CC BY
46ДИАГНОСТИКА
J5KBQ
Биохимические и генетические критерии фолатного метаболизма и нарушения эмбриогенеза человека
Деревянчук Е. Г., Машкина Е. В., Коваленко К. А., Александрова А. А., НИИ биологии ЮФУ; Шестопалов А. В., Рымашевский А. Н, ГОУ ВПО РостГМУ МЗ РФ; Келлер О. В., МЗ РО; Шкурат Т. П., НИИ биологии ЮФУ, г. Ростов-на-Дону
Введение
Среди важнейших задач эмбриологии человека одной из первых является изучение механизмов регуляции эмбриогенеза, а также поиск причин и диагностических маркеров его нарушения. Несмотря на наблюдаемую положительную динамику рождаемости в последние годы, демографическая ситуация в России все еще остается неблагоприятной. Высокая частота патологии развития и внутриутробной гибели плода, не имеющая тенденции к снижению, обуславливает высокую значимость рассматриваемой проблемы.
Статистико-популяционные исследования, посвященные изучению роли биохимических и молекулярно-генетических факторов в этиологии осложнений эмбриогенеза человека, ведутся с середины 90-х годов прошлого века. На сегодняшний день в результате многочисленных исследований накоплен большой массив клинических данных, которые позволяют выделить аномальное содержание гомоцистеина, дефицит фолиевой кислоты, а также полиморфизмы генов фолатного цикла в отдельную группу причин, вызывающих различные нарушения репродуктивного здоровья человека. Гипергомоцистеинемия, проявляющаяся повышенной концентрацией гомоцистеина в крови и связанная с вовлечением генетических и негенетических механизмов, играет роль в патогенезе микроциркулярных и тромботических осложнений, зачастую приводящих к эмбриональной потере плода. В связи с этим представляет интерес исследование наличия отклоняющихся от нормы уровней гомоци-стеина и фолата, а также носительства полиморфизмов генов ферментов, участвующих в метаболизме гомоцистеина, у женщин с неблагоприятным исходом беременности.
Целью нашего исследования было оценить роль отклоняющихся от нормы уровней гомоцистеина и фолата, а также полиморфизмов генов фолатного обмена в развитии нарушений эмбриогенеза человека.
Материалы и методы
Материалом для исследования концентраций гомоцистеина и фолиевой кислоты послужила сыворотка крови беременных женщин Ростовской области с эмбриональной потерей плода вследствие самопроизвольного аборта (I группа) или неразвивающейся беременности (II группа) в I триместре гестации (табл. 1), находившихся на учете в родовспомогательных учреждениях г. Ростова-на-Дону.
В контрольную III группу были включены женщины с физиологически протекающей беременностью. У обследуемых женщин венозная кровь была взята натощак. До проведения биохимического исследования были проанализированы анамнестические данные всех женщин. Из исследования были исключены женщины, имевшие в анамнезе заболевания желудочно-кишечного тракта, сопровождающиеся нарушением всасывания витаминов (синдром мальабсорбции) и сердечно-сосудистой системы, почечную недостаточность, витаминодефицитные состояния (витамины В6, В12), сахарный диабет, гипотиреоз. В исследование были включены русские женщины, родившиеся в г. Ростове-на-Дону и Ростовской области, то есть представительницы ростовской популяции.
Уровень гомоцистеина в сыворотке крови определяли с помощью иммуноферментного метода тест-системой Axis Homocysteine EIA (Axis-Shield, Норвегия) на автоматическом иммуноферментном анализаторе ALISEI Q.S. (Италия). Определение уровня фолиевой кислоты в сыворотке крови осуществляли с использованием микропланшета, покрытого Lactobacillus rhamnosus, производства ID-Vit Folsaure / Folie Acid (Germany).
Для молекулярно-генетического исследования полиморфизмов генов фолатного цикла C677T MTHFR, A66G MTRR и A2756G MTR образцы цельной крови были отобраны в I триместре гестации у 7 беременных женщин, беременность которых окончилась спонтанным абортом, у 10 — с диагнозом неразвивающаяся беременность, у 30 — с физиологически протекавшей беременностью. Репрезентативную контрольную группу составили 278 практически здоровых мужчин и небеременных женщин, родившихся в Ростовской области.
