CC BY
42
Гематол. и трансфузиол., 2014, т. 59, № 1
Исследование влияния аспирина на параметры пространственного роста фибринового сгустка
в тесте тромбодинамики
Столяр М.А., Ольховский И.А.
Красноярский филиал ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России; ФГБУН Красноярский научный центр СО РАН,; Сибирский
федеральный университет, Красноярск
Введение. Дезагрегационное действие аспирина широко используют для профилактики тромбозов. Известно, что механизм его действия не исчерпывается ингибированием ци-клооксигеназы и препарат может парадоксально увеличивать скорость генерации тромбина.
Цель работы. Изучить влияние аспирина при инкубации с пробами цельной крови на параметры роста сгустка в высокочувствительном к гиперкоагуляционным сдвигам тесте тромбодинамики.
Материалы и методы. Рост фибринового сгустка оценивали с помощью "Регистратора Тромбодинамики-Т2" по сигналу светорассеяния в тонком неперемешиваемом слое рекальцифицированной, свободной от тромбоцитов плазме в
7 пробах крови после предварительной инкубации 15 мин с аспирином 0,1 мМ.
Результаты. Во всех исследованных образцах добавление аспирина приводило к однонаправленному увеличению в 1,2-1,7 раза начальной и стационарной скорости роста сгустка и его размеранезависимо от наличия заболевания.
Заключение. При использовании теста тромбодинамики обнаружено прокоагуляционное действие аспирина in vitro. Механизмы данного эффекта, вероятно, связаны с ацетили-рованием белков плазмы крови, регулирующих активность тромбина, и могут вносить вклад в развитие аспиринорези-стентности у отдельных пациентов. Выявленный феномен требует дальнейшего изучения.
Исследование влияния аспирина на агрегацию тромбоцитов у больных хроническими миелопролиферативными заболеваниями
Столяр М.А., Васильев Е.В., Москов В.И., Виноградова Е.Ю., Бахтина В.И., Ольховский И.А. Красноярский филиал ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России; КГБУЗ Краевая клиническая больница; ФГБУН Красноярский
научный центр СО РАН, Красноярск
Введение. Тромбозы и кровотечения часто сопровождают течение хронических миелопролиферативных заболеваний (ХМПЗ) и определяют актуальность персонифицированного учета функции тромбоцитов в процессе терапии дезагрегантами.
Цель работы. Изучение влияния аспирина на агрегаци-онную активность тромбоцитов у больных ХМПЗ в зависимости от пола и мутации JAK2.
Материалы и методы. Использовался метод импеданса в цельной крови при индукции 5 мкМ АДФ и тест инкубации пробы с 0,1 мМ аспирином на агрегометре "Хронолог-700".
Обследованы 68 здоровых добровольцев, 78 пациентов без мутации и 44 пациента с мутацией JAK2.
Результаты. У лиц с мутацией JAK2 прием низких доз аспирина не оказывал влияния на повышенную АДФ-агрегацию. У женщин параметры агрегации в 1,5-2 раза больше, чем у мужчин (p < 0,05). При этом у пациентов с мутацией аспирин в тесте in vitro нивелирует гендерные отличия.
Заключение. Мутация в гене JAK2 сопряжена с ЦОГ-1-неза-висимой активацией тромбоцитов и подавлением полового детерминизма функций тромбоцитов. Оценка агрегации тромбоцитов целесообразна при назначении дезагрегантов больных ХМПЗ.
Частота встречаемости ПНГ-клона у гематологических больных Иркутской области
Сускина М.А.1, Пронькина Н.В.2, Киселев И.В.1, Петрова Л.М.1, Ребриков А.Н.1, Романова Е.В.1, ЛужноваН.Н.1, Грекина М.И.1,
КапорскаяТ.С.1
'ГБУЗ Иркутская ордена "Знак Почета" областная клиническая больница, Иркутск; 2Клиника иммунопатологии ФГБУ НИИ СО РАМН, лаборатория
клинической иммунопатологии, Новосибирск
Введение. Пароксизмальная ночная гемоглобинурия (ПНГ) является результатом незлокачественной клональной экспансии одной или нескольких гематопоэтических клеток, несущих соматическую мутацию гена РЮ-А. У всех потомков этих клеток наблюдается дефицит гликозил фосфатидилинози-тол-сцепленных белков (GPI-APs). Дефицит GPI-сцепленных регуляторных белков CD55 и CD59 обусловливает внутрисо-судистый гемолиз, являющийся главным клиническим признаком заболевания. ПНГ часто сочетается с другими нарушениями функции костного мозга, чаще всего с апластической анемией (АА), миелодиспластическим синдромом (МДС) или другой миелопатией (например, с миелофиброзом). Различают 3 варианта ПНГ: 1) классический; 2) ПНГ в комбинации со специфическими заболеваниями костного мозга (например, ПНГ/апластическая анемия или ПНГ/ МДС-рефрактерная анемия - РА); 3) субклинический вариант ПНГ в комбинации со специфическими заболеваниями костного мозга (например, ПНГ/апластическая анемия). Выявление субклинического варианта ПНГ имеет большое клиническое значение, поскольку в последних исследованиях было показано, что у пациентов с малой популяцией ПНГ- клеток в комбинации с апластиче-ской анемией или МДС-рефрактерной анемией высока вероятность ответа на иммуносупрессивную терапию.
