CC BY
9
3. Полученный эффект медленно снижается к 10 суткам экспозиции, но продолжает все время достоверно отличаться от контроля.
4. Высокая цитогенетическая активность препарата ДДБ требует его дальнейшего изучения по критериям соматического и генеративного мута-
^ генеза.
Поступила 23/1X 1970 г.
THE CYTOGENIC EFFECT OF DDB COMPOUNDS
В. Ya. Ekshtat, V. G. Matveeva, Yu. Ya. Kerkis
The DDB pesticide was found to have a cytogenic effect on the bone marrow cells of mice (C57B Breed) in case of its oral and intraperitoneal introduction in a dose of Vs LD50 (100 mg/kg). The same mutagenic effect was produced by the administration of the compound by means of various routes; however, the maximum effect took place at much an earlier stage if it was introduced intraperitoneally.
L УДК 612.017.1.014.46:615.28
«I ДЕЙСТВИЕ НЕКОТОРЫХ ПЕСТИЦИДОВ
НА ИММУНОЛОГИЧЕСКУЮ РЕАКТИВНОСТЬ
i
fk * J
Проф. ß. M. Перелыгину M. Б. Шпирт, О. А. Арипов, В. И. Ершова
0
Киргизский институт эпидемиологии, микробиологии и гигиены, Фрунзе
• •
Учитывая, что иммунологическая реактивность организма является чувствительным показателем влияния факторов внешней среды, мы изучили действие различных доз ДДТ, тетраметилтиурамдисульфида (ТМТД), севина и цинеба в 6-месячном эксперименте на 96 кроликах и 1150 белых мышах. Для опытов применяли следующие дозы препаратов: ДДТ и ТМТД —0,1; 0,5 и 1 мг/кг\ севин — 0,1; 20 и 200 мг/кг; цинеб — 10, 100 и 500 мг/кг. Первая доза обычно соответствует допустимому остаточному количеству (ДОК) или дозе, не вызывающей изменений в организме; вторая позволяет уловить физиологические и биохимические сдвиги; третья доза — токсическая. Препараты вводили ежедневно внутрижелудочно в течение 6 месяцев. Иммунологические показатели определяли до начала затравки и ежедекадно в процессе затравки, а также спустя месяц после ее прекращения. Изменения защитных свойств организма оценивали по бактерицидным, превентивным свойствам и по белковому спектру сыворотки крови, титру агглютининов и фагоцитарной активности лейкоцитов, по состоянию периферической крови и активности холинэстераз, по внутри-кожной пробе с морфином в 2 разведениях (10~3 и 10~5), по суточной двигательной активности (для ДДТ), числу эозинофилов (для ТМТД), а также по динамике веса и общему состоянию животных.
I 1 И I ■ Fï' г
Превентивные свойства сыворотки крови определяли следующим образом: вводили внутрибрюшинно 0,3 мл сыворотки от каждого кролика 5 мышам. Через 24 часа заражали мышей смертельной дозой живой брюшнотифозной культуры (штамм 410, фаготип А). Эту же дозу культуры вводили мышам для контроля правильности подобранной дозы. Степень защиты сравнивали по группе контрольных иммунизированных мышей, получивших смертельную дозу культуры. Защитные свойства сыворотки вакцинированных мышей принимали за 100%. Содержание отдельных белковых фракций сыворотки крови определяли методом электрофореза на бумаге с помощью аппарата ЭФА-1 с последующим колориметри-рованием фореграмм на фотоэлектроколориметре. Титр агглютининов изучали при троекратном введении животным химической сорбированной тифо-паратифозной дивакцины (ТБ), содержащей в 1 мл 1 млрд. микробных тел. Вакцину вводили внутривенно по следующей схеме: 1-е введение —0,8 мл спустя 15—20 дней с момента затравкй, 2-е— 1 мл спустя 2—21/2 месяца после затравки, 3-е — 1 мл спустя 4—4г/2 месяца после затравки. С целью изучения фагоцитарной активности лейкоцитов крови мы использовали односуточную культуру золотистого стафилококка (штамм 209). Густота взвеси составляла 1 млрд. микробных тел в 1 мл физиологического раствора по оптическому стандарту. Учитывали фагоцитарный показатель — частное от деления фагоцитированных микробов на число подсчитанных лейкоцитов (100)— и процент фагоцитов — количество лейкоцитов с фагоцитированными микробами при подсчете 100 нейтрофилов.
