CC BY
52
аспекты возникновения и развития болезней животных и защита их здоровья в современных условиях: матер. междунар. конф. Воронеж, 2000. Т.1. С.216-218.
7. Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника размножения/ А.П. Студен-цов, В.С. Шипилов, В.Я. Никитин [и др.]. М.: Колос, 2000. 495 с.
8. Шипилов, В.С. Послеродовая стимуляция половой функции у коров / В.С. Шипилов, В.А. Чирков. Киев: Урожай, 1987. 180 с.
УДК 579.26/.862
БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА СТРЕПТОКОККОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В КРАСНОДАРСКОМ КРАЕ
А.А. ШЕВЧЕНКО, Л.В. ШЕВЧЕНКО, О.В. ДВАДНЕНКО ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» г. Краснодар, Краснодарский край, Российская Федерация, 350044
(Поступила в редакцию 25.01.2010)
Введение. Для успешного развития животноводства необходимо предотвратить появление и распространение среди животных инфекционных болезней, наносящих значительный экономический ущерб отрасли. С интенсификацией животноводства, переводом его на индустриальную основу ощутимый урон стали наносить ранее имевшие незначительный удельный вес в инфекционной патологии животных болезни, вызываемые стрептококками: аборты, пневмонии, метриты, маститы, сепсис, энтериты, циститы, менингиты, поражение кожи, суставов и др. [1, 2]. Стрептококки широко распространены среди популяций домашних животных. Течение инфекционного процесса при стрептококкозе определяется антигенными свойствами возбудителя и зависит от состояния восприимчивых животных [3]. Для дифференциации микроорганизмов рода Streptococcus предложено использовать их ферментативные, гемолитические, морфологические и культураль-ные свойства. Точная классификация стала возможной лишь с выявлением специфических групповых антигенов [4, 5].
В медицинской практике в зависимости от степени патогенности паразита и восприимчивости хозяина стрептококков подразделяют на оппортунистические, условно-патогенные и безусловно-патогенные. При этом для представителей первой группы имеются свои установившиеся в ходе эволюции специфические экологические ниши. Представители других групп не имеют четко установленных экологических ниш [6].
В ветеринарной практике не всегда четко дифференцируют патогенные и непатогенные стрептококки, что затрудняет определение их эпизоотологического и этиологического значения [7, 8].
Отсутствие сведений о роли стрептококков различных серологических групп в инфекционной патологии животных не позволяет оценить экономическую значимость стрептококкоза и, таким образом, сдерживает разработку средств специфической профилактики стреп-тококкоза крупного рогатого скота.
Цель работы - изучить культуральные, морфологические, ферментативные, патогенные и антигенные свойства стрептококков, выделенных у крупного рогатого скота при различных патологических состояниях.
Материал и методика исследований. В животноводческих хозяйствах Кавказского, Тбилисского, Тихорецкого, Тимашевского районов Краснодарского края в период с 2004 по 2009 г. нами выделено более 200 культур стрептококков у больных коров, телят с клиническими признаками стрептококкоза, а также павших и вынужденно убитых животных.
Выделение стрептококков, изучение культуральных, морфологических, ферментативных, патогенных и антигенных свойств проводили согласно «Методическим указаниям по лабораторной диагностике стрептококкоза животных», утвержденным 25.09.1990 г. ГУВ СССР, а также справочнику «Определитель зоопатогенных микроорганизмов» под редакцией профессора М.А. Сидорова. Использовали селективные и обогащенные питательные среды: мясопептонный агар и бульон с 1 % глюкозы, энтерококковую среду, среду Эдварда, среду для выделения и культивирования гемокультур стрептококков и кровяной агар в модификации Института эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи. Серологическую идентификацию стрептококков определяли методом ЬапсейеШ, а также с использованием коммерческих диагно-стикумов. Патогенные свойства стрептококков изучали путем внутри-брюшинного заражения суточной бульонной культурой белых мышей массой 16-18 г.
Для изучения морфологических свойств приготовляли препараты из бульонных и агаровых культур, окрашивали их по методу Грама и микроскопировали под иммерсионной системой светового микроскопа.
