CC BY
425
к
. гик"
Ь&ст
ілі.ї
НІ
лл. с. гай
Лїілі
і І..Н. і.Л ■.,■
І -;ґіт
>ур)"л
:
ГІТ(і;:
іілії^
;п.-, V: і к'їЛм
її ІІ.11. !і :г :.\і
лі.'І
ЇІСПІ-П
Н.їцГ
■ ІП
ІІПТІЛ 'і'Л І ■
■: 1 '\г
іппііх
і Ґ'|Ч‘Ч_ '■! Л-
;!П-рСіІ-.-
■"їлЬ.!
66.098:663.81.002.237
' БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ В ПРОИЗВОДСТВЕ ПЛОДООВОЩНЫХ СОКОВ И НЕКТАРОВ
М.А. КОЖУХОВА, А.Н. ТЕРКУН, С.Е. РОЖКОВ
Кубанский государственный технологический универсишегй
Биотехнология, объявленная ООН технологией XXI века, позволяет решить многие стоящие перед обществом проблемы: обеспечить растущее население продовольствием, способствовать увеличению продолжительности жизни, снижению загрязнения окружающей среды и др.
Значение биотехнологии возрастает и в развитии производственной сферы: традиционные методы получения различных продуктов заменяются биотехнологическими. При переработке плодов и овощей эти методы связаны прежде всего с применением ферментов. Наибольший технологический эффект от использования биологических агентов и процессов получен в соковом производстве [1-3].
Применение ферментных препаратов (ФП) в технологии соков из овощей и фруктов позволяет существенно углубить степень промышленной переработки сельскохозяйственного сырья, увеличить производство и расширить ассортимент пищевых продуктов, а также повысить их качество, биологическую ценность и вкусовые достоинства [1, 4-8].
В соответствии с назначением препараты, применяемые в технологии соков, можно разделить на четыре основные гру ппы:
А - предназначены для обработки мезги перед прессованием, увеличивают выход сока и повышают его экстрактивность;
В - способствуют увеличению выхода сока и обеспечивают беспрессовый способ его получения;
С - предназначены для получения осветленных (прозрачных) соков;
Б - мацерируют плодовую ткань, повышают выход и гомогенность пюре и соков с мякотью (нектаров).
Схема, иллюстрирующая назначение ФП, приведена на рис. 1.
При получении соков наиболее широко используют препараты карбогидраз, которые вносят в мезгу для ускорения и улучшения прессования, применяют для предварительной обработки сока перед осветлением, добавляют к мезге с целью разрушения межклеточных связывающих веществ и растворения клеточной стенки, чтобы исключить механическое прессование [9].
Особое внимание уделяется применению пектоли-тических ферментов, так как основной фактор, препят-
ствующий отделению сока из плодов и ягод и ооуслов-ливающий его мутность, - наличие пектиновых соединений [2, 6]. : •
Пектиновые вещества характеризуются довольно сложным составом и структурой. Они имеют линейные и разветвленные участки, содержат кислые и нейтральные сахариды. В процессе ферментативного гидролиза пектиновых веществ участвуют пектин-эстера-за, эндополигалактуроназа, экзополигалактуроназа. Негидролитическое расщепление пектина катализируют ферменты из класса лиаз - пектинтрансэлиминазы. Схема действия ферментов на пектиновую молекулу показана на рис. 2 (а - арабиноза; аг - ацетильная группа; га - галактоза; гк - остаток О-галактуроновой кислоты; м - остаток метилового спирт; Ра - рамноза; к -ксилоза) [10, 11].
| Фрук
ты и овощи
Ичыельчяше
I—;—
ф
ф
Процеживание или
цен гр нф угир ова ние
Прессование------
А__________
Неосввт ленный
сок
Ф Очжткл ОТ ВЗВК ей 1 '"Г Пр пцеасива нне или цен тр и фу гнр ОБП ние *
ЇЇЮ ПІ- Осветленный Н«*в*т-*енный
СОК с мякаїью ЕМ сек
и ■ ■ Рис. 1
Под действием отдельных пектолитических ферментов можно осуществить определенный тіш расщепления пектиновых веществ и достигнуть требуемой глубины их гидролиза. Однако на практике чаще всего применяют препараты с определенным набором и соотношением ферментов, которые устанавливают в зависимости от технологических требований и химического состава сырья.