Активность холинэстеразы определяли по методу Э. И. Матлиной и В. М. Прихожан (1961), суточную двигательную активность — по методу И. И. Калабухова в модификации М. Л. Рыловой (1964). Результаты исследований обработаны статистически.
/
При действии ДДТ в опыте на кроликах не удалось отметить существенных изменений со стороны красной крови, бактерицидных свойств сыворотки и веса тела животных. Число лейкоцитов постепенно увеличивалось в течение первых 3 месяцев у всех подопытных животных. Наиболее выраженный подъем (на 32%) наблюдался у кроликов 3-й группы на 3-м
месяце затравки, затем шло снижение. К концу опыта оно было ниже исходного на 22%. Уве-
Таблица 1
Изменения фагоцитарной активности лейкоцитов кроликов при действии ядохимикатов к 3-му месяцу затравки (фагоцитарный индекс в % к контролю)
личение числа леикоцитов свидетельствует о начале хронической интоксикации, а снижение — об усугублении этого процесса (В. К. Навроцкий). Об этом же свидетельствует и динамика фагоцитарной активности лейкоцитов. В первые 2 месяца у кроликов 3-й группы наблюдалось увеличение фагоцитарной активности лейкоцитов, а на 3-м месяце — снижение на 38%. У других животных это снижение не было столь выраженным (табл. 1).
У животных наблюдались изменения титров агглютининов. После первой иммунизации титры антител у подопытных животных были ниже, чем у контрольных. К концу затравки была выявлена прямая зависимость титра от дозы препарата (табл. 2).
Наиболее выраженное угнетение продукции антител отмечалось у животных, получивших ДДТ в дозе 1 мг/кг.
Известно, что протективные антитела сыворотки — более достоверный показатель состояния устойчивости организма против возбудителя заболевания по сравнению с агглютинирующими антителами (Н. В. Чумаченко; Н. А. Хоменко; БПег), поэтому одновременно мы изучали превентивные свойства сыворотки кроликов (табл. 3).
Из табл. 3 видно, что у всех подопытных животных к концу затравки защитная сила сыворотки была сниженной, но наиболее резкое снижение (в Зраза) происходило под влиянием ДДТ в дозе 1 мг/кг. Наблюдались так-
Ядохимикат Группа животных
1-я 2-я 3-я
ДДТ 92 83 62
ТМТД 143 169 165
Севин 97 85 83
Цинеб 108 86 83 1
Примечание. В табл. 1—3: ДДТ и ТМТД животным 1-й группы вводили в дозе 0,1 мг/кг\ 2-й — 0,5 мг/кг\ 3-й — 1 мг!кг\ се-вин—соответственно в дозах 0,1, 20 и 200 мг!кг\ цинеб — 10, 100 и 500 мг/кг.
Таблица 2
I
Изменения агглютининооб-разовательной функции кроликов при действии ядохимикатов к концу затравки (титр антител в % к контролю)
Ядохимикат Группа животных
1-я 2-я 3-я
л п т 70 60 37
ТМТД 85 63 50
Севин 95 27 23
Ци неб 113 25 18
Таблица 3
Изменения превентивных свойств сыворотки кроликов при действии ядохимикатов к концу затравки (выживаемость белых мышей в % к контролю)
\
Ядохимикат Группа животных
1-я 2-я 3-я
ДДТ 85 54 31
ТМТД 93 67 53
Севин 92 65 46
Цинеб 86 50 29
же изменения в лейкоцитарной формуле: лимфоцитоз (75%) и нейтропе-ния (23%). Специальный анализ результатов пробы с морфином показал, что реактивность животных, получавших ДДТ в дозе 0,1 мг/кг, а также контрольных кроликов не снижалась, а у других подопытных животных это снижение начиналось с 3-го месяца и продолжалось до конца эксперимента.