Серологическую идентификацию выделенных стрептококков проводили в реакции преципитации в капилляре с коммерческими диагно-стикумами. Положительная реакция характеризовалась образованием хлопьев или резким помутнением в середине столбика смеси, сыворотки и антигена. При отрицательной реакции смесь сыворотки и антигена оставалась прозрачной.
Для изучения культуральных, морфологических, ферментативных, патогенных и антигенных свойств использовали 30 культур стрептококков серологической группы А, 45 - серогруппы В, 55 - серогруппы С, 62 - серогруппы Б, 25 - серогруппы О и 15 изолятов в.
Результаты исследований и их обсуждение. При изучении выделенных 30 изолятов стрептококков серологической группы А установлено, что 12 культур были выделены из носовых смывов телят с респираторными заболеваниями, 10 - из проб молока коров, больных маститами, 8 - из проб матки и 5 - из проб селезенки телят, павших от септических заболеваний. Выделенные 30 культур стрептококков серологической группы А не давали роста при культивировании при температуре 10 и 45 0С, не были устойчивы к нагреванию при темпе-
ратуре 60 0С в течение 30 мин, не редуцировали метиленовый синий в молоке, не росли в бульоне с 6,5%-ным хлорида натрия, 40 и 10% желчи.
При изучении гемолитических свойств установлено, что а-гемолиз (характеризующийся небольшой зоной неполного просветления вокруг колоний) проявлял 5 культур, ß-гемолиз (полное просветление агара вокруг колоний) - 11 изолятов. Выявлено, что 5 культур, выделенные из селезенки, обладали выраженным ß-гемолизом. Из выделенных 12 культур стрептококков из носовых смывов телят 4 обладали выраженным ß-гемолизом, а 5 культур - а-гемолизом. Из 8 культур стрептококков, выделенных из проб истечений матки, ß-гемолизом обладали три, а-гемолизом - четыре. Из выделенных 10 культур стрептококков из проб молока коров, больных маститом, 3 культуры проявляли а-гемолиз, 5 - ß-гемолиз. Все исследованные культуры стрептококков серологической группы А расщепляли гиппурат натрия, ферментировали трегалозу, сахарозу, салицин, раффинозу, инулин и арабинозу. В препаратах из бульонных и агаровых культур стрептококки окрашивались по Граму положительно и располагались в виде цепочек. По результатам проведенных исследований все 30 культур стрептококков были отнесены к виду Streptococcus pyogenes. Полученные нами результаты согласуются с проведенными исследованиями Ю.М. Ибрагимовым при изучении этиологического значения стрептококков в инфекционной патологии крупного рогатого скота в Кабардино-Балкарской республике [9].
При изучении выделенных 45 культур стрептококков серогруппы В установлено, что 12 культур были выделены из носовых смывов телят с заболеваниями респираторного тракта, 15 - из проб молока коров, больных маститами, 5 - из проб истечений матки коров, больных эндометритом, 5 - из проб легких павших телят и 8 - из крови больных животных. Выделенные 45 культур стрептококков серогруппы В не росли при температуре 10 и 45 0С, не были устойчивы к нагреванию при температуре 60 С в течение 30 мин, не редуцировали метилено-вый синий в молоке, не ферментировали сорбит, манит, раффинозу, эскулин и инулин. Три культуры росли в бульоне с 6,5 % хлорида натрия. При изучении гемолитических свойств установлено, что 5 культур обладали а-гемолизом, 30 культур проявляли ß-гемолиз и не обладали гемолизом 15 культур стрептококков. Значительное количество ß-гемолитических стрептококков серогруппы В было выделено из молока коров, больных маститами, и из истечений матки животных с признаками эндометрита. Выделенные культуры стрептококков серо-группы В расщепляли гиппурат натрия, ферментировали трегалозу и сахарозу. В САМР-тесте 35 культур стрептококков были положительными и 10 отрицательными. Установлено, что выделенные стрептококки из проб легких телят в большинстве были отрицательными в САМР-тесте. В препаратах из бульонных и агаровых культур стрептококки окрашивались по Граму положительно и располагались в виде цепочек. По результатам проведенных исследований все 45 культур стрептококков были отнесены к виду Str. agalactiae. Полученные нами
результаты согласуются с проведенными исследованиями Ю.М. Ибрагимовым при изучении этиологического значения стрептококков в инфекционной патологии крупного рогатого скота в Кабардино-Балкарской республике [9].