Цель работы. Оределение частоты встречаемости ПНГ-клона у больных с костномозговой недостаточностью.
Материалы и методы. Всего было обследовано 65 пациентов: 30 больных АА (16 мужчин и 14 женщин), в возрасте от 14 до 74 лет, медиана возраста 35,5 года, 12 больных МДС-РА (6 мужчин и 6 женщин) в возрасте от 53 до 70 лет, средний возраст 60,7 года, 23 больных с неясной этиологией цитопений, тромбозов (10 мужчин и 13 женщин) в возрасте от 22 до 73 лет, средний возраст 42,5 года, которые находились на обследовании и лечении в ГБУЗ ИОКБ (с марта 2012 г по ноябрь 2013 г).
Результаты. Исследовали периферическую кровь, взятую с антикоагулянтом К2-ЭДТА, на проточном ци-тофлюориметре FACS СаИЬиг с использованием антител CD45PerCP, CD24PE, CD15APC, CD14 РЕ, CD64APC, линейно специфичных CD235aFITC, GP/-связывающих антител FLAER А1еха^1иог488, CD59PE. Из общего числа обследованных у 3 больных выявлен классический вариант ПНГ, основным проявлением болезни у этих больных был внутрисосудистый гемолиз, тромбозов не было. Размер ПНГ-клона среди эритроцитов от 14,4 до 95,6%, гра-нулоцитов от 6,09 до 97,5%. ПНГ в комбинации со специфическими заболеваниями костного мозга - ПНГ/АА или ПНГ/МДС-РА выявлена у 23 больных, из них 17 больных
Приложение 1
АА (9 мужчин и 8 женщин), средний возраст 24,3 года, 6 больных МДС-РА (Змужчин и Зженщин), средний возраст 62 года. Величина клона у больных ПНГ/АА среди эритроцитов от 0,03 до 35,5%, гранулоцитов от 0,12 до 75,1%, у больных МДС-РА величина клона среди эритроцитов 13,1%, гранулоцитов 6,1%. Субклинический вариант ПНГ в комбинации со специфическими заболеваниями костного мозга (ПНГ/АА) был выявлен у 3 больных (2 мужчин и 1 женщины), средний возраст 44,6 года, величина клона среди эритроцитов от 0,01 до 0,29%, гранулоцитов от 0,15 до 0,59%; у 11 больных МДС-РА (6 мужчин и 6 женщин), средний возраст 44,6 года был выявлен минорный ПНГ-клон, среди эритроцитов от 0,01 до 0,05%, гранулоцитов от 0,01 до 0,41%.
Заключение. В соответствии с данными литературы выявлена высокая частота встречаемости ПНГ-клона у больных
с костно-мозговой недостаточностью (АА, МДС, ИМФ) - от 50 до 85%. У большинства больных наличие ПНГ-клона не ассоциировалось с признаками внутрисосудистого гемолиза (повышение ЛДГ, свободного билирубина). При динамическом исследовании уровня ПНГ-клона отмечен его рост у 8 больных АА, 1 больной МДС, обследованных на момент ремиссии без признаков клинически значимого ПНГ-синдрома. Из 15 обследованных больных с неясными цитопениями при дальнейшем обследовании у 8 выявлен МФ, а у 6 больных с неясными тромбозами в сочетании с анемией ПНГ-клон не выявлен ни у одного пациента. Полученные результаты подтверждают необходимость тестирования всех больных с костно-мозговой недостаточностью (АА, МДС, ИМФ) с целью определения значения этого показателя для оценки течения заболевания, ответа на терапию и ее коррекции при необходимости.