Таблица 1
Количество исследованных женщин в зависимости от диагноза и измеренного показателя
в Iтриместре гестации
Тип группы Диагноз Измеренный показатель (количество человек)
[омоцистеин Фолиевая кислота
I группа Спонтанный аборт 8 7
II группа Неразвивающаяся беременность 7 6
III группа (контроль) Физиологическая беременность 27 25
Выделение геномной ДНК из лимфоцитов периферической крови осуществлялось с помощью термо-коагуляционного метода с использованием реагентов «ДНК-Экспресс» (Литех, Москва). Полиморфизмы генов C677T MTHFR, A66G MTRR и A2756G MTR исследовали с использованием наборов реагентов SNP-экспресс (Ли-тех, Москва).
Статистический анализ биохимических и молекуляр-но-генетических показателей проводили с помощью лицензионного пакета StatPlus Professional версия 2009, а также GraphPad InStat версия 3.06 для Windows.
Исследования были проведены в соответствии с принципами и нормами биоэтики и с информированного письменного согласия обследованных женщин.
Результаты исследования и их обсуждение
Одной из задач нашего исследования было определить диапазоны содержания гомоцистеина и фолата в сыворотке крови женщин Ростовской области в I триместре физиологически протекавшей беременности.
Нами было установлено, что в I триместре физиологически протекающей беременности диапазон содержания гомоцистеина лежит в пределах 2,08—14,35 мкмоль/л. При этом корреляционный анализ по методу Спирмена показал статистически значимую обратную зависимость уровня гомоцистеина от недели гестации (R = -0,65; 95% ДИ: (-0,86) — (-0,25), при p<0,01) (рис. 1).
Наблюдаемое снижение содержания гомоцистеина при физиологически протекающей беременности может быть связано с увеличением потребности растущего плода в метионине [14], изменением в эндокринных функциях, увеличением почечного клиренса гомоцистеина и снижением количества альбуминов плазмы, с которыми гомоцистеин связан [15].
В свою очередь, диапазон значений фолата в I триместре физиологически протекающей беременности составил 2,42—15,56 мкг/л.
Далее мы измерили уровни гомоцистеина и фолата в сыворотке крови при патологическом течении I триместра гестации, а именно — при спонтанном аборте и неразвивающейся беременности. К основным отличиям между собственно спонтанным абортом и неразвивающейся беременностью относят способ отторжения эмбриона (самопроизвольно или путем хирургического вмешательства), время прекращения развития зародыша или плода (эмбриональный или фетальный периоды развития) и патогенез [1].
При изучении уровня гомоцистеина нами было обнаружено, что его концентрация ниже на 0,5 и 1,1 мкмоль/л в I и II исследуемых группах соответственно по сравнению с контрольной (табл. 2).
Споры относительно роли несоответствующего норме содержания гомоцистеина помимо других этиологических
ч
3 г
1 h
к и -
V ■
j ■ L
j ■
1
Чгаг rr гк1
Рис. 1. Корреляционная обратная зависимость уровня гомоцистеина (мкмоль/л) от недели гестации в I триместре физиологически
протекающей беременности
Рис. 2. Содержание фолиевой кислоты (мкг/л) в сыворотке крови женщин с различным течением беременности
факторов в генезе таких нарушений эмбрионального развития человека, как спонтанный аборт и неразвивающаяся беременность, ведутся достаточно давно [3, 9]. Зачастую исследователи отмечают, что повышенное содержание гомоцистеина в сыворотке крови беременных женщин приводит к микротромбообразованию, нарушению микроциркуляции и, как следствие, к осложнениям беременности. Однако до сих пор неизвестно, является ли повышенная концентрация гомоцистеина истинной причиной вышеупомянутых нарушений эмбриогенеза или всего лишь фактором риска их развития. К тому же, существует ряд исследований, отрицающих такую ассоциацию, например, в недавней работе Хоффман было показано отсутствие корреляции между повышенным уровнем гомоцистеина и риском спонтанного прерывания беременности [10].
В I группе женщин было отмечено более низкое содержание фолата, чем в контрольной группе (р=0,15), тогда как во II исследуемой группе, напротив, более высокое (р=0,16) (рис. 2).
