УДК 636.32/38:591.16.612.063
Шаран М. М., д.с.-г.н. ([email protected]) Андрушко О. Б., к.б.н., Яремчук I. М., к.с.-г.н, Корнят С. Б., к.с.-г.н, Чокан Т. В., к.с.-г.н.
Гримак X. М., астрантка © 1нститут бюлогптваринНААН Украшы, м. Лъвгв
БЮТЕХНОЛОГ1ЧНИЙ МЕТОД СТИМУЛЯЦ11 СТАТЕВ01 ОХОТИ В ОВЕЦЬ Р13НИХ ГЕНОТИП1В
У статт1 наведено результаты дослгдженъ застосування окремих метод1в стымуляцп статевог охоты та схем введения комплексу бюлог1чно активных речовин (БАР) у в1вцематок ргзных генотитв. Використання удосконаленог схемы стымуляцп охоты в овецъ дае позытывш результаты в уых дослгджуваных генотытв тварын, забезпечуе высокыы р1венъ запл1днення, що тдтверджуетъся концентращею стерогдных гормошв у кровг. Застосування комплексу БАР та аналога Гн-РГ пры зменшеты на 30 % дозы ГСЖК у складг стымулюючого препарату тдвыщуезапл1днешстъ в1вцематок.
Ключов1 слова: вгвщ, укратсъка г/рсъкокарпатсъка порода, саффолк, гонадотротны, стерогдт гормоны, статева охота, яечнык, запл1днення.
Застосування селекцшних програм схрещування I пбридизаци з використанням сучасних бютехнолопчних метод1в вщтворення дае можливють глибше розкрити генетичний потенщал продуктивное^ тварин. Значна увага при цьому придшяеться отриманню пом1сей з бажаними ознаками, оскшьки вони, в переважнш бшьшосп, за комерцшними показниками переважають чистопородних тварин. Основним напрямком пщвищення ефективност1 в1вчарсько! галуз1 е збшьшення виробництва та якост1 продукци в1вчарства, насамперед баранини та ягнятини, яка становить 50-80% в структур! прибутку [1, 2].
Специфжа ведения галуз1 в1вчарства у прських районах Карпат полягае у тому, що на данш територп е можливкть розведення практично лише прських порщ овець, зокрема украшсько! прськокарпатсько! (УГК). Беручи до уваги той факт, що щ тварини середньо! величини, яким притаманна невисока м'ясна продуктившсть, у процеЫ дослщжень нами було проведено штучне оаменшня УГК в1вцематок спермою барашв м'ясно! породи саффолк. Дана порода овець характеризуемся скороспшстю ягнят з високою м'ясною продуктивною, дае добр1 результати при використанш барашв для комерцшних схрещувань, а помюш нащадки поеднують м'ясш якост1 ¿з пристосовашстю до природних умов [3].
Для шдукцп множинно! овуляцп переважно використовують гонадотротн сироватки жеребних кобил (ГСЖК) [4, 5], фол1кулостимулюючий
© Шаран М. М., Андрушко О. Б., Яремчук I. М., Корнят С. Б., Чокан Т. В., Гримак X. М., 2012
366
гормон (ФСГ) [6], а також !х поеднання ¿з гонадотротн рел1зшг-гормоном (Гн-РГ) [7, 8], що дозволяе отримувати 5 ембрюшв на донора. Однак, гормональне викликання множинно! овуляцп е не досить ефективним у зв'язку ¿з смертшстю ягнят при народженш тршнят { бшьшо! !х кшькост1, тому доцшьним вважаеться застосування у юнцевш фаз1 статево! охоти аналопв (Гн-РГ) [9].
Враховуючи вищесказане, дослщження були скероваш на удосконалення способу пщвищення вщтворно! функцп в1вцематок украшсько! прськокарпатсько! породи та 1х пом1сей з баранами породи саффолк (1/2УГК + 1/2 саффолк) при застосуванш гормонально! стимуляци статево! охоти в овець.
Матер1ал 1 методи. Досл1дження проводили на ярках та в1вцематках в анестральний пер1од (кв1тень-травень) у фермерському господарств1 «Закарпатське руно» Воловецького району. Загальна схема викликання статево! охоти була аналог1чною для ус1х тддослщних тварин у поеднанн1 з проведениям в!тамш!заци та введениям ваг1нальних губок з прогестероном на 14 д1б. П1сля виймання губок було сформовано три групи тварин: (контрольну, п=38) I дв1 досл1дн1: перша та друга по 40 гол1в у кожнш.
