CC BY
18
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2020; ТОМ 65; №1 |
Расчет генетических расстояний, полученных на основании частот групп HLA-аллелей, между включенными в исследование популяциями и некоторыми евразийскими популяциями, представленными в базе данных Allele Frequency Net (http://www.allelefrequencies.net), проводили по методу Нея c помощью программы Phylip 3.695, как и построение филогенетических деревьев.
Результаты и обсуждение. Русские из Нижнего Новгорода и Забайкалья мало отличались по частотам групп аллелей HLA-генов друг от друга и от русских из Москвы, ранее исследованных в лаборатории тканевого типирования «НМИЦ гематологии». Характер распределения групп HLA-аллелей у русских был схож с распределением у других восточноевропейских популяций. Русские были близки к полякам, несколько ^большие генетические дистанции отделяли русских от че-
хов. Из включенных в исследование популяций наиболее существенно отличались от русских и друг от друга буряты и осетины (рис.). Буряты по частотам групп аллелей HLA-генов были близки к халха-монголам. Более близки к русским, чем буряты и осетины, были татары. Башкиры располагались между татарами и бурятами. Наиболее распространенные тА-гаплотипы: у русских - As01-Bs08-Cs07-DRBГг03-DOBrг02 (4,5% у нижегородцев; 3,5% у русских из Забайкалья), у башкир и татар - As02-B,;i13-Cs06-DRBГг07-DOBГг02 (6,3 и 4,1% соответственно), у бурят -As23-B,;i44-Cs04-DRBrг07-DOBrг02 (4,7%), у осетин -As30-Bs49-Cs07-DRBГг13-DOBГг06 (9,0%).
Заключение. Российские доноры ГСК, рекрутированные в регистр «НМИЦ гематологии», характеризуются значительным HLA-генетическим разнообразием.
Хоржевский В. А., Гаппоев С. В., Гаркуша Т. А.
УЛЬТРАСТРУКТУРНЫЙ ПАТОМОРФОЗ МЕГАКАРИОЦИТОВ ПРИ ИСТИННОЙ ПОЛИЦИТЕМИИ И ПЕРВИЧНОГО МИЕЛОФИБРОЗА
ПОД ВЛИЯНИЕМ ПРЕПАРАТОВ ГИДРОКСИМОЧЕВИНЫ
Краевое государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Красноярское краевое патолого-анатомическое бюро»
Введение. Истинная полицитемия (ИП), первичный миело-фиброз (ПМФ) — наиболее часто встречающиеся Ph-негативные миелопролиферативные неоплазии (МПН), характеризующиеся нарушением пролиферации одной или более клеточной линии мие-лопоэза. Одним из химиотерапевтических препаратов для лечения ПМФ и ИП является гидроксимочевина (ГМ). Предполагается, что под влиянием ГМ происходит ингибирование синтеза ДНК, однако достоверно механизм воздействия препарата не изучен.
Цель работы. Оценить явления патоморфоза на ультраструктурном уровне в МЦ под влиянием препаратов ГМ.
Материалы и методы. Исследовано 42 образца костного мозга, полученных от пациентов с ИП (22) и ПМФ (20), методом тре-панобиопсии ости подвздошной кости. В группе пациентов с ИП 12 (1-я группа) пациентов, а в группе с ПМФ 12 (2-я группа) пациентов получали монотерапию гидроксимочевиной в терапевтических дозах на протяжении от 23 до 49 месяцев с полным гематологическим ответом. Остальные пациенты на момент диагностики лечения не получали (ИП — 10 пациентов (3-я группа), ПМФ — 8 пациентов (4-я группа)). Исследование образцов проводилось с применением просвечивающего микроскопа Zeiss Libra 120 Plus в режиме TEM. Морфометрический анализ выполнен с применением программы Olympus iTEM. Статистический анализ проводился методами вариационной статистики для непараметрических величин.
Результаты и обсуждение. При электронно-микроскопическом исследовании МЦ пациентов 1-й и 2-й групп в парануклеарной локали -
зации определялись полости округлой и неправильной формы, различных размеров. В части данных полостей визуализировались участки цитоплазмы, ограниченные собственной мембраной или слоистые массы, пластинки которых имели концентрическое направление, — ауто-фагические вакуоли. Слоистые структуры с концентрически организованными пластинками, напоминающие содержимое аутофагических вакуолей, определялись и вне клеток. Конденсация хроматина в ядрах мегакариоцитов отсутствовала, в ядре визуализировалось ядрышко. В цитоплазме также имелись другие органоиды, такие как митохондрии, демаркационная мембранная система, рибосомы, аппарат Гольджи, альфа-гранулы и другие. В части органоидов имелся отек. Апоптотические тельца отсутствовали образцах всех групп. При сравнительном анализе различий встречаемости ультраструктурных явлений аутофагоцитоза между пациентами 1-й и 2-й групп не выявлено (р > 0,05), тогда как межгрупповой сравнительный анализ выявил достоверные различия по данному признаку между группами пациентов, получавших препараты гидроксимочевины и без лечения. Таким образом при ультраструктурном анализе мегакариоцитов пациентов, получавших препараты ГМ, на первый план выступают признаки активации аутофагоцитоза, чего не наблюдается вне терапии.