Одной из функций фолатов является участие в реакциях одноуглеродного переноса, включая биосинтез пуринов и тимидина. Биосинтез пуринов и тимидина — это необходимое событие, лежащее в основе синтеза
Таблица 2
Содержание гомоцистеина (мкмоль/л) в сыворотке крови женщин в Iтриместре беременности
с различным диагнозом
Тип группы N M±m 95% ДИ Р
I группа 8 7,73±0,58 6,37-9,09 0,62
II группа 7 7,10±0,93 4,84-9,37
III группа 27 8,21±0,59 7,00-9,43
Примечание: N - размер выборки; М - среднее; т - стандартная ошибка среднего; ДИ - доверительный интервал; р - уровень значимости.
ДИАГНОСТИКА
L ЯКУ
ДНК и РНК. Таким образом, совершенно очевидно, что несостоятельность фолат-зависимых реакций может ограничивать рост и развитие плода и, в конечном счете, способствовать высокому риску самопроизвольного прерывания беременности [7]. Тем не менее, как и в случае с ассоциацией гомоцистеина и обозначенных нарушений эмбриогенеза, трудно сделать окончательные выводы о влиянии дефицита фолиевой кислоты в сыворотке крови на исход беременности. На сегодняшний день нет достаточного количества фактов, подтверждающих данную ассоциацию, и, более того, имеют место расхождения в результатах. Гиндлер и соавт. сообщили, что употребление добавок фолиевой кислоты до и во время беременности не влияло на риск развития спонтанного аборта [10]. В нашем исследовании снижение уровня фолата на 36% в сыворотке крови женщин, перенесших спонтанный аборт, может служить свидетельством негативного влияния несоответствующего норме содержания фолиевой кислоты на течение эмбриогенеза человека. С другой стороны, отмеченное повышение концентрации фолата практически в 2 раза по сравнению с контролем при неразвивающейся беременности может отражать то, что уровень фолата не является определяющим фактором риска развития данной патологии. Кроме того, так как использованная нами методика позволяет определять все формы фолиевой кислоты, имеющиеся в сыворотке крови, то, вероятно, для решения поставленных перед нами задач и более точного анализа необходимо измерять содержание 5-метилтетрагидрофолата, 5,10-метилентетрагидрофолата и тетрагидрофолата по отдельности.
На сегодняшний день показана возможность причастности к репродуктивной патологии человека помимо биохимических критериев низкофункциональных аллелей генов фолатного обмена [2]. В процессе фолатного
обмена и реметилирования гомоцистеина в метионин фермент метионинсинтаза (MTR) катализирует процесс переноса метильной группы, высвобождаемой в процессе восстановления ферментом 5,10-метилен-тетрагидрофолатредуктазой (MTHFR) 5,10-метилен-тетрагидрофолата до 5-метилтетрагидрофолата. В свою очередь, фермент метионинсинтаза редуктаза (MTRR) восстанавливает функцию метионинсинтазы. Мутации в генах рассматриваемых ферментов, в особенности C677T MTHFR, A2756G MTR, A66G MTRR, приводят к снижению каталитической активности и оказывают существенное влияние на интенсивность фолатного метаболизма, что подразумевает накопление гомоцистеина.
Первоначально нами была проанализирована частота встречаемости аллелей и генотипов генов фолатного обмена у представителей ростовской популяции, результаты представлены в таблице 3.
Если для генов MTHFR и MTR в ростовской популяции превалировал нормальный аллель и доля его гомо-и гетерозигот, то для гена MTRR наблюдалась обратная ситуация — частота аллеля 66G (0,56) была выше, чем аллеля A66 (0,44).