Таблиця 1
Схема стимуляцн статевоУ охоти 1 багатопл1дност1 в овець в анестральний
першд
Назва заходу Термш проведения Групп тварин
контрольна 1 дослщна 2 дослщна
Дегельмштизащя 1-й день Альбендазол - 3 г
В1там1н1зац1я 1-й день 1нтров1т - 3 мл
Вкладання ваг1нальних губок + виамшзащя 7-й день 1нтровгг - 3 мл
Виймання ваг1нальних губок + внутршньом'язове введения ГСЖК 20-й день ГСЖК -500 10 ГСЖК -350 10 шозин -250мг, унтол - 20 мкг, шеолвгг -3 мл, ДМСО - 2мл ГСЖК - 350 10 шозин - 250 мг, унтол - 20 мкг, шеолвгг - 3 мл, ДМСО - 2 мл сурфагон - 10 мкг,
Початок статево! охоти 21-й день
Лапароскотчне оаменшня 21-й день 12-18 год в1д введения ГСЖК
Тваринам контрольно! групи внутр1шньм'язево вводили 500 10 ГСЖК (препарат Сергон), дослщним групам ¿н'ектували 350 10 Сергону ¿з комплексом БАР (¿нозин - 250 мг, ун1т1ол - 10 мкг, ¿нсолв!т - 3 мл, диметилсульфоксид у 10 % концентрацп - 2 мл). Тваринам друго! досл1дно! групи при ос1мен1нн! внутршньомязево вводили аналог Гн-РГ (Сурфагон - 10 мкг).
Через 12-18 годин теля введения ГСЖК (початок охоти) проводили лапароскотчне оаменшня в1вцематок. Перед проведениям лапароскопи тварин витримували на голоднш д1ет1 впродовж 24 годин. Безпосередньо перед
367
маншулящями ïm внутршньомязово вводили 0,4 мл седазину для релаксаци, теля чого в1вцематок розмщували головою донизу на специальному столику з нахилом пщ кутом 40°. Пщ мкцевою анестез1ею стшок черевно! порожнини теля введения 2 %-го розчину новока!ну проводили лапароскопш за допомогою лапароскопа ф1рми Wolf для визначення функцюнальнального стану яечниюв i матки i3 подальшим введениям деконсервовано! сперми барашв спещал!зовано! м'ясно! породи саффолк.
На 5-й день теля лапароскотчного оаметння у тварин Bcix груп були вдабрат проби кров! для визначення концентрацп стерощних гормотв: прогестерону (нг/мл) i естрадюлу 17Р (пг/мл) радю!мунолопчним методом.
Отримаш цифров! дат опрацьовували статистично за допомогою програми Microsoft Office Excel.
Результати дослщження. У результат! проведених дослщжень встановлено, що ¿ндукщя статево! охоти в анестральний перюд викликала еструс у Bcix пщдослщних тварин. Лапароскотчною оцшкою морфо-функцюнального стану яечниюв встановлено, що кшькють передовуляторних фол1кул1в у в1вцематок УГК породи та помюних ярок в контрольних групах була фактично однаковою i коливалася в межах 3,52-3,60 (табл. 2). В яечниках в1вцематок УГК породи 1 дослщно! групи кшьккть фол1кул1в була на 13,1 % бшьша, шж у контрольних тварин, у пом1сних ярок (1/2 саффолка) — на 20,6 % (р<0,05).
Таблиця 2
Лапароскошчна ощнка функщонального стану ясчник1в ярок та
в1вцематок, M±m
Показ ники Порода i Групи тварин
породшсть контрольна 1 дослшиа 2 дослшиа
Кшьшсть тварин, гол УГК 1/2 саффолка 20 18 20 20 20 20
Кшьшсть фол1кул1в УГК 3,52±0,27 3,98±0,22 4,22±0,21
на голову 1/2 саффолка 3,60±0,23 4,34±0,32* 4,56±0,35*
КШЬШСТЬ жовтих УГК 0,52±0,06 0,38±0,04** 0,33±0,03**
тш на голову 1/2 саффолка 0,48±0,05 0,36±0,02** 0,26±0,02***
Примака: у цш i наступних таблицях * - p<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001 —
в1ропдш р1знищ м1ждосл1дними I контрольною групами.
