Влияние селенсодержащего аналога феназепама на тревожно-фобический статус самок крыс // Материалы I Международной научно-практической конференции «Биоэлементы». - Оренбург, 2004. - С. 232-233.
11. Многопараметровый метод комплексной оценки тревожно-фобического состояния у крыс / Родина В.И., Крупина Н.А., Крыжанов-
ский Г.Н., Окнина М.Б. // Журн. высш. нервн. де-ят. - 1993. - № 5. - С. 1006-1017.
12. Acuna Dario, Fernandes Begona, Gomar Maria D., Aguila Carmen M., Castillo Jose L. Influ-ens of the pituitary-adrenal axis on benzodiadi-azepin receptor binding to rat cerebral cortecs // Neuroendocrinology. - 1990. - № 1. - Р. 97-103.
13. Kennaway D.J., Hugel H.M. Melatonin, mela-tonin metabolites and the suprachiasmatic nucleus // Adv. Pineal Res. - 1991. -V. 6. - P.169-178.
14. Lynch H.J., Deng M.H. Pineal responses to stress // J. Neural Transm. - 1986. - Suppl. 21. - P. 461 - 473.
15. Maranges P., Patel J. Hirata F., Sonhein D., Paul S.M. Inhibition of diazepam binding by tryp-thophan derivatives including metabolite N-acetyl-5-methoxykynurenamine // Life sci - 1981.-V.29-p. 259-267.
16. Orchii Paul B. Infuence of propranolol on the circadian variantons of the anaesthetic effects and hexobarbital sodium // Pol.J. Pharmacol. And pharm. - 1992. - Suppl. 44. - P. 195.
Об авторе
Манвелян Элеонора Аслибековна, кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры анатомии, физиологии и гигиены человека Ставропольского государственного университета. Сфера научных интересов - хронофармакология, фармакология анксиолитических средств, хронофизиология. Автор 32 научных и научно-методических трудов, получено свидетельство на рационализаторское предложение.