Частота встречаемости мутантного аллеля 667Т гена MTHFR в различных популяциях мира варьирует с размахом от 0,02 в африканских до 0,50 в латиноамериканских популяциях [5]. В ростовской популяции частота аллеля 667T MTHFR составила 0,32. Аллель 2756G MTR у представителей ростовской популяции встречался с частотой 0,22, что несколько выше, чем, например, у лиц французско-канадской популяции, у которых его частота составила 0,15 [12]. Аллель 66G гена MTRR также встречается с высокой частотой в популяциях по всему миру: от 0,57 у лиц европейской расы до 0,21 в мексиканской популяции [13]. В нашем исследовании у представителей
Таблица 3
Распределение частот аллелей и генотипов генов фолатного обмена MTHFR, MTR и MTRR
в исследуемых группах
Ген Аллели и генотипы Ростовская популяция, N=278 III группа, N=27 I группа, N=8 II группа, N=7
С 0,68 0,78 0,69 0,79
T 0,32 0,22 0,31 0,21
C677T MTHFR CC 46,0% 59,0% 37,0% 57,0%
CT 45,0% 37,0% 63,0% 43,0%
TT 9,0% 4,0% 0,0% 0,0%
A 0,78 0,85 0,88 0,71
G 0,22 0,15 0,12 0,29
A2756G MTR AA 61,0% 74,0% 75,0% 71,0%
AG 34,0% 22,0% 25,0% 0,0%
GG 5,0% 4,0% 0,0% 29,0%
A 0,44 0,54 0,56 0,57
G 0,56 0,46 0,44 0,43
A66G MTRR AA 20,0% 26,0% 50,0% 29,0%
AG 47,0% 56,0% 12,0% 57,0%
GG 33,0% 18,0% 38,0% 14,0%
навву
Таблица 4
Уровень гомоцистеина (мкмоль/л) в сыворотке крови в зависимости от генотипа генов фолатного обмена MTHFR, MTR и MTRR и диагноза обследуемых женщин
Ген Генотип N III группа N I группа N II группа P2
СС 16 7,38±0,56 3 7,28±0,16 4 6,34±0,89 0,66
C677T MTHFR CT+TT 11 9,42±1,14 5 8,00±0,94 3 8,12±1,87 0,68
Р1 - 0,09 - 0,49 - 0,39 -
AA 20 8,32±0,75 6 7,59±0,75 5 7,66±1,18 0,83
A2756G MTR AG+GG 7 7,91±0,82 2 8,16±0,86 2 5,70±1,10 0,39
Р1 - 0,78 - 0,70 - 0,38 -
AA 7 8,14±0,73 4 8,34±0,33 2 8,15±0,63 0,98
A66G MTRR AG+GG 20 8,24±0,76 4 7,12±1,09 5 6,68±1,27 0,57
Р1 - 0,94 - 0,33 - 0,52 -
Примечание: здесь и далее р-| - уровень значимости различий в уровне гомоцистеина между женщинами, имеющими и не имеющими патологический аллель, и относящимися к одной из трех исследуемых групп;
р2 - уровень значимости различий в уровнях гомоцистеина между тремя исследуемыми группами женщин, имеющих один и тот же генотип соответствующего гена.
ростовской популяции частота аллеля 66G была равна 0,56.
С целью оценки вклада генетических дефектов фолатного обмена в нарушение эмбрионального развития человека нами было проведено молекулярно-генетическое исследование носительства полиморфизмов генов фо-латного обмена в трех группах обследуемых женщин с различным течением гестационного процесса. Из таблицы 3 видно, что в I группе отмечается увеличение частоты патологического аллеля 677Т гена MTHFR, а во II группе — аллеля 2756G гена MTR, при этом отсутствие достоверного уровня значимости может быть обусловлено малыми размерами выборки. Для гена MTRR различий в частотах аллелей 66A/66G выявлено не было.
При анализе частот генотипов было установлено, что во всех исследуемых группах они не отклонялись от равновесия Харди-Вайнберга. В группе женщин с диагнозом «спонтанный аборт» доля гетерозигот 677C/T MTHFR и гомозигот 66G/G MTRR была выше по сравнению с контролем и группой представителей ростовской популяции и составила 63% и 38% соответственно (табл. 3). Однако риск развития спонтанного аборта в присутствии мутант-ных аллелей 677T MTHFR и 66G MTRR был незначительным (ОШ=1,59 и 0,90; 95% ДИ: 0,46—5,48 и 0,29—2,78, при p=0,51 и 1,00 соответственно). Во II группе был отмечен высокий процент гомозигот 2756G/G MTR, при этом риск развития неразвивающейся беременности в присутствии гомозиготного генотипа гена MTR был в 2 раза выше по отношению к контролю (ОШ=2,3; 95% ДИ: 0,58—9,16, при p=0,25).