Успехи, достигнутые в изучении структурных полисахаридов растительной клетки, способствовали созданию препаратов нового поколения с оптимальным сочетанием ферментов направленного действия. Это позволило не только значительно увеличивать выход сока, но и улучшить показатели его ценности, сократить время ферментативной обработки. Например, при производстве яблочного сока обработка мезги пре-
паратом Pectinex Ultra в течение 60 мин увеличивает выход сока на 12-15%, а добавление ФП Ciarex, как сообщают авторы работы, позволяет повысить выход сока на 25-30%. Обработка ферментами спелой мякоти слив увеличивает выход сока с 45,5 до 90% [2, 6, 12-14].
Возрастающий интерес потребителей к «полезным» сокам и напиткам обязывает производителей увеличить выпуск конкурентоспособной продукции, обладающей высокими качественными показателями. Поэтому фирма «Erbsloeh Geisenheim Getraenketeclmologie» (Германия) предлагает ФП серии Fmctozym, предназначенные специально для различных групп сырья: семечковых, косточковых плодов, темноокрашенных ягод, овощных культур [10].
Включение в состав препаратов, помимо пектоли-тических ферментов, гемицеллюлаз (арабаназы, ксила-назы и т. д.) и целлюлаз, позволило не только увеличить выход сока и экстрактивность, но и радикально усовершенствовать технологию, т. е. получать сок не прессованием, а путем разделения жидкой и твердой фракции продуктов ферментации на центрифугах [6].
Рис. 2
Ферментные препараты нашли широкое применение в производстве фруктовых и ягодных соков, но в гораздо меньшей степени при производстве соков овощных. Однако имеются данные, что хорошие результаты в этом отношении дает обработка пектолити-ческими ферментами таких овощей, как свекла, морковь, красный перец, редис и репчатый лук.
Применение пектолитических ферментов в производстве овощных соков увеличивает выход продукта и способствует более высокому содержанию в нем питательных, вкусовых и других веществ. Так, в морковном соке, по сравнению с традиционно полученным, возрастает содержание каротина, в соке из столовой свеклы достигается максимальный выход красящих веществ [6].
Под действием эндополигалактуроназы разжижается пульпа плодов и овощей, которую затем смешивают в разных вариантах: свекла-красный перец-хрен, яблоки-морковь-абрикосы-сельдерей-хрен и т. п., получая новые продукты - овощные коктейли. Эти коктейли низкокалорийны, имеют хорошие вкусовые
свойства, сохраняют почти все витамины и ценные пищевые компоненты свежего сырья [6].
Важным технологическим процессом производства соков является осветление. Существует много различных способов осветления, однако для получения качественного продукта при любом из них первым и обязательным условием является ферментативное расщепление пектина и других коллоидов. Рекомендуется применение пектолитических ферментов совместно с амилазами, протеазами, гемицеллюлазами [6, 15, 16].
Особую актуальность осветление с применением ферментов приобрело в связи с расширением производства концентратов. В данной отрасли исследования направлены на подбор мультиэнзимных композиций, наиболее полно разрушающих коллоидную систему соков и обеспечивающих получение стабильного к помутнению продукта [2].
Ферментативное расщепление биополимеров не только сокращает количество отходов, но и обогащает сок продуктами гидролиза, ускоряет фильтрацию, повышает эффективность работы мембранной техники [17].
Новые возможности открывает иммобилизация ферментов на мембранах, применяемых для микро- и ультрафильтрации [2,18]. Иммобилизованные ФП обладают рядом существенных преимуществ при использовании в биотехнологических процессах: их можно применять многократно, легко отделять от продукта, вместе с тем, иммобилизация позволяет совмещать процессы биотрансформации с массообменными разделительными процессами [19].
Многие направления соковой индустрии используют сегодня именно осветленные соки и концентраты. Кроме того, и большинство потребителей предпочитает кристально прозрачные соки определенного ассортимента. Однако наметившиеся тенденции к потреблению не только вкусной, но и полезной пищи делают производство неосветленных соков и соков с мякотью развивающимся и перспективным. Такие соки имеют повышенную пищевую и физиологическую ценность за счет лучшего сохранения витаминов, минеральных, пектиновых и дубильных веществ, целлюлозы, а также красящих и ароматических веществ сырья [10, 20].