При изучении 55 изолятов стрептококков серогруппы С установлено, что все культуры не росли при температуре 10 и 45 0С в бульоне с 6,5 % хлорида натрия и 40 % желчи, не выдерживали при температуре 60 0С в течение 30 мин, не расщепляли гиппурат натрия, не ферментировали манит и инулин. При изучении гемолитических свойств 20 культур стрептококков серогруппы С вызывали а-гемолиз, 28 - ß-гемолиз и 7 - гемолиза не вызывали. 27 изолятов стрептококков редуцировали метиленовую синь в молоке, в том числе из проб носовых смывов телят - 5, из молока коров, больных маститом, - 7, из проб истечений матки коров, больных эндометритом, - 12, из проб легких телят - 8. В препаратах из бульонных и агаровых культур стрептококки окрашивались по Граму положительно и располагались в виде цепочек. По результатам проведенных исследований 55 изолятов стрептококков серогруппы С установлено, что 25 (45,4 %) из них отнесены к подвиду Str. dysagalactiae и 30 (49,2 %) - к Str. zooepidemicus, а видовую принадлежность трех (5,4 %) культур стрептококков по ферментативным и культуральным свойствам установить не удалось.
При изучении выделенных 62 культур стрептококков серогруппы D установлено, что 7 культур были выделены из проб пораженных участков кожи, 8 - из проб воспаленных участков копыт, 10 культур были выделены из проб носовых смывов телят с заболеваниями респираторного тракта, из проб молока - 8, из истечений матки коров, больных эндометритом, - 11, из крови - 7, из проб легких - 9 и из проб суставной жидкости - 2. При изучении биохимических, культуральных свойств стрептококков серогруппы D установлено, что все они росли при температуре 10 и 45 0С в бульоне с 6,5 % хлорида натрия и в бульоне с 40 % желчи, не расщепляли гиппурат натрия, не вызывали на кровяном агаре ß-гемолиз.
В мазках-отпечатках, приготовленных из бульонных и агаровых культур, стрептококки окрашивались по Граму положительно и располагались в виде диплококков ланцетовидной формы или коротких цепочек, не более четырех кокков.
Были изучены особенности роста 62 культур стрептококков серогруппы D на молочно-ингибиторной среде (МИС). В результате установлено, что из 62 изолятов, выращенных на среде МИС, 48 образовывали крупные с выпуклыми краями черные блестящие колонии, у 5 культур колонии были такие же, но имели зону просветления с ободком помутнения по периферии, 9 (14,5 %) изолятов образовали на среде МИС мелкие сероватые колонии. По результатам проведенных исследований 62 изолятов стрептококков серогруппы D культуры стрептококков серогруппы D отнесены в 48 (77,4 %) случаях к Str. bovis, в 9 (14,5 %) - Str. equinus, в 5 (8,1 %) - Str. faecium.
При изучении стрептококков серогруппы G установлено, что они ферментировали глюкозу, лактозу, сахарозу, трегалозу, а также в по-
ловине случаев - салицин и инулин. Без образования кислоты ферментировали манит, сорбит и раффинозу, во всех случаях проявляли ß-гемолиз. По всем остальным показателям эти стрептококки были аналогичны стрептококкам серогруппы А, кроме этого из 15 культур 9 были положительными в САМР-тесте. По культуральным и ферментативным свойствам изученные культуры стрептококков не были включены в известные 29 видов. В препаратах из бульонных и агаровых культур стрептококки окрашивались по Граму положительно и располагались в виде цепочек.
При изучении 25 изолятов стрептококков серогруппы О установлено, что эти микроорганизмы чаще выделялись из патологического материала у больных и павших телят с признаками поражений органов дыхания и желудочно-кишечного тракта. Выделенные культуры не росли при температуре 10 и 45 0С в бульоне с 6,5 % хлорида натрия и в бульоне с 40 % желчи, не выдерживали нагревания при температуре 60 0С в течение 30 мин, не расщепляли гиппурат натрия, не ферментировали манит и инулин. В препаратах из бульонных и агаровых культур стрептококки окрашивались по Граму положительно и располагались в виде цепочек.