Заключение. Полученные результаты позволяют предположить, что препараты ГМ инициируют в МЦ аутофагический ответ. Терапевтическая значимость этого явления не ясна, так как может свидетельствовать как об аутофагической гибели, так и об активации протективных механизмов МЦ.
Хрульнова С. А., Коробова А. Г., Федорова А. В., Фролова И. Н., Клясова Г. А.
ДЕТЕКЦИЯ ГЕНОВ ПРИОБРЕТЕННЫХ КАРБАПЕНЕМАЗ УАСШЕТОБАСТЕЯ БАиИАММ1, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ГЕМОКУЛЬТУРЫ
БОЛЬНЫХ ОПУХОЛЯМИ СИСТЕМЫ КРОВИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России Введение. В последние годы в России, как и в ряде других ных изолятов Acinetobacter Ьаиташги. Устойчивость к карба-стран, наблюдается увеличение карбапенем-нечувствитель- пенемам у А. bau.mann.ii обусловлена преимущественно про-
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
дукцией приобретенных карбапенемаз, в основном группы ОХА-ферментов.
Цель работы. Изучить распространение генов приобретенных карбапенемаз среди изолятов А. Ьаитаппи, выделенных из гемо-культуры больных опухолями системы крови.
Материалы и методы. Материалом исследования были изоля-ты А. Ьаитаппи, выделенные из гемокультуры больных, находившихся на стационарном лечении в 7 лечебных учреждениях России (2003—2015 гг.). Чувствительность изолятов А. Ьаитаппи к карбапе-немам оценивали согласно критериям CLSI (2018). Наличие генов карбапенемаз класса D (групп ЫаОХА-51, Ыа0ХА-24/40, ЫаОХА-23 и ЫаОХА-58) и класса В (групп ЪЫМР, ЪкУШ и ЫaNDM) определяли методом ПЦР в режиме реального времени с использованием коммерческих наборов.
Результаты и обсуждение. Всего было исследовано 103 изолята А. Ьаитаппи, из которых 83 (80,6%) были нечувствительными к меро-пенему и/или имипенему. Гены приобретенных карбапенемаз были обнаружены в 67/83 (80,7%) нечувствительных к карбапенемам изо-лятах А. Ьаитаппи. Основными генами приобретенных ОХА-карбапе-немаз были ЫаОХА-24/40-подобные (п=31; 37,3%) и Ь1аОХА-23-подобные (п=30; 36,1%), далее следовали гены Ъ1аОХА-58-подобные (п=4; 4,8%), у одного изолята (1,2%) было выявлено одновременное наличие генов Ъ1аОХА-24/40-подобные и Ъ1аОХА-23-подобные. Выявлен один изолят, несущий ген blaNDM (1,2%). Гены карбапенемаз групп Ь1а1МР и Ь1аУ1М не были обнаружены. С 2003 г. по 2006 г. нечувствительными к карбапенемам были 72,7% (п=16) изолятов, и ни у одного из них не были обнаружены гены приобретенных карбапенемаз. Все карбапенем-не-
чувствительные А. Ьаитаппи, выделенные в последующие периоды исследования (2007—2010, 2011—2014 и 2015—2018 гг.), содержали гены приобретенных карбапенемаз (табл.). Гены Ь1аОХА-24/40-подобные преобладали в 2007—2010 и в 2011—2014 гг. (50 и 53,3% соответственно), в то время как в 2015—2018 гг. наибольшее распространение получили гены Ь1аОХА-23-подобные (53,1%). Последний период исследования (2015—2018 гг.) характеризовался наибольшим разнообразием генов приобретенных карбапенемаз, включая сочетание Ь1аОХА-24/40-подоб-ные и Ь1аОХА-23-подобные, а также blaNDM-подобные.
Заключение. Среди А. Ьаитаппи, выделенных из гемокультуры больных опухолями системы крови, преобладали карбапенем-нечувстви-тельные изоляты (80,6%), из которых 80,7% несли гены приобретенных ОХА-карбапенемаз. Наиболее распространенными генами приобретенных карбапенемаз среди карбапенем-нечувствительных А. Ьаитаппи были Ь1аОХА-24/40-подобные (37,3%) и Ь1аОХА-23-подобные (36,1%).
