CC BY
8Проблемы медицинской микологии, 2020, Т.22, №3
ем набора реагентов BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit (Thermo Fisher Scientific, США) и дополнительных праймеров CaERGl 1_I_R ACATTGGCAACCCCATGAGT; CaERG11_II_F TCCAGTTTTCGGTAAAGGGGTT; CaERGl 1_II_R GCAGAAGTATGTTGACCACCC; CaERG11_III_F
GTGGTGATATTGATCCAAATCGTG на приборе ABI PRISM 3500 Genetic Analyzer. Результаты проанализированы в программе Variant Reporter ver. 1.1., в качестве референсного взят штамм дикого типа X13296.
Результаты. Для изучаемого изолята установлены следующие МПК антими-котиков: амфотерицин В - 2 мг/л, флуконазол - 256 мг/л, вориконазол - 4 мг/л: итраконазол - 4 мг/л, позаконазол - 0,5 мг/л, 5-фторцитозин - 0,25 мг/л, каспо-фунгин - 0,03 мг/л, микафунгин - 0,03 мг/л, анидулафунгин - 0,06 мг/л. При определении нуклеотидного состава открытой рамки считывания (ОРС) ERG11 прочитано 1584 п.н. (из 1716 п.н.). Несмотря на низкий уровень полиморфизма изучаемой последовательности, выявлено две миссес-мутации - T395C и G1343A, обусловливающие аминокислотные замены Y132H и G448E, ассоциированные, по литературным данным, с 4-х и 2-м возрастанием МПК к флуконазолу.
Заключение. Мультирезистентность к азолам клинического изолята C. albicans - возбудителя острого диссеминированного кандидоза определена мутациями Y132H и G448E гена ERG11.
БЕЗОПАСНОСТЬ И КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ 23-ВАЛЕНТНОЙ ПО-ЛИСАХАРИДНОЙ ПНЕВМОКОККОВОЙ ВАКЦИНЫ У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ
Тарасова Г.М., Белов Б.С., Муравьева А.В., Черкасова М.В., Соловьев С.К., Решетняк Т.М., Попкова Т.В.
Научно-исследовательский институт ревматологии им В.А. Насоновой, Москва, Россия
SAFETY AND CLINICAL EFFICACY OF THE 23-VALENT POLYSACCHARIDE PNEUMOCOCCAL VACCINE IN PATIENTS WITH SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMA-TOSUS
Tarasova G.M., Belov B.S., Muravyova A.V., Cherkasova M.V., Soloviev S.K., Reshetnyak T.M., Popkova T.V.
V.A. Nasonova Research Institute of Rheumatology, Moscow, Russia
Цель исследования - изучение безопасности и клинической эффективности 23-валентной полисахаридной пневмококковой вакцины (ППВ-23) у больных системной красной волчанкой (СКВ).
Материалы и методы. В исследование включен 61 пациент (возраст - от 19 до 68 лет) с достоверным диагнозом СКВ. Проводимая терапия: 59 больных получали глюкококортикоиды (ГК) - 5-30 мг/сут., 33 - цитостатики , 45 - гидрок-сихлорохин, 22 - генно-инженерные биологические препараты. ППВ-23 0,5 мл (1 доза) вводили подкожно. Сроки наблюдения: 9 пациентов - в течение 3 мес., 52 -в течение 1 года после вакцинации. Во время визитов выполняли стандартные клинические и лабораторные исследования, а также определяли уровень АТ к Streptococcus pneumoniae в сыворотке крови.
Результаты. Безопасность вакцинации: у 28 (45,9%) человек вакцинальные реакции отсутствовали, у 31 (50,8%) - отмечали местные реакции легкой и средней степени выраженности, у 1 (1,6%) - общую реакцию легкой степени выраженности, у 1(1,6%) - гиперергическую реакцию (феномен Артюса), симптомы которой купировались в течение 7 дней на фоне применения антигистаминных препаратов и ГК местно. В течение года после вакцинации не было зарегистрировано ни одного случая обострения СКВ, достоверно связанного с проведенной вакцинацией, а анализах крови - ни одного вновь выявленного аутоиммунного феномена. Через год у 61,5% из 52 пациентов («ответчики») сохранялось значимое повышение концентрации пневмококковых антител. В течение года перед вакцинацией инфекции нижних дыхательных путей (НДП) наблюдали у 23 (44,2%) больных, в течение года после вакцинации - у 7 (13,5%), р=0,001. Не было ни одного случая повторной пневмонии, тогда как до вакцинации она имела место у 4 (7,7%).
Заключение. Продемонстрирован хороший профиль безопасности, а также клиническая эффективность ППВ-23 у больных СКВ, получающих иммуносупрес-сивную терапию.
ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ КОКЦИДИОИДОМИКОЗА В МТТ-ТЕСТЕ
Терешко Д.Л., Новицкая И.В.
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт, Волгоград, Россия
CYTOTOXIC PROPERTIES OF THE CAUSATIVE AGENT OF COCCIDIOIDOMYCO-SIS IN THE MTT-ASSAY
Tereshko D.L., Novitskaya I. V.
