CC BY
9
«(ИНФЕКЦИИ И ИНФЕКЦИОННАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ В ГЕМАТОЛОГИИ И СЛУЖБЕ КРОВИ»
Санкт-Петербург 13-14 ноября 2014 г.
Васнева Ж. П.
ОАО «Самарский диагностический центр», г. Самара
СБ45-ТЕСТ И ПРОДУКЦИЯ гамма-ИНТЕРФЕРОНА (у-ИФН) У ДЕТЕЙ С ПОВЫШЕННОЙ РЕАКЦИЕЙ МАНТУ
Введение. В условиях роста заболеваемости туберкулезом, как среди взрослого, так и детского населения России все более актуальной становится проблема своевременного выявления лиц, инфицированных Mycobacterium tuberculosis. Кожные туберкулиновые пробы для детей на данный момент являются официально утвержденным диагностическим методом, однако, интерпретация результатов, полученных с их помощью, становится все более проблематичной. С одной стороны, устойчиво нарастает частота встречаемости детей с положительными результатами Манту, с другой — количество иммунокомпроментированных детей и детей с аллергической непереносимостью, в частности и компонентов препарата туберкулина 2ТЕ. Появление нового кожного метода с использованием рекомбинантного туберкулезного аллергена Диаскинтест, представляющего собой коктейль белков, продуцируемых генетически модифицированной Escherichia coli, скорее поставило новые вопросы, чем решило проблему эффективной диагностики тубинфицированности. Основной причиной данных проблем автору видится в не идентичности антигенного состава природной Mycobacterium tuberculosis и препаратов, используемых для вакцинации и последующей диагностики in vivo.
Цель. Исследование особенностей специфического иммунного ответа БЦЖ- вакцинированных детей с положительными Манту на БЦЖ-вакцину, туберкулин 2ТЕ и Диаскинтест.
Материалы и методы. Обследовали 155 детей (2-13 лет, средний возраст 6 лет, 50,0% мальчиков) БЦЖ-вакцинированных с положительной реакцией Манту 2ТЕ. В периферической крови (ПК) в качестве показателя аллергической реактивности на исследуемый препарат определяли коэффициент сенсибилизации (КС) к туберкулину 2ТЕ (НИИ вакцин и сывороток, Санкт-Петербург), БЦЖ-вакцине (ФГУП «НПО «Микроген», Москва) и Диаскинтесту (ЗАО «ЛЕККО», Россия) по динамике экспрессии общелейкоцитарного антигена CD45 (С045-тест) с использованием меченых ФИТЦ моноклональ-ных антител серии LT («Сорбент», Москва) и лазерного проточного цитофлюориметра Calibur
(«ВО», США). Продукцию у-ИФН спонтанную (в качестве показателя общей функциональной активности) и стимулированную (в качестве показателя специфической функциональной активности) клетками ПК определяли после 24-часовой инкубации ПК с питательной средой и стимулирующими агентами (туберкулин 2ТЕ, БЦЖ-вакцина, Диаскинтест) при 37 °С с использованием ИФТС («Вектор-Бест», Новосибирск). Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы 81айзйса 5.5.
Результаты. Было получено, что повышенные (> 0,2) КС к туберкулину регистрировались в 64,1 % случаев, к БЦЖ-вакцине — 62,2 %, Диаскинтесту — 44,4% случаев. Повышенные КС к туберкулину и БЦЖ-вакцине одновременно отмечались в 45,7% случаев, только к туберкулину — в 17,1 %, только к БЦЖ — в 11,4 % случаев. Совпадение по результатам отмечалось в 48,6% случаев, среди которых большинство (70,6 %) — по повышенным КС. Повышенные КС к туберкулину и Диаскинтесту отмечались одновременно в 44,4 % случаев. Совпадение результатов отмечалось в 100,0% случаев, среди которых в 44,4% — совпадение по повышенным КС. Уровень спонтанной продукции у-ИФН у 90,0 % обследованных детей не превышал 87,5 пг/мл и в среднем составил 24,0 ±6,3 пг/мл. В 10,0% случаев таковой колебался в пределах 105,6298,0 пг/мл, в среднем составил 192,0±25,3 пг/мл. Уровень стимулированной продукции у-ИФН в тест-системе с туберкулином 2ТЕ у обследованных детей колебался в пределах 2,086,0 пг/мл, что в среднем составило 28,5 ±6,7 пг/мл. В 36,0% случаев детей отмечался повышенный (относительно спонтанного более, чем в 2 раза) выброс у-ИФН, среди которых таковой в 85,7% случаев сопровождался повышенной продукцией стимулированного у-ИФН и в тест-системе с БЦЖ-вакциной и повышенными КС к туберкулину. Уровень стимулированной продукции у-ИФН в тест-системе с Диаскинтестом во всех случаях не превышал спонтанного равного 2,0 пг/мл и совпадал с таковым в тест-системе с туберкулином. Уровень стимулированной продукции у-ИФН в тест-системе с БЦЖ-вакциной колебался в пределах 2,0-2000,0 пг/мл, что
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИтом X, № 4, 2014
в среднем составило 214,0±20,0 пг/мл. В 55,0% случаев детей отмечался повышенный выброс у-ИФН в тест-системе с БЦЖ-вакциной на фоне отсутствия такового в тест-системе с туберкулином.