Под!бт результати було одержано у в1вцематок { ярок 2 дослщно! групи, кшьюсть передовуляторних фол1кул1в у яких за генотипами була бшьшою, тж у контрольних овець, вщповщно, у породи УГК - на 19,9 %, 1/2 саффолка — на 26,7 % (р<0.05). Зростання кшькост! передовуляторних фол1кул1в у яечниках овець дослщних груп свщчить про посилення фолшулогенезу пщ впливом комплексно! д!! ГСЖК ! БАР.
Протилежна картина спостер!галася за кшькктю жовтих т!л в яечниках пщдослщних тварин. Так, якщо в контрольних овець дослщжуваних генотип!в сформувалась майже однакова к!льк!сть жовтих т!л (0,52±0,06; 0,48±0,05), то у в!вцематок породи УГК ! пом!сних ярок (1/2 саффолка) обох досл!дних груп
368
число жовтих тш було значно меншим \ р1зниця була статистично в1рогщною (р<0,01-0,001), ¿з бшьш вираженою законом1ршстю у тварин 2 дослщно! групи.
Зменшення кшькост1 жовтих тш у яечииках дослщних тварин свщчить про точшшу синхроншсть овуляцш за ди БАР, а в овець друго! дослщно! групи аналог Гн-РГ скорочуе овуляцшний перюд.
Результата дослщжень концентраци стерощних гормошв у кров1 в1вцематок та ярок на 5-й день теля лапароскотчного оаменшня пщтверджують функщональний стан яечниюв. Концентрация прогестерону в овець дослщжуваних генотишв в обох дослщних групах була вищою пор1вняно з контрольною I мала максимальне значения для цього перюду статевого циклу (табл. 3).
Таблиця 3
Концентращя прогестерону 1 естрадшлу-17р в кров1 в1вцематок 1 ярок шд
впливом БАР, М±т
Показники Порода 1 породшеть Групи тварин
контрольна 1 дослщна 2 дослщна
Прогестерон, нг/мл УГК 1/2 саффолка 1,5±0,19 1,7±0,20 1,8±0,24 2,3±0,21* 2,5±0,22* 2,6±0,24*
Естрадюл-17р, пг/мл УГК 1/2 саффолка 12,3±1,17 12,5±0,98 9,6±0,92 8,4±0,64* 8,6±0,88* 8,0±0,76*
Концентращя прогестерону у кров1 в1вцематок УГК породи 1 дослщно! групи була на 20,0 % вищою, а у помкних ярок — на 35,3 % бшьшою (р<0,05), шж у тварин контрольно! групи. Найвищ1 показники концентраци прогестерону були одержан! у кров1 овець 2 дослщно! групи. Так, концентращя прогестерону була вищою кров1 в1вцематок УГК породи на 66,7 % (р<0,05), помкних ярок (1/2 саффолка) — на 52,9 % (р<0,05).
Значне зростання концентраци прогестерону у кров1 дослщних овець пов'язано з тим, що у них було бшьше передовуляцшних фол1кул1в, яю шд впливом окремих БАР та аналога Гн-РГ синхронно овулювали I стимулювали рют функщональних жовтих тш до п'ятого дня статевого циклу.
Протилежш даш отримаш при визначенш концентраци естрадюлу 17Р у пщдослщних овець. При майже однаковому р1вш гормону в кров1 контрольних тварин дослщжуваних генотишв (12,3±1,17; 12,5±0,98) суттев1 розб1жност1 спостеркалися у дослщних групах. У в1вцематок УГК породи 1 дослщно! групи концентращя даного гормону була на 22,0 % меншою, а у помюних ярок (1/2 саффолка) в1рогщно нижчою (р<0,05) пор1вняно з контролем. Под1бш результати встановлеш у тварин 2 дослщно! групи, де концентращя естрадюлу-17Р в овець дослщжуваних генотишв в1рогщно (р<0,05) нижча, вщповщно, на 30,1 та 36,0 %, шж в контрольних тварин.
При анал1з1 заплщнюваност1 за генотипами та трупами тварин вщм1чено, що у в1вцематок УГК породи 1 дослщно! групи р1вень заплщнення був аналопчним до показника контрольних тварин I становив 70 %, а 2 дослщно! групи — на 10,0 % вищим (табл.4). Значно вищий р1вень заплщнення спостеркався у помкних овець шд впливом БАР. Так, у ярок 1 I 2 дослщних
369
груп заплщнюватсть становила 80 i 90 %, що вище на 7,8 та 17 %, шж у контрольних тварин.