Результаты исследований белкового спектра сыворотки крови свидетельствовали о нарушении белковообразовательной функции печени у кроликов, получавших ДДТ в дозе 1 мг/кг и в значительно меньшей степени — в дозе 0,5 мг/кг. Отмечалось увеличение суточной двигательной активности белых мышей от различных доз ДДТ (изменения в реактивности центральной нервной системы, обычно начинающиеся после 3-го месяца) по сравнению с контролем: от дозы 0,1 мг/кг — на 14%, от дозы 0,5 мг/кг — на 90%, от дозы 1 мг/кг—на 111%.
Действие ТМТД. При затравке животных ТМТД в дозах 0,5 и 1 мг1кг у кроликов происходило изменение реактивности с 1-го месяца опыта (по данным внутрикожной пробы с морфином). Максимальное снижение наблюдалось к 3-му месяцу и удерживалось на протяжении всего эксперимента.
После первой иммунизации титры агглютининов были низкими у животных всех групп, а у кроликов, получавших 1 мг/кг препарата, они были в 2 раза ниже, чем у контрольных животных. К концу затравки обнаруживалась выраженная зависимость величины титра агглютининов от дозы препарата (см. табл. 2). Аналогичные данные получены при изучении превентивных свойств сыворотки крови животных (см. табл. 3).
Фагоцитарная активность лейкоцитов у всех подопытных кроликов несколько возрастала в течение 3 месяцев затравки (см. табл. 1). Нормализация ее под влиянием дозы 0,1 мг/кг происходила с 3-го, а от дозы 0,5 мг/кг — с 4-го месяца, от дозы 1 мг/кг — в восстановительном периоде. Можно полагать, что ТМТД оказывал симпатикотропный эффект, стимулировавший естественный иммунитет.
Действие севина. При проведении внутрикожной пробы с морфином выявлено снижение реактивности у кроликов, получавших севин в дозе 20 мг/кг и особенно в дозе 200 мг/кг. Однако у животных первых 2 опытных групп в течение 2 месяцев имела место компенсация, а у кроликов 3-й группы—снижение реактивности с 1-го месяца затравки. Максимальное снижение реактивности у подопытных животных 3-й группы наблюдалось к 3-му месяцу и удерживалось в течение всего эксперимента. Претерпевали изменения и титры агглютининов у животных. К концу затравки они снижались в 4—5 раз у кроликов, получавших севин в дозах 20 и 200 мг/кг (см. табл. 2). Подтверждением этому служат данные изучения превентивных свойств сыворотки крови кроликов (см. табл. 3). Наиболее выраженными защитными свойствами обладали сыворотки животных контрольной и 1-й опытной групп. По мере увеличения дозы препарата превентивные свойства сыворотки животных снижались. Наиболее слабой степенью защиты обладали сыворотки кроликов, получавших севин в дозе 200 мг/кг; она в 2 с лишним раза ниже сывороток контрольных животных.
Фагоцитарная активность лейкоцитов у животных, получавших севин в дозе 0,1 мг/кгу вначале несколько повышалась, а к концу затравки отмечалась явная тенденция к ее нормализации (фагоцитарный индекс до опыта — 41,7±3%, через 2 месяца — 46,0±3,5%, к концу затравки — 38,74:5,6%). у кроликов, получавших севин в дозе 20 мг/кг, вначале отмечалась компенсаторная реакция в виде некоторого повышения фагоцитарной активности лейкоцитов, а затем наступало ее снижение (соответственно 42,0±3,1; 44,7±1,1 и 30,8±3,0 %). У животных, получавших севин в дозе 200 мг/кг, такой компенсации не наступало и фагоцитарная активность лейкоцитов была сниженной (45,3±2,6; 32,8+2,4 и 33,1 ±1,2%). Такая зависимость от дозировок наблюдалась и при других иммунологических показателях у других изученных препаратов.
