CC BY
16
УДК 661.311.21-085.262.55]-092.9 В.М. Зубачик, М.0.1ськв
Б10Х1М1ЧН1 АСПЕКТИ ВПЛИВУ ПРЕПАРАТ1В АКВАЛ1ФТ I ДМАЕ НА СПОЛУЧНУ ТКАНИНУ ЯСЕН ЩУР1В З1 ЗМОДЕЛЬОВАНОЮ РЕЦЕС16Ю ЯСЕН
Львiвський нацiональний медичний унiверситет iменi Данила Галицького
Актуальшсть дослiдження.
Актуальним питанням сучасно'Т стоматологи залишаеться вiдновлення тканин марпнального пародонта внаслiдок рецеси ясен шляхом контурно! пластики м'яких тканин. Основним методом лн кування цього захворювання е хiрургiчний (препа-рування вiльного слизового чи сполучнотканинно-го трансплантата [5; 6; 7], а також рухомого клап-тя [8; 9], однак при початкових ступенях пропону-емо терапевтичний пщхщ. Для усунення естетич-ного дефекту застосовували низку препара^в, для ш'екцш у маргiнальний край ясен у дтянц нижнiх рiзцiв порожнини рота щурiв на основi спо-лук синтетичного походження, як сприяли лiфтин-гу сполучнотканинного шару, тим самим вщнов-люючи втраченi тканини.
Мета роботи. Моделювання рецеси ясен i ви-бiр препарату для вщновлення маргiнального краю з наступним з'ясуванням його ефективност -лiфтингового ефекту та впливу на змшу бiохiмiч-них показникiв у сполучнiй тканин ясен.
Матерiал i методи дослщження.
Дослiдження було виконано в експериментi на щурах вiком 9-10 тижыв, стадного розведення, масою 210-230 г. Пщ час роботи зi щурами до-тримувалися Мiжнародних рекомендацiй щодо медико-бюлопчних дослiджень iз використанням тварин [10]. Моделювання рецеси ясен проводили пщ наркозом. Пiсля знеболювання скальпелем витинали марпнальний край ясен у дтянц рiзцiв нижньо'Т щелепи для оголення кютково'Т тканини пародонта. Процедуру виконували при постшному зрошеннi операцшно'Т рани стерильним фiзiологi-чним розчином. Пюля хiрургiчного втручання тварин утримували на щадному рацюн вiварiю. Стан тканин пародонта оцiнювали вiзуально й шстру-ментально, змiни фксували шляхом фотографу-вання.
Пiсля змодельовано'Т патологи пародонта тварин було подтено на дослщн групи: 6 особин слугували контролем; другш групi (7 тварин) внут-рiшньослизово вводили гщрогель аквалiфт; у тре-тiй груп (7 щурiв) застосовували препарат 2-диметиламiноетанол 4-ацетоамiнобензоат 6% (ДМАЕ). Тваринам двiчi з iнтервалом у 10 дiб iн'екцiйно вводили у м'як тканин маргiнальних ясен вiдповiдний препарат. Перед проведенням мантуляцш тварин обстежували. На 30 добу екс-перименту проводили евтаназш щурiв шляхом передозування диетилового ефiру.
1з тканин ясен щурiв готували гомогенати у
сшввщношенш маса тканини до об'ему фiзiологiч-ного розчину 1:40. Гомогенати при +4°С центри-фугували при 2500д упродовж 30 хв.
Для бiохiмiчних дослiджень ясен використову-вали надосадову рщину гомогенату ясен, в якш визначали активнiсть лужно'Т (ЛФ) та кисло' фос-фатаз (КФ), каталази, вмют малонового дiальдегi-ду (МДА), бiлковозв'язаного (БЗО) та вiльного ок-сипролiну (ВО), глiкозамiнглiканiв. Активнiсть ЛФ i КФ характеризували колориметрично за гщролн зом, р-нiтрофенiлфосфату та 1-нафтилфосфату, вiдповiдно, за допомогою бiохiмiчного аналiзатора «Нита^ег-2000». Активнiсть каталази визначали методом М.А. Королюк i спiвавт. [3], який фунту-еться на здатност пероксиду водню утворювати iз солями молiбдену стiйкий кольоровий комплекс. Умют МДА встановлювали колiрною реакцiею з тюбарб^уровою кислотою [4]. Стан антиоксидан-тно'Т системи виражали антиоксидантно-про-оксидантним шдексом (АП1), який вiдображае баланс анти- й прооксидантних систем оргашв i тканин [1]. Обмш колагенових компонентiв волокнис-тих структур сполучно'Т тканини слизово'Т оболонки ясен у щурiв вивчали за вмютом у гомогенатах вь льного (ВО) та бтковозв'язаного оксипролiну (БЗО). Стан бiополiмерiв основно'Т речовини сполучно'Т тканини ясен оцшювали за вмютом глко-замiнглiканiв - компонент протеоглiканiв, якi виражали через гексуроновi кислоти [2].
Результати дослщження та 1х обговорення.