Наблюдаемые тенденции согласуются с результатами предыдущих работ по изучению ассоциативных связей полиморфизмов генов фолатного обмена и развития нарушений эмбриогенеза человека. Kumar и соавт. при исследовании ассоциации полиморфизма C677T гена MTHFR с привычным невынашиванием беременности установили, что в группе с изучаемой патологией гетерозигот 677C/T было значительно больше по сравнению с контролем. При этом среди обследуемых женщин с диагнозом привычного невынашивания беременности гомозиготы 677T/T гена MTHFR отсутствовали [11].
Сочетанный анализ уровня гомоцистеина в зависимости от генотипов СС, СТ+ТТ гена MTHFR, AA, AG+GG гена MTR и AA, AG+GG гена MTRR изолированно в группах I, II и III достоверных различий не выявил (табл. 4).
Однако можно отметить тенденцию повышения уровня гомоцистеина на 1 —2 мкмоль/л в присутствии аллеля 677T гена MTHFR у женщин всех трех исследуемых групп. При носительстве аллеля 2756G гена MTR во II и III группах наблюдалось незначительное снижение концентрации гомоцистеина, тогда как в I группе, наоборот, его повышение. В отношении аллеля 66G гена MTRR в обеих группах с неблагоприятным исходом беременности содержание гомоцистеина в сыворотке крови было ниже у женщин-носительниц данного аллеля. Исходя из этого, можно предположить, что полиморфные состояния генов MTR и MTRR, вероятно, оказывают второстепенное и незначительное влияние на уровень гомоцистеина в сыворотке крови. Американские исследователи изучали влияние присутствия генотипов AA, AG и GG генов MTR и MTRR на развитие умеренной гипергомоцистеине-мии и установили, что наличие полиморфизмов A2756G и A66G соответствующих генов не оказывает какого-либо эффекта на концентрацию гомоцистеина [9]. В исследовании итальянских ученых из Университета Палермо было обнаружено, что у лиц с сердечно-сосудистыми заболеваниями концентрация гомоцистеина в крови так же не зависела от присутствия полиморфизма A66G гена MTRR [12].
При сравнении полученных значений уровня гомоци-стеина в зависимости от генотипа генов MTHFR, MTR и MTRR между тремя исследуемыми группами оказалось, что статистически значимых отличий содержания гомоцистеина в случае спонтанного аборта или неразвивающейся беременности по сравнению с контролем нет (табл. 4).
Исследование содержания фолата в сыворотке крови показало, что самый высокий его уровень наблюдался во II группе женщин, независимо от присутствующего у них генотипа изучаемых генов фолатного обмена (табл. 5). В группе женщин, чья беременность окончилась спонтанным абортом, наблюдалась тенденция снижения уров-
ДИАГНОСТИКА
Таблица 5
Уровень фолиевой кислоты (мкг/л) в сыворотке крови в зависимости от генотипа генов фолатного обмена MTHFR, MTR и MTRR и диагноза обследуемых женщин
Ген Генотип N III группа N I группа N II группа P2
СС 16 9,46±1,70 3 5,75±1,75 3 14,78±6,22 0,31
C677T MTHFR CT+TT 9 8,14±2,15 4 4,06±1,19 3 17,85±8,44 0,1
Pi - 0,64 - 0,44 - 0,78 -
AA 18 10,18±1,62 5 4,44±0,88 4 17,70±5,97 0,09
A2756G MTR AG+GG 7 5,90±1,82 2 5,64±3,37 2 13,55±10,55 0,41
Pi - 0,15 - 0,63 - 0,73 -
AA 6 8,03±2,19 3 3,41±0,93 2 9,20±8,06 0,49
A66G MTRR AG+GG 19 9,29±1,61 4 5,81±1,45 4 19,88±5,71 0,03*
Pi - 0,69 - 0,26 - 0,34 -
Примечание: * - уровень значимости различий в уровне фолата между II и III группами женщин.
ня фолата в сыворотке крови по сравнению с II и III группами, также независимо от генотипа изучаемых генов.
Концентрация фолата у женщин с неразвивающейся беременностью, имевших аллель 66G гена MTRR, была достоверно выше (более чем в 2 раза) по сравнению с контролем. Принимая во внимание тот факт, что при неразвивающейся беременности гибель эмбриона происходит без клинических признаков выкидыша, и плодное яйцо может находиться в матке в течение длительного времени, можно заключить, что уровень фолата к моменту диагностирования данного нарушения беременности возвращается к своей физиологической норме. Более низкое содержание фолата при физиологической беременности объясняется увеличением потребности на рост плода и маточно-плацентарных органов, повышением катаболизма и экскреции фолиевой кислоты. Таким образом, измерение уровня фолата, вероятно, более целесообразно проводить как можно раньше, то есть в течение первых недель установленной беременности для точного прогнозирования и своевременной диагностики риска эмбриональной потери плода.