Активность истинной холинэстеразы у животных контрольной и одной опытной (введение 0,1 мг/кг севина) групп в течение всего опыта увеличивалась. Вероятно, ее повышение явилось следствием иммунизаций животных. Известно, что в ответ на антигенное раздражение в организме повышается содержание ацетилхолина, который играет положительную
роль в процессах иммуногенеза. По-видимому, это обусловило постоянный подъем титра антител у животных этих групп. В результате гуморальной компенсации медиаторного обмена возрастала активность холинэстеразы. При введении более высоких доз севина (20 и 200 мг/кг), который, как известно, является ингибитором холинэстеразы, в результате перенапряжения компенсаторных механизмов наряду с угнетением активности холинэстеразы (на 48—54%), очевидно, происходит снижение содержания аце-тилхолина. Это угнетение реактивности организма проявлялось в снижении титров антител в 4—5 раз по сравнению с этим показателем у контрольных животных.
Действие цинеба. При затравке цинебом (в дозе 500 мг/кг) у кроликов снижалась реактивность (по данным внутрикожной пробы с морфином) с 1-го месяца, а в дозе 100 мг/кг—со 2-го. В восстановительном периоде у подопытных кроликов (за исключением животных, получавших цинеб в дозе 500 мг/кг) наблюдалась нормализация реактивности.
Титр агглютининов у животных, получавших препарат в дозе 500 мг/кг, был в 4—51/2 раз ниже, чем у контрольных кроликов (см. табл. 2).
Результаты изучения превентивных свойств сывороток подтверждают изложенное (см. табл. 3). По мере увеличения дозы препарата защитная сила сыворотки уменьшалась.
Фагоцитарная активность лейкоцитов у подопытных кроликов 2-й и 3-й групп несколько снижалась (см. табл. 1). Это снижение начиналось с 1-го месяца затравки и сохранялось до конца опыта.
Изменения активности холинэстеразы под влиянием цинеба аналогичны тем, которые наблюдались при действии севина. Так, во 2-й и 3-й опытных группах активность фермента была снижена на 52—67%. Наблюдались изменения белкового спектра под действием изучаемых соединений в сторону уменьшения содержания альбумина и увеличения содержания глобулина. Отмечены также нейтропения и лимфоцитоз.
Таким образом, иммунобиологическая реактивность — довольно чувствительный показатель влияния ядохимикатов на организм. Сдвиги в реактивности происходили даже от допустимых остаточных количеств (в пересчете на 1 кг веса тела). Однако эти изменения не были стабильными. После непродолжительного и незначительного снижения или повышения иммунобиологической реактивности явственно проявлялась тенденция к нормализации. Дозы препаратов, обусловливающие начальные токсические явления в организме, приводили к снижению фагоцитарной активности лейкоцитов, резкому снижению титров антител и превентивных свойств сыворотки крови экспериментальных животных. Следует отметить, что здесь характерной была смена фаз. В первые 2 месяца опыта, вероятно, за счет напряжения компенсаторных механизмов наблюдалось некоторое повышение реактивности, а затем наступало ее снижение.
Большие (токсические) дозы обычно значительно раньше вызывали декомпенсацию, и иммунологическая реактивность прогрессивно снижалась. Надо отметить, что эти изменения предшествовали проявлению симптомов специфической патологии от воздействия изученных соединений.
Наиболее четкими показателями иммунологической реактивности при действии ядохимикатов можно считать титр агглютининов, протективные антитела сыворотки, фагоцитарную активность лейкоцитов, а также внут-рикожную пробу с морфином. Менее существенные сдвиги получены при исследовании бактерицидных свойств,, белкового спектра сыворотки и периферической крови.
