Биохимические изменения в крови при β -талассемии. Метгемоглобиновый фактор Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК 616.155.194.125-053:612.111.1

Зейналова Л.Э.1, Алиева С.Р.2 ©

1Магистрант, 2доктор биологических наук, кафедра биохимии и биотехнологии, Бакинский государственный университет

БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В КРОВИ ПРИ р -ТАЛАССЕМИИ. МЕТГЕМОГЛОБИНОВЫЙ ФАКТОР

Аннотация

Было проведено изучение гематологических показателей периферической крови при различных формах [в-талассемии. Установлено увеличение содержания метгемоглобинового фактора (MtHb) в организме в зависимости от тяжести клинических течений заболеваний среди населения Азербайджана. Обследования, охватившие 54 человек, отличающихся по полу и возрасту, проводились поэтапно в различных выборках.

Ключевые слова: Р-талассемия, метгемоглобин, периферическая кровь Keywords: P-thalassemia, methemoglobin, peripheral blood

В общей структуре заболеваний системы крови велик удельный вес наследственных гемолитических анемий, в частности талассемии. Первые сведения o наличии тяжелой гемолитической анемии или гемоглобинопатии в азербайджанской популяции относятся к началу 60-х гг. [1,10]. Следом в отечественной литературе ст^о появляться большое количество работ, посвященных как выявлению, так и клиническому описанию рaзличныx форм тaлассемии y азербайджанцев [2, 221; 3,14].

В результате многолетних исследований было установлено, что в Азербайджанской Республике, в районах высокой распространенности данных заболеваний частота Р-талассемии составляет 15%.

Талассемия - большая гетерогенная группа наследственных нарушений синтеза молекулы гемоглобина, обусловленное различными мутациями в генах а- или Р-глобинового кластера [4,125]. Классифицируют их в зависимости от избирательного поражения полипептидных цепей глобина. B соответствии c этим выделяют:. а, Р и у -тaлaссемии. Наиболее важная в клиническом отношении Р-талассемия.

Р-талассемия характеризуется значительным клиническим, биохимическим и генетическим полиморфизмом. B соответствии c существующей клинической классификацией различают большую, соответствующую гомозиготной форме болезни, промежуточную, малую и минимальную формы тaлaссемии. Последние три формы относятся к гeтерозиготному состоянию [5, 211; 6, 2400].

Клиническое течение укaзaнного заболевания в отдельности и при сочетанных формах сопровождается изменением гематологических и биохимических показателей крови. Немаловажную роль в тяжести клинических течений заболеваний играет увеличение содержания MtHb в организме.

Однако, надо отметить, что недостаточно количество литературных источников, показывающих увеличение количества метгемоглобина (MtHb) при сочетании Р-талассемии с метгемоглобинемией. Поэтому с этих позиций есть необходимость более подробно остановиться на имеющихся литературных данных, связанных с нарушением обмена железа при данных компаундных формах.

Метгемоглобин (MtHb) - производное гемоглобина, в котором Fe2+ переходит Fe3+. У здоровых лиц MtHb, отличающийся наличием трехвалентного (окисленного) железа, составляет до 4% от всего гемоглобина. В крови нередко возрастает уровень метгемоглобина. Так как талассемический синдром сопровождается повышением содержания MtHb и это явление трактуется как вторичная метгемоглобинемия, не исключается возможность ассоциации Р-талассемии с первичным, т.е. с наследственным метгемоглобинемией [7, 71].

Цель нашей работы - исследование биохимических показателей крови при b-талассемии, а также изучение изменения метгемоглобинового фактора (MtHb) при различных формах Р-талассемии среди населения Азербайджана.

Материалы и методы исследования

Общеклинические и гематологические показатели периферической крови выполнялись

© Зейналова Л.Э., Алиева С.Р., 2013 г.

общепринятыми стандартизованными методами. Обследования, охватившие 54 человек, отличающихся по полу и возрасту, проводились поэтапно в различных выборках. Р-талассемия диагностирована на основании данных анамнеза, клинических проявлений заболевания, определением осмотической резистентности эритроцитов, фетального гемоглобина, НЬА2, а также медико-генетического обследования членов семьи пробанда. Электрофоретическое разделение гемоглобинов на ацетат-целлюлозных пленках проводили в трис-ЭДТА боратном (р-9,0) буфере по Маге^о^оуе [8,157]. Для определения HbF использовали метод Бетке [9,117]. Количество МШЬ и МШЬ-Я определяли методом изоэлектрофокусирования метгемоглобинредуктазы, проводили на приборе «МиШр^г-2117» фирмы LKB (Щвеция), используя амфолины рН 3,5-10 [10,110; 11,1877]. Определение МШЬ и МеШЬ^ исследовали также спектрофотометрическим методом [12,790].

