CC BY
22
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
ДЕТЕКЦИЯ АНТИФОСФОЛИПИДНЫХ АНТИТЕЛ НОВЫМ МЕТОДОМ ИММУНОБЛОТТИНГА
Ткаченко О.Ю.1, Лапин С.В.1, Шмонин А.А.1, Соловьева Л.Н.1, Бондарева Е.А.1, Сельков С.А.2, Чепанов С.В.2
1ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский
государственный медицинский университет
им. И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ,
Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии
ирепродуктологии им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург,
Россия
Введение. Лабораторная диагностика антифосфоли-пидного синдрома (АФС) состоит в выявлении антифос-фолипидных антител (АФА) методом иммуноферментно-го анализа (ИФА), а именно в детекции антикардиолипи-новых (аКл) антител и антител к бета-2-гликопротеину (aß2rn). Использование классических ИФА тест-систем затруднено их недостаточной стандартизацией. Новым подходом к детекции антифосфолипидных антител является использование иммуноблоттинга, преимуществом которого является сорбция антигенов на гидрофобной PVDF-мембране и комплексный подход к диагностике АФС.
Материалы и методы. Нами была собрана коллекция образцов сывороток 45 пациентов с некардиоэмболиче-скими ишемическими инсультами, 19 пациентов с рецидивирующими тромбозами глубоких вен нижних конечностей и 44 пациентов с привычным невынашиванием
беременности, а также 120 клинически здоровых доноров. В данных сыворотках были измерены аКл IgG, аКл IgM, аß2ГП1 методом ИФА с помощью тест-систем фирм Euroimmun (ПР1) и Orgentec Diagnostica (ПР2) и аКл IgG, аКл IgM, аß2ГП1, а также некритериальные АФА — методом иммуноблоттинга на тест-системе фирмы Medipan (ПР3).
Результаты. Классическим методом ИФА при использовании пограничного значения, заявленного производителями, АФА были выявлены у 57% пациентов, методом иммуноблоттинга — у 40%, при этом средние и высокие титры определялись у 14% пациентов при использовании ИФА тест-систем, и у 23% — при использовании нового метода иммуноблоттинга. В группе пациентов с привычным невынашиванием частота АФА значимо выше, чем в группах пациентов с некардиоэмболическими инсультами и рецидивирующими тромбозами глубоких вен нижних конечностей. Встречаемость критериальных АФА, измеренных методом иммуноблоттинга, для аß2ГП составила 50%, для аКл — 20%. Среди минорных антител к наиболее значимыми оказались антитела к фосфати-дилсерину, аннексину и фосфатидной кислоте (встречаемость составила 20%).
Выводы. Использование классического подхода к диагностике АФС сопряжено с рядом серьезных проблем (большое количество низкоположительных результатов). Новый метод иммуноблоттинга обладает более высокой чувствительностью при средних и высоких титрах АФА. Использование нового принципа определения АФА позволяет увеличить количество подтвержденного АФС.