За рубежом в технологии соков с мякотью применяют мацерирующие ФП Ресйпех БР-г (Дания), Ресйпо1 МА, НойатеШ РС (Германия), 1г§агут М-10 (Швейцария), Масегагут (Дания), Масегага М4Б (Япония) и др. [2, 6].
Получение соков с мякотью с применением таких препаратов отличается от традиционной технологии тем, что позволяет в максимальной степени сохранить нативные вещества сырья, а в раде случаев - меньшей энергоемкостью. Действуя в «мягких» условиях, маце-рирующис ферменты гидролизуют полисахариды клеточных стенок и межклеточных образований ткани сырья, за счет чего достигается ее тонкое измельчение. При обработке овощной мезги мацерирующими ФП
ые ПИ-
водст--ораз-чения вьш и >е раскуется стно с 16]. ением троиз-шания
ЇИЦИЙ,
[СТЄМУ
экпо-
ОВ НС
■ащает ю, по-гехни-
*зация кро- и >Поб-)и ис-lx: их ітпро-;овме-шыми
ОЛЬЗ}'-
траты.
очита-
ассор-
ребле-
;елают
котью
имеют
ШОСТЬ
шшх,
также
0].
гриме-
дния),
[М-10
(Япо-
таких шогии шить кьшей маце-ы клени сы-чение. и ФП
повышается вязкость, обеспечивающая высокую стабильность мякоти получаемых продуктов [2, 6, 7].
Многочисленные работы по созданию технологии получения натуральных овощных, овощефруктовых соков и пюреобразных продуктов повышенной биологической ценности из различных видов овощного и фруктового сырья с применением комплексных ФП Пектомацерин Г10Х, Целловиридин Г10Х, Целлюлаза и др. проведены Е.П. Ляшенко с сотрудниками [21-27]. При этом установлено достоверное накопление экстрактивных веществ и пектина, биофлавонои-дов и каротина в результате мацерации растительной ткани, гидролиза полисахаридоз и выделения структурно связанных форм. Полученные гидролизаты были использованы при изготовлении различных видов плодоовощных соков, напитков, соусов, десертов, фруктовых и овощных паст.
Применение мацерирующих ФП позволяет не только увеличить выход готового продукта, но и интенсифицировать последующие технологические процессы: протирание, гомогенизацию и концентрирование [26, 27].
Для большего выхода мякоти и перевода ее биологически активных веществ в сок был проведен ферментативный гидролиз плодовой мезги с использованием для этой цели цитопектопротеолитического комплекса ФП. В результате содержание мякоти в соках увеличилось на 30-40% по сравнению с соками, полученными прессованием [28]. Авторами была разработана малоотходная технология напитка на основе моркови [28].
Исследованы условия получения устойчивых суспензий в процессе мацерации тканей манго при помощи препаратов пектинлиаз [29]. Применяя метод газовой хроматографии, авторы обнаружили шесть новых летучих соединений - производных терпена, образовавшихся вследствие расщепления гликозидных связей при мацерации тканей и обусловливающих аромат продукта.
Влияние разжижения плодов сливы коммерческими препаратами Celluclast, Ultrazyme и Pectinex 3L (фирма Novo, Швейцария) на выход и качество сливового сока изучено в работе [13]. Наиболеевысокий выход сока (до 90,3%) получен при обработке плодов комбинацией пектолитических ферментов Ultrazyme с целлюлотическими Celluclast. Исследуя зависимость между нерастворимыми в спирте сухими веществами, пектиновыми фракциями и выходом сока, авторы пришли к выводу, что конфигурация молекул после ферментативной деградации полисахаридов, возможно, играет главную роль в процессе экстракции и в некоторых качественных характеристиках сока [13].
Согласно современным представлениям о строении растительной клетки, необходимая вязкость может быть достигнута, если препарат мацерирующего действия будет растворять серединную пластинку плодов, не оказывая глубоких гидролитических воздействий на растворимый пектин. Допускается частичное растворение клеточной стенки, обусловленное фер-
ментами с целлюлазной и гемицеллюлазной активностью [30].
По мнению ряда авторов, процесс расщепления протопектина протекает под влиянием фермента про-топектиназы, действующей на нерастворимый пектин путем разрушения связей между компонентами клеточных стенок и пектином, в результате чего последний переходит в растворимое состояние. Однако этот фермент еще не выделен и механизм его действия не ясен [31].