Выводы
1. ДДТ, ТМТД, севин в дозе 0,1 мг}кг и цинеб в дозе 10 мг/кг не вызывали стабильных изменений иммунологической реактивности.
2. ДДТ, ТМТД в дозе 0,5 мг/кг, севин в дозе 20 мг/кг, цинеб в дозе 100 мг/кг приводили к снижению фагоцитарной активности лейкоцитов,
антителообразования и защитных свойств сыворотки. Пестициды в этих дозах приводили к смене фаз — вначале к повышению, а затем к снижению реактивности.
3. ДДТ, ТМТД в дозе 1 мг]кгу севин в дозе 200 мг]кг, цинеб в дозе 500 мг/кг вызывали значительное, прогрессирующее снижение иммунологической реактивности.
4. Изменения иммунологической реактивности, наблюдаемые при действии изученных пестицидов, часто предшествовали появлению специфически выраженной патологии. , \
ЛИТЕРАТУРА
Навроцкий В. Н. Гиг. труда, 1957, № 2, с. 12.— ХоменкоН.А. В кн.: Вопросы эпидемиологии, профилактики и клиники кишечных инфекций. М., 1954, с. 127.— ЧумаченкоН. В. Ж. микробиол., 1953, № 9, с. 27.
> Поступила 15/1X 1970 г.
THE ACTION OF CERTAIN PESTICIDES ON THE IMMUNOLOGICAL REACTIVITY
i •
V. M. Perelygin, M. B. Shpirt, O. A. Aripov, V. /. Ershova
_ ^ j •
The paper contains results of a study of the immunological reactivity of rabbits and albino rats exposed to the chronic action of various doses of pesticides. DDT, TMTD, sevine in a dose of 0.1 mg/kg and cineb in a dose of 10 mg/kg did not produce any stable changes in the immunological reactivity. DDT, TMTD in a dose of 0.5 mg/kg, sevine in a dose of 20 mg/kg and cineb in a dose of 100 mg/kg brought about a fall of the phagocytic activity of leucocytes, that of antibody formation and protective properties of the serum. Different phases of reactivity were found to exist: at the beginning that of increase and later that of decrease of reactivity. DDT, TMTD in a dose of lmg/kg, sevine in a dose of 200 mg/kg, cineb in a dose of 500 mg/kg caused a prolonged, gradual fall of the immunological reactivity. The shifts of immunological reactivity, that were noted to develop under the action of investigated pesticides, were often preceded clinical signs specific for pathological changes.
УДК 613.268:665.347.8
ВЛИЯНИЕ ОКИСЛИВШЕГОСЯ ПОДСОЛНЕЧНОГО МАСЛА
НА ОРГАНИЗМ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
%
М. М. Дубенецкая
Белорусский научно-исследовательский санитарно-гигиенический институт, Минск
Отсутствие в ГОСТ на растительное масло надежных критериев для оценки его качества затрудняет санитарный контроль и приводит к тому, что в торговой сети оно встречается со значительным содержанием продуктов окисления (Л. Ф. Ромыш и М. М. Дубенецкая). По литературным данным, продукты окисления масла оказывают токсическое влияние на живот-
>✓ _ „
ный организм (Вепеэ и БесИасек; В. Г. Партешко).
Изучение содержания продуктов окисления (перекисей и альдегидов) в потребляемом населением подсолнечном масле в сопоставлении с кислотным числом и органолептическими свойствами показало, что это масло, вполне доброкачественное по вкусовым свойствам, содержит не более 0,25% перекисей (по йоду) и не более 0,46 мг альдегидов в 1 г. Вкус и запах начинают изменяться при перекисном числе, превышающем 0,25%; если же оно составляет около 0,5%, то появляется неприятный привкус окисленного масла (Л. Ф. Ромыш и М. М. Дубенецкая; Ыакашига).
В настоящем сообщении представлены экспериментальные данные о влиянии на организм животных окислившегося при хранении подсолнеч-
ф
2 Гигиена и санитария № 12 33
/
/ • /