Заключение
В результате проведенного нами исследования было обнаружено, что на ранних стадиях эмбриогенеза человека в сыворотке крови беременных женщин происходит постепенное снижение концентрации гомоцистеина. При этом было установлено, что в I триместре физиологически протекающей беременности диапазон содержания гомоцистеина варьирует от 0,81 до 14,346 мкмоль/л. Концентрация измеренного нами фолата в сыворотке крови беременных женщин в норме находилась в пределах 2,42—15,56 мкг/л. Кроме того, в нашей работе было показано, что при спонтанном прерывании беременности наблюдается тенденция снижения уровня фолата при соответствующем норме уровне гомоцистеина.
В ходе исследования носительства полиморфизмов генов фолатного обмена было обнаружено, что в ростовской популяции превалируют нормальные аллели и доля благоприятных генотипов генов MTHFR и MTR, тогда как для гена MTRR была отмечена высокая частота встречаемости аллеля 66G. В группе женщин с диагностированным спонтанным абортом доли гетерозигот
677C/T MTHFR (63%) и гомозигот 66G/G MTRR (38%) были выше по сравнению с группой женщин с физиологически протекавшей беременностью и популяционной группой. В случае неразвивающейся беременности присутствие гомозиготного генотипа по полиморфизму гена MTR вероятно повышает риск развития данной патологии в 2 раза.
При сочетанном анализе биохимических и генетических критериев фолатного обмена нами было установлено, что при наличии полиморфизмов генов MTHFR, MTR и MTRR наблюдается тенденция повышения гомо-цистеина в сыворотке крови женщин всех трех обследуемых групп. Было показано, что аллели 2756G MTR и 66G MTRR оказывают незначительное или второстепенное влияние на концентрацию гомоцистеина в сыворотке крови. В результате проведенного нами исследования содержания фолата в сыворотке крови самый высокий его уровень был отмечен у женщин с неразвивающейся беременностью, независимо от присутствующего у них генотипа изучаемых генов фолатного обмена.
Таким образом, для более эффективной диагностики и точного прогнозирования риска эмбриональных потерь рекомендовано вести наблюдение за уровнями гомо-цистеина и фолата в сыворотке крови матерей, а также уделять внимание носительству ими полиморфизма C677T гена MTHFR, отягощающего течение беременности. Для своевременного выявления риска возникновения неразвивающейся беременности целесообразно измерять биохимические показатели и присутствие полиморфизмов фолатного обмена на первых неделях гестации.
Работа выполнена в рамках гранта Федерального агентства по науке и инновациям по федеральной целевой программе «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России 2009—2013», госконтракт №02.740.11.0501, а также при частичном финансировании ФЦП МОН РФ Центра коллективного пользования научным оборудованием ЮФУ «Высокие технологии», государственный контракт № 16.552.11.7024.
Литература
1. Айламазян Э. К. Акушерство: Учебник для медицинских вузов. - СПб: СпецЛит, 2003. - 528 с.
Ш11Ы111
IIEVI
ДИАГНОСТИКА
2. Бескоровайная Т. С. Влияние некоторых генетических факторов на нарушение репродукции у человека: Автореф. дисс... к.м.н. — М, 2005. — 89 с.
3. Доброхотова Ю. Э., Сухих Г. Т., Файзуллин Л. З. и др. Роль гипергомоцистеинемии в генезе неразвивающейся беременности и начавшегося выкидыша // Русс. мед. журнал. — 2005. — Т. 13. — №17. — С. 1110—1112.
4. Botto L.D., Yang Q. 5,10-Methylenetetrahydrofolate reductase gene variants and congenital anomalies: a HuGE review // Am. J. Epidemiol. — 2000. — Vol. 151. — №9. — P. 862—877.
5. George L. et al. Plasma folate levels and risk of spontaneous abortion // JAMA. — 2002. — Vol. 288. — №15. — P. 1867—1873.