В работах В.Л. Кретовича и JI.B. Донченко указывается, что протопектиназа расщепляет связи между метоксилированной полигалактуроновой кислотой и гемицеллюлозами, что приводит к образованию растворимого пектина. Авторы также отмечают, что существование этого фермента точно еще не установлено [31, 32].
Исследования механизма мацерации при обработке растительных тканей очищенной фракцией пектин-трансэлиминазы, полученной японскими учеными из плесневого гриба Asp. Sojae, подтвердили, что именно пектинтрансэлиминаза вызывает разрушение межклеточных веществ, не затрагивая при этом клеточных стенок [11].
Работы многих исследователей свидетельствуют об участии в процессе мацерации трансэлиминаз и эн-дополигалактуроназ. Так, по мнению В.П. Саловаро-вой и Ю.П. Козлова, мацерирующие ферменты неупорядоченным способом осуществляют гидролитическое расщепление предпочтительно внутренних а-1,4 связей в a-D-галактуронанах [33].
Однако В.Л. Кретович считает наличие в препаратах полигалактуроназ и особенно эндополигалактуро-назы, резко снижающей вязкость сока, недопустимым, так как ее присутствие приводит к расслаиванию соков с мякотью [31].
Известно, что хорошее качество соков с мякотью среди прочих показателей обусловливается устойчивостью к расслаиванию. Важную роль в стабилизации мякоти играют соотношение масс мякоти и жидкой фазы, электрический заряд частиц мякоти, плотность жидкой и твердой фаз, величина pH, содержание отдельных электролитов, а также вязкость. Последняя зависит прежде всего от содержания пектина, являющегося защитным коллоидом и естественным стабилизатором [30]. В связи с этим вывод о нежелательности полигалактуроназы в составе мацерирующих ферментов представляется справедливым.
В обзорной статье Л. С. Салмановой сообщается об использовании мацерирующих препаратов из фильтратов грибов родов Aspergillus, Rhizopus, Ceratocystis и Penicillium, содержащих полигалактуроназу и прото-пектин азу и почти не содержащих полиметилгалакту-роназы и пектинэстеразы, для получения соков и пюре из фруктов, овощей и трав повышенной вязкости и стабильной гомогенной консистенции с высоким содержанием пектиновых веществ и других полимеров. От-
мечено, что под действием этих ферментов высвобождается высокоэтерифпцированный протопектин межклеточного вещества сырья, который переходит в растворимое состояние, образуя суспензию из отдельных клеток [6].
Исследования мацерирующих ФП Rohament Р, Filendonaza, Irgazym и др. для получения жидких не-расслаивающихся соков из различных фруктов и овощей, проведенные в Венгрии, Польше и Чехии, установили, что препараты пектолитического действия, содержащие высокоактивную пектинэстеразу, не действуют как мадерирующие и не могут применяться в производстве высоковязких продуктов [6].
Таким образом, существуют различные точки зрения на механизм ферментативной мацерации растительных тканей и полной ясности о составе действующих ферментных систем еще нет. Противоречивость мнений о роли ферментов в процессе мацерации можно в определенной степени объяснить различным назначением исследуемых авторами препаратов. Если препарат используют в технологии, предусматривающей отделение сока от измельченной мякоти, наличие ферментов, деполимеризующих пектин и снижающих вязкость сока, вполне обоснованно. Если же стоит задача получить стабильный, не расслаивающийся сок с мякотью, то присутствие активных полигалактурона-зы и пектинэстеразы нежелательно. В связи с этим необходимо усовершенствование классификации данной группы ФП.
На основании проведенного обзора литературы можно заключить, что ферментативная обработка сырья является одним из наиболее прогрессивных методов сохранения пищевой ценности продуктов и интенсификации производства.
Ферментные препараты используются на различных этапах технологического процесса для увеличения способности мезги к прессованию, для повышения скорости осветления и улучшения фильтрации, для сохранения цвета, извлечения аромата, снижения горечи и облегчения выпаривания. В целом процесс ферментативного разжижения плодов и овощей относят к технологиям будущего, так как использование ферментов улучшает экологию, повышает экономичность и гибкость производства, снижая при этом расход энергии и уменьшая количество отходов [1, 2,6, 7].