Анемия у пациентов с внепеченочной портальной гипертензией
Сысоева Е.П.1, Деженкова А.В.1, Егорова М.О.1, Киценко Е.А.2, Лукина Е.А.1 'ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России, Москва; 2ФГБУ Российский научный центр хирургии РАМН, Москва
Введение. Рецидивирующие кровотечения из варикоз-но-расширенных вен (ВРВ) пищевода и желудка являются частым осложнением портальной гипертензии, в том числе развившейся вследствие тромбозов в системе воротной вены (ВПГ). Анемия у этих больных расценивается как постгеморрагическая железодефицитная анемия (ЖДА) и служит основанием для лечения препаратами железа.
Цель работы. Изучение показателей обмена железа у больных ВПГ.
Материалы и методы. Обследованы 83 больных ВПГ с давностью тромбоза портальной системы не менее 12 мес (Ме 72 мес), 36 мужчин и 47 женщины, медиана возраста 42 года. Рецидивы кровотечений из ВРВ регистрировались у 61% больных. У 57% больных выявлена гипо- или нормох-ромная анемия (Ме НЬ 97 г/л). Исследовали сывороточные
показатели обмена железа: концентрацию ферритина, железа, трансферрина, концентрацию ОЖСС. У части больных исследовали экскрецию железа с мочой.
Результаты. Лабораторная картина ЖДА - снижение сывороточных показателей железа (Ме 7,8 мкмоль/л), феррити-на (Ме 31 мкг/л), НТЖ (Ме 11,8 мкмоль/л) - выявлена у 65% больных ВПГ с анемией. Однако проведение десфералового теста показало, что у 31% больных с анемией лабораторные признаки дефицита железа сочетались с повышенной экскрецией железа с мочой, что свидетельствует о повышении тканевых запасов железа и нехарактерно для истинной ЖДА.
Заключение. Истинная ЖДА выявлена только у 34% больных ВПГ. У остальных 66% анемия ассоциируется с повышением запасов железа, что характерно для анемии хронических заболеваний.
Мультиплексная ПЦР как новый метод определения генов устойчивости к карбапенемам
Тихомиров Д.С.1, Катрыш С.А.1, Савочкина Ю.А.2, Гаранжа Т.А.1, Туполева Т.А.1, Филатов Ф.П.1, Галстян Г.М.1 'ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России, Москва; 2ФБУН Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии
Роспотребнадзора, Москва
Введение. Одной из причин устойчивости микроорганизмов к антибиотическим препаратам является наличие ферментов, разрушающих карбапенемы. Гены, кодирующие эти ферменты, входят в состав мобильных генетических элементов патогенов, что способствует их быстрому распространению в госпитальной среде. Основным бактериологическим методом выявления устойчивости к карбапенемам является метод двойных дисков с ЭДТА. Его применение связано с большими временными и трудозатратами. Альтернативным методом для определения устойчивости является мультиплексная ПЦР.
Цель работы. Определить наличие генов устойчивости к карбапенемам у микроорганизмов, выявленных у больных отделения реанимации и интенсивной терапии.
Материалы и методы. Исследованы образцы клинического материала от 41 больного отделения реанимации. Кровь, мазки из зева и ануса, смывы из дыхательного тракта пациентов отправляли на бактериологическое исследование. При наличии роста патогенов получали культуру, которую в последующем исследовали на наличие генов приобретенных карбапенемаз методом ПЦР.
Результаты. Исследовано 52 образца культур Acinetobacter b. от 18 больных, 69 образцов культур Pseudomonas a. от 23 больных. Методом ПЦР определяли гены карбапенемаз - VM, TMP, NDM, OXA-23, OXA-48, OXA-51 и KPC с помощью тест-систем, разработанных в ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора. Ни в одном образце не выявлены гены IMP, NDM, OXA-48 и KPC. Во всех культурах Acinetobacter b. были обнаружены гены OXA-40 и ОХА-51. В двух образцах культур, полученных из зева, был обнаружен ген резистентности ОХА-23. У 1 больного был выявлен ген устойчивости к имипенему VIM. У 14 из 23 пациентов (половины) в образцах культур Pseudomonas a. был обнаружен ген VIM. В подавляющем большинстве случаев выявление генов резистентности методом ПЦР в культурах коррелировало с низкой эффективностью проводимой антибиотической терапии. Полученные данные указывают на возможность применения метода ПЦР для выявления первичной резистентности микроорганизмов к карбапенемам.
Заключение. Предложенный амплификационный метод определения генов устойчивости требует меньше трудозатрат и времени, что предпочтительно в условиях необходимости быстрого принятия решения о коррекции терапии.