Результаты и их обсуждения

Результаты лабораторных показателей у обследованных нами больных представлены в таблице 1.

Таблица 1

Лабораторная характеристика больных р-талассемией (М±т)

Показатели Клинические формы Достоверность

Большая I гр Промежуточная II гр

Гемоглобин, г/л 56,90±3,12 71,76±4,09 р<0,01

Эритроциты, х1012л 2,43±0,11 2,50±0,16

Тромбоциты, х106л 128,10±5,91 129,7±108

СОЭ, мм/час 29,70±2,20 31,71±5,08

Билирубин, мкмоль/л

Общий 30,27±2,16 44,19±5,28 р<0,02

Непрямой 19,97±1,78 33,57±4,64 р<0,01

Прямой 12,21±0,67 9,38±1,80

НЬ А2 (%) 2,49±0,12 3,60±0,37 р<0,01

НЬ Б (%) 46,81±4,68 41,8±3,35

Сывороточное железа, мкмоль/л 52,03±6,54 34,35±3,90 р<0,05

Как следует из указанной таблицы, сразу же обращает на себя внимание низкое содержание гемоглобина, эритроцитов и тромбоцитов у больных большой формой Р-талассемии по сравнению с промежуточной. Наибольший дефицит гемоглобина отмечен нами у больных большой формой Р-талассемии по сравнению с промежуточной (р<0,01). Показатели СОЭ повышены в обеих группах. При общей тенденции к увеличению всех фракций билирубина, более высокая концентрация общего и непрямого билирубина в сыворотке крови у больных промежуточной формой (р<0,02 и р<0,01 соответственно), что можно объяснить повышенным распадом эритроцитов при этой патологии и тем, что большее количество гепатоцитов повреждается при более длительном течении процесса. Достоверной разницы в содержании прямой фракции мы не отметили.

Количественный анализ состава фракций гемоглобина показал, что у больных промежуточной формой содержание гемоглобина А2 выше, чем у I группы больных (р<0,01), а среднее содержание гемоглобина F составило в группе 46,81±4,68, а во II группе 41,81±3,39. Концентрация сывороточного железа значительно выше при более тяжелой форме Р-талассемии (р<0,05), поскольку идет более массивный распад эритроцитов. Некоторые биохимические показатели у больных Р-талассемией представлены в таблице 2.

Активность лактатдегидрогеназы в сыворотке крови, как один из показателей, отражающий повреждение паренхимы печени и миокарда, как мы считаем зависит от гемосидероза.

Таблица 2

Биохимические показатели крови при р-талассемии

Показатели Клинические формы Достовер ность

Большая (I гр) Промежуточная (II гр) Малая (III гр) Контрольная ОУгр)

Лактатдегидро киназа, 398,2±36,7 233,3±17,9 220,9±39,3 146,1±11,9 Р:- II <0,001 Р:- ш <0,001 Р:-:v <0,001 Р::-:v <0,001

в-глутамин- транспептидаза , 13,7±1,42 19,9±2,16 45,0±11,4 64,3±9,18 P:-:: <0,02 Рнп <0,01 P:-:v <0,001 Рп-ш <0,05 Рп-^ <0,001

Щелочная фосфатаза 250,9±33,9 187,4±18,3 97,3±14,4 92,4±12,1 P:-ш <0,001 P:-:v <0,001 Рп-ш <0,001 P::-:v <0,001

Креатининкиназа, 22,6±1,92 35,4±3,85 55,6±6,37 150,4±20,4 Рш <0,01 P:-ш <0,001 P:-:v <0,001 Рп-Ш <0,01

Креатинин, 31,2±0,27 40,4±2,56 42,3±3,31 78,3±8,14 P:-:: <0,02 Рып 0,0201 P:-:v <0,001 P::-:v <0,001 Pш-:v 0,001

Мочевина, мкмоль/л 3,51±0,27 12,9±1,76 7,64±5,12 6,4±1,12 P:-:: <0,001 Р^ <0,01 Pn.Iv <0,01

Мочевая кислота, мкмоль/л 456,6±27,6 687,3±62,1 399,5±52,4 440,2±64,3 Рш <0,001 Рп-ш <0,001 P::-:v<0,01

Наличие тромбоцитопении резко выражено в I группе больных по сравнению со II группой и с контролем (р<0,001, р<0,001, р<0,001 соответственно). При малой форме разница не достоверна.

Активность G-глутаминтранспептидазы, креатининкиназа и креатинина, резко снижена у всех обследованных нами, по сравнению с контролем. Активность щелочной фосфатазы оказалась, напротив, повышенной у больных большой и промежуточной формами по сравнению с контролем (р<0,001, р<0,001), а у больных малой формой практически не отличалась.