При изучении гемолитических свойств 25 изолятов стрептококков серогруппы О установлено, что четыре культуры на кровяном агаре вызывали ß-гемолиз, десять - а-гемолиз, восемь - гемолиза не вызывали, 15 изолятов редуцировали метиленовую синь в молоке.
По результатам проведенных исследований изолятов стрептококков по культуральным и ферментативным свойствам была определена видовая принадлежность 25 культур стрептококков, серологическую принадлежность которых ни одним из методов установить не удалось. Эти культуры были отнесены к видам: Str. cricetus, Str. mutans, Str. oralis, Str. salivarius, Str. sobrinus, Str. anginosus, Str. mitis, Str. mitior.
Изучение патогенных свойств изолятов стрептококков проводили на белых мышах путем заражения их по указанной выше методике. В результате серии проведенных исследований установлено, что из 15 культур стрептококков серогруппы А восемь были патогенны для белых мышей. Максимальное количество патогенных культур стрептококков было выделено из проб легких больных телят и молока коров, больных маститами. Изоляты стрептококков серогруппы В, выделенные из проб легких клинически здоровых телят, были патогенными для белых мышей в 19 % случаев, тогда как выделенные у больных животных - в 80 %. Культуры стрептококков, выделенные из проб молока коров, больных маститами, были патогенными в 65 % случаев, а почти половина изолятов из проб половых путей клинически здоровых коров была также патогенна для белых мышей. Из 55 стрептококков серогруппы С, выделенных от больных и павших животных, были патогенны для белых мышей 35 (63,6 %), при этом культуры, выделенные из суставной жидкости телят, селезенки и крови при сепсисе, вызывали гибель всех зараженных белых мышей. Выделенные стрептококки из проб носовых смывов у клинически здоровых телят культуры стрептококков серогруппы С были непатогенными, тогда как у боль-
ных животных - патогенными. Культуры стрептококков, выделенные из проб матки коров, больных эндометритами, были патогенными в 80 %, из молока коров, больных маститами, - в 75 %, из проб легких - 78 %, а из вагинальных смывов патогенны - в 35 % случаев. Культуры стрептококков серогруппы D, выделенные из суставной жидкости, селезенки павших телят, были патогенны для белых мышей. При этом количество культур стрептококков серогруппы D из проб носовых смывов клинически здоровых телят составило около 50 %, от больных - 70 %, из проб молока коров, больных маститами, - 80 %, из проб легких - 75 %, из проб матки коров, больных эндометритами, - 78 %, из крови - 55 % и из проб смывов из влагалища - 55 %. Из 15 изолятов стрептококков серогруппы G патогенными были 7 (56,6 %). Культуры, выделенные из селезенки павших телят, были патогенными для белых мышей. Стрептококки серогруппы О из 25 изолятов были патогенны для белых мышей в 45 % случаев. Из 202 изученных изолятов стрептококков разных серогрупп были патогенными для белых мышей 65,5 % случаев. Полученные нами результаты согласуются с проведенными исследованиями Ю.М. Ибрагимовым при изучении этиологического значения стрептококков в инфекционной патологии крупного рогатого скота в Кабардино-Балкарской республике [9].
Заключение. Таким образом, патогенные стрептококки, выделенные у больных и павших животных, вызывают инфекционные болезни -стрептококкозы, характеризующиеся широким охватом поголовья и высокой смертностью, особенно молодняка. Изучение биологических свойств стрептококков, выделенных у больных коров и больных и павших телят, показывает неоднородный микробный биоценоз и что все они относятся к известным серогруппам А, В, С, D, О, G. Помимо перечисленных серологических групп, из патологического материала выделяются часто стрептококки видов: Str. cricetus, Str. mutans, Str. oralis, Str. salivarius, Str. sobrinus, Str. anginosus, Str. mitis, Str. mitior, эпизоотологическое и этиологическое значение которых пока изучено недостаточно. Для профилактики стрептококкозов целесообразно применение вакцин и лечебных сывороток.