Дальнейшие перспективы применения ферментов связаны с возможностью мягкой модификации исходного состава сырья в направлении улучшения органолептических, питательных и функциональных свойств готовых пищевых продуктов [1, 2, 18, 34, 35];
ЛИТЕРАТУРА
1. Соколова Т.Н. Применение ферментных препаратов в народном хозяйстве // Пищевая пром-сть. - 2001. - № 11. - С. 37.
2. Комаров В.И., Иванова Е.А. 'Ферменты для производства продуктов питания // Пищевая пром-сть. - 1997. - № 12. - С. 12-14.
3. Toursel P. Les alchimistes du genie dlimentaire // Process. - 1997. -№ 1129. - S. 32-35.
4. Sawicka-Zukowska R. Zastosowanie preparatow enzymatycz-nych w przemysle rolno-spozywczim//Przem. Spoz. - 1998. -52. - №3.
- S. 19-21.
5. Научно-практический симпозиум по микробным ферментным препаратам, Москва, 19 мая, 1999 // Пищевая пром-сть. - 1999. -№ б. -С. 42-43.
6. Салманова Л.С., Филонова Г.Л., Соболевская Т.Н. Применение ферментативного катализа в производстве плодово-ягодных, овощных соков и экстрактов из растительного сырья // Хранение и переработка сельхозсырья. - 1995. - № 2. - С. 38-^14.
7. По итогам научно-практической конференции «Ферменты в пищевой промышленности» // Пищевая пром-сть. - 1999. - № 12. -С. 45-46.
8. Food biotechnology: food industry nutrition, and public health: Pap. Symp. «Food Ind. Nutr. And Public Health» during winter Meet. Nutr. Soc., London, 19 Febr. 1997 / Ryan - Harshman Milly // Proc. Nutr. Soc. - 1997. - 56. - № 3. - P. 845-854.
9. 36 Internationale Fruchtsaft - Woche in Karlsruhe // Brauwelf. -1996. - 136. -№ 28-29. - S. 1339-1347.
10. Труды конференции «Мир соков» 26-28 нояб. 2000 г., Москва, Россия: Докл.. - 248 с.
11. McMillan S.D. Pattern of Action of an exo-transelminase from Clostridium multigermentans. // Biochemistry. - 1964. - № 3. - P. 572-578.
12. Faigh Jilane G. Enzyme formulations for optimizing juice yields // Food Technol. - 1995. - 49. - № 9. - P. 79-83.
13. Shalom P., Gur-Arie A.R., Levi A.H. Extraction of plum juice after liquefaction with commercial enzyme // Ital. J. Food Sci. - 1999. -
11. -№ l.-P. 29-38.
14. Павлов H., Гр i no ров а Ст. Изпитания на ензимни препарата за обработка на ябълки преди пресуване // Науч. тр. / Высш. инст. хранит, и вкус, пром., Пловдив. - 1992. - 39. - № 1. - S. 67-75.. .
15. Румянцева Г.Н. Гемицеллюлазы и пектиназы микроорганизмов: свойства и аспекты применения // Хранение и переработка сельхозсырья. - 1994. - № 2. - С. 30-32.
16. Сахаров Ю.В., Линецкая А.Е. Средства для осветления и стабилизации и эффективность их использования при обработке плодовых соков и вин Н Пищевая пром-сть. - 1999. - № 6. - С. 3 8-41.
17. Румянцева Г.Н. Использование микробных ферментов при переработке пищевого растительного сырья /7 Хранение и переработка сельхозсырья! - 1993. - № 2. - С. 35-38.
18. Поляков В.А., Рнмарева JI.B., Кудряшев Л.В., Никифорова Т.А. Ресурсосберегающие технологии биоконверсии сельскохозяйственного сырья с целью получения комплексных ферментных препаратов, ароматизаторов, пищевых кислот и добавок // Пищевая пром-сть. - 2002. - № 6. - С. 14-15.
19. Голубев В.Н. Мембранная биотехнология - перспективное направление для перерабатывающих отраслей АПК // Изв. вузов. Пищевая технология. - 1990. - № 2-3. - С. 7-9.
20. Самсонова А.Н., Ушева В.К Фруктовые и овощные соки. (Техника и технология) - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Агропромиз-дат, 1990. - 287 с.