За результатами бiохiмiчних дослiджень акти-внiсть ЛФ у гомогенатах слизово'Т оболонки ясен щурiв була найнижча в щурiв, яким вводили аква-лiфт, i становила 3,98±0,49 мккат/г. Натомiсть у щурiв пiсля введення ДМАЕ залишалася на рiвнi 4,59±0,34 мккат/г. Зниження активност ЛФ можна пояснити зниженням мiграцil лейкоцитiв у тканини пародонта, яю, як вiдомо, мають дуже високу ак-тивнiсть цього ферменту.
Активнють КФ у 3 груп була в межах статисти-чно'Т похибки порiвняно з результатами групи контролю, що становило 0,91±0,05 мккат/г (р>0,05). Якщо зростання активност КФ пояснюеться по-рушенням цтюносп лiзосомальних мембран, що мае мюце при будь-якому запальному процесi, то певна тенден^я до активiзацiТ' ферменту засвщ-чуе посилений метаболiзм у дослщжуваних тканинах. Натомiсть зниження активност КФ спосте-рiгали у 2 грут, де вона склала 0,76±0,05 мккат/г.
Аналiзуючи результати каталазно'Т активностi в гомогенатах слизово'Т оболонки ясен щурiв усiх дослiдних груп порiвняно з iнтактними тваринами,
Перспективи подальших дослiджень.
Розглядаемо перспективи застосування лкар-ських 3aco6iB для ремоделювання м'яких тканин пародонта при початкових ступенях рецесп ясен, якi б сприяли лiфтингу, вiдновлюючи контур втра-чених тканин маргiнальних ясен.
Лтература
1. Антиоксидантно-прооксидантний 1ндекс сироватки кров1 щур1в з експериментальним стоматитом i йо-го корекц1я зубними елксирами / [А.П. Левицький, В.М. Почтар, А.О. Макаренко, Л.1. Грид1на] // Оде-ський медичний журнал. - 2006. - № 1. - С. 22-25.
2. Биохимические методы анализа показателей обмена биополимеров соединительной ткани / П.Н. Шараев, В.Н. Пишков, О.Н. Зубарев [и др.]. -Ижевск: Ижевский государственный медицинский институт, 1990. - 14 с.
3. Метод определения активности каталазы / [М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, В.Е. Токарев] // Лабораторное дело. - 1988. - № 1. - С. 1618.
4. Стальная И. Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии ; под. ред.
B.Н. Ореховича. - М.: Медицина, 1977. - С. 66-68.
5. Holbrook T. Complete coverage of the denuded root surface with a one-stage gingival graft / T. Holbrook,
C. Ochsenbein // Int. J. Periodontics Resto^t^ Dent. - 1983.- Vol. 3, № 3. - P. 9-27.
6. Miller P.D. Root coverage using a free soft tissue autogenous graft following citric acid application. I Technique Int. / P.D. Miller // J. Periodont. Rest. Dent. - 1982. - № 2. - P. 65-70.
7. Sullivan H.C. Free autogenous gingival grafts. III. Utilization of grafts in the treatment of gingival recession / H.C. Sullivan, J.H. Atkins // J. Periodontics. -1968. - № 6. - P. 60-152.
8. Стерретт Д. Устранение рецессий большого размера с помощью соединительнотканного трансплантата с участком эпителия / Д. Стерретт // Peno IQ. - 2009. - № 17. - С. 91-96.
9. Oates T. Surgical therapies for the treatment of gingival recession. A systematic review / T. Oates, M. Robinson, J. Gunsolley // Annals of Periodontology. -2003. - Vol. 1, № 8. - P. 303-320.
10. Етика л1каря та права людини: положення про ви-користання тварин у бюмедичних дослщах // Екс-периментальна та кглычна ф1зюлопя i бюх1м1я. -2003. - № 2 (22). - С. 108-109.
Стаття надшшла 12.02.2016 р.
Резюме
Актуальним питанням у стоматологи, в пародонтологп зокрема, залишаеться проблема рецесп ясен, основним методом лкування яко'Г е хiрургiчний. При початкових ступенях автори пропонують терапевти-чний пщхщ за допомогою ш'екцшного введення синтетичних препара^в iз метою вщновлення втрачених м'яких тканин шляхом лiфтингу. Для виявлення змш, як вщбувалися в сполучнш тканиш, використовува-ли бiохiмiчне дослщження, яке показало високу метаболiчну активнють у тканинах ясен пюля внутрш ньослизового введення пластикоконтуруючих препара^в.
Ключовi слова: aквалiфт, диметиламшоетанол (ДМАЕ), лiфтинг, рецеая ясен, сполучна тканина.
Резюме
Актуальным вопросом в стоматологии, в пародонтологии в частности, остается проблема рецессии десны, основным методом лечения которой является хирургический. При начальных степенях авторы предлагают терапевтический подход с помощью инъекционного введения синтетических препаратов с
можна помггити и практично достовфне зростання (рь0,001) у вщповщь на штенсифкацш процеав ПОЛ. Так, найбтьш значущ1 показники отриман в щур1в 1з препаратом ДМАЕ, де активнють даного ензиму складала 31,9±2,5 мккат/г, що в 4 рази пе-ревищувало результати групи контролю, як1 ста-новили 7,94±0,32 мккат/г.