Выводы. Можно резюмировать, что при использовании в тест-системе in vitro препарата
Диаскинтест у БЦЖ-вакцинированных детей с повышенными Манту функциональная активность клеток иммунной системы не повышается. Тогда как при использовании в тест-системе туберкулина 2 ТЕ таковая повышается в 36,0%, БЦЖ-вакцины — в 55,0% случаев.
Ващенко В. И., Бельгесов Н.В., Романенко С. М., Тихменева И. Б., Ващенко Т. Н., Попова H.H.
ФГБВОУВПО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова»МО РФ, Санкт-Петербург
ПОВЫШЕНИЕ ИНФЕКЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ ИНДИКАЦИИ АЛТ У ПЕРВИЧНЫХ ДОНОРОВ В ПОДРАЗДЕЛЕНИИ СЛУЖБЫ КРОВИ ВОЕННО-МЕДИЦИНСКОЙ АКАДЕМИИ
Введение. Одним из самых актуальных вопросов трансфузионной медицины остается обеспечение инфекционной безопасности ге-мотрансфузий. В подавляющем большинстве стран сложилась определенная практика, направленная на достижение этой цели и включающая в себя ряд строго регламентированных последовательных действий — от опроса потенциального донора крови до лабораторного тестирования крови на декретированные маркеры гемотрансмиссивных инфекций. На сегодняшний день известно два внедренных в практику метода оценки функционального состояния донора или отдельных его органов — метод определения неоптерина (ДашковаН.Г. и соавт., 2006) и определение аланинаминотрансферазы (АЛТ) (ЖибуртЕ. Б. и соавт., 1995). Соглашаясь с мнением о существовании «методических проблем в службе крови России» (Жибурт Е. Б. и соавт., 2013), все же вызывает сомнение постулат об экономической нецелесообразности исследования крови доноров на АЛТ.
Цель работы. Проведение сравнительного исследования динамики изменений носитель-ства тестируемых инфекций и активности АЛТ при обследовании первичных доноров в подразделении службы крови Военно-медицинской академии имени С. М. Кирова (ВМедА).
Материалы и методы. Материалом для исследований являлись образцы донорской крови первичных доноров военнослужащих постоянного состава, курсантов и слушателей ВМедА, ВВУЗов СПб., а также воинских частей Ленинградской области. Донорами были также родственники и друзья пациентов клиник ВМедА, студенты и жители Санкт-Петербурга. Для те-
стирования носительства ВИЧ-1 и ВИЧ-2, гепатитов В и С использовали тест-системы разных производителей (ООО МЦ «Авиценна», ЗАО «Биоград», ЗАО «Вектор-Бест»).
Результаты. При сравнительном исследовании 210 образцов донорской крови с повышенным содержанием АЛТ (в 1,5 раза и более выше нормы) на антитела и антиген гепатита С мы получили следующие результаты: при использовании тест-системы «Авиценна» гепатит С определялся в 20,5% случаев, тест-системы «Биоград» — в 26,7% случаев, тест-системы «Вектор-Бест» — в 24,3% случаев. Известно, что повышение уровня АЛТ на ранних стадиях при вирусных поражениях печени, в первую очередь, рассматривается как индикатор этих инфекций. Необходимо подчеркнуть, что приведение в соответствие отечественной службы крови к требованиям европейских и американских стандартов, не должно нарушать ФЗ РФ «О донорстве крови и ее компонентов», который не требуют отказа от тестирования донорской крови на АЛТ.
Выводы. 1) Вопрос о маркере АЛТ, позволяющем дать дополнительную оценку здоровья первичного донора (в конечном счете повысить гарантию безопасности гемотрансфузий) необходимо решить в пользу обязательных методов тестирования на инфекционную безопасность.
2) Применение в лабораторной практике обследования первичных доноров простого и недорого теста АЛТ, выполняемого всеми лабораториями службы крови, безусловно поддерживает основополагающий медицинский принцип — не навреди.