Таблиця 4
Показники Порода i Групи тварин
породшсть контрольна 1 дослщна 2 дослщна
Ос1м1нено тварин, УГК 20 20 20
гол1в 1/2 саффолка 18 20 20
К1тних овець, УГК 14-70,0 14-70,0 16-80,0
n-% 1/2 саффолка 13-72,2 16-80,0 18-90,0
Таким чином, застосування комплексу БАР i аналога Гн-РГ при зменшенш на 30 % дози ГСЖК пщвищуе заплщнюватсть у в1вцематок i ярок дослщжуваних генотитв.
Висновки.
1. Застосування удосконалено! схеми стимуляцп статево! охоти у в!вцематок i ярок забезпечуе високий р!вень заплщнення тварин, що п!дтверджуеться в!дпов!дною концентращею стеро!дних гормон!в у кров!.
2. Лапароскотчною оцшкою морфо-функц!онального стану яечниюв встановлено збшьшення к!лькост! передовуляц!йних фолшул!в в овець досл!дних груп, що свщчить про посилення фол!кулогенезу пщ впливом комплексно! д!! ГСЖК i БАР.
Л1тература
1. 1овенко В. М. В!вчарство Укра!ни / В. М. Йовенко, О. Г. Польська та ¿н. За редак. В. П. Бурката. // — К.: Аграрна наука, — 2006. — С. 19-23.
2. Чокан Т. В. Стан i перспективи розвитку г!рськокарпатського в!вчарства /Т. В. Чокан, П. В. Стапай, В. В. Гавриляк // НТБ 1БТ та ДНДК1 вет. препарат!в та кормових добавок. — 2009. — В. 10, № 1-2. — С. 437-444.
3. Пименов В. С. Научное и практическое обоснование создания мясо-шерстного овцеводства в условиях Забайкалья : диссертация ... доктора сельскохозяйственных наук : 06.02.04 / Краснояр. гос. аграр. ун-т. — Чита, — 2006. — 273 с.
4. Moore R.M., Osborn J.C., Crosby I.M. Gonadotrophin induced abnormalities in sheep oocytes after superovulation// J.Reprod.Fert. — 1985. — №74 — P.167.
5. Ryan J.P., Hunton J.R., Maxwell M.C. Increased productionof sheep embryos following superovulation of Merino ewes with a combination of pregnant mare serum gonadotropin and follicle stimulating hormone // Reprod.Fert.Develop. — 1991. — №3 — P.551-571.
6. Driancourt M.A., Fry R.C. Effect of superovulation with pFSH or PMSG on growth and maturation of the ovulatory follicles in sheep// Anim.Reprod.Sci. — 1992. — №27. — P.279-292.
370
7. Walker S.K., Smith D.H., Frensham A., Ashman R.J., Seamark R.F. The use of synthetic gonadotropin releasing hormone treatment in the collection of sheep embryos // Theriogenology. — 1989. — 31. — P.741-752.
8. Murray J.D., Boland M.P., Moran C. Frequency of chromosomal abnormalities in embryos from superovulated Merino ewes // J.Reprod.Fert. — 1986.
— №78. — P.433-437.
9. Bielanski A., Tischner M. Biotechnologia rozrodu zwierzat gospodarskich.
- Krakow, «Universitas», 1993. — 455 p.
Summary
Sharan M., Andrushko O., Yaremchuk I., Kornyat S., Chokan T., Grymak K., SHEEP OF DIFFERENT GENOTYPES HAVE BIOTECHNOLOGICAL METHOD OF STIMULATION OF OESTRUS.
In the article is showed results of researches of application of separate methods of stimulation of estrus and methods of introduction of complex biologically active compounds for ewes of different genotypes. The use of the improved methods of stimulation of estrus for ewes gives positive results in all probed genotypes of animals, provides the high level of impregnation which is confirmed the results of researches of concentration of steroid hormones in blood and increase of the functional state of ovaries after a laparoscopic insemination. Application of complex biologically active compounds and analogue of GN-RG is at diminishing on a 30% dose, PMSG in composition stimulant preparation promotes impregnated for ewes of experimental groups by comparison to control.
Рецензент - д.вет.н., професор Стефаник В.Ю.
371