CC BY
12
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием
«ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ - Санкт-Петербург ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»_26-27 апреля 2019 г.
А. И. Шакирова, И. М. Бархатов, Я. А. Гудожникова, Н. Н. Мамаев
Научно-исследовательский институт детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачёвой, г. Санкт-Петербург
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Санкт-Петербург
БИОЛОГИЯ И КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ГИПЕРЭКСПРЕССИИ ГЕНА BAALC У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ МИЕЛОИДНЫМ ЛЕЙКОЗОМ ПРИ ТЕРАПИИ МЕТОДОМ АЛЛОГЕННОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
Введение. На сегодняшний день лучшим способом терапии острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) считается аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК). Одним из отягчающих моментов такого лечения являются частые посттрансплантационные рецидивы (ПТР)заболевания и его прогрессия. Согласно современным представлениям, популяция клеток, ответственных за ПТР, формируется ранними лейкозными предшественниками, в частности лейкозными стволовыми клетками с иммунофеноти-пом CD34+CD38-, изучать которые в клинических условиях не так просто. Важный шаг к разрешению проблемы был сделан после внедрения в клинику нового панспецифиче-ского молекулярного маркера BAALC (brain and acute leukemia-cytoplasmic), гиперэкспрессия которого имеет место у половины больных ОМЛ, причём уровень его экспрессии слабо коррелирует с количеством бластных элементов в костном мозге. В то же время факт неслучайного распределения встречаемости гиперэкспрессии гена BAALC у больных с различными ФАБ-вариантами ОМЛ позволил предположить его важную патогенетическую роль в популяции инициирующих рецидив незрелых типов клеток (Xiao et al., 2015). Данная гипотеза подтверждается тем, что уровень экспрессии BAALC у больных ОМЛ значительно выше в субпопуляции CD34+ клеток по сравнению с общей фракцией ядерных элементов в костном мозге или более дифференцированными CD34CD117+ и CD34CD117- клетками (p<0,001). Кроме того, она значительно снижена у больных острым промиелоцитарным лейкозом. Что касается окончательной взаимосвязи гиперэкспрессии гена BAALC с продуцирующими его ранними предшественниками лейкозного гемопоэза у больных ОМЛ, её ещё предстоит установить.
Материалы и методы. Изучение уровня экспрессии гена BAALC было проведено у 115
больных ОМЛ, в возрасте от 2 до 60 лет, которым алло-ТГСК выполнялась в НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой. Измерение экспрессии гена BAALC осуществляли серийно методом количественной ПЦР в режиме реального времени. Уровень экспрессии BAALC в 3100 копий/104 копий ЛВЬ1, отличающийся от медианы такового у больных в ремиссии до ТГСК на четыре стандартных отклонения, был выбран в качестве порогового для исследования клинического значения гиперэкспрессии BAALC.
Результаты. Согласно полученным результатам, такой неблагоприятный в прогностическом отношении фактор в дебюте заболевания, как гиперэкспрессия гена BAALC, в случае выполнения больному алло-ТГСК своей клинической значимости не имеет, как по отношению к общей (ОВ) и безрецидивной выживаемости (БРВ), так и к риску развития ПТР (р>0,377). В тоже время в случае гиперэкспрессии BAALC в костном мозге непосредственно перед началом режима кондиционирования, риск развития ПТР значительно возрастает (69,2 % уб. 39,8 %, р=0,026), даже в случае алло-ТГСК в состоянии достигнутой цитологической ремиссии.
Как известно, важным предиктором течения посттрансплантационного периода у больных ОМЛ является наличие у больных на момент ТГСК гиперэкспрессии маркера WT1, который на молекулярном уровне отражает популяцию бластов в костном мозге. Согласно полученным данным, обнаружение у больных на момент выполнения аллоТГСК повышенного уровня обоих обсуждаемых здесь маркеров приводили к значительному ухудшению показателей двухлетних ПТР и БРВ, по сравнению с таковыми у больных, не имевших их гиперэкспрессии (80 % уб. 37,5 % (р=0,015) и 6,7 % уб. 45,4 % (р=0,013) соответственно), или обнаруживающих гиперэкспрессию только одного маркера
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
(80 % те. 21,1 %, (р=0,003) и 6,7 % те. 42,1 %, (р=0,028) соответственно).