ЛИТЕРАТУРА
1. Брико, Н.И. Выделение и идентификация стрептококков / Н.И. Брико, А.С. Ещи-на, Л.А. Ряпис. М., 2002. 120 с.
2. Джупина, С.И. Эпизоотический процесс и его контроль при факторных инфекционных болезнях / С.И. Джупина. М.: Изд-во РУДН, 2000.
3. Конопаткин, А.А. Этиологическая и эпизоотологическая характеристика факторно-инфекционных болезней животных / А.А. Конопаткин, А.А. Глушков // Тезисы докладов III Всесоюзной конф. по эпизоотологии. Новосибирск, 1991. С. 22, 23.
4. Крюков, Н.А. Микробный пейзаж и иммунологическая реактивность телят, выращиваемых в условиях промышленной технологии / Н. А. Крюков, А. Т. Семенюта, Э. А. Шегидевич // Труды ВИЭВ. 1984. Т. 60. С. 81-84.
5. Покровский, В.И. Стрептококки и стрептококкозы / В.И. Покровский, Н.И. Брико, Л.А. Ряпис. М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2006. 544 с.
6. Сидоров, М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов / М.А. Сидоров. М.: Колос, 1995. С. 90-95.
7. Шевченко, Л.В. Идентификация энтеробактерий нутрий / Л. В. Шевченко, А.А. Шевченко // Биол. -экол. проблемы заразных болезней диких животных и их роль в
патологии с.-х. животных и людей: материалы Междунар. науч.-практ. конф. / ВНИИВ-ВиМ. Покров, 2002. С. 254, 255.
8. Шевченко, А.А. Изучение энтеробактерий нутрий и совершенствование лечения и профилактики / А. А. Шевченко, Л. В. Шевченко, Э. А. Горностаев // Фундам. исслед. 2004. № 1. С. 93.
9. Ибрагимов, Ю.М. Этиологическое значение стрептококков в инфекционной патологии крупного рогатого скота в Кабардино-Балкарской республике: автореф. дис. ... канд. ветерин. наук / Ю.М. Ибрагимов. Нальчик, 2001. 25 с.
УДК 619:616.001:619:612.015:638.8
ВЛИЯНИЕ ВИТАМИНА В6 НА НЕКОТОРЫЕ КЛИНИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ, КОНЦЕНТРАЦИЮ ОБЩЕГО БЕЛКА И БЕЛКОВЫХ ФРАКЦИЙ КРОВИ КРОЛИКОВ ПРИ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ
С.С. КОСТЮК
Научно-исследовательский институт физиологии и иммунологии животных и птиц Львовского национального университета ветеринарной медицины и биотехнологий (ЛНУВМ и БТ) им. С.З. Гжицкого г. Львов, Украина, 79010
(Поступила в редакцию 29.01.2010)
Введение. Изучение характера биологического действия разных доз облучения на живой организм, диагностика заболевания и профилактика степени облучения остаются актуальными и на сегодняшний день, особенно когда существует угроза облучения при разных аварийных ситуациях на многочисленных атомных электростанциях Украины.
Эффективное использование животных в условиях интенсификации животноводства требует глубокого понимания особенностей физиологических процессов у животных и птицы, а также изменений, которые возникают в организме под воздействием разнообразных факторов внешней среды, среди которых встречается ионизирующая радиация.
Из-за интенсивного испытания ядерной энергетики, возникновения аварий на атомных электростанциях становятся новые задачи изучения особенностей действия ионизирующего излучения на живой организм и возникает необходимость поиска средств, которые уменьшали бы вредное влияние ионизирующей радиации на живой организм. Среди них (средств) существенную роль как радиопротектор играет пиридоксин [7, 8]. Белки плазмы крови, альбумины и фибриноген образуются исключительно в печени, тогда как глобулины - еще и в костном мозге, селезенке, лимфатических узлах, брыжейке кишечника. Они выполняют разнообразные функции: поддерживают нормальный объем крови и постоянное количество воды в тканях. Как высокомолекулярные коллоидные частицы, белки не могут проходить через артериальные стенки в тканевую жидкость, они притягивают определенное количество воды из тканей в кровь и создают онкотическое давление. Особенно большое значение в создании онкотического давления при-