6. Gindler J. et al. Folic acid supplements during pregnancy and risk of miscarriage // Lancet. — 2001. — Vol. 358. — №9284. — P. 796—800.
7. Gris J.C. et al. Antiphospholipid/antiprotein antibodies, hemostasis-related autoantibodies, and plasma homocysteine as risk factors for a first early pregnancy loss: a matched case-control study // Blood. — 2003. — Vol. 102. — №10. — P. 3504—3513.
8. Hoffman M.L. et al. Abnormal folate metabolism as a risk factor for first-trimester spontaneous abortion // J. Reprod. Med. — 2008. — Vol. 53. — №3. — P. 207—212.
9. Jacques P.F., Bostom A.G., Selhub J. et al. Effects of polymorphisms of methionine synthase and methionine synthase reductase on total plasma homocysteine in the
NHLBI Family Heart Study // Atherosclerosis. - 2003. -Vol. 166. - №1. - P. 49-55.
10. Kumar K.S. et al. Plasma homocysteine levels correlated to interactions between folate status and methylene tetrahydrofolate reductase gene mutation in women with unexplained recurrent pregnancy loss // J. Obstet. Gynaecol. -2003. - Vol. 23. - №1. - P. 55-58.
11. Leclerc D. et al. Human methionine synthase: cDNA cloning and identification of mutations in patients of the cblG complementation group of folate/cobalamin disorders // Hum. Mol. Genet. - 1996. - Vol. 5. - №12. - P. 1867-1874.
12. Scazzone C., Acuto S., Guglielmini E. et al. Methionine synthase reductase (MTRR) A66G polymorphism is not related to plasma homocysteine concentration and the risk for vascular disease // Exp. Mol. Pathol. - 2009. - Vol. 86. -№2. - P. 131-133.
13. Shi M. et al. Genotype frequencies and linkage disequilibrium in the CEPH human diversity panel for variants in folate pathway genes MTHFR, MTHFD, MTRR, RFC1, and GCP2 // Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. - 2003. -Vol. 67. - №8. - P. 545-549.
14. Steegers-Theunissen R.P. et al. Neural-tube defects and derangement of homocysteine metabolism // N. Engl. J. Med. - 1991. - Vol. 324. - №3. - P. 199-200.
15. Walker M.C. et al. Changes in homocysteine levels during normal pregnancy // Am. J. Obstet Gynecol. - 1999. -Vol. 180. - №3. - P. 660-664.
Сканеры УЗИ "PACKAH'
Полностью цифров&я обрабопш Высокая плотность лучъй
Переносные приборы
С вОФИЙНЧОСТЯМИ стационарны*. Лелме. компактные
с ВДТЮН0МНЫМ
П "г1Тй л г* £ У.
КОнийчСныв. J HMtHHUB. iKijiDtPM^w н^лыичвСЮтыв
дэлчищ еыеою&н плати«™. Рабсчие частоты
ст 2,5 до 10 МГц. Дпнамнчйздая фокуафов«
Дапгюр. Пунктиром«^. КниОПйТПД Перампьчде настройки. Помощи Быв даннь»: нсслздон>мй Вычничиня и ИЗ«ЧЖи«Я Пиктпгрл.умы 3«клнменир Рэсчыаткэ эщгдаим.
НПП ТАТЕ КС"
Т30т7а, Cr-n<wmpi)iK, ул. Доныля, & 1$, nw.lH, ТыЛрт; W!)321-$$-74, №-$7-7Ь fi«JfcKWM?
ООО «ПОТЕНЦИАЛ» ^^¡¡¡SSHSSSSOSC'
ЭЛЕКТРОДЫ ДЛЯ ЭНЦЕФАЛОГРАФИИ ЭЛ ЭГМ —
М чашечковые, мостиковые, плоские М
ШЛЕМЫ ЭЭГ СИЛИКОНОВЫЕ
ЭЛЕКТРОДЫ РЭГ
Продукция сертифицирована. Сертификат соответствия РОСС RU.ME77.BO6637 от 16.06.2010г. Рег. уд. ФС 2010/06951 от 03.03.2010 г.
Тел.:(812)313-36-32, 298-99-56; +7(921)964-02-54
E-mail: potential-eeg@mail.ru | www.potential-eeg.ru
