^Ноябрь
2010 г.
ствует несколько видов бифидо- и лактобактерий, что затрудняет выход таких препаратов на рынок. В настоящее время во всем мире все большую популярность приобретают методы молекулярной биологии - например, метод полимеразно цепной реакции (ПЦР).
С использованием метода ПЦР нами была разработана методика качественного и количественного анализа поливидовой смеси, содержащей три вида бифидобактерий (B. bifidum, B. longum и B. adolescentis) и два вида лактобактерий (L. plantarum, L. acidophilus). Для решения данной задачи нами были разработаны оригинальные специфические прай-
меры, направляющие синтез определенного фрагмента ДНК для каждого вида бактерии, входящей в состав смеси. Данная методика разработана с целью контроля параметров качества, а именно определения качественного и количественного состава живых пробиотических бактерий в новых целевых сорбированных пробиотиках.
Для количественного определения живых пробиотических бактерий нами разработан метод с использованием стандартного десятикратного разведения анализируемого образца с последующим высевом на плотную питательную среду. Видовая принадлежность выросших колоний определялась ПЦР идентификацией.
БАКТЕРИОЦИНЫ - АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА ПРОБИОТИЧЕСКИХ И КЛИНИЧЕСКИХ ШТАММОВ
Блинкова Л.П.
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва
Бактериоцины, своеобразная группа антибактериальных биологически активных веществ микробного происхождения, являются в настоящее время объектом детального изучения во многих странах. Исследования сосредоточены на свойствах новых бактериоцинов, выделенных у микроорганизмов разных таксономических групп (физико-химическая характеристика, спектр антибактериального действия, механизмы взаимодействия с микробной клеткой и макроорганизмом, возможности практического применения и т. д.). Как правило, изучение сопровождается определением молекулярно-генетических особенностей штаммов-про-дуцентов. На основании полученных результатов проводится классификация вещества. Отметим, что система международной классификации бактериоци-нов несовершенна, ее продолжают уточнять и дополнять, так же, как и основные критерии принадлежности бактериальной субстанции к группе бактериоцинов. Особый интерес вызывают пептидсодержащие бактериоцины, как правило, имеющие широкий спектр действия и обладающие регуляторным влиянием на макроорганизм. Установлено, что как пробиотические штаммы, так и многие из изученных клинических культур обладают бактериоцинпродуцирующей актив-
ностью. На скрининг новых штаммов - продуцентов бактериоцинов и выявление их прикладного потенциала (пробиотики, анибактериальные средства консерванты биопрепаратов, пищевых продуктов и др.) ассоциированным коллективам ученых из стран Евросоюза оказывается мощная финансовая поддержка.
В 80-х гг. прошлого века сотрудниками НИИВС им. И.И. Мечникова на основе бактериоцина создан первый отечественный коммерческий препарат «томицид» [Блинкова Л.П. и др., 1985]. В настоящее время проведен анализ выделенных клинических штаммов, а также культур из окружающей среды на способность продуцировать бактериоцинподобные субстанции. Показано, что частота встречаемости признака варьирует от 52 до > 60%. Некоторые из родов синтезировали вещество не менее чем в 90% случаев [Блинкова Л.П., Гор-батко Е.С. и др., 2008]. Обнаружены бактериоциноген-ные штаммы, которые предполагается тестировать на возможность использования в качестве пробиотиков или консервантов. Следует заключить, что скрининг новых безопасных штаммов-продуцентов и получение соответствующих бактериоцинов является весьма актуальным и перспективным.