В отличие от того, что лечение с помощью алло-ТГСК позволяет преодолеть неблагоприятный фактор гиперэкспрессии BAALC в дебюте ОМЛ, в случае повышения уровня его экспрессии в посттрансплантационном периоде ухудшение прогноза течения заболевания становится очевидным. Ухудшение прогноза касалось ОВ (22,7 % те. 68,9 %; р=0,00), БРВ (9,1 % те. 66,2 %; р=0,00) и кумулятивной частоты возникновения ПТР (90,9 % те. 16,2 %; р=0,00) в течение двух лет после ТГСК. По нашим данным серийный мониторинг уровня экспрессии BAALC после ТГСК на день (Д) Д+60, Д+90, Д+120, Д+150 и Д+270 имеет важное клиническое значение (р<0,006). При сравнении данного подхода с результатами определения минимальной остаточной болезни (МОБ) реко-
мендованными методами исследования с помощью ЮС-анализа было показано, что уровень экспрессии BAALC слабо отражает количество остаточных клеток опухолевого клона после проведенной терапии, а потому его серийный мониторинг не целесообразно использовать в качестве универсального маркера МОБ у больных ОМЛ после ТГСК.
Выводы. Представленные здесь результаты показывают, что изучение уровней экспрессии гена BAALC у пациентов с ОМЛ существенно дополняет систему стратификации этих больных на группы риска, основанную на экспрессии гена WT1 и может стать важным подспорьем для предсказания ответа на терапию. Поэтому изучение взаимосвязи гиперэкспрессии гена BAALC с конкретными фракциями незрелых лей-козных предшественников в области изучения острых лейкозов становится крайне важным.
Д. Б. Шамсутдинова, Х.Я. Каримов
Научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Министерства здравоохранения Республики Узбекистан, г. Ташкент
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ГЕНА PAI I 5G/4G НА РИСК РАЗВИТИЯ ТРОМБОЗА У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМИ МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ
Введение. Многочисленные исследования последних лет посвящены выяснению роли таких генетических дефектов, как мутация гена РА1 I в предрасположенности к формированию тромбозов. Определено, что эта мутация может стать причиной острого локального тромбоза или блокады терминального сосудистого русла микротромбами и фибрином. Однако данные о значимости данного генетического маркера в развитии тромбоэмболических осложнения у онкогематологических больных крайне противоречивы, особенно в отношении влияния на гемостаз носительства генетических изменений РА1 I при ХМПЗ.
Цель. Изучение влияния полиморфизма 5в/4в гена РА1 I на риск развития тромбоза у больных с ХМПЗ.
Материалы и методы. Работа выполнена на 225 образцах ДНК, выделенных из периферической крови больных с наиболее часто встречающимися ХМПЗ — хроническим миелолейкозом (ХМЛ, п=32) и истинной полицитемией (ИП, п=79), а также группы контроля (п=114). Всего обследовано 111 больных, из них 53 с тромбозом и 58 без тромбоза. Генотипирование образ-
цов и детекция мутации полиморфизма 5G/4G гена PAI I проводились методом ПЦР на приборе «Applied Biosystems 2720» (США) с использованием наборов реагентов НПО «Литех» (Москва, Россия), согласно инструкции производителя. Статистический анализ результатов проведен с использованием пакета статистических программ «OpenEpi 2009».
Результаты. В результате проведенного исследования нами выявлены статистически значимые различия между объеденной группой больных ХМПЗ с тромбозом и условно здоровых доноров по частотам 5G и 4G аллелей (42.5/57.5 % против 73.2/26.8 %, соответственно; х2=29.6; Р<0.05; OR=3.7; 95 %CI 2.28-6.022). В этих исследованных группах выявлено статистически значимое различие и в распределение генотипа 5G/4G (57.4 % против 30.5 %; х2=4.3; Р=0.04; 0R=2.0; 95 %CI1.03-3.861) и гомозиготного генотипа 4G/4G (30.2 % против 7.9 %; Х2=14.1; Р<0.05; 0R=3.8; 95 %CI2.05-12.39).
Также выявлялось статистически значимое увеличение носительство частот неблагоприятного 4G аллеля в подгруппе больных с тромбозом по сравнению пациентов без тромбо-