Анал1з стану ПОЛ лтщ1в засвщчив, що в щур1в 2-3 груп умют МДА у гомогенатах слизовоТ оболо-нки ясен був найвищим I коливався в межах вщ 18,6±2,2 мкмоль/г до 20,1±2,5 мкмоль/г, що в 1,41,5 разу вище цього показника в тканинах ясен щур1в контрольно'!' групи (рь0,001-0,01). Пщви-щення вмюту МДА в гомогенатах слизовоТ оболо-нки ясен дослщних тварин можна пов'язувати з швелюванням град1ента концентрацп води та кис-ню кттинами ештелш.
Наочшше стан антиоксидантно-прооксидант-них систем ясен засвщчуе 1ндекс АП1 (антиокси-дантно-пероксидантний шдекс). При введенн1 в ясна препарату ДМАЕ окисно-вщновы процеси е достатньо активними з вираженим антиоксидант-ним захистом бюструктур I складають 16,3±1,2 од. При цьому така ж висока ефективнють при засто-суванн препарату аквал1фт (11,6±1,1 од.), хоча потенц1ал метабол1чноТ активност1 значно нижчий. Анал1зуючи стан процес1в ПОЛ, слщ зазначити, що застосування вс1х дослщжуваних препарат1в зумовлюе антиоксидантну д1ю, беручи активну участь у окисно-вщновних процесах у орган1зм1 шляхом п1двищення активност каталази, що, у свою чергу, сприяе пщвищенню антиоксидантного потенц1алу оргашзму в ц1лому. П1двищення вм1сту МДА при одночасному пщвищены р1вня каталази свщчить про в1дносну компенсац1ю I напруженють антипероксидного захисту.
П1сля застосування препарату ДМАЕ зрю умют ВО на 18,5 % вщносно контролю, так I його утво-рення - на 12,5 % зрю БЗО. Натомють пюля застосування препарату аквал1фт змш практично не вщбулося.
Висновок.
Анал1з результат1в бюх1м1чного досл1дження засв1дчив високу метабол1чну активнють у тканинах ясен пюля внутр1шньослизового введення пластикоконтуруючих препарат1в, що супрово-джувалося напружен1стю I посиленням антиоксидантного захисту субкттинних структур.
целью восстановления утраченных мягких тканей путем лифтинга. Для выявления изменений, которые происходили в соединительной ткани, использовали биохимическое исследование, показавшее высокую метаболическую активность в тканях десны после внутрислизистого введения пластикоконтурирующих препаратов.
Ключевые слова: аквалифт, диметиламиноэтанол (ДМАЭ), лифтинг, рецессия десен, соединительная ткань.
UDC 661.311.21-085.262.55]-092.9
BIOCHEMICAL ASPECTS INFLUENCE REMEDIES AQUALIFT AND DMAE ON SOFT TISSUES AFTER MODELING RECESSION GUMS ON THE RATS
Volodymyr Zubachyk, Mariana Iskiv
Danylo Halytskyi National Medical University in Lviv
Summary
Aesthetic aspects remains the actual issue of dentistry, especially periodontology. It concerns not only the harmony in shape, size and color of teeth, but also the outline of lips and gums. Gum recession mainly is being treated by means of surgery. At the initial stages we have proposed to use the therapeutic approach using injection of synthetic drugs in order to recover lost soft tissue by lifting. The injection of drugs has been conducted after modelling the gum recession of rats in order to create a pathological condition similar to humans. When working with rats we have followed the international recommendations on biomedical research using animals. To eliminate the simulated aesthetic defect there have been used drugs to being injected based on synthetic compounds: hydrogel aqualift and 2- dimethylaminoethanol 4-acetoaminobenzoat 6% (DMAE), into marginal edge of the gums in the area of the lower incisors of the oral cavity of rats. The animals got injections of appropriate medication into soft tissue of marginal gum twice with interval of 10 days. The experiment lasted for 30 days, after which the euthanasia of rats was performed by means of overdose of diethyl ether.
Using the rat gingival tissue there have been prepared homogenates in the ratio of the mass of tissue to volume of saline 1:40. At + 4 ° C the homogenates were centrifuged at 2500g for 30 min. To identify the changes occurring in the connective tissue there were used biochemical research: there was measured the activity of alkaline (ALP) acid phosphatase, and catalase; protein-bound (PB) and free oxyproline (FO), glycosaminogly-cans; in order to assess the intensity of lipid peroxidation in the gingival epithelial tissues in case of experimental recession in rats and following injections of medicines there have been assessed by accumulation of secondary products, such as the activity of malon dialdehyde (MDA). Condition of the antioxidant system was expressed by antioxidant-prooxidant index (API). The research showed high metabolic activity in the gingival tissue after introduction of internal mucosal plastic and contouring drugs.
Key words: aqualift, demethylaminomethanol (DMAE), lifting, recessing gums, connective tissue.