Таблица. Распределение генов приобретенных карбапенемаз А. ЬаитаппИ в исследуемые временные периоды
Гены приобретенных карбапенемаз Число карбапенем-нечувствительных A. baumannii, n (%)
2003-2006 гг. n=16 2007-2010 гг. n=20 2011-2014 гг. n=15 2015-2018 гг. n=32 всего N=83
Ь1аОХА-23-подобные 0 6 (30) 7 (46,7) 17 (53,1) 30 (36,1)
Ь1аОХА-24/40-подобные 0 10 (50) 8 (53,3) 13 (40,6) 31 (37,3)
Ь'аОХА-58-подобные 0 4 (20) 0 0 4 (4,8)
Ь'аОХА-23-подобные + ОХА-24/40-подобные 0 0 0 1 (3,1) 1 (1,2)
Ь'а№М-подобные 0 0 0 1 (3,1) 1 (1,2)
Цветков Н. Ю., Морозова Е. В., Моисеев И. С., Барабанщикова М. В., Бархатов И. М., Тишков А. В., Буг Д. С., Измайлова Е. А.,
Бондаренко С. Н., [Афанасьев Б. В.~|
ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАРКЕРОВ У ПАЦИЕНТОВ С МИЕЛОДИСПЛАСТИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ
НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, ФГБОУ ВО ПСПбГМУ им. И. П. Павлова Минздрава России
Введение. Миелодиспластический синдром (МДС) — гетерогенная группа клональных заболеваний с поражением гемопоэтической стволовой клетки крови, в основе которых лежат соматические мутации различных генов и/или эпигенетической регуляции, индуцированной нарушением микроокружения, а также нарушения в иммунной системе противоопухолевого надзора. Терапия при МДС варьирует от наблюдения до аллогенной трансплантации костного мозга (алло-ТГСК). В последнее время изучаются молекулярные механизмы патогенеза МДС и роль молекулярных маркеров при оценке риска прогрессирования заболевания.
Цель работы. Оценить прогностическое значение мутаций генов метилирования, SF3B1, ТР53у пациентов с МДС
Материалы и методы. В исследование включено 35 пациентов, среди них МДС с мультилинейной дисплазией — 2, избытком бла-стов 1 — 13, избытком бластов 2 — 19, 5д- синдром — 1 (ВОЗ 2016). У 30 пациентов наблюдался первичный МДС, у 5 пациентов — в результате предшествующей химио- или лучевой терапии. 25 получали алло-ТГСК, 10 — консервативную терапию. По IPSS-R 2 пациента соответствовали низкому риску, 1 — промежуточному, 13 — высокому, 19 — очень высокому. 28 пациентов получали терапию гипомети-лирующими препаратами, 7 — не получали. Медиана возраста 49 лет (18—80). С помощью секвенирования нового поколения определялись соматические мутации в генах метилирования ДНК (ТЕТ2, ШН1,2, ASXL1, DNMT3A), SF3B1, ТР53. Время до прогрессирования (ВП) рассчитывалось как время от постановки диагноза до трансформации в острый лейкоз, конкурирующим риском считалась смерть от причин, связанных с алло-ТГСК или проводимой химиотерапией. Исследование выполнялось в рамках гранта РНФ № 17-75-20145.
Результаты и обсуждение. При анализе мутаций в генах метилирования было обнаружено, что у 37% пациентов не выявлялось ни одной мутации, у 40% — мутация в 1 из генов, у 23% — мутации в 2 и более генах. Мутации SF3B1 наблюдались у 23%, ТР53 — у 11% больных. Медиана времени наблюдения 25 месяцев (5—116). В одно-факторном анализе не получено значимых различий в общей выживаемости в зависимости от мутационного статуса. Медиана ВП в слу-
чае проведения алло-ТГСК не достигнута, если алло-ТГСК не проводилась, — 6 месяцев (р=0,0001). Медиана ВП при отсутствии мутации в гене SF3B1 составила 35 месяцев, при наличии мутации в гене SF3B1 медиана ВП не достигнута (р=0,043), при наличии >2 мутаций в генах метилирования — 12 месяцев, в других случаях медиана не достигнута (р=0,024), при наличии мутации в гене ТР53 — 6 месяцев, при отсутствии — 43 месяца (р=0,023). В многофакторном анализе наличие мутации в генах ТР53 или >2 мутаций в генах метилирования сохранило свое неблагоприятное значение в отношении ВП вне зависимости от проведенного консервативного лечения или ал-
ло-ТГСК (отношение рисков 7,1; 95% ДИ 2,6-19,6; р=0,0001).
Заключение. Молекулярные маркеры позволят получить дополнительную информацию о прогнозе при МДС. Дополнительные исследования требуются для определения роли молекулярных маркеров в клинической практике, что позволит индивидуализировать подход к терапии МДС.
О 20 40 60
Time to progression, months
Number at risk
0 23 14 7 5
1 12 5 3 0