21. Ляшенко Е.П. Повышение пищевой и биологической ценности консервов для детского питания па основе биотехнолог ических процессов // Прогрессивные пищевые технологии третьему тысячелетию: Междунар. науч. конф., Краснодар, 19-22 сент., 2000: Тез. докл. - Краснодар, 2000. - С. 139-140.
22. Малоотходные технологии переработки плодов и овощей на основе применения биотехнологических процессов и мембранной технологии. / Е.П. Ляшенко, О.Ю. Шалаева и др. // Там же - С. 140-141.
23. Биотехнологические процессы как основа комплексного использования сырья и получения продуктов повышенной биологической ценности / Е.П. Ляшенко, О.Ю. Пашкина, Л. Л. Гром и др. // 2-я Всерос. науч.-техн. конф. «Прогрессивные экологически безопасные технологии хранения и комплексной переработки сельхозпродукции для создания продуктов питания повышенной иищевой и биологической ценности», Углич, 1-4 окт., 1996: Тез. докл. 4.2. - Углич, 1996. - С. 403.
24. Михайлова Р.В., Ляшенко Е.П. Применение биотехнологии для получения экологически чистых продуктов питания // Там же. - С. 427.
ilT-:7-
г -ч ?
■ЛН|^УЛ
.ПрщЙ
Г.\ИГ,1\ I:. I* ■ U
WITH r,
:■* l; -
с :ы^::
rafc;t-
25. Ляшенко Е.П. Биотехнология в консервной промышленности. // Там же. - С. 430.
26. Ляшенко Е.П. Биотехнология в консервной промышленности // Рациональные пути использования вторичных ресурсов АПК: Междунар. науч. конф., Краснодар, 23-26 септ., 1997: Тез. докл. -Краснодар, 1997. - С. 63-64.
27. Ляшенко Е.П., Пашкина О.Ю., Гром Л.Л. Биотехнология в консервной промышленности // Прогрессивные технологии и техника в пищевой пром-сти: Междунар. науч. конф., Краснодар, 19-21 септ., 1994: Тез. докл. - Краснодар, 1994. - С. 39—40.
28. Комплексная переработка плодово-ягодного и овощного сырья при производстве напитков / JI.A. Маюрникова, В.М. Позняков-ский, В.А. Поляков и др. // Там же. - С. 40-41.
29. Enzymatic maceration: Effects on volatile components of mango pulp / M. Sakho, D. Chassagne, A. Jaus a. o. // J. Food Sci. - 1998. - 63. -№ 6. - P. 975-978.
30. Шобиигер У. Плодово-ягодные и овощные соки / Под ред. А.Н. Самсоновой. - М.: Легкая и пищевая пром-сть, 1982. - 472 с.
31. Ферментные препараты в пищевой промышленности / Под ред. В.Л. Кретовича и В.Л. Яровенко. - М.: Пищевая пром-стъ, 1975.
- 535 с.
32. Донченко Л.В. Технология пектина и пекгиноиродуктов / Учеб. пособие. - М.: ДеЛи, 2000. - 255 с.
33. Саловарова В.П., Козлов Ю.П. Эколого-биотехнологиче-ские основы конверсии растительных субстратов: Учеб. пособие. -М.: Изд-во РУДН, 2001. - 331 с.
34. Developing fields in food biotechnology // Food Sci. and Techno!. today. - 1997. - 11. - № 4. - P. 229-249.
35. James J., Simpson B.K. Application of enzymes in food processing // Crit. Rew. Food Sci. and Nutr. [SRC Crit. Rew. Food Sci. and Nutr.]. - 1996. - 36. - № 5. - P. 437-463.
Кафедра технологии консервирования
Поступила 27.12.02 г.
■и: Ггс:" Ь,— Р
1U1I гик -1 -
-illл: IH U
N р-'1-': Г,—-"L-
iid.j .■■■
jpSora;?
>541.
LRe.-l'L : i: i «f:=
JtVtrtJHt-
!M
Jr . ПШ:ч
i fraa.
.K-L'lKM.
■ m; 1-
1Г.’-
uii;ii_.i.
Vforrfti+t
i:r: hi пгчч.1-. j- i-i
f" J4ii= :»v-
i jtfrinO-
■Hlj i
>.VT^