Основными критериями диагноза Р-талассемии были повышение фетального гемоглобина (HbF) и гемоглобина А2, которые также обнаруживали у родителей этих больных, а в мазках периферической крови -анизопойкилоцитоз, мишеневидные гипохромные клетки, нормобластоз, а в некоторых случаях базофильную пунктацию эритроцитов, ретикулоцитоз, осмотическая резистентность эритроцитов повышена.

Для выполнения поставленной задачи было обследовано 54 больных Р-талассемией: 12 детей в возрасте 2-15 лет. Содержание железа в сыворотке было повышено от 34,35 до 52,03 мкмоль/л (при норме 37,1 ± 4,65).

Для выявления различных форм метгемоглобинемии с Р-талассемией было обследовано 8 гомозиготных и 45 гетерозиготных больных с Р-талассемией в возрасте от 8 месяцев до 50 лет. Из 8 гомозиготных больных 5 были женского, 3 мужского пола. Среди гетерозиготных больных были 16 мужчин и 29 женщин.

Уровень МШЬ колебался от 9,5% до 67% т.е. в 9,7 раз было выше по сравнению с контрольной группой (норма 1-2%). Обнаружено достоверное повышение активности (¿><0,001) МШЬ^ на 37,7%, чем в контрольной группе.

Также наблюдались глубокие нарушения содержания МШЬ, приводящие в конечном итоге к развитию сердечной недостаточности у больных с большой и промежуточной формами Р-талассемии.

При гомозиготном носительстве b-талассемии наблюдались более достоверные повышения MtHb и снижения MtHb-R, чем при носительстве гетерозиготной b-талассемии.

В конце можно сделать вывод, что с каждым годом растет количество больных талассемией, основная масса которых составляет детский контингент и лица молодого возраста. Наследственное заболевание, как талассемия, сохраняется у человека в течение всей его жизни. Единственный радикальный способ лечения - пересадка костного мозга.

Литература

1. Ахундова A.M. Талассемия в Азербайджане // Проблемы гематологии. - Баку. - 1988. - №7. - C.10-19.

2. Абдуллаев Г.М., Эфендиев Э.И., Сафаров Ю.И. К вопросу о клинико-генеалогической идентификации различных гемоглобинопатий в Азербайджане / Тезисы докладов Всесоюзного съезда гематологов и трансфузиологов. - Баку. - 1979. - 603 с.

3. Аскерова Т.А., Назарли А.Г., Мовсум-заде К.М., Токарев Ю.Н. Постнатальная диагностика гемоглобинопатий и эритроцитарных энзимопатий //Гематология и трансфузиология. - Баку. - 1998. - №2.

- C.14-18.

4. Хуцишвили Г.Э. Врожденная энзимопеническая метгемоглобинемия у двух братьев // Терапевтический архив, - Москва. -1977. т. 49. - №8.- С.125-126.

5. El-Hazmi M.A.F., Ali-Swailem A.R., Sickle-cell.p-thalassemia in Sandi Arabian // Hum. Hered. - 1987. - v.37. -N 4. - P.211-216.

6. Orkin S.H., Old J.M., Weatherall D.J., Nathan D.C. Partial deletion of p-globin gene DNA in certain patients with P-thalassemia / Proc. Nat. Acad. Sci. - USA. - 1979. - v.76. - P.2400-2404.

7. Долгов В.В., Луговская С.А., Морозова В.Т., Почтарь М.Е. Лабораторная диагностика анемий. - Москва, Издательство «Триада», - 2009. - 148с.

8. Jamal A. Hereditary methemoglobinemia // J. CoU Physieians Surg Pak. - 2006. - 16(2). - P. 157-159.

9. Jeffrey Black. Isoelectrifocusing in agarose gel for detection and identification of haemoglobin variants // Haemoglobin. - 1984. - v.8. - N 2. -P. 117-127.

10. Мовсум-заде К.М., Ахундова А.И., Расулов Э.М. Сочетание генетически различных эритроцитарных нарушений b-талассемии с аномалиями структур HbS и дефицитом Г-6-ФД // Известия АН Азербайджанской ССР, Серия Биологических наук. - 1986. - № 1. - C. 110-116.

11. Betke K., Merbi H., Schicht J. Estimation of small percentages of fetal hemoglobin // Nature. - 1959. - 184. -P. 1877-1880.

12. Marengo-Rove A.J. Rapid electrophoresis and quantitation of haemoglobins on cellulose acetate // J. Clin. Pathol.

- 1965. - v. 18. - p. 790-792.