Volgograd Research Antiplague Institute, Volgograd, Russia
Цель - изучение цитотоксичности возбудителей кокцидиоидомикоза на культуре перевиваемой клеточной линии Wehi 3 in vitro.
Материалы и методы. Для оценки цитотоксических свойств штаммов Coc-cidioides immitis и Coccidioides posadasii определяли жизнеспособность клеток опухолевой мышиной макрофагоподобной линии Wehi 3 после её инкубации с фильтратами возбудителей особо опасных микозов путем использования широко распространённого МТТ-теста. Принцип метода заключается в выявлении цито-токсического действия веществ на митохондриальные оксидоредуктазы, что проявляется в угнетении их способности восстанавливать водорастворимую желтую соль МТТ до пурпурного формазана. Спектрофотометрический анализ результатов при длине волны 550 нм позволял определить корреляцию между величиной поглощения спектра и жизнеспособностью клеток Wehi 3.
Результаты. Результаты оценки цитотоксичности, полученные в ходе трехкратного проведения МТТ-теста, представлены в виде величины средней с указанием стандартного отклонения (M±m). Постановку теста проводили на 4-е сутки инкубации клеток Wehi 3 с фильтратами микромицетов при их последовательных двукратных разведениях от 1/2 до 1/16. В качестве контроля использовали клетки, помещенные в интактную среду. Гибель Wehi 3 под влияниями фильтратов в их первом разведении составила более 80% для C. immitis C5: (89,89±1,34); C. immitis 333: (80,60±4,47); C. posadasii B13: (81,04±3,4); C. posadasii 22: (92,71 ±0,09); C. posadasii 36S: (87,18±2,71); C. posadasii 442: (64,01±4,09); C. posadasii M11: (80,31 ±5,28). Цитотоксический эффект фильтратов снижался пропорционально их разведению. Показатели цитотоксичности штаммов возбудителей кокцидиоидо-микоза достоверно отличались от контроля (p<0.05).
Заключение. Возбудители особо опасных микозов на клеточные линии оказывают цитотоксическое действие, регистрируемое с помощью МТТ-теста. Мак-рофагоподобная клеточная линия Wehi 3 может быть использована для изучения цитотоксичности особо опасных микромицетов, в частности возбудителя кокцидиоидомикоза.
АНТИМИКОТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА «ФАРГАЛС» И ОПЫТ ЕГО КЛИНИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ
Тилавбердиев Ш.А.
Республиканский центр по борьбе со СПИДом, Ташкент, Республика Узбекистан
ANTIMICOTIC ACTIVITY OF THE DRUG "FARGALS" AND THE EXPERIENCE OF ITS CLINICAL USE
Tilavberdiev Sh.A.
Republican Center to Fight AIDS, Tashkent, Republic of Uzbekistan
Цель исследования - оценка антимикотической активности препарата «Фаргалс» в отношении грибов Candida spp., Aspergillus spp. и Cryptococcus neoformans in vitro и в клинике.
Материалы и методы. «Фаргалс» зарегистрирован Фармкомитетом МЗ РУз. и разрешен к клиническому применению. Активность определяли методом диффузии в агар и методом серийных разведений. В качестве тест-культур использовали Candida spp. (4 штамма), Aspergillus spp. (6) из коллекции грибов НИИЭМИЗ МЗ РУз., а также Cryptococcus neoformans (10) из РКПГ НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина ФГБОУ ВО СЗГМУ им. И.И. Мечникова МЗ РФ. Клиническую эффективность «Фаргалса» изучали при лечении кандидозного стоматита (КС) у 38 больных с ВИЧ-инфекцией, разделенных на основную (18 человек) и контрольную (20) группы. Также «Фаргалс» использовали при лечении поверхно-инвазивного аспергиллеза кожи (ПИАК) носогубной складки лица у пациентов с лейкозами (3).
Результаты. «Фаргалс» проявлял активность в отношении всех испытанных штаммов Candida spp., Aspergillus spp. и C. neoformans. Диаметр зоны ингибиции роста (ДЗИР) Candida spp. составил в среднем 15 мм. Aspergillus spp. оказались более чувствительны - ДЗИР колебались от 22 до 24 мм. МФК «Фаргалса» в отношении С. neoformans находились в интервале от 1:64 до 1:512. Использование «Фаргалса» при лечении КС способствовало полному купированию заболевания у 88,9±7,4% больных в основной группе, в контрольной - 55,0±11,1% (p<0,05). Применение препарата при ПИАК во всех случаях также оказалось эффективным.
Заключение. «Фаргалс» обладает антимикотической активностью in vitro в отношении грибов Candida spp., Aspergillus spp. и C. neoformans. Активность препарата против Candida spp. подтверждено и другими авторами, тогда как исследование чувствительности Aspergillus spp. и C. neoformans к «Фаргалсу» выполнено впервые. Показана эффективность использования препарата для купирования КС и ПИАК, что предупреждает развитие соответствующих инвазивных микозов. Представленные данные указывают на целесообразность более широкого применения «Фаргалса» для профилактики и лечения микозов, обусловленных грибами Candida spp., Aspergillus spp. и C. neoformans.
